听源性惊厥致P77PMC大鼠杏仁核内胆囊收缩素mRNA短暂性增加

铃声刺激诱发惊厥 ,原位杂交法检测遗传性听源性癫痫易感大鼠 (P77PMC)一次与多次惊厥发作对杏仁核内胆囊收缩素 (CCK)mRNA含量的影响。结果发现 :( 1)惊厥未发作组大鼠杏仁核单位面积内的CCKmRNA阳性神经元数 (No/ 0 0 1mm2 )较少 ,为 8± 1;( 2 )惊厥发作一次组大鼠杏仁核单位面积内CCKmRNA阳性神经元数显著增加 ,发作后 30min时达到峰值 ,为 5 8± 5 (P <0 0 1) ,但是 2h后迅速降为正常 ,为 9± 2 (P >0 0 5 ) ;( 3)惊厥多次发作组大鼠在惊厥发作后 30min时 ,CCKmRNA阳性神经元数亦显著增加 ,为 2 2± 3 (P <0 0 1) ,但明显低于惊厥发作一次组大鼠 (P <0 0 1) ,1h即恢复正常 ,为 9± 3 (P >0 0 5 )。结果表明 ,惊厥发作后P77PMC大鼠杏仁核内CCKmR NA含量呈现迅速而短暂增加的特点 ,表明CCKmRNA参与惊厥的急性发作过程 。

P77PMC大鼠脑内孤啡肽含量低于Wistar大鼠

孤啡肽（ｏｒｐｈａｎｉｎＦＱ，ＯＦＱ）是１９９５年底发现的孤儿阿片受体样受体的内源性配体［１］，其结构和细胞内信号转导通路方面类似于阿片肽但功能在脑内则与阿片肽相反。ＯＦＱ作为一种新的抗阿片样物质广泛存在于中枢神经系统，原位杂交［２］和Ｎｏｒｔｈｅｒ...

反复惊厥对P77PMC大鼠海马结构及其惊厥行为的影响

目的 探讨海马苔藓状纤维 (mossyfiber,MF)发芽在癫发生发展病理生理机制中的作用。方法 采用Timm′s硫化银染色法和尼氏染色法 ,对反复惊厥过程中不同阶段遗传性癫易感大鼠模型———P77PMC大鼠海马的结构以及惊厥行为的改变进行观察研究。结果 反复多次听源性惊厥样发作可导致P77PMC大鼠海马CA1区的部分神经元缺失和海马齿状回内分子层出现明显的MF发芽表现 ;并能使其听源性惊厥样发作的潜伏期显著缩短 ,而惊厥发作的持续时间明显延长。结论 在遗传性听源性惊厥 ,这种脑干起源但迅速泛化为全身性惊厥发作的癫动物模型 ,也有海马内神经元缺失和MF突触重组的表现。听源性惊厥易感大鼠在经历足够多次的反复惊厥发作后 ,可发生海马苔藓状纤维发芽和神经元缺失 ;另外单纯惊厥的反复发作还能导致P77PMC大鼠惊厥加剧、惊厥易感性增高。在反复听源性惊厥过程中 ,P77PMC大鼠惊厥易感性增高的行为改变在海马发生明显的结构性变化之前就已发生 。

HSV转基因表达IL-1ra抑制P77PMC大鼠的惊厥发作

利用PCR基因克隆及基因转染技术 ,构建含人IL 1ra(IL 1receptorantago nist,IL 1ra)cDNA的质粒型单纯疱疹病毒 (herpessimplexvirus ,HSV)载体 ,再由HSV 1tsK株包装成假病毒颗粒 ,然后注入P77PMC听源性惊厥易感大鼠侧脑室 ,观察LacZ基因和IL 1ra在脑内的表达情况及对P77PMC大鼠惊厥程度的影响 .结果表明 :( 1 )LacZ在脑内神经和非神经细胞可持续表达 8周以上 ;( 2 )侧脑室注射pHSV IL 1ra假病毒可明显抑制P77PMC大鼠的惊厥发作 .原位杂交和免疫荧光染色发现脑膜和脉络丛上皮细胞及某些神经细胞有IL 1ramRNA和蛋白的表达 .结果表明HSV载体可有效地将IL 1ra基因转入脑内 ,并能明显抑制P77PMC听源性惊厥易感大鼠的惊厥发作 .

遗传性P77PMC癫痫大鼠海马基因表达谱的研究

目的利用cDNA表达阵列构建遗传性癫痫大鼠海马基因表达谱,寻找其中的差异表达基因,为从分子水平探讨癫痫的发病机理打下基础。方法采用32P-α-dATP逆转录标记探针与cDNA阵列杂交,构建P77PMC大鼠和Wistar大鼠海马基因表达谱,用图象分析仪分析两者基因表达谱差异。结果在P77PMC大鼠海马中共发现有15个差异表达基因,其中12个基因表达上调,3个基因表达下调。并用逆转录-聚合酶链反应进一步证实了结果的可靠性。结论P77PMC大鼠与正常Wistar大鼠海马中存在多个差异表达基因,这些差异表达的基因可能在癫痫的发生中具有重要作用。

Attenuation of seizure in P77PMC rats with an HSV-vector expressing IL-1ra in brain

Cloned human IL 1ra (IL 1 receptor antagonist, IL 1ra) cDNA is inserted into pHSVLac, resulting in recombinant named pHSV IL 1ra. pHSVLac and pHSV IL 1ra were packaged into HSV 1 particles using HSV 1 ts K as helper virus. The results showed that: (i) vero cell infected by pHSV IL 1ra particles showed IL 1ra expression; expression of β galactosidase is observed in meninges and some neurons closed to ventricular and maintained for 8 weeks in rats after intracerebroventricular injection of pHSV IL 1ra particles; (ii) transgenic expression of IL 1ra by pHSV IL 1ra injection significantly inhibited seizure attacks of P77PMC rat. These studies indicate that HSV 1 vector expressing IL 1ra in brain attenuated seizure attacks of P77PMC rat.

用cDNA表达阵列分析遗传性癫痫易感大鼠海马和大脑皮质的基因表达

采用AtlasTM RatcDNAExpressionArray建立遗传性癫痫易感性P77PMC大鼠和正常对照Wistar大鼠的海马与大脑皮质基因表达谱 ,用EagleEyeⅡStillVideoSystem (Stratagene)图象分析仪分析两者基因表达谱差异 .结果发现海马和大脑皮质中各有 15个差异表达基因 .海马组织中 ,12个基因在P77PMC大鼠中高表达而在正常对照Wistar大鼠中低表达 ,3个基因在正常对照Wistar大鼠中高表达 ,而在P77PMC大鼠中低表达 ;大脑皮质中 ,13个基因在P77PMC大鼠中高表达 ,而在正常对照Wistar大鼠中低表达 ,2个基因在正常对照Wistar大鼠中高表达 ,而在P77PMC大鼠中低表达 .结果说明 ,P77PMC大鼠与正常对照Wistar大鼠海马和大脑皮质存在多个差异表达基因 。

用cDNA表达阵列分析遗传性癫癎易感大鼠大脑皮质的基因表达

应用cDNA阵列技术寻找遗传性癫差异表达基因 ,为从基因水平探讨癫的发病机理打下基础。采用AtlasTM RatcDNAExpressionArray建立遗传性癫易感性P77PMC大鼠和正常Wistar大鼠大脑皮质基因表达谱 ,用图像分析仪分析两者基因表达谱差异。结果发现有 15个差异表达基因 ,其中 13个基因在P77PMC大鼠大脑皮质中高表达而在正常Wistar大鼠大脑皮质中低表达 ,2个基因在正常Wistar大鼠大脑皮质中高表达而在P77PMC大鼠大脑皮质中低表达。结果提示 ,P77PMC大鼠与正常Wistar大鼠大脑皮质存在多个差异表达基因 ,这些差异表达的基因可能在癫的发生、发展中扮演了重要角色。