尿激酶型纤溶酶原激活剂及其抑制剂PAI-1 mRNAs的表达与人肝细胞癌的关系

为探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂（ｕＰＡ）及其抑制剂ＰＡＩ－１ｍＲＮＡｓ的表达变化与人肝细胞癌（ＨＣＣ）浸润、转移间的关系，应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术对３０例新鲜活检肝组织作ｕＰＡ和ＰＡＩ－１ｍＲＮＡｓ表达的研究。结果显示：１６例伴肝内浸润和转移癌组织中ｕＰＡ和ＰＡＩ－１ｍＲＮＡｓ表达水平明显高于１４例无肝内浸润和转移肝组织；１８例高分化ＨＣＣ癌组织与１２例中、低分化ＨＣＣ相比，ｕＰＡ和ＰＡＩ－１ｍＲＮＡｓ含量差异有显著性意义。结果表明，癌组织内ｕＰＡ和ＰＡＩ－１基因转录水平的改变与ＨＣＣ浸润、转移及细胞分化密切相关。

化痰逐瘀法对尿酸性肾病模型大鼠肾小管间质PAI-1 mRNA表达的影响

目的:从肾小管间质PAI-1的表达入手,进行化痰逐瘀法对尿酸性肾病模型大鼠肾小管间质PAI-1 mRNA表达影响的实验研究。方法:RT-PCR法。结果:各组大鼠PAI-1 mRNA含量分别为,正常组41.65±15.03,模型组72.87±11.96,中药治疗组34.16±12.91,西药治疗组49.22±9.19。结论:化痰逐瘀方药可降低尿酸性肾病模型大鼠肾间质PAI-1 mRNA水平,从而提高PA活性,促进纤维蛋白及细胞外基质(ECM)降解,延缓肾间质纤维化的进展。

RT-PCR半定量法检测人脐静脉内皮细胞t-PA和PAI-1 mRNA表达

目的 建立一种敏感的检测组织型纤溶酶原激活物 ( t- PA)及其抑制剂 ( PAI- 1)基因表达的方法。 方法 用异硫氰酸胍一步法提取细胞总 RNA,用单管 RT- PCR法逆转录 -扩增 t- PA、PAI- 1和内参照三磷酸甘油醛脱氢酶 ( GAPDH) m RNA,扩增产物经电泳分离后 ,用凝胶图像分析仪照相和扫描分析 ,测定各条带分子量和光密度值。 结果 PCR产物均与预期长度相吻合 ,且PCR产物量与扩增初始模板量之间存在良好的量 -效关系。 结论 本实验建立的单管 RT- PCR半定量法是检测 t- PA、PAI- 1m RNA表达的有效手段 ,具有灵敏、快速、简便、可靠等优点。

视网膜色素上皮细胞PAI-1 mRNA的表达

目的从基因转录水平确定人视网膜色素上皮（ＲＰＥ）细胞是否具有合成纤溶酶原激活物抑制１（ＰＡＩ１）蛋白酶的生物学特性。方法取供体人眼ＲＰＥ细胞进行体外培养；当细胞生长融合后抽取ＲＮＡ，应用Ｎｏｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析技术，经特异的探针对人ＲＰＥ细胞的总ＲＮＡ进行检测。结果在体外培养的人ＲＰＥ细胞基因转录产物中存在有ＰＡＩ１ｍＲＮＡ的表达，其长度分别为３．０ｋｂ和２．３ｋｂ。结论人ＲＰＥ细胞能够合成ＰＡＩ１蛋白酶；它可能在一些致盲性眼病的病理发生过程中起到重要的作用。

PAI-1和FV基因多态性与静脉血栓的临床意义

目的 一种新技术检测静脉血栓相关基因纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)和凝血因子V(FV)基因多态性,分析清远地区人群基因频率分布情况,指导静脉血栓临床药物治疗。方法 提取2020年4月至2021年8月在清远市人民医院行静脉血栓基因检测的2 281例患者DNA,应用数字荧光分子杂交法检测PAI-1和FV基因多态性,并进行Sanger测序加以验证,大数据分析清远市人民医院就诊患者基因型分布频率,评估男、女性和心、脑血管疾病、肿瘤患者PAI-1和FV基因是否突变与发生静脉血栓的风险,指导抗血栓药物使用。结果 数字荧光分子杂交与Sanger测序结果完全符合(100%);大数据发现本地区人群PAI-1基因呈多态性分布(19.33%、50.33%、30.34%),而FV基因型突变极少,多为野生纯合型(99.91%);PAI-1和FV基因型频率和等位基因频率在男、女性和心、脑血管疾病、肿瘤患者人群中差异无统计学意义(P均>0.05);PAI-1基因多态性与疾病进程无明显相关性。结论 PAI-1基因检测对静脉血栓药物应用极具临床意义,可实现精准化个体治疗,但PAI-1基因多态性与其他疾病和性别无关。

过表达miR-144-3p下调感染巨噬细胞 IL-6 mRNA抑制BCG的存活

探究miR-144-3p对巨噬细胞IL-6 mRNA表达量和巨噬细胞免疫能力的影响,为结核诊疗提供理论参考。方法(1)建立BCG感染THP-1巨噬细胞模型,qPCR检测感染不同时间miR-144-3p和IL-6 mRNA表达变化;(2)瞬转miR-144-3p模拟物/抑制剂来过表达/抑制miR-144-3p后,qPCR检测感染不同时间miR-144-3p和IL-6 mRNA表达变化;皮尔森相关系数分析miR-144-3p和IL-6 mRNA的相关性;(3)CCK-8检测瞬转miR-144-3p模拟物/抑制剂后,CCK-8检测BCG感染的巨噬细胞增殖能力;CFU检测BCG存活状态。结果显示:(1)巨噬细胞感染BCG后,miR-144-3p和IL-6 mRNA表达均显著上升(P<0.05),miR-144-3p表达量在12 h达到峰值,IL-6 mRNA表达量在24 h达到峰值;(2)巨噬细胞感染BCG后,过表达miR-144-3p使IL-6 mRNA表达显著下降(P<0.01);抑制miR-144-3p使IL-6 mRNA表达显著上升(P<0.01);皮尔森相关系数分析结果显示两者存在负相关性;(3)过表达/抑制miR-144-3p不影响巨噬细胞增殖能力,但过表达miR-144-3p能抑制巨噬细胞中BCG的存活。结论:BCG感染巨噬细胞后miR-144-3p和IL-6 mRNA表达均显著上升;过表达/抑制巨噬细胞miR-144-3p,miR-144-3p可能负调控IL-6 mRNA表达;过表达miR-144-3p能抑制BCG存活,进而增强巨噬细胞的先天免疫能力。

椎管内麻醉后CD老年患者S100β、H-FABP、NLRP3mRNA、Caspase-1 mRNA表达意义

目的分析老年髋关节置换术(THA)患者椎管内麻醉后认知功能障碍(CD)发生的危险因素及中枢神经特异蛋白(S100-β)、核苷酸结合寡聚化域受体蛋白3信使核糖核酸(NLRP3 mRNA)、中心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)、天冬氨酸蛋白水解酶1信使核糖核酸(Caspase-1 mRNA)对其预测价值。方法将椎管内麻醉后发生CD的40例老年THA术患者纳入A组,另选取未发生CD的68例老年THA术患者纳入B组。比较两组临床资料、S100-β、H-FABP、NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA,危险因素采用多因素Logistic回归分析法进行分析,S100-β、H-FABP、NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA对老年THA术患者椎管内麻醉后CD发生的预测价值采用受试者工作特征(ROC)曲线进行分析。结果A组年龄大于B组,差异有统计学意义(t=13.674,P<0.05);有糖尿病、术中低血压的患者占比均高于B组,差异有统计学意义(χ^(2)=12.643、17.767,P<0.05)。A组血清S100-β、NLRP3 mRNA、H-FABP、Caspase-1mRNA表达均高于B组,差异有统计学意义(t=14.571、21.691、80.159、23.572,P<0.05)。老年THA术患者椎管内麻醉后CD发生的独立危险因素包括年龄大、糖尿病、术中低血压、血清S100-β、H-FABP、水平、NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA高,差异有统计学意义(P<0.05)。S100-β、H-FABP、NLRP3 mRNA、Caspase-1 mRNA联合检查预测老年THA术患者椎管内麻醉后CD发生的曲线下面积(AUC)为0.915高于单一检测(P<0.05)。结论年龄大、糖尿病、术中低血压均为老年THA术患者椎管内麻醉后CD发生的独立危险因素,且S100-β、H-FABP、NLRP3 m RNA、Caspase-1 mRNA联合检测对CD的预测价值较高。

子宫内膜癌组织中IGF2BP1mRNA,PEG10mRNA表达及与增殖基因表达的相关性和预后研究

目的研究子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)组织中胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(insulinlike growth factor 2 mRNA binding protein 1,IGF2BP1)mRNA,父系表达遗传印记基因10(patrilineal expression of genetic imprinting gene 10,PEG10)mRNA表达及与增殖基因表达的相关性及预后。方法选取2017年1月~2019年1月湖北理工学院附属妇幼保健院诊治的100例EC患者。实时荧光定量PCR检测EC癌组织和癌旁组织中IGF2BP1 mRNA,PEG10 mRNA及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)mRNA,细胞周期素D1(cyclin D1)mRNA,细胞周期蛋白依赖激酶4(cyclin dependent kinase 4,CDK4)mRNA表达。免疫组织化学检测IGF2BP1,PEG10蛋白表达。相关性采用Pearson相关分析。Kaplan-Meier曲线分析不同IGF2BP1,PEG10表达组EC患者的预后差异。COX回归分析EC患者的预后影响因素。结果EC癌组织中IGF2BP1 mRNA(1.84±0.33),PEG10 mRNA(2.12±0.40),PCNA mRNA(3.14±0.42),cyclinD1 mRNA(2.81±0.36),CDK4 mRNA(2.37±0.34)高于癌旁组织(0.78±0.21,0.91±0.25,0.74±0.13,0.67±0.21,0.59±0.18),差异具有统计学意义(t=25.652~54.588,均P<0.05)。癌组织中IGF2BP1(70.00%),PEG10(72.00%)蛋白阳性率高于癌旁组织(100%,9.00%),差异具有统计学意义(χ^(2)=75.000,82.363,均P<0.05)。EC中IGF2BP1 mRNA,PEG10 mRNA表达与PCNA mRNA,cyclinD1 mRNA,CDK4 mRNA表达呈正相关(r=0.562~0.625,均P<0.05)。EC中IGF2BP1 mRNA与PEG10 mRNA表达呈显著正相关(r=0.663,P<0.05)。FIGO分期Ⅲ期、并发淋巴结转移EC癌组织中IGF2BP1(86.49%,87.50%),PEG10(89.19%,90.63%)阳性率高于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期(60.32%,61.90%)、无淋巴结转移(61.77%,63.24%),差异具有统计学意义(χ^(2)=6.863~8.608,均P<0.05)。IGF2BP1阳性组患者三年总体生存率70.00%(49/70)低于阴性组的90.00%(27/30);PEG10阳性组患者三年总体生存率为69.44%(50/72),低于阴性组的92.86%(26/28),差异具有统计学意义(Log-rankχ^(2)=4.133,5.491,P=0.042,0.019)。FIGO分期Ⅲ期(OR=1.449,95%CI:1.148~1.830)、并发淋巴结转移(OR=1.442,95%CI:1.124~1.850),IGF2BP1阳性(OR=1.637,95%CI:1.239~2.163)及PEG10阳性(OR=1.576,95%CI:1.136~1.187)是影响EC患者生存预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论EC中IGF2BP1,PEG10表达升高,两者与增殖基因表达呈正相关,是EC预后评估的肿瘤标志物。

lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:探究胃癌(GC)组织中长链非编码RNA HOXC反义RNA1(lncRNA HOXC-AS1)、胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)mRNA表达水平与患者临床病理特征及术后5年内生存的关系。方法:选取我院2015年5月至2018年4月收治的GC患者139例,手术收集GC组织及癌旁组织。荧光定量PCR法检测lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达。对GC患者进行术后随访5年,记录GC患者生存情况,分为生存组88例,死亡组51例。比较GC组织和癌旁组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平、不同临床病理特征患者GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达情况、生存组和死亡组临床病理特征和GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平。分析GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平的相关性、GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达情况与术后5年生存的关系、影响GC患者术后5年内生存的危险因素。结果:与癌旁组织相比,GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平均显著升高(P<0.05);GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平呈正相关(P<0.05);GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平与淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度相关(P<0.05);lncRNA HOXC-AS1高表达组、IGF2BP2 mRNA高表达组患者术后5年总生存率分别显著低于lncRNA HOXC-AS1低表达组、IGF2BP2 mRNA低表达组(P<0.05);生存组和死亡组淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度比较差异有统计学意义(P<0.05);死亡组患者GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平显著高于生存组(P<0.05);TNM分期为III期、肿瘤低分化、lncRNA HOXC-AS1高表达、IGF2BP2 mRNA高表达是影响GC患者术后5年内生存的独立危险因素(P<0.05)。结论:GC患者癌组织中lncRNA HOXC-AS1及IGF2BP2 mRNA表达水平均显著升高,且术后5年内死亡的GC患者较存活患者更高,二者与淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度密切相关,二者高表达是影响GC患者术后5年内生存的独立危险因素。

纤维蛋白原对内皮细胞t-PA和PAI-1 mRNA表达的影响

目的 探讨纤维蛋白原 (Fg)对内皮细胞 (EC)组织型纤溶酶原激活物 (t PA)和纤溶酶原灭活剂 (PAI 1)mRNA表达的影响。方法 不同浓度Fg与EC孵育不同时间后 ,用单管逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)半定量法检测t PA和PAI 1mRNA的表达。结果 用 2 0 ,2 0 0 ,2 0 0 0mg/L的Fg与EC孵育 12h后 ,PAI 1mRNA的相对表达水平分别为对照组的 2 0 ,2 9,3 4倍 ,2 0 0mg/LFg与EC孵育1、12、2 4h ,PAI 1mRNA的相对表达水平分别为同时相对照组的 1 7,3 6 ,2 5倍。t PAmRNA的表达则不依Fg浓度和孵育时间而变化。结论 Fg可诱导PAI 1高表达而不增加t PA的表达水平 ,导致EC表面纤溶活性降低 。

中药海乐得对部分肾切除大鼠残余肾脏表达PAI-1、TGFβ mRNA的影响

目的：观察中药制剂海乐得对５／６肾切除（５／６ＮＸ）大鼠残余肾组织表达纤溶酶原激活物抑制物－１（Ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒ－ｌ，ＰＡＩ－ｌ）、转化生长因子β（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ－β，ＴＧＦβ）的影响。方法：海乐得治疗５／６肾切除大鼠６周后处死，检测尿蛋白排泄和血生化变化，制作残肾组织病理和冰冻切片，提取残余肾脏组织ＲＮＡ，分别采用组织原位杂交及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印记杂交方法观察ＰＡＩ－ｌ、ＴＧＦβ的基因表达。结果：中药治疗组残肾组织中ＰＡＩ－ｌ和ＴＧＦβｍＲＮＡ表达、尿蛋白排泄、血清尿素氮和肌酐均明显低于未治疗组，肾脏病理损害以及脂代谢紊乱亦有明显改善。结论：海乐得通过ＰＡＩ－ｌ和ＴＧＦβ途径，能明显改善慢性肾功能衰竭大鼠的肾功能和病理损伤。

益肾化浊注射液对高糖培养肾小球系膜细胞表达FN及PAI-1 mRNA的影响

观察高糖对体外培养肾小球系膜细胞表达纤维连接蛋自 (FN)、纤溶酶原激活物抑制物(PAI 1)mRNA以及细胞增殖、分泌FN的影响 ,同时观察益肾化浊注射液对高糖引起上述各指标变化的影响。采用体外培养肾小球系膜细胞方法 ,用高糖及益肾化浊注射液作为刺激物 ,四甲基偶氮唑盐微量酶比色法 (MTT)检测细胞增殖 ,酶联免疫吸附测定法 (ELISA)测定细胞上清FN含量 ,Northem杂交检测FN、PAI 1mRNA表达水平。结果表明 ,高糖可促进分泌FN ,上调PAI 1mRNA的表达 ,明显抑制系膜细胞的增殖 ;而益肾化浊注射液可缓解高糖所引起的上述指标的改变 ,并可下调FNmRNA的表达。

牛磺酸对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织PAI-1mRNA表达的影响

目的 :观察牛磺酸对胰岛素抵抗大鼠的治疗作用。方法 :选择 SD雄性大鼠 ,按体重随机分为正常组和造模组 ,造模组大鼠饲以特殊高脂饲料 30 d,造成胰岛素抵抗动物模型 ;经牛磺酸治疗 30 d后 ,取血检测血糖、胰岛素等指标 ,计算胰岛素抵抗敏感指数。运用 RT- PCR技术测定大网膜脂肪组织 PAI- 1m RNA的表达。结果 :采用特殊高脂饲料可以成功诱导胰岛素抵抗动物模型 ;牛磺酸可提高胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感指数 (P<0 .0 5 ) ,下调脂肪组织PAI- 1m RNA的表达。结论 :牛磺酸具有提高胰岛素敏感性作用 ,以及阻断 PAI- 1m RNA的过度表达的综合效应。

晶状体上皮细胞PAI-1蛋白酶mRNA的表达

目的 研究从转录水平确定晶状体上皮细胞是否能够合成纤溶酶原激活物抑制物 1(PAI 1)蛋白酶。方法 体外培养的牛晶状体上皮细胞 ,当细胞生长融合后 ,抽提RNA ;采用Nothernblot分析技术 ,对抽提得到的牛晶状体上皮细胞RNA用特异的cDNA探针进行检测。结果 在牛晶状体上皮细胞的基因转录产物中存在有PAI 1mRNA的表达 ,所表达的PAI 1mRNA碱基长度为 2 .3kb。结论 牛晶状体上皮细胞能够分泌PAI 1蛋白酶 ;

老年结肠癌患者NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达变化和意义

目的探讨染色体凝缩蛋白复合物I(NCAP)D2、Krüppel样因子(KLF)5蛋白及跨膜受体蛋白Notch1 mRNA对老年结肠癌患者预后的预测价值。方法选取老年结肠癌患者85例,术中采集肿瘤组织和正常组织(距离肿瘤组织5 cm以上),Western印迹检测组织标本中NCAPD2、KLF5蛋白表达,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测组织标本中Notch1 mRNA表达。收集老年结肠癌患者的人口学特征和临床病理资料;以患者出院时日期为随访起点,进行3年随访,记录患者生存情况,分为预后良好组(生存),不良组(死亡)。结果老年结肠癌患者结肠癌组织中NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平明显高于正常组织(P<0.01)。NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平在不同病理分期、分化程度、淋巴结转移情况、远端转移情况的结肠癌患者差异均有统计学意义(P<0.01);其中,浸润程度T3~T4、有淋巴结转移、有远端转移的结肠癌患者NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平明显高于浸润程度T1~T2、无淋巴结转移、无远端转移的结肠癌患者(P<0.01);随着分化程度的降低,结肠癌患者NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平逐渐升高(P<0.01)。不良组NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平明显高于预后良好组(P<0.01)。构建受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA表达水平对老年结肠癌患者预后均具有较高的预测价值(P<0.01);各指标联合检测对老年结肠癌患者预后的预测价值最高。结论老年结肠癌患者肿瘤组织中NCAPD2、KLF5蛋白及Notch1 mRNA高表达,且与浸润程度、分化程度及转移情况密切相关,联合检测可用于患者预后评估。

救心胶囊对缺氧及LDL损伤人脐静脉内皮细胞PAI-1mRNA表达的影响

[目的]观察救心胶囊通过抑制损伤人脐静脉内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)mRNA的表达,保护内皮细胞功能。[方法]通过建立缺氧及低密度脂蛋白(LDL)损伤内皮细胞模型,并以载药血清为给药方式,运用细胞原位杂交技术检测PAI-1mRNA的表达。[结果]内皮细胞损伤后PAI-1mRNA阳性率明显增加,救心胶囊显著降低其表达。[结论]救心胶囊保护内皮细胞,参与血液凝固性调节,防止冠状动脉粥样硬化继发血栓形成。

肿瘤坏死因子对人脐静脉内皮细胞PAI-1活性、mRNA的影响以及促分裂原活化蛋白激酶的作用

目的 研究肿瘤坏死因子 α(TNF α)对人脐静脉内皮细胞 (HUVECs)纤溶酶原激活物抑制剂 (PAI 1)活性及mRNA水平的影响 ,以及促分裂原活化蛋白激酶 (MAPK)在其中的作用。 方法 进行HUVECs的培养和鉴定。加入不同浓度TNF α ,并选择最佳时间条件。采用发色底物法测定PAI 1活性 ,Northernblot法检测PAI 1mRNA的水平。运用MAPK激酶抑制剂PD980 5 9观察对上述PAI 1l表达系统的作用。 结果 不同浓度TNF α(5× 10 4IU L、1× 10 5IU L、2× 10 5IU L和 4× 10 5IU L)均明显增高HUVECsPAI 1的活性 (P <0 0 1) ,1× 10 5IU LTNF α作用不同时间 (12、18、2 4h) ,PAI 1活性均明显增加 (P <0 0 1)。 1× 10 5IU LTNF α作用 18h时 ,PAI 1mRNA水平为正常对照组的 2 88倍。MAPK激酶抑制剂PD980 5 9能显著抑制TNF α对PAI 1活性和mRNA表达增强的作用。 结论 TNF α增强HUVECsPAI 1活性与mRNA表达 ;PAI 1活性提高与其mRNA表达增加呈正相关 ;MAPK途径在TNF α诱导PAI 1反应中起着重要作用。

Fascin⁃1 mRNA联合肿瘤标志物对结直肠腺癌患者术后淋巴结转移和生存预后的评估价值

目的探讨Fascin⁃1 mRNA联合肿瘤标志物对结直肠腺癌患者术后淋巴结转移和生存预后的评估价值。方法选取2018年2月至2021年7月于淮南东方医院集团总院接受手术治疗患者97例作为研究对象,术后检测患者血清Fascin⁃1 mRNA、糖类抗原199(CA199)、肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)水平,术后随访12个月。根据是否发生淋巴结转移分为淋巴结转移组(n=34)与无淋巴结转移组(n=63),比较两组血清Fascin⁃1 mRNA、CA199与CEA表达水平;根据随访12个月患者生存情况分为死亡组(n=37)与生存组(n=60),比较两组临床资料与Fascin⁃1 mRNA、CA199、CEA水平,进行单、多因素分析,绘制ROC曲线检验Fascin⁃1 mRNA、CA199、CEA对结直肠腺癌患者术后淋巴结转移与生存预后的诊断效能。结果淋巴结转移患者血清CA199、CEA与Fascin⁃1 mRNA表达水平均高于无淋巴结转移患者,差异具有统计学意义(t=4.299、4.271、4.492,P<0.05);死亡组与生存组患者肿瘤大小、TNM分期、术后是否接受化疗、有无淋巴结转移、CA19⁃9、CEA、Fascin⁃1 mRNA水平比较差异具有统计学意义(χ^(2)=5.167、5.167、2.428、9.488,t=4.360、4.497、6.993,P<0.05);多因素logistic回归分析结果显示淋巴结转移、CA19⁃9、CEA、Fascin⁃1 mRNA表达水平为结直肠腺癌患者术后12月生存预后独立影响因素(P<0.05);ROC曲线结果显示Fascin⁃1 mRNA联合CA199、CEA检测均对术后淋巴结转移和生存预后的AUC分别为0.940、0.989,敏感度分别为0.882、0.946,特异度分别为0.857、0.983。结论Fascin⁃1 mRNA、CA199、CEA对结直肠腺癌患者术后淋巴结转移和生存预后具有良好的预测价值,三项指标联合可提高预测价值。

纤维蛋白原、极低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞t-PA和PAI-1mRNA含量的影响

目的 拟建立逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）半定量法，探讨纤维蛋白原（Ｆｇ）、极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）对人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣｓ）组织型纤溶酶原激活物（ｔ－ＰＡ）、Ｉ型纤溶酶原灭活剂（ＰＡＩ－ｌ）ｍ ＲＮＡ 表达的影响。 方法 （ｌ）用异硫氰酸胍一步法（ＴＲＩｚｏｌ试剂）提取细胞总ＲＮＡ，用单管ＲＴ－ＰＣＲ 法、三对引物分别逆转录、扩增ｔ－ＰＡ，ＰＡＩ－１ 及内参照三磷酸甘油醛脱氢酶（ＧＡＰＤＨ）的特异性片段，扩增产物经２．０％ 琼脂糖凝胶电泳分离后，用凝胶图像分析仪照相、计算各条带分子量并扫描其光密度值（ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ ｄｅｎｓｉｔｙ ｖａｌｕｅ，ＩＤＶ），ｔ－ＰＡ、ＰＡＩ－１ ｍ ＲＮＡ的ＩＤＶ 用ＧＡＰＤＨ ｍ ＲＮＡ 的ＩＤＶ 进行校正，其相对表达量用各实验组与对照组比较的倍数表示。（２）以ＥＬＩＳＡ 法测定内皮细胞（ＥＣ）培养上清液（ＣＭ）中ｔ－ＰＡ，ＰＡＩ－１总抗原的含量。（３）ＥＣ与不同浓度Ｆｇ（２，２０，２００，２０００ μｇ／ｍ ｌ）或ＶＬＤＬ（５，１０，２０，３０，４０ μｇ／ｍ ｌ）共同孵育１２ ｈ 或２４ ｈ 后，观察ＥＣｔ－ＰＡ 和ＰＡＩ－１ ｍ ＲＮＡ 水平及ＣＭ 中抗原含量的变化。（４?

高危型HPV阳性患者中HPVL1蛋白的表达及临床意义

探讨HPV-L1蛋白在宫颈细胞学高危型HPV阳性患者中的表达及临床意义。方法 选取187例高危型HPV阳性宫颈液基细胞学标本,其中未见上皮内瘤样病变及恶性细胞(NILM)40例,非典型鳞状上皮细胞(ASC-US)68例、低度鳞状上皮内瘤变(LSIL)39 例、非典型鳞状上皮细胞-不除外高度(ASC-H)13例、高度鳞状上皮内病变(HSIL)24例、鳞状细胞癌(SCC)3例,用赛泰(CytoReact?)免疫组织化学染色检测 HPV L1 蛋白的表达,187例样本中同时具有宫颈细胞学和病理学诊断结果的111例。同时将细胞学诊断与病理诊断相对照。 结果 不同细胞学诊断患者HPV L1蛋白阳性表达率分别为NILM 5%、ASC-US 48.5%、LSIL 61.5%、ASC-H 8%、HSIL 0%、SCC 0%,比较差异显著,有统计学意义(χ2=36.100,P<0.01);不同病理学诊断患者HPV L1蛋白阳性率分别为:炎症66.6%、CIN 1 50%、CIN 2 10%、CIN 3 9%、SCC 0%,比较差异显著,有统计学意义(χ2=22.285,P<0.01)。随着病变级别的增加,HPV L1的表达逐渐下降。结论 HPV L1蛋白表达缺失和高危型人乳头瘤病毒感染的持续存在是ASC-US和LSIL患者进展为CIN2及以上病变的可靠预测因子。