PA-MSHA疫苗对严重创伤患者并发肺部感染的预防作用

目的研究绿脓杆菌菌毛株(PA-MSHA)疫苗对严重创伤患者免疫功能影响和对并发肺部感染的预防作用。方法选择ICU住院严重创伤患者共55例,随机分为两组:①对照组:27例,给予常规治疗;②疫苗组:28例,除常规救治外,从入院当天给予皮下注射PA-MSHA疫苗1．0 mL,1次/d,连续注射14 d。分别在入院当天和入院第14天取静脉血测定免疫功能指标,并统计入院第14天内并发肺部感染的发生率。结果疫苗组在入院第14天时血清IgG、补体C3和C4、NK(自然杀伤细胞)活性、CD3、CD4和CD4/CD8比值均比入院当天有明显升高(P＜0．01),而对照组仅有补体C3值在入院第14天出现明显升高(P＜0．05);对照组在入院第14天内并发肺部感染发生率为44．4%,疫苗组为21．4%,疫苗组肺部感染发生率明显低于对照组(P＜0．01)。结论PA-MSHA疫苗能够明显提高严重创伤患者机体免疫功能,并且能一定程度预防肺部感染的发生率。

PA-MSHA抗肿瘤效应的免疫机制研究

目的研究铜绿假单胞菌甘露糖敏感血凝菌毛株(pseudomonas aeruginosa-mannose sensitive hemagglutinin,PA-MSHA)处理树突状细胞(dendritic cells,DCs)后对其功能及激活T细胞杀伤肿瘤细胞效应的影响。方法取小鼠骨髓来源的DC,观察PA-MSHA体外处理后对DC表面分子、吞噬功能及T细胞杀伤功能的影响。结果 PA-MSHA处理的DC其表面分子CD40、I-E表达显著上升,吞噬功能显著下降,由DC诱导的活化T细胞对肿瘤细胞的杀伤效应显著高于对照组。结论 PA-MSHA能有效促进DC成熟并增强抗肿瘤免疫效应。

PA-MSHA辅助治疗晚期胃癌对外周血T细胞及NK细胞影响的研究

目的观察PA-MSHA辅助奥沙利铂联合ELF(足叶乙甙+亚叶酸钙+5-氟尿嘧啶)方案治疗晚期胃癌对外周血T细胞及NK细胞的影响。方法选择晚期胃腺癌患者40例及健康体检者20例,将患者随机均分为单纯化疗组和PA-MSHA联合化疗组。各组均使用奥沙利铂联合ELF化疗方案。PA-MSHA联合治疗组于术后同时使用PA-MSHA辅助化疗方案。抽取各病例外周抗凝血,用流式细胞仪检测并比较外周血T细胞及NK细胞的绝对数。结果术后化疗前单纯化疗组CD4+、CD4+/CD8+和NK细胞水平明显低于健康对照组及PA-MSHA辅助化疗组(P<0.01),PA-MHSA辅助化疗组CD4+、CD4+/CD8+和NK细胞水平低于健康对照组,但无统计学差异。第2个化疗周期开始前单纯化疗组CD4+、CD4+/CD8+和NK细胞水平明显低于PA-MSHA辅助化疗组(P<0.01)。结论 PA-MSHA辅助奥沙利铂联合ELF方案可增强晚期胃癌术后机体T细胞及NK细胞免疫功能,使晚期胃癌术后机体细胞免疫受损状态较早恢复,减轻化疗期间化疗药物对细胞免疫抑制作用。

PA-MSHA菌苗辅助治疗肺癌临床研究

目的 评价Ⅱ类新生物制品绿脓杆菌菌毛株菌苗 (PA—MSHA菌苗 )作为免疫调节剂的有效性和安全性。方法 采用非盲性随机对照试验。纳入肺癌患者试验组 44例 ,对照组 45例。试验组给予化疗 +PA -MSHA菌苗 ,对照组单用化疗 ,两组化疗方案一致。结束后评价肿瘤疗效和感染率 ,并在治疗前、中、后分别检测患者免疫功能。结果 在临床疗效评价中 ,试验组有效率 (CR +PR)为 5 9 0 9% ,对照组为 42 2 3 % (P <0 .0 5 ) ;试验组感染发生率为 15 91% ,对照组为 40 0 0 % (P <0 0 5 )。试验组治疗后C3 、C4 、CD4/CD8比值 ,NKz细胞活性和IL— 2水平均高于对照组 (P <0 0 5 )。疗中、疗后各抗体滴度也明显高于对照组 (P <0 .0 5 )有 3例出现不良反应。结论 PA -MSHA菌苗能明显提高肺癌患者的免疫功能 ,与化疗药物合用可提高疗效 ,并有预防感染作用。安全有效。

PA-MSHA菌苗治疗复发性口腔溃疡

目的观察ＰＡ－ＭＳＨＡ菌苗（绿脓杆菌甘露糖敏感血凝菌毛株菌苗）治疗复发性口腔溃疡的疗效．方法 的例复发性口腔溃疡患者被分为菌苗组（３８例）和转移因子对照组（２例），并对二组疗效进行比较．结果菌苗组的总有效率（９４．７４％）明显高于转移因子对照组（６７．８６％），二者有显著性差异（Ｐ＜０．０１）．结论 菌苗的良好治疗效果是由于其免疫调节作用和微量元素、维生素的调节作用．

PA-MSHA对脓毒症大鼠的肺组织炎症反应的影响

目的:探讨铜绿假单胞菌甘露糖敏感血凝素(PA-MSHA)对脓毒症致急性肺损伤炎症反应的影响及可能机制。方法:健康SD大鼠120只按随机数字法分为假手术对照组(SC组,n=30)、脓毒症组(CLP组,n=30)、术前治疗组(Pre T组,n=30)和术后治疗组(Pos T组,n=30)。以盲肠结扎穿孔法(CLP)复制大鼠脓毒症模型。制模后12、24、36 h分别采集外周血测定血清细胞因子(TNF-α、IL-6、IL-10和TGF-β)并处死动物,实时RT-PCR方法检测各组肺组织Toll样受体4(TLR4)mRNA表达;计算肺损伤病理评分;采用流式细胞术检测大鼠外周血单核细胞TLR4阳性率。结果:脓毒症大鼠中Pre T组与CLP组和Pos T组相比,Pre T组血清细胞因子TNF-α、IL-6浓度降低而细胞因子IL-10、TGF-β浓度均高于CLP组和Pos T组(P<0.01)。脓毒症大鼠中Pre T组外周血单核细胞TLR4阳性率和肺组织TLR4 mRNA表达水平低于CLP组和Pos T组(P<0.05),肺组织病理学评分也优于另两组(P<0.01)。结论:术前给予PA-MSHA可以明显下调脓毒症大鼠的炎症反应,从而减轻肺病理损伤程度。

PA-MSHA菌苗局部治疗RAU

复发性阿弗遣他溃疡（RAU）是口腔粘膜常见病之一．由于其病因复杂，尚没有特效的治疗方案．我们选用绿脓杆菌甘露糖敏感血凝菌毛株菌苗局部治疗RAU，其在促进溃疡愈合，延长复发间隔的作用均优于口腔渍疡膏，并讨论了治疗机制．

PA-MSHA、BCG分别联合S-180瘤苗对荷瘤小鼠治疗作用的比较

本文对比观察了ＰＡ—ＭＳＨＡ、ＢＣＧ分别联合Ｓ—１８０瘤苗对荷瘤Ｂａｌｂ／ｃ小鼠（接种１×１０７Ｓ—１８０活瘤细胞）的主动免疫治疗效果及对免疫细胞活性的影响。结果表明：ＰＡ—ＭＳＨＡ单独治疗、与瘤苗联合治疗及ＢＣＧ与瘤苗联合治疗均抑制局部移植瘤的生长（Ｐ＜０．０１），并可降低附近淋巴结转移率。免疫细胞活性测定表明：ＰＡ—ＭＳＨＡ联合瘤苗应用可显著增强小鼠腹腔ＭΦ细胞对Ｓ—１８０瘤细胞增殖的抑制作用（Ｐ＜０．０１），并提高脾细胞自然增殖能力（Ｐ＜０．０１）；ＢＣＧ联合瘤苗则增强ＭΦ的抑制作用（Ｐ＜０．０１），但未见提高脾细胞的自然增殖能力（Ｐ＞０．０５）。由此可见，ＰＡ—ＭＳＨＡ较ＢＣＧ更能有效地协同瘤苗，提高肿瘤的ＡＳＩ效应。

PA-MSHA对结肠癌细胞HT29迁移的抑制作用

(1)目的探讨铜绿假单胞菌-甘露糖敏感血凝素菌毛株菌苗(PA-MSHA)对结肠癌细胞HT29的迁移抑制作用,并分析其可能的作用机制。(2)方法培养结肠癌细胞株HT29,以不同剂量的PA-MSHA作用于细胞,倒置显微镜观察细胞形态,Transwell小室检测不同剂量PA-MSHA对结肠癌细胞迁移作用的影响,应用Western Blot检测PA-MSHA作用前后基质蛋白MMP-2的表达情况。(3)结果 PA-MSHA作用后,光镜下观察细胞生长受阻;PA-MSHA处理组结肠癌细胞迁移数量均低于对照组,且随着药物浓度的升高,迁移细胞数量逐渐减少;高剂量及低剂量PA-MSHA处理组细胞MMP-2表达均低于对照组,且高剂量组低于低剂量组,差异均有统计学意义。(4)结论 PA-MSHA能够抑制结肠癌细胞HT29的迁移,作用机制可能与其下调MMP-2的表达有关。

PA-MSHA疫苗增强急性髓细胞白血病源DC对Treg的抑制作用

目的:探讨带有甘露糖敏感血凝菌毛的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosawith mannose sensitive hemagglutina-tion pili,PA-MSHA)疫苗处理后急性髓细胞白血病源性树突状细胞(dendritic cells derived from acute myeloid leukemia,AML-DC)对调节性T细胞(regulatory Tcell,Treg)的抑制作用。方法:rhGM-CSF和rhII-4诱导的AML-DC分为对照组、PA-MSHA组和TNF-α组,培养24h后观察3组AML-DC的形态、流式细胞术检测各组AML-DC的表型、MTT法和混合淋巴细胞反应检测AML-DC对淋巴细胞增殖的作用。磁珠法分离健康人外周血CD4+T细胞,加入各组AML-DC中诱导Treg,ELISA法检测各组Treg上清液中IL-10、TGF-β的水平,流式细胞术检测Treg表面CD4、CD25的表达,RT-PCR法检测Treg中Foxp3mRNA的表达水平。结果:PA-MSHA组和TNF-α组AML-DC呈树突状形态,且CDla、CD80、CD83、CD86和HLA-DR表达较对照组明显升高(P<0.05)。PA-MSHA组和TNF-α组AML-DC诱导的T细胞增殖能力显著增强(P<0.05)。PA-MSHA组和TNF-α组AML-DC诱导产生的Treg分泌较低水平的IL-10、TGF-β(P<0.05),CD4、CD25的表达及Foxp3mRNA水平均较对照组明显降低(P<0.05)。上述各指标PA-MSHA组和TNF-α组间均无明显差异。结论:PA-MSHA疫苗可促进AML-DC的成熟,抑制初始T细胞向Treg的分化,增强AML-DC对AML患者Treg的抑制作用。

PA-MSHA菌苗联合S-180瘤苗对荷瘤小鼠白细胞IL_1产生的影响

本文应用ＰＡ—ＭＳＨＡ菌苗联合Ｓ—１８０瘤苗对荷瘤小鼠体外试验发现，ＰＡ—ＭＳＨＡ菌苗联合Ｓ—１８０瘤苗比单独用Ｓ—１８０瘤苗或ＰＡ—ＭＳＨＡ菌苗对荷瘤小鼠有更强的增强小鼠腹腔ＭφＩＬ１产生的能力，提示联合瘤苗能提高荷瘤宿主的免疫功能。

PA-MSHA菌苗辅助治疗肺癌临床研究

目的 评价Ⅱ类新生物制品绿脓杆菌菌毛株菌苗(PAMSHA菌苗)作为免疫调节剂的有效性和安全性。方法 采用非盲法随机对照试验。试验组纳入肺癌患者44例,对照组45例。两组采用同样的化疗方案,试验组加用PAMSHA菌苗。治疗结束后评价疗效和感染率,并在治疗前、中、后分别检测患者免疫功能。结果 在临床疗效评价中,试验组有效率(CR+PR)为59.09%,对照组为42.23%(P<0.01);试验组感染率为15.91%,对照组为40%(P<0.05)。试验组治疗后C3、C4、CD4/CD8比值、NK细胞活性和IL2水平均高于对照组(P<0.05)。试验组中3例患者出现不良反应,仅1例给予特殊处理,其余自行缓解。结论 作为一类新的免疫调节剂,PAMSHA菌苗能明显提高肺癌患者的免疫功能,与化疗药物合用可提高疗效,并有预防感染作用。

PA-MSHA菌毛株疫苗对三种癌症患者免疫疗效的临床观察

目的 证实绿脓杆菌 甘露糖敏感血凝 (PA MSHA)菌毛株疫苗是一种能有效提高和调节多种疾病患者的免疫功能 ,改善免疫调节机制 ,增强免疫力的新型细菌性免疫调节剂 (或称PA MSHA免疫调节剂 )。方法 用该疫苗对 30 1例癌症 (急性白血病、恶性淋巴瘤及肺癌 )患者的治疗过程中的 12项免疫指标变化的临床疗效加以比较。结果 免疫综合疗效的总有效率 ,急性白血病为87 1% ;恶性淋巴瘤为 77 78% ;肺癌为 84 0 9%。治疗后 ,3组中的实验组与对照组的各项免疫指标相比较P值均小于 0 0 5。结论 PA MSHA菌毛株疫苗能全面提高及调整癌症患者的体液免疫和细胞免疫功能 ,增强抑制和杀伤癌细胞的效应 ,是癌症患者理想的辅助治疗药物。

PA-MSHA辅助治疗晚期胃癌的效果观察

目的观察PA-MSHA辅助奥沙利铂联合ELF（足叶乙甙加亚叶酸钙加5-氟尿嘧啶）方案对晚期胃癌的治疗疗效并评估不良反应。方法选择我院手术病理证实为晚期胃腺癌患者40例。患者均在术后第15d开始奥沙利铂联合ELF化疗方案（奥沙利铂100mg/m2,静滴2h,第1d;亚叶酸钙200mg/m2,静滴30min,第1~3d;5-氟尿嘧啶500mg/m2,静滴2h,第1~3d;足叶乙甙100mg/m2,静滴3h,第1~3d）治疗,间隔21d进行第二个周期该化疗方案;术后当日开始皮下注射万特普安,1ml/d×7d,以后隔日1次,持续到术后1个月;术后化疗前3个周期后评价疗效和不良反应。结果所有病例均可评价疗效,其中完全缓解（CR）4例,部分缓解（PR）19例,病情稳定（SD）14例,病情进展（PD）3例,总缓解率为57.5%。主要的血液学不良反应为贫血（57.5%）、白细胞减少（37.5%）和血小板减少（45%）。最常见的非血液学不良反应有恶心呕吐（52.5%）、口腔黏膜炎（30%）、腹泻（42.5%）和脱发（12.5%）。KPS提高20分以上者47.5%（19/40）。结论 PA-MSHA辅助奥沙利铂联合ELF方案可通过减少晚期胃癌术后机体对ELF化疗方案化疗不良反应,增强对化疗耐受性,而增强该方案的化疗疗效。

铜绿假单胞菌-甘露糖敏感血细胞凝集素抗肿瘤的作用机制及临床应用

铜绿假单胞菌-甘露糖敏感血细胞凝集素(PA-MSHA)在抗肿瘤领域的应用不断增加。PA-MSHA可以通过抑制表皮生长因子受体(EGFR)通路促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞侵袭和迁移、分化以及改变耐药和细胞上皮-间充质转化(EMT)状态,同时PA-MSHA也通过Toll样受体(TLR)增强巨噬细胞和T细胞对肿瘤细胞的免疫杀伤和抑制。该文梳理并综述关于PA-MSHA抗肿瘤的机制及临床应用,认为PA-MSHA通过作用于细胞甘露糖基的调节过程改变了EGFR和TLR蛋白的糖基化。PA-MSHA可能作用的细胞膜蛋白包括更多的高甘露糖基信号通路受体,阐明PA-MSHA和甘露糖基之间的深层次关系对PA-MSHA的机制研究及临床应用意义重大。

PA-MSHA通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌耐西妥昔单抗耐药结肠癌SW480细胞的增殖、迁移和侵袭

目的:研究铜绿假单胞菌-甘露糖敏感血凝素(pseudomonas aeruginosa mannose-sensitive hemagglutinin,PA-MSHA)对西妥昔单抗耐药结肠癌SW480细胞(SW480-R)增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探讨可能的作用机制。方法:用不同浓度的西妥昔单抗处理亲本SW480细胞和耐药SW480-R细胞,采用CCK-8法检测亲本和耐药细胞对西妥昔单抗的敏感性。用不同浓度的PA-MSHA处理SW480-R细胞,采用CCK-8法检测PAMSHA对SW480-R细胞增殖能力的影响,实时荧光定量PCR法检测对SW480-R细胞中微RNA(micro,miR)-7-5p表达的影响,划痕愈合实验和Transwell小室法检测对SW480-R细胞迁移和侵袭能力的影响。采用脂质体转染的方法将miR-7-5p-模拟物(mimics)转入SW480-R细胞再用PA-MSHA处理后,采用划痕愈合实验和Transwell小室实验检测miR-7-5p过表达对PA-MSHA抑制SW480-R细胞迁移和侵袭能力的影响,最后用蛋白印迹法检测对Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路中β-catenin和E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平的影响。结果:结肠癌SW480-R细胞对西妥昔单抗的敏感性低于SW480细胞(P<0.05),成功建立对西妥昔单抗耐药的结肠癌细胞。与对照组相比,PA-MSHA可以明显抑制SW480-R细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P均<0.01),且呈剂量依赖性。PA-MSHA刺激后,miR-7-5p的表达水平上调(P<0.01);miR-7-5p过表达明显增强PA-MSHA抑制SW480-R细胞迁移和侵袭的能力(P<0.05)。蛋白质印迹法检测结果显示,PA-MSHA刺激后,Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin的表达水平下调,E-cadherin的表达水平上调(P均<0.01),提示Wnt/β-catenin信号通路的活性被抑制;miR-7-5p过表达进一步降低β-catenin的表达水平,上调E-cadherin蛋白的表达水平(P均<0.05)。结论:PA-MSHA可能通过调控miR-7-5p/Wnt/β-catenin通路抑制西妥昔单抗耐药结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭。

绿脓杆菌MSHA菌毛株菌苗对恶性淋巴瘤的治疗及其机制初探

绿脓杆菌MSHA菌毛株菌苗是一种新型的微生物免疫调节剂，首次应用于恶性淋巴瘤化疗的辅助治疗。结果显示：在化疗同时进行菌苗治疗组其治疗有效率（95．56％）明显高于仅进行化疗的对照组（69．77％），而感染率（17．78％）则明显低于对照组（37．21％），P值均小于0．05。菌苗治疗组IL－2水平，NK细胞活性及CD4+／CD8+比值也明显高于对照组，且其抵抗多种不同菌属的革兰氏阴性杆菌抗体水平亦显著高于对照组，提示该菌苗是通过调整或增强患者自身细胞免疫或体液免疫水平，达到抗肿瘤．抗感染的功效。作者认为该菌苗是恶性淋巴瘤患者化疗的良好辅助药物。

绿脓杆菌制剂对人肝癌细胞株BEL-7402的杀伤效应

目的探索绿脓杆菌制剂对人肝癌细胞BEL-7402的杀伤效应。方法采用MTT法检测不同浓度的绿脓杆菌制剂对人肝癌细胞BEL-7402增殖的作用,同时利用电子显微镜、透射电镜观察细胞BEL-7402的形态学变化。结果MTT检测表明:绿脓杆菌制剂为10×107/mL、5×107/mL、2.5×107/mL时对肝癌细胞生长杀伤作用与对照组比较差异有高度统计学意义(P<0.01);电子显微镜、透射电镜观察发现肝癌细胞BEL-7402于12、24 h出现凋亡形态学改变,40 h形态学表现为凋亡与坏死并存。结论绿脓杆菌制剂对肝癌细胞BEL-7402生长有抑制作用,诱导细胞凋亡及坏死可能是主要作用机制。

PA—MSHA免疫调节剂治疗白血病的疗效研究

目的：证明PA－MSHA免疫调节剂即绿脓杆菌MSHA菌毛杆菌苗这种新型细菌性免疫调节剂，能提高和调节白血病患者自身的免疫功能，改善其免疫，调节机制，增强免疫力。方法：将该菌苗应用于白血病化疗的协同治疗，进行疗效观察比较，结果：化疗同时注射PA－MSHA菌苗治疗，其临床疗效（完全缓解率为66．13％）明显好于单纯化疗组（安全缓解率56．45％），P值小于0．05。且以PA－MSHA苗苗协同化疗的治疗组各项免疫指标均好于单纯化疗组（P＜0．05）。结论：该绿脓杆菌MSHA菌苗能全面调整癌症患者的体液免疫和细胞免疫的免疫功能，增强抑制和杀伤癌细胞效应，以达到抗感染，抗癌的功效。本试验验证了该菌苗是癌症患者较理想的化疗协同治疗药物的设想。