非综合征型多数牙先天缺失家系中PAX9新突变的研究及PAX9突变导致非综合征型先天缺牙基因型—表型分析

目的 在中国多个非综合征型先天缺牙家系中鉴定PAX9突变,并研究PAX9突变导致非综合征型先天缺牙的基因型—表型关系,为先天缺牙基因诊断提供依据。方法 收集自2018年至2023年期间于河北医科大学口腔医院就诊的44例非综合征型多数牙缺失患者。采集先证者及其核心家系成员外周血进行全外显子组测序(WES),并用Sanger测序验证其突变,通过生物信息学工具对突变体进行了致病性分析和功能预测。在PubMed等检索出与先天缺牙相关PAX9突变的55篇文章共232例患者,分析PAX9突变基因型—表型关系。结果 在中国家庭中发现了一个新的PAX9基因移码突变c.447delG (p.Pro150Argfs*62)和一个已报道的PAX9基因错义突变c.406C>T (p.Gln136*)。通过生物信息学分析和三维结构建模,预测发现该移码突变具有致病性,突变导致PAX9蛋白提前终止,结构与功能受损严重。总结PAX9基因型—表型关系发现,携带PAX9突变的非综合征型先天缺牙患者最容易缺失第二磨牙。结论 发现非综合征型先天缺牙新的PAX9基因移码突变c.447delG(p.Pro150Argfs*62),扩展先天缺牙PAX9突变谱。非综合征型先天缺牙PAX9突变最易感牙位为第二磨牙,PAX9突变导致的乳牙缺失均为乳磨牙缺失。

伴有PAX9突变非综合征型先天缺牙患者的牙颌面表型研究

目的·评估配对盒基因9(paired box gene 9,PAX9)突变非综合征型先天缺牙(non-syndromic tooth agenesis,NSTA)患者的牙颌面表型。方法·对2016年1月—2023年12月于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔第二门诊部就诊的NSTA患者进行全外显子组测序,筛查PAX9突变患者。对筛查到的患者采用曲面体层摄影片评估缺牙的位置和数目,采用X射线头影测量评估患者的牙颌面畸形情况。结果·7例PAX9突变的NSTA患者纳入研究,男性3例(42.9%),女性4例(57.1%)。患者首诊年龄7~31岁,平均(19.7±8.0)岁。7例患者均携带PAX9杂合突变,其中4例为错义突变,3例为移码突变。平均缺失恒牙(15.9±2.9)颗,上颌缺失数[(9.6±2.6)颗]略多于下颌[(6.3±2.4)颗](P=0.030)。上颌第二磨牙(100.0%)、上颌尖牙(85.7%)、下颌第二前磨牙(85.7%)为最常见的缺失位点,下颌侧切牙(14.3%)、下颌尖牙(14.3%)为最少缺失的位点。移码突变的患者缺牙数[(18.3±2.1)颗]多于错义突变[(14.0±1.8)颗](P=0.032)。X射线头影测量结果显示:PAX9突变成年患者上牙槽座角(angle sella-nasion-subspinale,SNA)、颌凸角(angle nasion-subspinale-subspinale-porion,NA-APo)和前颅底长度(sella-nasion,S-N)均明显小于正常参考范围,提示上颌后缩,前颅底矢状向发育不足;面角(frankfort horizontal plane-nasion-porion,FH-NPo)大于参考值、Y轴角(Y axis)小于参考值,提示下颌前伸;上/下牙槽座角(angle subspinale-nasion-supramental,ANB)小于参考值,提示骨性Ⅲ类错畸形;上中切牙角(angle upper central incisor-nasion-subspinale,angle U1-NA)大于参考值,提示上中切牙唇倾;下中切牙-下颌平面角(angle lower central incisor-mandibular plane,IMPA)、下中切牙凸度(lower central incisor-nasion-supramental,L1-NB)小于参考值,提示下中切牙舌倾,上下前牙反倾向。结论·较为全面地报道了PAX9突变NSTA患者的牙颌面表型,有利于进一步理解PAX9在人类颌面部发育中的作用。

miR-181b-5p通过靶向结合PAX9促进人急性髓细胞性白血病细胞增殖并诱导其凋亡

目的 探究miR-181b-5p通过靶向结合配对盒基因9(PAX9)对急性髓细胞性白血病(AML)细胞增殖和凋亡的影响。方法 分别用基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库和肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析AML患者中PAX9的表达水平和预后的关系。在Kasumi-1细胞和AML5细胞中转染空载体(Vector组)或PAX9(PAX9组),CCK-8法检测细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot法检测细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)和细胞周期蛋白B1(CCNB1)、B细胞淋巴瘤因子2(Bcl2)、 Bcl2相关X蛋白(BAX)的表达。生物信息学分析预测PAX9靶作用的微小RNA(miRNA)、荧光素酶报告系统验证其靶向作用,实时定量PCR检测PAX9 mRNA水平,Western blot法检测PAX9蛋白表达。在Kasumi-1细胞和AML5细胞中转染miR-NC(miR-NC组)或miR-181b-5p(miR-181b-5p组),在miR-181b-5p组细胞中进一步转染PAX9(miR-181b-5p联合PAX9组),采用前述方法分别检测细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡。结果 GEPIA和TCGA数据库显示AML患者PAX9呈低表达趋势并与患者不良预后相关。在Kasumi-1、 AML5细胞中,与Vector组相比,PAX9组细胞增殖活力、 S期细胞百分比、 CDK2、 CCNB1和Bcl2蛋白表达降低,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率、 BAX蛋白表达升高。双荧光素酶报告基因验证PAX9是miR-181b-5p的靶基因。与miR-NC组相比,miR-181b-5p组细胞增殖活力、 S期细胞百分比、 CDK2、 CCNB1和Bcl2蛋白表达升高,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡率、 BAX蛋白表达降低。与miR-181b-5p组相比,miR-181b-5p联合PAX9组细胞增殖活力、 S期细胞百分比、 CDK2、 CCNB1和Bcl2蛋白表达降低,G0/G1期细胞百分比、细胞凋亡、 BAX蛋白表达升高。结论 miR-181b-5p靶向抑制PAX9表达促进AML细胞增殖、延缓细胞凋亡。

子宫内膜样腺癌中TBX2、PAX9的表达及其相关性

目的探讨TBX2、PAX9在正常子宫内膜、子宫内膜增殖症和子宫内膜样腺癌(endometrioid adenocarcinoma,EA)组织中的表达及临床病理学意义。方法采用组织芯片技术和免疫组化检测30例正常子宫内膜组织、30例单纯性增生内膜、30例复杂伴不典型性增生内膜、82例EA组织中TBX2、PAX9蛋白的表达。结果 TBX2蛋白在子宫内膜样腺癌中的阳性表达率明显高于正常子宫内膜和子宫内膜增殖症(P均<0.01),TBX2过表达与组织学分级、临床分期、浸润程度均有相关性(P<0.01,P<0.05,P<0.01),与淋巴结转移无相关性(P>0.05);PAX9蛋白在子宫内膜样腺癌中的阳性表达率明显高于正常子宫内膜、子宫内膜单纯性增生(P均<0.01),而和复杂伴不典型性增生之间没有统计学意义(P>0.05),在复杂伴不典型增生中表达明显高于正常子宫内膜和单纯性增生内膜(P均<0.01),PAX9阳性表达与组织学分级、临床分期、浸润程度均有相关性(P<0.01,P<0.01,P<0.05),但与淋巴结转移无相关性(P>0.05)。TBX2与PAX9蛋白呈正相关(rs=0.427,P<0.01)。结论 TBX2和PAX9均在子宫内膜样腺癌中发生、发展中发挥重要作用,联合检测其表达可为子宫内膜样腺癌的早期诊断、预后判断提供有价值的指标。

2例多数牙先天缺失患儿及其父母的Pax9基因突变检测

目的 :探讨多数牙先天缺失患者的基因突变位点。方法 :从两例多数牙先天缺失患者与家庭成员的静脉血中提取DNA ,在Pax9基因内设计引物 ,采用PCR方法扩增Pax9基因的外显子 2、3、4 ,而后通过对分段PCR纯化产物的测序 ,并结合系谱进行单核甘酸多态性分析。结果 :外显子 3的第 88、89位点上发现两个单核甘酸多态性位点 (singlenucleotidepolymorphisms ,SNPs) ,其中第 88位为C变为T ,第 99位为G变为C ,前者是同义突变 ,后者是错义突变 ,由丙氨酸变为脯氨酸。结论 :多数牙先天缺失可能与Pax9基因外显子 3的第 88、89位点上的两个SNPs有关。

涎腺肿瘤中Pax9基因的表达及其意义

目的:检测正常涎腺组织及涎腺肿瘤中转录因子Pax9的表达。方法:采用免疫组化SABC法,研究Pax9在正常涎腺组织、多形性腺瘤、腺淋巴瘤、基底细胞腺瘤、粘液表皮样癌和腺样囊性癌共48例中的表达情况。结果:除1例多形性腺瘤外,其余组织均表达Pax9。正常涎腺的腺泡细胞和导管内衬细胞、多形性腺瘤的上皮细胞、腺淋巴瘤的肿瘤上皮细胞和基底细胞腺瘤中Pax9弱阳性表达,差异没有显著性;而在增殖活跃的细胞如正常涎腺导管的基底细胞和恶性肿瘤细胞(粘液表皮样癌、腺样囊性癌)中表达增强,恶性肿瘤中Pax9的强阳性表达率明显增高,与正常和良性肿瘤相比具有显著差异(P<0.05)。结论:Pax9在涎腺肿瘤尤其是恶性肿瘤的发生过程中发挥重要的作用。

PAX9基因上新近发现的一个单核苷酸多态性位点的SNP分析

目的:研究位于PAX9基因外显子3的第89位点上的SNP与多数牙先天缺失的相关性。方法:分别从11名多数牙先天缺失病人,5名少数牙先天缺失病人和38名正常对照者的静脉血样品中提取DNA。采用TaqMan-MGB探针技术对该SNP位点进行单核苷酸多态性研究,利用软件对实验结果进行SNP分型,并行统计分析。结果:突变为纯合子C/C的绝大多数表现为先天缺牙(多数牙先天缺失5例,少数牙先天缺失2例,正常1例)。但31例杂合子中只有7例表现为先天缺牙(多数牙先天缺失6例,少数牙先天缺失1例)。13例野生型纯合子只有2例表现为少数牙先天缺失,11例完全正常。统计结果表明该位点与多数牙先天缺失相关(P<0.001)。结论:多数牙先天缺失可能与PAX9基因外显子3的第89位点上的SNP有关。

PAX9基因与非综合征型多数牙先天缺失的关系及研究进展

先天性缺牙是人类牙列中最常见的发育异常,包括个别牙先天缺失,多数牙先天缺失和先天无牙症。多数牙先天缺失按照其表现型不同通常可分为综合征型和非综合征型,表现为常染色体的显性或隐性遗传、X-连锁遗传特性,有的具有家族遗传史,有的则是无家族史的散发病例。本文就近年来非综合征型牙齿发育不全研究中的热点基因PAX9的研究进展作一综述。

TBX2和PAX9在膀胱尿路上皮癌中高表达

目的研究TBX2和PAX9在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义。方法收集武汉大学人民医院病理科2006-2009年有完整临床和病理资料的膀胱尿路上皮癌存档蜡块50例和5例癌旁组织,采用免疫组织化学S-P法检测50例膀胱尿路上皮癌和5例癌旁组织中TBX2和PAX9的表达水平;采用HPIAS-1000高清晰度彩色病理图文报告管理系统,对TBX2和PAX9的表达进行定量分析,并用SPSS13.0软件对各组免疫组织化学反应阳性颗粒的平均光密度、阳性面积率做单因素方差分析和SNK(q)检验。结果 TBX2和PAX9在膀胱尿路上皮癌中均高表达,与癌旁组织相比,差异有显著性;经Spearman等级相关分析显示,TBX2和PAX9表达呈正相关。结论 TBX2和PAX9对膀胱尿路上皮癌诊断提供参考价值。

Pax9基因在斑马鱼早期发育阶段腮弓中的表达

目的:研究Pax9基因在斑马鱼早期发育阶段腮弓中的表达。方法:利用RT-PCR技术直接克隆Pax9特异性基因片段,制作针对Pax9的基因探针,选取斑马鱼发育早期多个时段的胚胎进行整胚原位杂交。结果:成功克隆Pax9基因,合成针对Pax9的基因探针,发现Pax9基因在受精16h的斑马鱼胚胎中开始有特异性信号出现,还可以明显地看到腮弓上的Pax9基因特异性信号在24～72h发育过程中的迁徙过程。结论:初步了解了Pax9基因在斑马鱼早期发育阶段的表达情况。

Pax9调控小鼠帽状期和钟状期牙乳头细胞的增殖和分化的初步研究

目的观察Pax9对小鼠帽状期和钟状期牙胚牙乳头细胞的作用。方法培养胚胎14.5d和16.5d小鼠下颌第一磨牙牙胚的牙乳头细胞。转染Pax9 siRNA至牙乳头细胞中敲低Pax9的表达,CCK8检测转染后24、48、72和96h细胞的增殖情况,Real-time PCR检测转染后Msx1、Bmp2、Bmp4的表达变化。在转染Pax9 siRNA的同时进行矿化诱导培养7d,然后检测Alp、Dmp1和Dspp的表达情况。结果敲低Pax9表达后,牙乳头细胞的增殖能力减弱;Msx1的表达水平下降,而Bmp2和Bmp4的表达水平升高;牙本质形成相关基因-Alp、Dmp1和Dspp的表达水平升高,牙乳头细胞的矿化能力增强。结论 Pax9参与调控小鼠帽状期和钟状期牙乳头细胞的增殖和成牙本质分化,同时调控下游基因Msx1、Bmp2和Bmp4的表达。

TBX2和PAX9在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义探讨

目的探讨TBX2和PAX9在甲状腺乳头状癌中的表达及临床病理学意义。方法取得60例甲状腺乳头状癌组织及20例癌旁正常甲状腺组织标本,用免疫组化法检测TBX2和PAX9的蛋白表达情况,用RT-PCR法检测TBX2 mRNA和PAX9 mRNA的相对表达量,并分析两者与患者临床病理因素之间的关系。结果免疫组化和RT-PCR结果均显示TBX2和PAX9在甲状腺乳头状癌组织中的表达明显高于正常甲状腺组织,差异有统计学意义(P<0.01);TBX2和PAX9的表达与分化程度、病理分期(pTMN)及淋巴转移密切相关(P<0.05);并且甲状腺乳头状癌组织中TBX2蛋白与PAX9蛋白的表达呈正相关(r=0.471,P<0.01)。结论 TBX2和PAX9参与了人类甲状腺乳头状癌的发生、发展,表达水平随着甲状腺乳头状癌组织恶性程度的增高而增高,可作为衡量食管鳞状细胞癌恶性程度的肿瘤分子标志物。

PAX9和MSX1基因异常对牙齿发育的影响

PAX9和MSX1基因对牙齿发育有比较重要的影响。本文介绍了PAX9和MSX1基因及其对先天性缺牙疾病的影响。

PAX9基因大片段外显子-5与一蒙古族先天缺失牙家系患者相关性研究

目的:探讨转录调控因子成对盒基因PAX9(Paired box 9)大片段外显子-5与一蒙古族先天缺失牙家系患者发病的相关性.方法:分别使用普通PCR和降落PCR技术扩增PAX9大片段外显子-5,对比扩增结果,并将扩增得到的产物进行测序.结果:降落PCR技术能够扩增出与预期大小完全一致的目的片段,且扩增的特异性较普通PCR高.测序结果表明该外显子-5与GenBank中登录的正常人序列相同,未发现突变位点.结论:此患者先天缺失牙并非由外显子-5突变造成.降落PCR技术能有效地降低或避免非特异性扩增,快速得到目的片段.

Pax9——牙齿发育中的关键调控基因

在牙齿发育过程中,Pax9基因局限且持续表达于间充质中,是间充质而非上皮组织的重要调控基因,可作为牙源性间充质的标志物,其表达受限则可导致牙胚的凋亡;它还是使牙胚蕾状期间充质细胞获得牙齿形成诱导能力的基因及缺牙区和切、磨牙区之间最早的差异性表达物。

PAX9突变非综合征型先天缺牙患者的缺牙表型分析

目的:探讨PAX9突变相关的临床表型,并尝试分析PAX9突变患者的恒牙先天缺失分布特征。方法:从Pubmed数据库检索截止至2018年2月的相关文献,文献报道了明确为PAX9突变导致先天缺牙的病例,将其缺失牙位记录汇总,进一步分析缺牙表现及对比不同牙位缺失率。结果:PAX9突变导致先天缺牙基本呈左右对称,故合并进一步分析。在不计第三磨牙情况下,第二磨牙缺失率(上颌:78. 8%;下颌:79. 2%)最高,上颌中切牙(5. 4%)、下颌尖牙(4. 6%)及下颌第一前磨牙(5. 0%)缺失率最低;除了第二磨牙外,其余牙位上下颌缺失率有统计学差异;上颌侧切牙为PAX9突变导致牙齿形态异常的好发牙位。结论:PAX9突变的表型分析明确了突变导致的缺牙表型特征,并有助于了解PAX9在牙齿发育中的作用。

PAX9基因在肺鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨PAX9基因在肺鳞状细胞癌(LUSC)中的表达情况及其临床意义。方法从TCGA数据库和GEO数据库中获取LUSC患者的基因测序数据和预后数据,包括TCGA-LUSC数据集、GSE21933数据集和GSE73403数据集;选取34例LUSC患者的癌组织及癌旁组织。基于TCGA-LUSC数据集和GSE21933数据集绘制ROC曲线,评估PAX9诊断LUSC的效能;建立基于TCGA-LUSC数据集和GSE73403数据集的LUSC患者预后列线图模型,并采用Kaplan-Meier法分析不同PAX9表达水平LUSC患者的总体生存率;采用qRT-PCR检测比较LUSC患者癌组织与癌旁组织的PAX9基因表达水平;采用qRT-PCR、蛋白免疫印迹试验(Western Blot)检测比较PAX9在人肺鳞状细胞癌细胞(NCI-H520)和正常肺泡上皮细胞(BEAS-2B)中的相对表达情况。用siRNA实现PAX9的敲低,并通过CCK8试验、划痕试验、平板克隆试验以及细胞周期试验分析PAX9的下调对LUSC细胞活力、迁移、扩增以及细胞周期的影响。结果基于TCGA-LUSC数据集和GSE21933数据集,绘制ROC曲线的分析结果显示,根据PAX9基因表达水平诊断LUSC的效能良好;生存分析结果显示,PAX9低表达LUSC患者的总体生存率显著低于PAX9高表达的LUSC患者(P<0.05)。LUSC患者癌组织PAX9基因表达水平显著低于癌旁组织;NCI-H520 PAX9基因和蛋白的表达水平均显著低于BEAS-2B。PAX9基因敲除试验结果显示,si-PAX9转染组的NCI-H520细胞活力显著高于si-NC转染组,克隆数显著多于si-NC转染组,愈合速度显著快于si-NC转染组;与si-NC转染组比较,si-PAX9转染组NCI-H520细胞处于S期的细胞明显减少,处于G2期的细胞明显增加。结论PAX9在LUSC中的表达水平可作为LUSC患者诊断和预后的评估指标;敲除PAX9基因会显著影响LUSC细胞的增殖、克隆、迁移和细胞周期进程。

PAX9基因在2个新疆维吾尔族非综合征型先天缺牙家系中的表达

目的通过对新疆维吾尔族非综合征型先天缺牙患者PAX9基因突变的检测,为维吾尔族该病发病的分子机制提供依据。方法采集2个新疆维吾尔族非综合征型先天缺牙家系颊黏膜拭子,提取DNA,采用聚合酶链反应技术结合DNA双向测序技术对患者DNA进行检测。结果 PAX9基因外显子3的85、86位点检测出两个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)位点。结论 PAX9基因外显子3的85、86位点的改变可能与新疆维吾尔族非综合征型先天缺牙的发生有关。

PAX9在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨配对盒基因9(paired box gene 9,PAX9)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者组织中的表达情况及其临床意义。方法采用RT-PCR和免疫组织化学技术(SP法)检测75例NSCLC患者肺癌组织及对应癌旁组织中PAX9的表达情况,并分析PAX9蛋白表达与患者临床病理特征及预后的关系。结果 (1)与癌旁组织相比(1.03±0.32),PAX9 mRNA在NSCLC组织中表达明显上调(1.74±0.48)(P<0.0001)。(2)PAX9在NSCLC组织中表达的阳性率为62.7%(47/75),显著高于对应癌旁组织的37.3%(28/75)(P=0.002)。(3)PAX9的表达与肿瘤病理分型及临床分期显著相关(P<0.05),而与患者性别、年龄、淋巴转移及肿瘤大小无相关性(P>0.05)。(4)Kaplan-Meier生存分析显示:PAX9表达阳性患者的生存时间短于PAX9表达阴性的患者(P=0.013)。COX回归分析结果显示:PAX9的表达水平(P=0.028)及临床分期(P=0.021)为影响NSCLC患者预后的独立危险因素。结论 PAX9在NSCLC中高表达,且其表达水平与肿瘤病理分型及临床分期相关,PAX9的过高表达有可能作为评估NSCLC预后的指标。

PAX9在卵巢癌中的表达及对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的探讨配对盒基因9(PAX9)在卵巢癌(OC)组织中的表达及其对SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法选取2017年6月至2019年5月在内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院实施手术治疗的90例OC患者的卵巢组织标本作为研究对象,另选取20例正常卵巢组织标本作为对照。检测标本组织中PAX9的表达水平,分析PAX9蛋白表达与病理特征间的关系。培养SKOV3细胞,并将细胞分为PAX9siRNA组、阴性对照组和空白对照组,MTT法检测各组细胞增殖能力,Transwell小室实验和划痕实验检测各组细胞增殖和迁移能力,WesternBlot检测SKOV3细胞中E-钙黏素(E-cad)、血清应答因子(SRF)和α-平滑肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平。结果PAX9在OC卵巢组织中的表达阳性率(75.56%,68/90)显著高于正常卵巢组织(10.00%,2/20),其表达与国际妇产科联盟(FIGO)分期和分化程度有关,差异具有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组比较,PAX9siRNA组SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力显著降低,细胞中SRF、α-SMA蛋白表达水平明显下调,而E-cad蛋白表达水平明显上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论PAX9基因在卵巢癌组织中高表达,且表达水平与肿瘤的恶性程度相关。沉默PAX9可抑制卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移能力,其机制可能与SRF介导的上皮间充质转化(EMT)过程有关。