PAK1在幽门螺杆菌联合MNNG诱导人食管上皮细胞分泌IL-8和GRO-α中的作用

目的构建PAK1低、高表达人食管上皮细胞(HEEC)稳定细胞株,探究PAK1在幽门螺杆菌(HP)联合N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导HEEC分泌趋化因子IL-8和GRO-α中的作用,为食管癌发病机制提供理论依据。方法利用RNAi技术转染HEEC构建PAK1低表达(PAK1-KD)稳定细胞株,利用过表达慢病毒转染HEEC构建PAK1高表达(PAK1-OE)稳定细胞株;两种细胞分别分为HP+MNNG染毒组、HP染毒组和MNNG染毒组,并设立空白对照组。按感染复数(MOI)=100∶1,即细菌∶细胞=100∶1将HP加入细胞中进行共培养,采用CCK8法计算MNNG半数抑制浓度(IC50)。收集染毒后3 h、6 h和9 h的细胞上清液,采用ELISA法测定IL-8和GRO-α含量。结果相较于空载体对照组(PAK1-NC),PAK1-KD组PAK1基因敲减效率达到84.1%(t=14.627,P=0.004),PAK1-OE组PAK1基因的表达丰度是PAK1-NC组的1,101.646倍(t=16.104,P=0.004)。表明成功构建了PAK1低、高表达HEEC稳定细胞株。在PAK1-KD和PAK1-OE细胞中,各染毒组细胞IL-8和GRO-α分泌含量均随染毒时间呈趋势性增加(均P<0.01)。在PAK1-KD和PAK1-OE细胞中,相同染毒时间,各组细胞IL-8和GRO-α含量均出现联合染毒组>HP染毒组>MNNG染毒组>对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。在相同染毒时间内,与PAK1低表达(PAK1-KD)相比,PAK1高表达(PAK1-OE)显著促进联合染毒组、HP染毒组和MNNG染毒组细胞分泌IL-8和GRO-α,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论PAK1作为幽门螺杆菌感染上皮信号通路关键因子,其高表达可促进HP联合MNNG染毒诱导人食管上皮细胞分泌趋化因子IL-8和GRO-α,在食管癌发生中起重要作用。

PAK1和NF2/Merlin的拮抗作用驱动少突胶质细胞髓鞘膜扩张

在中枢神经系统中,少突胶质细胞(OL)髓鞘的形成依赖于肌动蛋白细胞骨架从聚合到解聚的转变。触发这种转变的分子机制尚未阐明。本研究确定P21活化激酶1(PAK1)是OL中肌动蛋白解聚的主要调节因子。我们的结果表明,PAK1以激酶抑制形式在OL中积累,从而触发肌动蛋白分解,进而导致髓鞘膜扩张。值得注意的是,PAK1结合伙伴的蛋白质组学分析使我们能够确定NF2/Merlin是其内源性抑制剂。本研究表明,OL中的Nf2敲低会导致PAK1活化、肌动蛋白聚合和OL髓鞘膜扩张减少。通过使用PAK1抑制剂治疗可以挽救这种影响。本研究还提供了证据表明,少突胶质细胞中特定的Pak1功能丧失会刺激体内髓鞘增厚。总体而言,我们的数据表明PAK1和NF2/Merlin对OL肌动蛋白细胞骨架的拮抗作用对于髓鞘的正常形成至关重要。这些发现对研究脱髓鞘疾病和神经发育障碍的机制和治疗有着重要意义。

运动促进骨骼肌健康的新视角:基于Rac1/PAK1/p38 MAPK信号通路改善肌生成和糖代谢的研究进展与展望

骨骼肌是维持机体运动能力、调节机体能量代谢的重要器官,其内分泌功能也日益被重视。久坐、衰老、肥胖等因素会引起肌萎缩,继而影响糖脂代谢稳态,引起内分泌失调等相关疾病。抑制Rac1/PAK1/p38 MAPK信号通路能干预癌变,而激活该通路可控制骨骼肌生成、调节机体糖代谢。通过文献资料调研法分析了Rac1/PAK1/p38 MAPK信号通路的生理基础以及运动对其影响的可能性,系统阐述了运动调控Rac1/PAK1/p38 MAPK信号通路改善肌生成和糖代谢的潜在机制。研究认为,运动可通过Rac1/PAK1/p38 MAPK信号通路促进生肌决定因子的形成和葡萄糖转运蛋白4转位,从而促进骨骼肌再生,改善骨骼肌对葡萄糖的摄取能力。

miR-513a-5p通过靶向调控PAK1抑制子宫颈癌细胞增殖和侵袭

目的研究miR-513a-5p通过靶向调控p21活化激酶1(p21-activated kinase 1,PAK1)抑制子宫颈癌细胞增殖和侵袭的机制。方法通过分析高通量基因表达(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库GSE145372数据集的数据确认miR-513a-5p在子宫颈癌组织和正常子宫颈组织中的表达差异。采用实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测miR-513a-5p和PAK1在子宫颈癌细胞株(HT3、C-33A和HeLa)和人子宫颈内膜上皮细胞株(End1/E6E7)中的表达情况。在miR-513a-5p表达最低的细胞株HT3和C-33A中分别转染miR-513a-5p mimics(miR-513a-5p mimics组)和NC mimics(NC mimics组)。在HT3和C-33A细胞中分别转染pcDNA3.1-PAK1和空载pcDNA3.1-NC用于后续功能拯救实验。采用EdU实验和transwell实验分别检测miR-513a-5p和PAK1对子宫颈癌细胞增殖和侵袭能力的影响。荧光素酶报告实验验证miR-513a-5p和PAK1之间的相互作用。结果miR-513a-5p在子宫颈癌细胞株HT3、C-33A和HeLa中的表达均低于人子宫颈内膜上皮细胞株End1/E6E7(均P<0.01)。与转染NC mimics的HT3和C-33A细胞比较,转染miR-513a-5p mimics后48 h,HT3和C-33A细胞株增殖和侵袭能力均减弱(均P<0.01)。荧光素酶实验结果显示,miR-513a-5p可以和PAK1结合。拯救实验结果表明,与单独转染miR-513a-5p mimics的HT3和C-33A细胞比较,共转染miR-513a-5p mimics和pcDNA3.1-PAK1能恢复HT3和C-33A细胞的增殖和侵袭能力(均P<0.01)。结论miR-513a-5p通过靶向调控PAK1抑制子宫颈癌细胞增殖和侵袭。

BET溴域抑制通过阻断VEGFR2介导的PAK1和eNOS激活抑制糖尿病大鼠视网膜病变机制

目的探究BET溴域抑制通过阻断血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)介导的p21激活激酶1(PAK1)和内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)激活抑制糖尿病大鼠视网膜病变机制。方法选择36只雄性SD大鼠,随机选取10只大鼠作为对照组,余下大鼠采用单次注射链脲霉素60 mg/kg建立糖尿病模型。将建模成功的20只大鼠随机分为模型组和BET抑制组,每组10只。对照组大鼠不建模。BET抑制组大鼠建模后,腹腔注射80 mg·kg^(-1)·d^(-1)剂量的JQ1。使用ZEISS数码显微镜和免疫组织化学分析大鼠视网膜心血管生成。通过蛋白质印迹法分析视网膜屏障功能相关蛋白的表达。通过FITC-葡聚糖泄漏实验检测大鼠内外视网膜屏障完整性。通过RT-qPCR分析大鼠视网膜炎症因子的表达。通过酶联免疫吸附试验试剂盒检测大鼠房水VEGF浓度。通过蛋白质印迹法分析视网膜VEGFR2/PAK1/eNOS的蛋白表达。结果与对照组相比,模型组和BET抑制组视网膜新血管生成量、CD34表达、albumin蛋白表达、内外视网膜FITC-葡聚糖泄漏量、IL-1β、iNOS和ICAM-1 mRNA表达、VEGF浓度、视网膜P-PAK1、P-VEGFR2和eNOS蛋白表达均升高,ZO-1和occludin蛋白表达均降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,BET抑制组视网膜新血管生成量、CD34表达、albumin表达、内外视网膜FITC-葡聚糖泄漏量、IL-1β、iNOS和ICAM-1mRNA表达、VEGF浓度、P-PAK1、P-VEGFR2和eNOS蛋白表达均降低,ZO-1和occludin蛋白表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论BET溴化域通过调节VEGFR2介导的PAK1和eNOS信号通路激活抑制血管生成,降低血管通透性,改善糖尿病大鼠视网膜病变。抑制BET溴化域的策略可能为限制血管生成相关疾病提供一种新的治疗方法。

miR-216a-5p调节胰腺癌中PAK1的表达并增强吉西他滨的抗肿瘤作用

目的了解miR-216-5p在胰腺导管腺癌中的表达和意义。方法实时定量聚合酶链反应检测10例新鲜胰腺导管腺癌组织标本及对应的癌旁组织标本中miR-216和PAK1的表达。同时检测miR-216和PAK1在胰腺癌细胞系和正常胰腺导管上皮细胞中的表达。胰腺癌细胞系转染相应miRNA合成物后使用定量聚合酶链反应和蛋白免疫印迹检测PAK1表达水平的变化。细胞增殖实验检测miR-216介导的PAK1表达对吉西他滨对胰腺癌细胞增殖的影响。结果PAK1和Has-miR216-5p在胰腺癌病人术后标本中的表达:胰腺癌肿瘤组织中PAK1的相对表达量为(2.263±0.748),明显高于胰腺癌癌旁正常组织的(1.094±0.302),差异具有统计学意义(P<0.01)。且胰腺癌肿瘤组织中miR216-5p的相对表达量为(0.243±0.048),明显低于胰腺癌癌旁正常组织的(1.144±0.302),差异具有统计学意义(P<0.01)。结论miR-216-5p可显著抑制PAK1的表达,且miR216-5p可通过抑制PAK1的表达来协同吉西他滨的肿瘤抑制作用。

肝癌细胞转移与PI3K-Akt-PAK1通路的相关性研究

目的研究肝细胞癌(HCC)组织PI3K/Akt/p21活化蛋白激酶1(PAK1)信号通路的表达对于HCC发生及转移的重要性,以期为HCC的预防和预后提供一个有效的分子标志,并为HCC的治疗提供一定的理论基础。方法自NCBI中GEO数据库中的GES364数据集提取数据,对PI3K/Akt/PAK1信号通路基因的表达量进行分析。结果将数据库中HCC组织分为肝内扩散组(PS)、肝外转移组(PM)、无转移组(PN)和正常肝对照组(H)。分析发现PS组和PM组PAK1和MMP-9表达量明显高于H组和PN组(P<0.0001);PS组、PM组和PN组AKT(1/2)和Girdin表达量明显高于H组(P<0.05),PS组和PM组AKT2和Girdin表达量也明显高于PN组(P<0.05);在PM组,AKT2与PAK1表达呈正相关(r=0.5679,P=0.0013)。结论 PAK1和MMP-9高表达可以促进HCC的扩散和转移,而AKT的表达和活性对于HCC的转移也是至关重要的,提示PI3K/AKT/PAK1信号通路与HCC转移密切相关。

消癌平注射液联合奥曲肽抑制肝癌细胞生长作用及对PAK1表达影响的实验研究

目的观察消癌平注射液联合奥曲肽对小鼠Hepal-6细胞生长的抑制作用、PAK1蛋白表达水平的影响以及两药联合作用的最佳时间,探讨其可能的作用机制。方法采用MTT法检测不同浓度(10、30、50mg/ml)、不同时间(-24、-16、-8、0、+8、+16、+24h)消癌平注射液联合奥曲肽对小鼠Hepal-6细胞生长的抑制作用;用Western blotting法检测PAK1蛋白表达水平。结果 50mg/ml消癌平注射液联合奥曲肽对Hepal-6细胞生长的抑制作用明显优于其他各组(P<0.05);奥曲肽先于消癌平8小时加入组显示出较好的抗肿瘤效果,且该组PAK1蛋白表达水平较其他各组显著下降(P<0.05)。结论 50mg/ml消癌平注射液联合奥曲肽为抗癌的最佳药物浓度,奥曲肽先于消癌平8小时加入为抑瘤的最佳时间点,两药联合可能通过下调PAK1表达抑制肿瘤细胞的增殖,降低肿瘤细胞的移行能力,为靶向治疗肝癌提供了理论基础。

ErbB-2、PAK1及VEGF在大肠癌中的关系及其意义研究

目的探讨ErbB-2、PAK1和VEGF在大肠癌中的表达与相关性以及三者与大肠癌临床病理特征之间的关系。方法选取结直肠癌根治术后病理检测确诊为大肠癌的组织标本共48例,分为三组:肠癌组织组(48例)、癌旁组织组(21例)及远癌组织组(12例)。分别采用western blot法和RT-PCR法检测ErbB-2、PAK1及VEGF在各组中的蛋白表达及基因表达,并分析三者表达的相关性。同时收集患者的临床资料,包括组织学分型、病理学分级、Dukes分期、有无淋巴结转移等。结果ErbB-2在肠癌组织的基因表达(53.23±11.25)及蛋白表达(4183232.57±587378.18)比癌旁组织(38.21±6.20,2283766.18±376455.78)均明显增加(P<0.05),癌旁组织蛋白表达又高于远癌组织(1394280.24±6562.30)(P<0.05),但癌旁组织基因表达(38.21±6.20)与远癌组织(30.29±10.20)无显著差异。PAK1在肠癌组织基因(67.20±19.32)及蛋白表达(3879654.12±256332.02)较癌旁组织(26.50±7.22,1336987.25±98653.20)显著增加(P<0.01),远癌组织几乎未见表达。VEGF在肠癌组织的基因(62.30±33.58)及蛋白表达(4219314.65±433587.02)均高于癌旁组织(28.22±7.56,2275653.51±403731.20)及远癌组织(23.33±8.12,1878528.34±387563.71)(P<0.05)。三者在肠癌组织的表达呈现两两正相关关系,且与大肠癌的病理学分级、Dukes分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05),而与组织学分型、肿瘤形态及发生部位无关。结论 ErbB-2、PAK1及VEGF在大肠癌发生发展中具有重要作用。ErbB-2活化后可激活下游分子PAK1及VEGF,后二者又相互促进表达,共同导致了大肠癌的演进侵袭。提示联合检测ErbB-2、PAK1及VEGF比单一检测判定大肠癌恶性行为及评估预后更有意义。

喉癌中PAK1基因mRNA的表达及临床意义

目的探讨PAK1（p21activated kinase1）基因在喉癌组织中mRNA水平表达情况及临床意义。方法采用实时定量多聚酶链式反应（qRT—PCR）检测喉癌组织和癌旁正常黏膜组织中PAK1基因的mRNA表达情况。结果62例喉癌中PAK1基因mRNA水平的阳性表达率为72．58％（45例），PAK1的表达与肿瘤分级、淋巴结转移、临床分期和不良预后相关（P〈0．05）。结论喉癌中PAK1基因在mR—NA水平表达的上调与喉癌的发生发展密切相关，并且与病理分级、淋巴结转移、临床分期、不良预后有关，表明PAK1可能成为喉癌治疗中的新靶点。

PAK1-nNOS-NO信号通路在有氧运动减轻压力负荷小鼠心肌肥厚中的作用及其机制

目的:有氧运动减轻压力负荷小鼠心肌肥厚中PAK1-nNOS-NO发挥的作用及机制。方法:将C57BL/6小鼠通过主动脉缩窄术(transverse aortic constriction,TAC)建立小鼠压力负荷模型,通过游泳对其进行有氧运动干预。将小鼠随机分为5组:假手术(SHAM),SHAM+有氧运动(SHAM+E),TAC,TAC+有氧运动(TAC+E)和TAC+有氧运动+IPA-3(TAC+E+I)组。通过小鼠心脏重量指数(heart weight to body weight ratio,HW/BW)变化和心脏结构变化评价心脏肥大程度,心肌组织麦胚凝集素染色评价心肌细胞肥大程度;ELASA试剂盒检测心肌组织NO水平,MDA含量和SOD活性。Western印迹检测p-PAK1,eNOS,p-eNOS Ser114,nNOS和p-nNOS Ser1412蛋白表达水平。结果:随着术后时间的延长,与SHAM组相比,TAC组HW/BW、左室质量(left ventricular mass,LVM)、左室后壁厚度(left ventricular posterior wall thickness,LVPWS)以及室间隔厚度(interventricular septal thickness,IVSS)显著增加,心肌细胞肥大,MDA含量增高,SOD活性降低,但p-PAK1蛋白含量和NO水平却显著降低。有氧运动后,TAC+E组与TAC组相比HW/BW和LVM降低,心肌细胞肥大程度减轻,组织MDA含量减少,SOD活性升高,p-PAK1表达增加,NO水平升高。而给予PAK1抑制剂IPA-3后,与TAC+E组相比,运动训练对心肌肥厚的作用减弱。TAC小鼠eNOS和nNOS表达增高,p-nNOS Ser1412和p-eNOS Ser114表达降低。运动训练可上调nNOS,p-nNOS Ser1412和p-eNOS Ser114表达;而注射IPA-3后,TAC+E+I小鼠与TAC+E小鼠相比,nNOS和p-nNOS Ser1412表达降低,eNOS和p-eNOS Ser114蛋白表达水平无明显改变。结论:PAK1-nNOSNO信号可能是介导有氧运动减轻压力负荷小鼠心肌肥厚作用的关键信号通路。

PAK1基因在相关肿瘤中的作用研究进展

PAK1基因位于人类染色体11q13-q14区域,是丝氨酸/苏氨酸蛋白质磷酸化激酶家族的成员。该基因在肿瘤细胞增殖、凋亡及侵袭等多种生物学过程中发挥重要作用。研究发现,该基因在黑素瘤、淋巴瘤、乳腺癌等多种肿瘤中均存在高表达,与肿瘤的发生、发展密切相关,且PAK1有望成为靶向治疗新的作用靶点。该文就PAK1基因在相关肿瘤中的研究进展进行了综述。

PAK1和PAK4在不同毛色绵羊皮肤中的表达与定位

本研究通过研究p21活化激酶1(p21-Activated Kinase 1,PAK1)、p21活化激酶4(p21-Activated Kinase 4,PAK4)在不同毛色绵羊皮肤的表达与定位,探索PAK1、PAK4在绵羊毛色形成中的作用。选取黑色、棕色和白色哈萨克绵羊各3只,取背部皮肤组织,qRT-PCR检测不同毛色皮肤中PAK1和PAK4 mRNA相对表达量,Western Blotting研究PAK1和PAK4蛋白在不同毛色绵羊皮肤中的相对表达量,免疫组化技术对PAK1和PAK4在绵羊皮肤组织中表达情况进行定位分析。结果表明,PAK1基因在黑色绵羊皮肤中的mRNA相对表达量极显著高于棕色和白色绵羊,棕色绵羊的表达极显著高于白色绵羊。PAK4基因在黑色绵羊皮肤中的mRNA相对表达量极显著高于棕色和白色绵羊,棕色绵羊的表达显著高于白色绵羊;黑色绵羊的皮肤中PAK1和PAK4蛋白表达量极显著高于棕色和白色绵羊,棕色绵羊中PAK4蛋白表达量极显著高于白色绵羊;PAK1蛋白在白色绵羊的表皮、根鞘、毛干表达,在黑色绵羊的表皮、根鞘、毛球表达,在棕色绵羊的表皮、根鞘表达。PAK4蛋白在白色,黑色和棕色绵羊的表皮、根鞘、毛基质中均有表达。综上表明,PAK1和PAK4可能通过诱导黑色素的生成进而调控哈萨克绵羊毛色生成过程。

人PAK1重组蛋白质的表达及在人胃癌BGC-823细胞内定位

为检测人PAK1在原核细胞中的表达情况及在真核细胞中的定位,利用RT-PCR技术获得PAK1目的基因,构建GST融合蛋白原核表达载体pGEX-5X-1/PAK1,IPTG诱导后进行SDS-PAGE及Western印迹检测,并用体外激酶实验测定其生物学活性;同时,构建带绿色荧光蛋白(GFP)标签的真核表达载体pEGFP/PAK1,利用脂质体法转入人胃癌BGC-823细胞系中,在共焦激光扫描显微镜下观察癌细胞中绿色荧光蛋白的表达。结果表明,pGEX-5X-1/PAK1载体能在大肠杆菌BL-21中正确表达GST-PAK1融合蛋白,大小约为94kDa,具有生物活性;PAK1绿色荧光蛋白定位于细胞浆。上述研究为进一步探索PAK1的生物学特性及信号转导通路打下了基础。

PAK1在康莱特联合5-氟脲嘧啶对Hepal-6肝癌细胞化疗增效中的作用

目的观察康莱特对化疗药物5-氟脲嘧啶(5-Fu)的最佳增效时间和最佳增效浓度,并探讨其发挥化疗增效作用的机制。方法采用MTT比色法观察不同浓度康莱特联合5-Fu对Hepal-6肝癌细胞的生长抑制作用,康莱特作用浓度分别设10、30、50mL/L,作用时间分别设5-Fu作用前0、8、16、24h和作用后8、16、24h,采用RT-PCR法检测PAK1mRNA的表达,细胞划痕愈合实验测定细胞扩散运动能力。结果不同浓度康莱特联合5-Fu给药组细胞生长抑制率明显高于5-Fu单药组(P<0.05),且康莱特的增效作用随其剂量的增加而增加(P<0.05),50mL/L康莱特于5-Fu作用前8h加入增效作用最佳(P<0.01)。正常肝细胞仅表达少量PAK1mRNA,康莱特8h-5-Fu给药组较肝癌细胞组、5-Fu单药组能明显下调Hepal-6肝癌细胞PAK1mRNA的表达(P<0.01),但仍较正常肝细胞组高。康莱特8h-5-Fu给药组较肝癌细胞组、5-Fu单药组能显著减弱细胞移行运动能力。结论康莱特以50mL/L于5-Fu作用前8h加入,化疗增效作用最佳,康莱特主要通过减少PAK1基因的表达,减弱细胞移行运动能力,从而发挥增加5-Fu化疗效果的作用。

二烯丙基二硫对人胃癌MGC803细胞Rac1-Pak1／Rock1通路的影响

目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人胃癌MGC803细胞Rac1-Pak1/Rock1通路分子的影响。方法 30 mg·L-1DADS分别处理MGC803细胞不同时间后,采用RT-PCR、Western blot分别检测Rac1、Pak1、Rock1、cofilin1和destrin的mRNA和蛋白水平。结果 DADS可下调MGC803细胞Rac1、Pak1和Rock1 mRNA和蛋白水平(P<0.05),对cofilin1和destrin的表达无影响,但可抑制cofilin1磷酸化(P<0.01)。结论 DADS可下调Rac1、Pak1和Rock1表达和磷酸化cofilin1;DADS抑制Rac1-Pak1/Rock1通路可能与DADS抗人胃癌MGC803细胞迁移侵袭作用机制有关。

一种新型PAK1抑制剂诱导结直肠癌DLD-1细胞凋亡的机制研究

PAK1蛋白激酶在肿瘤的发生发展中发挥着重要作用,筛选开发新的PAK1抑制剂作为肿瘤治疗靶向药物具有重要意义。传统的PAK1抑制剂筛选方法存在成本高、效率低等缺陷,而计算机虚拟筛选可降低发现活性先导化合物的成本,提高筛选效率。本实验采用计算机辅助药物虚拟筛选结合Z'lyteTM高通量激酶筛选出1种PAK1靶向候选化合物,体外酶活性检测发现化合物18(K788)具有良好的PAK1抑制活性(抑制率为42.7%)。进一步通过MTT检测发现K788具有显著的PAK1阳性肿瘤杀伤活性,抑制活性优于阳性药IPA-3(inhibitor of p21-activated kinase compound-3)。采用流式细胞分析、Western blot检测发现K788能通过抑制PAK1的表达及其活化以激活caspase凋亡通路,诱导结肠癌细胞DLD-1的凋亡。K788具有临床开发应用的潜力,可作为PAK1靶向先导分子进行深入研究。

天然PAK1抑制剂抵御SARS-CoV-2感染的潜力

PAK1是主要的“致病”激酶,其异常激活导致人类出现多种疾病,包括衰老、癌症、炎症、疟疾和新型冠状病毒肺炎(Corona virus disease 2019,COVID-19)等大流行性病毒感染。特定的疫苗是治疗病毒感染最有效的方法,但需要长时间的准备及临床试验。在缺乏针对SARS-CoV-2的特异性抗病毒药的情况下,天然的PAK1抑制剂或可成为抵御SARS-CoV-2感染/治疗COVID-19的潜在靶标药物。

Rac1和Pak1在胰腺癌中的表达及其意义

Ras相关的C3肉毒素底物1（Ras-related C3 botulinum toxinsubstrate 1,Racl）是Rho家族（Ras homologue family,Rho）重要成员之一,p21蛋白活化激酶（p21-activated kinase 1,Pak1）是Rac1的效应物,是最早被鉴定的RHO GTP酶下游效应分子。Rac1和Pak1在多种肿瘤中异常高表达,与肿瘤分化程度及淋巴转移呈正相关[1-3],本文对胰腺癌中Rac1及Pak1的表达情况进行了分析。

小鼠卵母细胞减数分裂过程中活化Pak1的表达及其与染色体分离的相关性

目的研究活化的Pak1在小鼠卵母细胞减数分裂进程中的表达、亚细胞定位及其与染色体分离的相关性。方法用Western blot方法半定量分析活化的Pak1(^(Ser204)位点磷酸化,pPak1^(Ser204))在小鼠卵母细胞减数分裂各个时期的蛋白表达量;用免疫荧光染色法分析减数分裂进程中pPak1^(Ser204)的亚细胞定位模式及其与纺锤体和微管组织中心(MTOC)的时空相关性。结果 pPak1^(Ser204)在小鼠卵母细胞减数分裂重启时(GVBD)开始表达,其表达量随减数分裂进程逐渐升高,在第一次减数分裂中期(MⅠ)时达到峰值并持续保持至第二次减数分裂中期(MⅡ)。在第一次减数分裂前中期(pro-MⅠ)、MⅠ和MⅡ期,pPak1^(Ser204)与MTOC核心蛋白pericentrin和γ-tubulin共同定位于纺锤体两极,pPak1^(Ser204)同时存在于染色体上;在第一次减数分裂后期(AI)到末期(TelI)进程中pPak1^(Ser204)离开MTOC和染色体,聚集在收缩环部位。结论 pPak1^(Ser204)在卵母细胞减数分裂恢复时开始表达,是一种MTOC相关蛋白,可能通过参与纺锤体结构的形成和维持而调控染色体的分离。