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PAK6基因的克隆、抗体制备及在前列腺癌中的表达 被引量:1
1
作者 韩宇晶 安政雯 +3 位作者 杨金星 李俊 罗荣城 张宏权 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期827-830,共4页
目的在克隆P21相关激酶6(PAK6)全长cDNA的基础上,进一步克隆PAK6-N端基因并使其在大肠杆菌中高效表达,纯化基因产物并进行多克隆抗体制备,为研究PAK6与疾病的关系奠定基础。同时研究PAK6在前列腺癌中的表达。方法根据人全长PAK6cDNA序列... 目的在克隆P21相关激酶6(PAK6)全长cDNA的基础上,进一步克隆PAK6-N端基因并使其在大肠杆菌中高效表达,纯化基因产物并进行多克隆抗体制备,为研究PAK6与疾病的关系奠定基础。同时研究PAK6在前列腺癌中的表达。方法根据人全长PAK6cDNA序列,设计PCR引物,以人前列腺癌cDNA文库为模板利用PCR技术克隆PAK6全长cDNA。在此基础上,以PAK6全长cDNA为模板克隆PAK6-N端基因,将扩增产物克隆至大肠杆菌表达载体pGEX-4T-1中,经EcoRIXhoI双酶切鉴定后,进行DAN序列测定。GST-PAK6-N融合蛋白在硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下在大肠杆菌BL21中得到表达。利用Glutothione亲和层析纯化融合蛋白,用纯化的GST-PAK6-N融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,并用纯化的抗PAK6多克隆抗体在3例前列腺癌病人标本中进行了免疫组化表达的初步研究。结果成功克隆了PAK6全长cDNA和PAK6-N端基因片断,在E.coli中表达了PAK6-NT,纯化了GST-PAK6-N融合蛋白,并制备了PAK6特异性抗体。免疫组织化学研究表明:3例前列腺癌患者石蜡包埋病理组织切片免疫组化染色全部表现为间质阳性,PAK6在前列腺癌间质中呈现表达,而前列腺癌细胞则不染色。结论首次克隆了PAK6全长cDNA和PAK6-N端基因片断并成功制备了PAK6特异性抗体,为深入探讨PAK6在前列腺癌中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 pak6 基因克隆 蛋白表达 多克隆抗体 前列腺肿瘤
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PAK6在结肠癌组织中的表达及其意义 被引量:1
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作者 王佳 韩纯杰 +1 位作者 宋娟 卢彦珍 《长治医学院学报》 2016年第3期165-168,共4页
目的:探讨PAK6在结肠癌组织中的表达水平及生物学意义。方法:应用组织芯片结合免疫组化技术检测41例结肠癌及9例正常的结肠组织芯片中PAK6表达情况。采用siRNA技术干扰结肠癌细胞系SW480中PAK6表达,观察对结肠癌细胞侵袭能力的影响。结... 目的:探讨PAK6在结肠癌组织中的表达水平及生物学意义。方法:应用组织芯片结合免疫组化技术检测41例结肠癌及9例正常的结肠组织芯片中PAK6表达情况。采用siRNA技术干扰结肠癌细胞系SW480中PAK6表达,观察对结肠癌细胞侵袭能力的影响。结果:PAK6在结肠癌中高表达率为80.5%(33/41),高于正常组织22.2%(2/9),差异具有统计学意义(P<0.05);siRNA干扰结肠癌细胞系SW480中PAK6表达明显抑制了结肠癌细胞的侵袭能力。结论:PAK6在结肠癌中呈高表达,可能与结肠癌的发生发展有关。 展开更多
关键词 pak6 组织芯片 结肠癌 肿瘤侵袭
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不同激酶活性的hPAK6基因原核表达载体的构建及重组蛋白的表达
3
作者 刘彤 李洋 +1 位作者 朱戈 李丰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1057-1059,1071,共4页
目的构建不同激酶活性的hPAK6原核表达载体并诱导和鉴定其融合蛋白表达。方法野生型、激酶活型和激酶死型pcDNA3.1-PAK6经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,在E.coli BL21中诱导不同型GST-hPAK6融合蛋白表达,并经... 目的构建不同激酶活性的hPAK6原核表达载体并诱导和鉴定其融合蛋白表达。方法野生型、激酶活型和激酶死型pcDNA3.1-PAK6经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,在E.coli BL21中诱导不同型GST-hPAK6融合蛋白表达,并经免疫印迹鉴定结果。结果野生型、激酶活型和激酶死型hPAK6编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,双酶切及测序鉴定正确,并在E.coli BL21中获得了诱导表达,蛋白的分子量均为101 kDa,免疫印迹检测到了融合蛋白表达。结论成功构建不同激酶活性的hPAK6基因原核表达载体,并分别诱导表达出GST-PAK6融合蛋白。 展开更多
关键词 pak6基因 激酶活型 激酶死型 原核表达 融合蛋白
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粗糠柴霉素通过调控PAK6基因的表达对非小细胞肺癌细胞A549增殖、凋亡以及放射敏感性的影响
4
作者 穆双锋 李敬霞 庞然然 《临床肺科杂志》 2022年第4期565-569,共5页
目的研究粗糠柴霉素对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡和放射敏感性的影响及潜在作用机制。方法MTT法测定不同浓度粗糠柴霉素对A549细胞的增殖抑制率,流式细胞术测定A549细胞凋亡率,克隆形成实验测定不同放射剂量处理后细胞存活分数,Wes... 目的研究粗糠柴霉素对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡和放射敏感性的影响及潜在作用机制。方法MTT法测定不同浓度粗糠柴霉素对A549细胞的增殖抑制率,流式细胞术测定A549细胞凋亡率,克隆形成实验测定不同放射剂量处理后细胞存活分数,Western blot检测PAK6蛋白表达,qRT-PCR检测PAK6 mRNA的表达。结果8μM粗糠柴霉素处理A549细胞48h,细胞抑制率达(51.34±5.07)%,细胞抑制率和凋亡率较对照组均显著增加(P<0.05);随着照射剂量的增加,粗糠柴霉素组A549的细胞存活分数较对照组显著下降(P<0.05);qRT-PCR和Western Blot实验表明,粗糠柴霉素处理后A549细胞中PAK6基因的mRNA和蛋白表达量与对照组相比显著下降(P<0.05),PAK6过表达后,粗糠柴霉素对A549的抑制率和凋亡率较对照组均显著下降(P<0.05)。结论粗糠柴霉素通过抑制PAK6表达,抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖,促进细胞凋亡,增强其放射敏感性。粗糠柴霉素有望成为肺癌临床放射增敏剂。 展开更多
关键词 粗糠柴霉素 肺癌 A549 pak6 增殖 凋亡
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PAK6对前列腺癌的双向调控作用 被引量:2
5
作者 唐诣超 陈思蕾 刘彤 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第13期2166-2170,共5页
前列腺癌为一类男性患病率较高的癌症,对该癌症机制的认识以及治疗手段非常有限,在西欧和美洲男性中是一类致死率较高的癌症。随着科学研究的不断进展,p21活化激酶(PAK)蛋白家族在癌症中发挥的作用开始进入人们的视野。p21活化激酶6(... 前列腺癌为一类男性患病率较高的癌症,对该癌症机制的认识以及治疗手段非常有限,在西欧和美洲男性中是一类致死率较高的癌症。随着科学研究的不断进展,p21活化激酶(PAK)蛋白家族在癌症中发挥的作用开始进入人们的视野。p21活化激酶6(PAK6)最初是以雄激素受体的配体结合域(LBD)上的氨基酸序列629~919,通过酵母双杂交识别出来的雄激素受体相关蛋白。而雄激素与雄激素受体在前列腺癌的发生与发展中发挥了十分重要的作用,因此PAK6蛋白作为前列腺癌治疗的靶向蛋白被不断研究。本文主要介绍PAK6在前列腺癌中的双向调节作用,包括通过磷酸化雄激素受体抑制雄激素受体向核内转移的抑癌作用,和通过抑制BAD凋亡通路、影响前列腺癌细胞生长周期以及促进前列腺癌细胞从细胞集落中脱离的促癌作用。同时PAK6的表达水平和激酶活性的调节对PAK6在前列腺癌中发挥作用具有十分重要的意义。激素与生长因素和内质网应激可能是提高PAK6表达水平和激酶活性的两条途径。PAK6在前列腺癌中发挥的作用与其表达水平和激酶活性的调节机制对前列腺癌的治疗手段以及其治疗药物的靶向目标具有十分重要的意义。 展开更多
关键词 前列腺癌 pak6 雄激素受体 BAD HGF 内质网应激 NF-κB P38-MAPK
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PAK6、p53在膀胱癌中的表达及其临床意义 被引量:3
6
作者 董宇 马淑盟 +1 位作者 刘芬 路喜安 《实用癌症杂志》 2020年第9期1444-1448,共5页
目的探讨P21活化激酶6(p21-activated kinase 6,PAK6)以及p53在膀胱癌中的表达及其临床意义。方法取膀胱癌患者85例作为膀胱癌组,并取其膀胱癌组织;取行膀胱部分切除或全部切除术患者35例为对照组,取其正常膀胱上皮组织。采用免疫组织... 目的探讨P21活化激酶6(p21-activated kinase 6,PAK6)以及p53在膀胱癌中的表达及其临床意义。方法取膀胱癌患者85例作为膀胱癌组,并取其膀胱癌组织;取行膀胱部分切除或全部切除术患者35例为对照组,取其正常膀胱上皮组织。采用免疫组织化学法检测2组组织PAK6、p53蛋白阳性表达率。Biu-87组、T24组膀胱癌细胞和SV-HUC-1正常膀胱细胞分为Biu-87组、T24组和SV-HUC-1组,采用实时荧光定量PCR法检测3组细胞的PAK6、p53 mRNA表达水平。结果膀胱癌组PAK6蛋白阳性表达率低于对照组(P<0.05),膀胱癌组复发者PAK6蛋白阳性表达率低于原发者(P<0.05)。膀胱癌组PAK6蛋白阳性表达率在肿瘤数量、是否转移、病理分级以及临床分期上差异无统计学意义(P>0.05)。Biu-87组、T24组细胞PAK6 mRNA表达水平均低于SV-HUC-1组(P<0.05)。Biu-87组、T24组细胞p53 mRNA表达水平均高于SV-HUC-1组(P<0.05)。结论PAK6在膀胱癌细胞中以及膀胱癌组织中低表达,并且与膀胱癌的复发有着密切的联系,在膀胱癌发生发展中有抑制作用,PAK6可能会作为新的抑癌指标用以指导临床。p53在膀胱癌细胞与膀胱癌组织中高表达,与病理分级、临床分期等密切相关,具有评估膀胱癌预后的价值。 展开更多
关键词 P21活化激酶6 膀胱癌 pak6蛋白阳性表达率 复发 P53
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PAK6基因沉默对前列腺癌细胞放疗敏感性研究 被引量:2
7
作者 王新敏 章乐 +5 位作者 赵静 李强 倪钊 李应龙 钱彪 王勤章 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2015年第6期732-735,共4页
为探讨p21活化激酶6基因沉默对雄激素依赖性前列腺癌细胞株LNCa P细胞放疗敏感性的影响。采用利用蛋白质免疫印迹技术检测筛选出的靶向PAK6的sh RNA对LNCa P细胞中PAK6蛋白表达抑制情况。并以靶向PAK6的sh RNA转染LNCa P细胞,分别给予0... 为探讨p21活化激酶6基因沉默对雄激素依赖性前列腺癌细胞株LNCa P细胞放疗敏感性的影响。采用利用蛋白质免疫印迹技术检测筛选出的靶向PAK6的sh RNA对LNCa P细胞中PAK6蛋白表达抑制情况。并以靶向PAK6的sh RNA转染LNCa P细胞,分别给予0、1、3、5Gy单次剂量放射治疗,观察放疗对PAK6基因沉默的前列腺癌细胞的抑制作用。用CCK-8法检测前列腺癌细胞的增殖活性;流式细胞仪测定其凋亡变化。结果显示,放疗能抑制前列腺癌细胞的增殖,增加其凋亡率;接受等剂量照射的PAK6基因沉默组前列腺癌细胞增殖减缓更明显,凋亡的肿瘤细胞显著增多。由此可知,PAK6基因沉默的前列腺癌细胞对放射治疗更敏感。 展开更多
关键词 前列腺癌 p21活化激酶6 放射治疗 基因沉默 LNCAP细胞
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血清饥饿条件下p21活化激酶6(PAK6)与雄激素受体表达的相关性及其意义
8
作者 刘彤 李丹妮 +1 位作者 李洋 李丰 《解剖学研究》 CAS 2013年第2期81-84,共4页
目的血清饥饿条件诱导前列腺癌细胞系中内源性p21活化激酶6(PAK6)与雄激素受体(AR)蛋白表达,探讨PAK6与AR蛋白表达的关系。方法在前列腺癌细胞系CWR22Rv1和LNcap细胞进行血清饥饿,诱导内源性PAK6与AR蛋白表达发生变化。结果血清饥饿处... 目的血清饥饿条件诱导前列腺癌细胞系中内源性p21活化激酶6(PAK6)与雄激素受体(AR)蛋白表达,探讨PAK6与AR蛋白表达的关系。方法在前列腺癌细胞系CWR22Rv1和LNcap细胞进行血清饥饿,诱导内源性PAK6与AR蛋白表达发生变化。结果血清饥饿处理的不同时间点,CWR22Rv1和LNCaP细胞中PAK6蛋白表达呈上升趋势,AR蛋白表达呈下降趋势。瞬时转染递增剂量的PAK6引起AR蛋白表达的抑制。结论血清饥饿条件诱导前列腺癌细胞中PAK6与AR蛋白表达呈负相关。 展开更多
关键词 P21活化激酶 雄激素受体 血清饥饿 前列腺癌细胞
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基于PAK6和Wnt/β-catenin信号通路的苦参碱对肺癌放疗敏感性的影响研究 被引量:9
9
作者 李修炜 王记南 张健 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期447-453,共7页
目的探究苦参碱对肺癌放疗敏感性的影响和作用机制。方法人非小细胞肺癌A549细胞分为对照组、2 Gy放疗组、4 Gy放疗组、苦参碱组、苦参碱联合2 Gy组、苦参碱联合4 Gy组、甘氨双唑钠联合2 Gy组、甘氨双唑钠联合4 Gy组,通过克隆形成、细... 目的探究苦参碱对肺癌放疗敏感性的影响和作用机制。方法人非小细胞肺癌A549细胞分为对照组、2 Gy放疗组、4 Gy放疗组、苦参碱组、苦参碱联合2 Gy组、苦参碱联合4 Gy组、甘氨双唑钠联合2 Gy组、甘氨双唑钠联合4 Gy组,通过克隆形成、细胞增殖、细胞凋亡评价苦参碱对A549细胞放疗敏感性的影响;建立裸鼠皮下移植瘤模型,分为对照组、5 Gy放疗组、苦参碱组、苦参碱联合5 Gy组、甘氨双唑钠联合5 Gy组,记录小鼠瘤体积;Western blotting法检测A549细胞和小鼠瘤组织中β-连环蛋白(β-catenin)、p21激活蛋白激酶6(p21-activated protein kinase,PAK6)、c-myc、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达。结果与单独放疗组相比,苦参碱联合放疗组A549细胞克隆形成、细胞增殖显著降低(P<0.001),细胞凋亡显著增加(P<0.001),裸鼠肿瘤体积显著降低(P<0.001),细胞和裸鼠肿瘤组织中PAK6、c-myc、磷酸化β-catenin蛋白表达显著下调(P<0.05、0.01、0.001),Caspase-3蛋白表达显著上调(P<0.001)。结论苦参碱通过干扰PAK6表达,抑制Wnt/β-连环蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路,从而提高肺癌的放疗敏感性。 展开更多
关键词 肺癌 苦参碱 p21激活蛋白激酶6 WNT/Β-CATENIN信号通路 放疗敏感性
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Expression and role of PAK6 after spinal cord injury in adult rat
10
作者 CHEN Xiang-dong ZHAO Wei SHEN Ai-guo 《Chinese Journal of Traumatology》 CAS 2011年第5期277-281,共5页
ObjectiveTo 观察激活 p21 的 kinase 6 (PAK6 ) 在在成年 rat.MethodsSprague-Dawley 老鼠的针的绳索损害(SCI ) 以后的表示和它的可能的角色受到针的绳索损害。为了探索 PAK6,表示模式和 PAK6 的分发的病理学、生理的意义,没被西方... ObjectiveTo 观察激活 p21 的 kinase 6 (PAK6 ) 在在成年 rat.MethodsSprague-Dawley 老鼠的针的绳索损害(SCI ) 以后的表示和它的可能的角色受到针的绳索损害。为了探索 PAK6,表示模式和 PAK6 的分发的病理学、生理的意义,没被西方的污点观察,免疫组织化学和 immunofluorescence.ResultsWestern 污点分析证明 PAK6 蛋白质水平在白天 2 和白天 4 上是显著地起来调整的,然后减少了并且有到白天 14 为止的起来规定。免疫组织化学分析证明 PAK6 的表示显著地在与控制组相比的白天 4 上被增加。而且,染色的两倍 immunofluorescence 证明 PAK6 首先在控制组在神经原和星形细胞被表示。当时在损害以后, PAK6 的表示在星形细胞显著地被增加,神经原,和星形细胞大部分被增殖。我们也检验了增殖的房间的表示原子抗原(PCNA ) 并且发现它的变化与 PAK6 的表示被相关。重要地,在在受伤针的绳索的 PAK6 的 injury.ConclusionThe 起来规定可以与 glial 增长被联系以后,染色的两倍 immunofluorescence 表明 PCNA 评估的房间增长在白天 4 上出现在许多 PAK6-express-ing 房间。 展开更多
关键词 脊髓损伤 成年大鼠 星形胶质细胞 免疫荧光染色 增殖细胞核抗原 BLOT分析 蛋白激酶 免疫组化
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P21活化激酶6在结肠癌组织中的表达及其意义 被引量:4
11
作者 王飞 李建国 +3 位作者 吴巧斌 邓龙 罗杰 李再晔 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第28期7-11,共5页
目的探讨P21活化激酶6(PAK6)在结肠癌组织的表达水平及临床意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR/q PCR)检测25例结肠癌患者肿瘤组织、配对的癌旁正常组织PAK6基因的m RNA表达水... 目的探讨P21活化激酶6(PAK6)在结肠癌组织的表达水平及临床意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR/q PCR)检测25例结肠癌患者肿瘤组织、配对的癌旁正常组织PAK6基因的m RNA表达水平,通过免疫组织化学的方法检测94例结肠癌及其癌旁正常组织PAK6的蛋白表达水平,并结合临床资料进行相关分析。结果 q PCR显示肿瘤组织中PAK6m RNA的表达水平显著高于癌旁正常组织(P<0.01)。免疫组织化学显示PAK6在正常组织低表达10.64%(10/94),在肿瘤组织中高表达64.89%(61/94);PAK6的表达量与肿瘤AJCC分期、肿瘤分化、Ki67表达水平和肿瘤远处转移显著相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示PAK6阳性组患者5年无病生存率及总体生存率均明显低于PAK6阴性组(P<0.01);多因素COX回归模型分析发现PAK6高表达是影响结肠癌预后相关的独立危险因素。结论 PAK6在结肠癌组织中高表达,与肿瘤分期、分化及远处转移相关,可作为结肠癌预后判断的指标。 展开更多
关键词 结肠癌 pak6 预后
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p21激活的磷酸化蛋白激酶6基因克隆、重组质粒载体的构建和序列分析
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作者 李俊 黎剑 +5 位作者 张宏权 罗荣城 张丽媛 林晓卿 袁建梅 韩宇晶 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1410-1412,共3页
目的测定PAK6在前列腺癌中的表达,探讨PAK6与前列腺癌的关系。方法根据人全长PAK6cDNA序列,设计PCR引物,以人前列腺癌cDNA文库为模板利用PCR技术克隆PAK6全长cDNA。在此基础上,进行DAN序列测定。结果成功克隆了PAK6全长cDNA,构建了pGEX-... 目的测定PAK6在前列腺癌中的表达,探讨PAK6与前列腺癌的关系。方法根据人全长PAK6cDNA序列,设计PCR引物,以人前列腺癌cDNA文库为模板利用PCR技术克隆PAK6全长cDNA。在此基础上,进行DAN序列测定。结果成功克隆了PAK6全长cDNA,构建了pGEX-4T-1-PAK6-NT重组质粒载体并进行了序列测定。结论克隆PAK6全长cDNA并进行了序列测定,为深入探讨PAK6在前列腺癌中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 pak6 基因克隆 重组质粒载体 序列 前列腺癌
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人p21活化激酶6基因真核表达质粒的构建及其亚细胞定位
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作者 刘彤 李丹妮 +1 位作者 李洋 李丰 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2013年第3期297-300,共4页
目的:构建人p21活化激酶6(PAK6)真核细胞表达质粒,并研究其在人胚肾真核细胞HEK293中的亚细胞定位。方法:PCR扩增人PAK6基因,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1HisC中,构建含人PAK6基因的真核表达质粒pcDNA3.1HisC-PAK6。利用酶切鉴定,DN... 目的:构建人p21活化激酶6(PAK6)真核细胞表达质粒,并研究其在人胚肾真核细胞HEK293中的亚细胞定位。方法:PCR扩增人PAK6基因,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1HisC中,构建含人PAK6基因的真核表达质粒pcDNA3.1HisC-PAK6。利用酶切鉴定,DNA测序,免疫印迹及免疫荧光方法鉴定PAK6真核表达质粒及PAK6蛋白的亚细胞定位。结果:经酶切鉴定、DNA测序、免疫印迹方法确认PAK6基因成功导入真核表达载体pcDNA3.1HisC。瞬时转染HEK293细胞,PAK6蛋白表达在细胞浆中。结论:PAK6真核表达质粒构建成功,PAK6定位于细胞浆中。 展开更多
关键词 pak6 真核细胞 PCDNA3 1HisC 亚细胞定位
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雄激素受体与P21活化激酶6在前列腺癌组织中的表达及意义 被引量:3
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作者 王新敏 王勤章 +1 位作者 章乐 丁国富 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2010年第1期79-82,共4页
应用免疫组织化学SP法检测PCa组织及前列腺增生(BPH)组织中AR、PAK6的表达,探讨了雄激素受体(AR)、P21活化激酶6(PAK6)与前列腺癌(PCa)发生的关系。结果表明:AR、PAK6在BPH和PCa组织中均有阳性表达,BPH和PCa前列腺组织中AR阳性表达率无... 应用免疫组织化学SP法检测PCa组织及前列腺增生(BPH)组织中AR、PAK6的表达,探讨了雄激素受体(AR)、P21活化激酶6(PAK6)与前列腺癌(PCa)发生的关系。结果表明:AR、PAK6在BPH和PCa组织中均有阳性表达,BPH和PCa前列腺组织中AR阳性表达率无显著性差异(P>0.05),而BPH和PCa前列腺组织中PAK6阳性表达率有显著性差异(P<0.05)。70例高、中、低分化前列腺癌中AR、PAK6表达阳性率逐渐升高,PCa组织中AR与PAK6二者表达呈现明显的正相关性。这说明,PAK6和AR阳性表达程度与PCa分级有关,提示二者在PCa的发病中可能扮演重要角色,检测PAK6和AR的变化对判断PCa的生物学行为有参考价值。 展开更多
关键词 前列腺癌 雄激素受体 P21活化激酶6
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体外激酶实验筛选p21活化激酶6对雄激素受体的磷酸化位点 被引量:1
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作者 刘彤 李洋 +1 位作者 耿楠希 李丰 《解剖学研究》 CAS 2013年第3期161-164,共4页
目的构建雄激素受体(AR)的点突变原核表达质粒,以体外激酶实验分析筛选p21活化激酶6(PAK6)对雄激素受体的磷酸化位点,更好的研究PAK6对AR的磷酸化所发挥的生物学功能。方法利用体外激酶实验分析PAK6对AR的较小磷酸化区域,并利用重叠延伸... 目的构建雄激素受体(AR)的点突变原核表达质粒,以体外激酶实验分析筛选p21活化激酶6(PAK6)对雄激素受体的磷酸化位点,更好的研究PAK6对AR的磷酸化所发挥的生物学功能。方法利用体外激酶实验分析PAK6对AR的较小磷酸化区域,并利用重叠延伸PCR的方法构建可能的磷酸化定点突变体;然后,体外纯化带有GST标签的突变体蛋白,及体外激酶实验筛选PAK6对AR的磷酸化位点。结果证明质粒构建成功,构建雄激素受体定点突变体,确定PAK6磷酸化雄激素受体位点。结论成功筛选PAK6对AR的磷酸化位点是578位丝氨酸。 展开更多
关键词 体外激酶实验 p21活化激酶6 雄激素变体 定点突变体 磷酸化
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Regulation of neuronal survival by DNA methyltransferases 被引量:1
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作者 Judit Symmank Geraldine Zimmer 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2017年第11期1768-1775,共8页
The limited regenerative capacity of neuronal cells requires tight orchestration of cell death and survival regulation in the context of longevity, age-associated diseases as well as during the development of the nerv... The limited regenerative capacity of neuronal cells requires tight orchestration of cell death and survival regulation in the context of longevity, age-associated diseases as well as during the development of the nervous system. Subordinate to genetic networks epigenetic mechanisms like DNA methylation and histone modifications are involved in the regulation of neuronal development, function and aging. DNA methylation by DNA methyltransferases (DNMTs), mostly correlated with gene silencing, is a dynamic and reversible process. In addition to their canonical actions performing cytosine methylation, DNMTs influence gene expression by interactions with histone modifying enzymes or complexes increasing the complexity of epigenetic transcriptional networks. DNMTs are expressed in neuronal progenitors, post-mi- totic as well as adult neurons. In this review, we discuss the role and mode of actions of DNMTs including downstream networks in the regulation of neuronal survival in the developing and aging nervous system and its relevance for associated disorders. 展开更多
关键词 DNA methyltransferase I cortical interneurons pak6 neuronal aging neuropsychiatric diseases neurodevelopment neuronal death
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P21活化激酶6在前列腺癌组织中的表达及意义 被引量:1
17
作者 王新敏 王勤章 +1 位作者 章乐 丁国富 《农垦医学》 2009年第4期314-316,共3页
目的:探讨P21活化激酶6(PAK6)在前列腺癌(PCa)中的表达和意义。方法:应用免疫组织化学的SP法,检测前列腺癌(PCa)组织及前列腺增生(BPH)组织中PAK6的表达,探讨PAK6蛋白表达与PCa的关系。结果:PAK6在BPH组织和PCa组织中均有阳性表达。二者... 目的:探讨P21活化激酶6(PAK6)在前列腺癌(PCa)中的表达和意义。方法:应用免疫组织化学的SP法,检测前列腺癌(PCa)组织及前列腺增生(BPH)组织中PAK6的表达,探讨PAK6蛋白表达与PCa的关系。结果:PAK6在BPH组织和PCa组织中均有阳性表达。二者中PAK6阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05)。后者PAK6表达阳性率随分化程度升高。结论:PAK6阳性表达程度与PCa分级有关,提示它在PCa的发病中可能扮演重要角色,检测PAK6变化对判断PCa生物学行为有参考价值。 展开更多
关键词 前列腺癌 前列腺增生 P21活化激酶6
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微小RNA-23a-p21活化激酶6通路对前列腺癌细胞迁移与侵袭能力的影响 被引量:8
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作者 蔡松旺 李小娟 +6 位作者 陈锐涵 朱宝益 蔡燚 叶春伟 陶奕然 冯淑君 温星桥 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1360-1362,共3页
目的探讨调控p21活化激酶6(PAK6)的微小RNA(miRNA)与前列腺癌侵袭及迁移的关系。方法生物信息学预测靶向PAK6的miRNA,转染miRNA模拟物及抑制剂,Western blot法及实时定量逆转录-聚合酶链反应(Real—timePCR)检测PC-3细胞PAK6的... 目的探讨调控p21活化激酶6(PAK6)的微小RNA(miRNA)与前列腺癌侵袭及迁移的关系。方法生物信息学预测靶向PAK6的miRNA,转染miRNA模拟物及抑制剂,Western blot法及实时定量逆转录-聚合酶链反应(Real—timePCR)检测PC-3细胞PAK6的表达,荧光素报告酶实验检测预测NmiRNA对PAK6的调控,并行体外迁移及侵袭实验,检测转染miRNA对PC-3细胞迁移及侵袭能力的影响。结果生物信息学预测miRNA-23a可能是调控PAK6的靶miRNA。Westernblot检测转染miRNA-23a组PAK6表达量下降79%,而转染miRNA-23a抑制剂组PAK6表达量上升40%,差异均有统计学意义(P〈0.05)。荧光素报告酶实验结果显示,转染miRNA-23a后野生型PAK6组荧光素酶活性下降32%,而突变组差异无统计学意义(P〉0.05)。Real-timePCR检测3组PAK6mRNA的表达,差异无统计学意义(P〉0.05)。体外迁移及侵袭实验示,转染miRNA-23a组迁移细胞数减少57%,侵袭的细胞数减少91%。结论微小RNA-23a通过下调靶蛋白PAK6的表达从而引起前列腺癌迁移及侵袭能力下降。 展开更多
关键词 微小RNA pak6 前列腺癌 转移 侵袭
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