疏肝和胃方对胃食管反流病大鼠食管中PAR-2、Claudin1、Claudin4和炎性因子的影响

目的探讨疏肝和胃方对胃食管反流病(GERD)大鼠食管组织中蛋白酶激活受体2(PAR-2)、炎性因子和紧密连接蛋白(Claudin)表达的影响。方法采用完全随机法将SD大鼠随机分为4组(正常组、模型组、中药组及西药组),并行下食管括约肌切开术加十二指肠半结扎术建立GERD模型。中药组予疏肝和胃方灌胃;西药组予雷贝拉唑灌胃;正常组及模型组予等量的生理盐水灌胃。予HE染色观察食管组织病理改变,予免疫组织化学和Western Blot检测食管组织中PAR-2、Claudin1及Claudin4蛋白表达,ELISA检测食管组织中血小板活化因子(PAF)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-8(IL-8)表达。结果正常组大鼠黏膜及肌层无病理改变;模型组大鼠食管下段见鳞状上皮增生,黏膜下见中性粒细胞及淋巴细胞,固有层见乳头节,食管肌层也可见不同程度炎性细胞浸润;与模型组相比,中药组大鼠食管黏膜结构轻度改变,未见明显局部糜烂及鳞状上皮增生,仅见少量炎性细胞浸润;西药组可见炎性细胞浸润且部分可见鳞状上皮增生及糜烂。与正常组相比,PAR-2、IL-8和IL-1β显著增加(P<0.05),PAF呈增加趋势(P>0.05),Claudian1和Claudin4显著降低(P<0.05);与模型组相比,中药组PAR-2、IL-8和IL-1β显著降低(P<0.05),PAF呈降低趋势(P>0.05),Claudian1和Claudin4表达显著增加(P<0.05),西药组PAR-2、IL-8和IL-1β显著降低(P<0.05),PAF呈下降趋势(P>0.05),Claudian1和Claudin4呈增加趋势(P>0.05);西药组PAR-2、IL-8、IL-1β、PAF表达高于中药组,Claudian1和Claudin4表达显著低于中药组。结论GERD通过PAR-2激活、食管黏膜炎症传导的关联途径,影响紧密连接蛋白表达,导致食管黏膜损伤。疏肝和胃方通过调控PAR-2传导途径和作用靶点,可一定程度上减轻GERD模型大鼠食管黏膜损伤,为临床治疗GERD提供了可靠的实验依据。

PAR-1、PAR-2在先天性巨结肠组织中的表达及其与预后的相关性分析

[目的]探讨蛋白酶激活受体-1(PAR-1)、蛋白酶激活受体-2(PAR-2)在先天性巨结肠(HSCR)组织中表达及其与预后的关系.[方法]选取2014年1月至2019年1月在周至县中医医院接受根治性手术治疗的100例HSCR患儿,留取HSCR病变(痉挛段)组织样本和病变旁(距病变2 cm以上)正常肠道黏膜组织.采用免疫组化检测HSCR病变组织样本和正常肠道黏膜组织中PAR-1和PAR-2表达情况,采用荧光定量PCR技术检测PAR-1 mRNA、PAR-2 mRNA表达水平,采用Pearson法分析PAR-1、PAR-2与Kricken-beck评分及血清IL-6、TNF-α水平的相关性,采用Logistic多因素分析影响HSCR患儿预后不良的危险因素.[结果]病变组织中PAR-1、PAR-2阳性表达率高于病变旁组织,差异有统计学意义(P<0.05).与病变旁组织相比,病变组织中PAR-1 mRNA、PAR-2 mRNA表达水平及PAR-1、PAR-2蛋白水平显著升高(P<0.05);预后较差组患儿PAR-1、PAR-2及血清IL-6、TNF-α水平明显高于预后良好组及预后较优组(P<0.05),预后良好组高于预后较优组(P<0.05).Pearson结果显示,PAR-1、PAR-2与Krickenbeck评分均呈负相关(均P<0.05),与IL-6、TNF-α呈正相关(均P<0.05).多因素Logistic回归分析显示,PAR-1、PAR-2是影响HSCR患儿预后不良的独立危险因素(P<0.05).[结论]PAR-1、PAR-2在HSCR组织中呈高表达,与Krickenbeck评分呈负相关,是影响HSCR患儿预后不良的危险因素.

类胰蛋白酶通过上调PAR-2和Rho激酶抑制类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞凋亡

目的研究类胰蛋白酶(tryptase)对MH7A类风湿性关节炎(RA)滑膜成纤维细胞表面蛋白酶激活受体2(PAR-2)、Rho信号通路及细胞凋亡的影响。方法采用流式细胞术检测MH7A细胞表面受体PAR-2的表达;异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞的凋亡情况;采用Pull-down及Western blot法检测MH7A细胞Rho激酶的表达变化。结果类胰蛋白酶能够上调MH7A细胞表面PAR-2的表达,并剂量依赖性的抑制Fas介导的MH7A细胞的凋亡;同时,PAR-2抑制剂FSLLRY-NH2能够显著降低类胰蛋白酶对MH7A细胞的抗凋亡作用,其作用与活化Rho激酶的表达增加有关。结论类胰蛋白酶通过上调PAR-2和活化Rho激酶发挥很强的抗MH7A细胞凋亡的作用。

青蒿素对UVB照射小鼠表皮c-kit和PAR-2蛋白表达的抑制作用

目的:研究青蒿素对紫外线照射后小鼠表皮c-kit和PAR-2蛋白的表达,探讨青蒿素光保护作用的可能机制。方法:30只BALB/C小鼠分为3组,正常对照组,给予生理盐水灌胃;模型对照组及青蒿素组分别给予生理盐水及青蒿素灌胃后进行UVB照射。各组灌胃均为100mg/(kg.d),每日1次,持续2周。UVB照射每次剂量1 J/cm2,每日1次,共2周,累积剂量14 J/cm2,采用免疫组化检测各组小鼠表皮中干细胞因子受体(c-KIT)和蛋白酶激活受体-2(PAR-2)表达量的变化。结果:UVB反复照射后,青蒿素组皮肤中c-kit和PAR-2表达水平均明显低于模型对照组(P<0.05),且c-kit和PAR-2表达水平呈正相关性(P<0.05)。结论:青蒿素可明显抑制UVB反复照射小鼠皮肤中c-kit和PAR-2的表达,提示系统性应用青蒿素对UVB致小鼠皮肤光损伤有保护作用。

驱虫斑鸠菊注射液联合NB-UVB照射对小鼠表皮c-KIT和PAR-2蛋白表达的影响

目的探讨驱虫斑鸠菊注射液联合窄谱中波紫外线(NB-UVB)照射临床治疗白癜风有效的可能机制。方法 40只小鼠随机分为4组即对照组(C),NB-UVB照射组(UV),驱虫斑鸠菊注射液组(VW),驱虫斑鸠菊注射液+NB-UVB组(VW+UV)。C组给予生理盐水腹腔注射,UV组给予生理盐水腹腔注射后NB-UVB照射,VW组给予驱虫斑鸠菊注射液腹腔注射,VW+UV组给予驱虫斑鸠菊注射液腹腔注射后进行NB-UVB照射,各1次/d,14天后取背部皮肤进行组织检查。采用免疫组化检测小鼠表皮中干细胞因子受体(c-KIT)和蛋白酶激活受体-2(PAR-2)表达量的变化。结果与C组相比,UV,VW,VW+UV组的c-KIT和PAR-2阳性细胞数均有增加,差异有统计学意义(P<0.05);而VW+UV组c-KIT和PAR-2的表达水平最强,与UV、VW组差异有统计学意义(P<0.05)。结论驱虫斑鸠菊注射液联合窄谱中波紫外线照射临床治疗白癜风有效的机理可能与表皮c-kit和par-2蛋白表达增强有关,从而促进了色素沉着的发生。

龙胆泻肝汤通过H1R/TRPV1、PAR-2/TRPV1和P38MAPK通路干预湿疹大鼠的作用机制研究

目的 基于H1R/TRPV1、PAR-2/TRPV1和P38MAPK通路探讨龙胆泻肝汤对湿疹大鼠的保护作用及相关机制。方法 60只大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、氯雷他定组(1 mg·kg^(-1))和龙胆泻肝汤低、中、高剂量组(6.3g·kg^(-1)、12.6g·kg^(-1)、25.2g·kg^(-1)),每组10只。除正常组外,其余各组大鼠采用二硝基氯苯(DNCB)建立湿疹模型,然后各组大鼠灌胃相应药物干预,1次/天,连续干预21天。末次给药后,测定大鼠耳肿胀度;采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠背部皮肤病理学变化;采用免疫组织化学法检测大鼠皮肤组织H1R、PAR-2、TRPV1蛋白水平;采用蛋白质印迹(WB)法检测大鼠皮肤组织P38MAPK、PP38MAPK蛋白水平。结果 与正常组比较,模型组大鼠耳肿胀度显著增加(P<0.05)且背部皮肤出现湿疹病理变化;皮肤组织中H1R、PAR-2、TRPV1水平与p-P38MAPK/P38MAPK比值显著升高(P<0.05);与模型组比较,氯雷他定组和龙胆泻肝汤低、中、高剂量组耳肿胀度显著减小(P<0.05)且病变程度减轻;皮肤组织中H1R、PAR-2、TRPV1水平与p-P38MAPK/P38MAPK比值显著降低(P<0.05)。结论 龙胆泻肝汤对湿疹大鼠具有保护作用,其机制可能与抑制H1R/TRPV1、PAR-2/TRPV1和P38MAPK通路有关。

头痛宁对偏头痛模型大鼠硬脑膜、三叉神经节及脑干区JNK-1和PAR-2表达的影响

目的：观察偏头痛模型大鼠硬脑膜、三叉神经节及脑干区丝裂原活化蛋白激酶家族c-Jun氨基末端激酶-1（JNK-1）和G-蛋白耦联受体家族蛋白酶激活受体-2（PAR-2）的表达以及中药头痛宁对其影响。方法：成年SD大鼠30只随机均分为正常对照组、模型组和头痛宁治疗组3组,每组10只。模型组、治疗组大鼠皮下注射硝酸甘油注射剂10mg/kg建立实验性偏头痛模型,模型组造模30min后蒸馏水1.04mL/kg灌胃,治疗组造模15~20min后头痛宁1.2g/kg灌胃。1周后用免疫组化法检测各组大鼠硬脑膜、三叉神经节及脑干区JNK-1和PAR-2的表达。结果：模型组硬脑膜、三叉神经节及脑干区JNK-1和PAR-2的表达均高于其他2组（JNK-1：F硬脑膜=288.665,F三叉神经节=20016.775,F脑干=333774.771,P均〈0.001;PAR2：F硬脑膜=25790.690,F三叉神经节=820.497,F脑干=198.165,P均〈0.001）,治疗组和对照组上述指标差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：头痛宁可通过下调偏头痛模型大鼠硬脑膜、三叉神经节及脑干区JNK-1和PAR-2的表达,防治偏头痛。

PAR-2在人胰腺肿瘤细胞中的表达及其相关机制的研究

目的:通过对蛋白酶激活受体-2(PAR-2)在人胰腺癌细胞及癌旁组织中表达态势的研究,以期明确PAR-2在胰腺癌中表达特点,并探索其相关机制。方法:收集胰腺癌标本,采用免疫组织化学(SP法)检测胰腺癌PAR-2基因的表达;培养胰腺癌细胞,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测胰腺癌PAR-2基因的表达。结果:胰腺癌组PAR-2 mR-NA的表达高于对照组(P<0.01)。PAR-2在胰腺癌中的表达与患者年龄、性别无关(P>0.05),但癌细胞远处转移者显著高于无转移者(P<0.01)。结论:胰腺癌的发生与发展与PAR-2正相关。PAR-2在胰腺癌中的表达与患者年龄、性别无关;但与淋巴结转移正相关。

胃腺癌中PAR-2、β-catenin和COX-2的表达及其意义

目的探讨人类蛋白酶激活受体-2(protease-activated receptor-2,PAR-2)、β-连环蛋白(β-catenin)与COX-2在胃腺癌中的表达及其与临床病理因素和预后的相关性及意义。方法应用免疫组化SP法检测63例胃腺癌组织1、9例低级别上皮内瘤变、20例正常胃组织中PAR-2、β-catenin与COX-2的表达情况。结果 PAR-2、COX-2在胃腺癌组织中的阳性表达率较在低级别上皮内瘤变组织、正常胃组织中分别升高(P<0.05),β-catenin在胃腺癌组织中的异常表达率较在低级别上皮内瘤变组织、正常胃黏膜组织中升高(P<0.05)。PAR-2在胃腺癌组织中的阳性表达与胃腺癌的浸润深度相关(P<0.05);β-catenin在胃腺癌组织中的异常表达与胃腺癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床病理分期相关(P<0.05);COX-2在胃腺癌组织中的阳性表达与胃腺癌的浸润深度、淋巴结转移、临床病理分期相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示:PAR-2、COX-2阳性表达与阴性表达组患者的5年生存期的差异有统计学意义(P<0.05),β-catenin异常表达与正常表达组患者的5年生存期的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PAR-2参与胃腺癌的进展且可作为判断预后的一项指标;β-catenin的异常表达和COX-2的阳性表达与胃腺癌的发生、发展密切相关,且可作为判断预后的重要指标。

外搽非光敏中药组方对大鼠表皮c-KIT和PAR-2蛋白表达的促进作用

目的:探讨非光敏中药组方中药2号临床治疗白癜风有效的可能机制。方法:中药2号乙醇提取液外搽大鼠背部皮肤,并以75%乙醇外搽作为阴性对照,4周后取组织活检。采用免疫组化检测大鼠表皮中S100、干细胞因子受体(c-K IT)和蛋白酶激活受体-2(PAR-2)表达量的变化。结果:与75%乙醇外搽相比,中药2号外搽后S100阳性细胞数无显著性差异(P>0.05);c-K IT和PAR-2阳性细胞数均有增加,差异有显著性(P<0.05)。讨论:中药2号外搽治疗白癜风有效的机理可能与促进细胞移行、黑素转运有关;而与黑素细胞增殖无关。

PAR-2和COX-2在不同类型胃食管反流病患者病变组织中表达及与患者血清炎性因子水平关系

目的探讨蛋白酶激活受体-2(PAR-2)和环氧合酶-2(COX-2)在不同类型胃食管反流病(GERD)患者病变组织中表达及与患者血清炎性因子水平的关系。方法选取GERD患者127例,其中糜烂性食管炎组41例,Barrett食管组43例,非糜烂性反流病组43例,另选取同期内镜检查正常者40例作为对照组,应用RT-PCR技术检测各组食管组织中PAR-2 mRNA和COX-2 mRNA表达情况,利用ELISA法检测血清IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α水平,利用Pearson相关分析对变量间相关关系进行分析。结果各患者组病变组织中PAR-2 mRNA和COX-2 mRNA相对表达量均明显高于对照组(P均<0.05),Barrett食管组和糜烂性食管炎组病变组织中PAR-2 mRNA和COX-2 mRNA相对表达量均明显高于非糜烂性反流病组(P均<0.05),且Barrett食管组病变组织中COX-2 mRNA相对表达量高于糜烂性食管炎组(P<0.05)。各患者组血清IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α水平均明显高于对照组(P均<0.05),Barrett食管组和糜烂性食管炎组血清IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α水平均明显高于非糜烂性反流病组(P均<0.05),且Barrett食管组血清IL-8水平明显高于糜烂性食管炎组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,GERD患者病变组织中PAR-2 mRNA和COX-2 mRNA相对表达量均与血清IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α水平呈正相关。结论 PAR-2和COX-2在GERD患者病变组织中呈高表达,且与患者血清炎性因子水平呈正相关,提示炎性反应可能参与了GERD的发生及发展过程。

原花青素对β-淀粉样肽25-35诱导PC12细胞par-4和bcl-2基因表达的影响

目的探讨原花青素(PC)对β-淀粉样肽(Aβ25-35)诱导凋亡PC12细胞par-4和bcl-2基因mRNA和蛋白表达的影响。方法采用MTT比色法分析细胞存活率,Hoechst33258-PI荧光染色法检测细胞凋亡,RT-PCR方法检测PC12细胞par-4和bcl-2基因mRNA的表达,Westernblotting检测PC12细胞Par-4和Bcl-2蛋白表达。结果不同剂量(5、10、20、30mg/L)PC预处理PC12细胞1h可剂量依赖性对抗Aβ25-35引起的细胞凋亡,提高PC12细胞的存活率,减少Aβ25-35引起的PC12细胞核固缩、凝聚和碎裂,降低par-4基因mRNA表达及蛋白表达,增加bcl-2基因mRNA表达及蛋白表达。结论PC可剂量依赖性对抗Aβ25-35对PC12细胞的毒性作用,其机制可能与下调凋亡基因par-4和上调抗凋亡基因bcl-2表达有关。

下调PAR基因表达对前列腺癌PC3细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的影响

目的:本研究以RNA干扰技术下调PAR(prostate androgen regulated)基因表达,探讨其对前列腺癌PC3细胞增殖、凋亡及其相关蛋白Bcl-2/Bax表达水平的影响。方法:PC3细胞转染靶向PAR基因的siRNA,MTT法检测细胞增殖,用流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹检测Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果:PC3细胞PAR基因表达水平下调,此时处于G2-M期的细胞增加,为(29.95±3.25)%;细胞凋亡率亦明显增加,为(20.61±2.73)%,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01),同时Bcl-2蛋白表达下降,Bax表达水平升高,Bax/Bcl-2比值升高。结论:PAR基因表达下调可诱导细胞G2-M期阻滞和凋亡,其机制为抑制凋亡相关蛋白Bcl-2表达,同时促进Bax表达。

白斑膏对瘙痒模型小鼠PAR-2和组胺水平的影响

目的:观察白斑膏对瘙痒模型小鼠PAR-2与组胺表达的影响。方法:将50只ICR雌性小鼠随机分为5组各10只,除正常组外,各组采用小鼠颈背部皮内注射4-AP (1 mg/kg)建立小鼠瘙痒模型。中药高、低剂量组搽高、低剂量浓度白斑膏,阳性药物组涂适量盐酸曲安奈德乳膏。观察小鼠的局部皮肤反应情况及小鼠舔体搔抓行为,治疗3周后取小鼠后肢静脉血,用ELLESA法测定小鼠血清中组胺浓度,并取小鼠颈背部造模处皮肤,用免疫组化法测定PAR-2蛋白的表达。结果:高浓度组、低浓度组均无局部皮肤红疹、渗出等现象;小鼠在用药第1周、第2周末舔体次数均低于模型组,具有统计学意义(P﹤0.01);与模型组相比,各治疗组给药第3周末未发现舔体反应,具有统计学意义(P﹤0.01)。与模型组相比,白斑膏高浓度组血清组胺水平较低,PAR-2表达较弱,有统计学意义(P﹤0.05)。结论:高浓度白斑膏对实验小鼠安全有效,其止痒机制可能是抑制局部致痒物质的释放,也可降低组胺的血清浓度。

基于H1R、PAR-2/TRPV1痒信号通路探讨马齿苋对急性湿疹的干预作用

目的:探讨马齿苋提取液对急性湿疹大鼠背部皮肤组胺受体1(H1R)、蛋白酶激活受体2(PAR-2)和瞬时感受器电位受体1(TRPV1)表达的影响及其对H1R、PAR-2/TRPV1信号通路的调控作用。方法:SD大鼠30只,分为正常组、模型组、马齿苋组,各组10只。采用二硝基氯苯(DNCB)建立急性湿疹模型,正常组除外。造模成功后,各组分别给予相应药物。末次给药后对各组大鼠进行湿疹面积及严重度指数(EASI)评分。免疫组化法检测H1R、PAR-2和TRPV1的表达,流式细胞技术测定细胞内钙离子(Ca^(2+))浓度。结果:与正常组比,模型组大鼠EASI(P<0.01)、H1R(P<0.05)和PAR-2(P<0.01)的含量、Ca^(2+)浓度(P<0.01)显著增加,TRPV1增加差异不明显(P>0.05)。与模型组比,马齿苋组大鼠EASI(P<0.01)、H1R(P<0.01)和PAR-2(P<0.01)的含量及Ca^(2+)浓度(P<0.05)显著减少,TRPV1减少差异不明显(P>0.05)。结论:马齿苋可减少H1R、PAR-2含量及降低Ca^(2+)浓度,发挥治疗急性湿疹的作用,其机制可能是通过降低上游分子H1R、PAR-2含量,使其下游分子TRPV1失活,减少Ca^(2+)内流,达到抗瘙痒的作用。

乌梅丸熏洗联合肛周皮下游离术对肛门瘙痒症患者PAR-2靶点的研究

目的通过研究治疗组(乌梅丸熏洗联合肛周皮下游离术)针对肛门瘙痒症皮损PAR-2(蛋白酶活化受体-2)的表达量,从而客观评价本方案的治疗效果。方法选择2013年1月至2014年10月肛门瘙痒症术后患者,随机分为治疗组20例、对照组20例、空白组10例。取术后三组第1、3、7 d的肛周皮损皮肤,采用实时荧光定量RT-PCR检测PAR-2编码基因的表达量,并进行统计分析。结果治疗组术后第1、3、7 d较对照组及空白组的表达量明显下降,且有显著性差异(P<0.05)。结论乌梅丸联合肛周皮下游离术对肛门瘙痒症有良好的治疗效果。

自噬介导的STEMI心肌缺血-再灌注损伤中PAR-2、Bcl-2、Beclin1的表达及其相关性

目的:探究自噬介导的急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)心肌缺血再灌注损伤中蛋白酶激活受体-2(PAR-2)、B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)、人抑癌基因Beclin1的表达及其相关性。方法:选取2017年1月至2018年7月诊断为STEMI患者50例为试验组,有胸痛症状但冠状动脉造影检查正常者50例为对照组,检测PCI术前及术后0 h、4 h、8 h、12 h、24 h、48 h血清PAR-2、Bcl-2及Beclin1水平,并分析三者的相关性。结果:试验组PAR-2、Bcl-2、Beclin1水平在PCI术前和术后各时间点均高于对照组(P<0.01)。PAR-2水平与Bcl-2呈正相关(r=0.932,P=0.000),Bcl-2水平与Beclin1呈负相关(r=-0.925,P=0.000)。结论:在STEMI心肌缺血-再灌注期,PAR-2、Bcl-2、Beclin1表达均升高,且三者间存在相关性,在减轻心肌缺血-再灌注损伤中发挥重要作用。

通过MC-Tryptase-PAR-2-FLS途径探讨资木瓜总苷对K/B×N小鼠血清转移性关节炎的治疗作用

目的:研究资木瓜总苷(TSCS)通过MC-Tryptase-PAR-2-FLS途径对K/B×N小鼠血清转移性关节炎的治疗作用。方法:小鼠随机分为6组:C57BL/6小鼠分别注射C57BL/6小鼠血清、K/B×N小鼠血清作为正常对照组和模型组,KitW-4Bao小鼠注射K/B×N小鼠血清作为阴性对照组,移植肥大细胞(MC)的KitW-4Bao小鼠随机分为3组:阳性药物(色甘酸钠)组、TSCS低、高剂量组,均注射K/B×N小鼠血清。游标卡尺测量小鼠关节肿胀度,HE染色观察关节形态学变化,甲苯胺蓝染色观察MC脱颗粒变化,免疫组化和qRT-PCR检测关节组织中类胰蛋白酶(Tryptase)、蛋白酶激活受体2(PAR-2)表达情况,ELISA检测血清IgG及关节中炎症因子含量变化。结果:KitW-4Bao小鼠对血清转移性关节炎抵抗,移植MC后,对K/B×N小鼠血清恢复敏感,引发关节炎。与模型组相比,TSCS高剂量组小鼠关节肿胀度、关节炎评分、病理学评分、MC脱颗粒率、Tryptase和PAR-2表达、血清IgG和炎症因子水平显著降低。结论:MC在K/B×N小鼠血清转移性关节炎模型中发挥重要作用;TSCS通过抑制MC脱颗粒释放类胰蛋白酶,影响MC-Tryptase-PAR-2-FLS通路,治疗K/B×N小鼠血清转移性关节炎。

肥大细胞及PAR-2与间质性膀胱炎纤维化的相关性研究

目的:探究肥大细胞及PAR-2与间质性膀胱炎纤维化的相关性。方法:腹腔注射环磷酰胺建立大鼠模型,肥大细胞用甲苯胺蓝染色,PAR-2用免疫组化显示,计数。结果:肥大细胞数目在实验组与空白组差异显著,实验组与对照组、对照组与空白组相比无明显差别,PAR-2阳性细胞数在实验组、对照组、空白组三组两两比较时均无显著性差异。结论:肥大细胞与间质性膀胱炎的纤维化呈正相关,PAR-2与间质性膀胱炎的纤维化无关,肥大细胞致纤维化的其中一个机制是否通过PAR-2尚未确定。

在食管癌细胞增殖过程中蛋白酶激活受体-2(PAR-2)对细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的调控机制

目的:探讨在食管癌细胞增殖过程中蛋白酶激活受体-2(PAR-2)影响细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的机制。方法:方法:使用食管癌EC109细胞株,实验分为:空白对照组、PAR-2激动组(加入激动剂SLIGKV)、PAR-2反激动组(加入反激动剂VKGILS)、PAR-2 shRNA组(PAR-2shRNA成功转染)和MAPK抑制组(加入阻滞剂PD98059);取对数生长期的细胞,以6×104 cells/ml的密度接种于培养瓶中,置于孵育箱中培养24 h后使用PBS清洗3次,更换为无血清的1640培养基培养24 h,之后各实验组按实验设计分别加入所需试剂,每组设置3个复孔,于孵育箱中继续培养24 h,采用RT-PCR法检测PAR-2、ERK1、CyclinD1的mRNA的表达水平;采用Western blot法检测PAR-2、ERK1、p-ERK1、CyclinD1的蛋白表达水平。结果:与空白对照组相比,PAR-2激动组PAR-2mRNA、ERK1 mRNA、和CyclinD1 mRN表达明显升高(P<0.05),PAR-2、p-ERK1和CyclinD1蛋白表达升高(P<0.05);PAR-2 shRNA组PAR-2mRNA、ERK1 mRNA和CyclinD1 mRNA表达降低(P<0.05),PAR-2、p-ERK1和CyclinD1蛋白表达降低(P<0.05);MAPK抑制组ERK1 mRNA和CyclinD1 mRNA表达明显降低(P<0.05),p-ERK1和CyclinD1表达降低(P<0.05)。结论:PAR-2可通过MAPK通路调节CyclinD1的表达从而促进食管癌细胞EC109的增殖。