用芯片电泳快速检测人p53基因外显子8上的突变点

目的 :建立简单快速的分析方法检测基因突变。方法 :利用修饰引物进行特异性单碱基延伸 ,采用Cy5荧光染色标记的ddNTP ,并通过芯片电泳来检测。结果 :实测了合成人p5 3基因外显子 8上突变点的 3种可能形态 (野生型 ,突变型和杂合型 ) ,并测定了一系列不同比例突变率的混合样本 ,最低至 5 %突变率。所有样本分别于芯片电泳中在 10 0s之内被检测出来。结论 :该方法操作简单易行 ,可用于快速检测已知的基因突变。

生物发光分析法检测P53基因上的突变点

目的 建立简单、快速和廉价的基因突变测定方法。方法 采用基于生物发光技术的焦测序法测定基因突变 ,并通过毛细管和气压方式循环递加微量脱氧核糖核酸 (dNTP)完成焦测序反应。结果 建立了一种供焦测序反应的新型装置 ;研究了焦测序反应的影响因素和实验条件 ;实测了P5 3外显子 8上Cys2 75Ser突变点的 3种可能形态 (野生型、突变型和杂合型 ) ,并提出了快速判断基因突变类型的方法。结论 建立的方法简单 ,仪器装置成本低、操作简便 。

胃癌组织中p53基因突变及蛋白表达的研究

目的探讨胃癌组织中p53基因第5～8外显子突变率及p53蛋白的表达。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)和银染技术,对30例胃癌石蜡包埋组织中p53基因第5～8外显子突变率进行检测;同时应用免疫组织化学Envision二步法检测胃癌组织中p53的表达水平。结果30例胃癌石蜡标本中有11例发生p53基因的突变,突变率为36.67%。病理组织学观察胃癌中乳头状腺癌/管状腺癌(分化较好)16例,低分化腺癌/印戒细胞癌(分化较差)14例。p53蛋白随胃癌的分化程度降低而增加,阳性表达率递增(P<0.05)。结论胃癌组织中p53基因突变及p53蛋白高表达在胃癌的发生中有重要的作用及意义。从石蜡包埋组织中提取DNA进行分子生物学检测适用于肿瘤研究。