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肺炎克雷伯菌多重耐药性与基因PBP2、PBP3的相关性研究 被引量:4
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作者 闫晓煜 肖创清 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第14期1873-1875,1878,共4页
目的探讨PBP2、PBP3基因在肺炎克雷伯菌对不同药物耐药中的作用与机制。方法收集该院2014年4月至2015年4月各科室临床标本中分离的非重复肺炎克雷伯菌203株,采用全自动微生物分析系统对菌株进行鉴定及药敏检测,提取细菌基因组DNA,用PCR... 目的探讨PBP2、PBP3基因在肺炎克雷伯菌对不同药物耐药中的作用与机制。方法收集该院2014年4月至2015年4月各科室临床标本中分离的非重复肺炎克雷伯菌203株,采用全自动微生物分析系统对菌株进行鉴定及药敏检测,提取细菌基因组DNA,用PCR扩增PBP2、PBP3产物并进行电泳,RT-PCR检测PBP2、PBP3的表达。结果 203株肺炎克雷伯菌中β-内酰胺类药物耐药105株(51.7%),敏感88株,对亚胺培南、美罗培南耐药率分别为5.4%、3.9%;PCR扩增产物的电泳条带中PBP2与PBP3基因阴性18株,阳性185株,但不平行,分别有各自的阴、阳性菌株;PBP2、PBP3与KP多重耐药性无显著相关(P=0.295、0.628)。PBP2与碳青烯酶类药物无显著相关(P=0.637);PBP3与碳青烯酶类药物存在显著相关,但相关系数不高(P=0.041,r=0.148);耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的PBP2、PBP3逆转录后扩增产物电泳条带与16SrRNA扩增产物电泳条带的灰度比值进行统计学检验,其差异均无统计学意义(PBP2:P=0.331,PBP3:P=0.383)。结论基因PBP2、PBP3与肺炎克雷伯菌多重耐药性之间可能无显著相关。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 多重耐药性 PBP2 pbp3
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肺炎链球菌中青霉素结合蛋白PBP3的功能与结构研究进展 被引量:2
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作者 周宇 王长振 +2 位作者 侯粲 李爽跃 杨曙明 《安徽农业科学》 CAS 2013年第8期3319-3322,共4页
PBP3作为肺炎链球菌唯一的D,D羧肽酶,能够从肽聚糖五肽上移除最后一个末端D-Ala,导致转肽反应中供体不可用,因此控制了肽聚糖的网状交联水平,在细胞分裂和生长中起重要作用。文中对PBP3的功能与结构进行了综述,为今后PBP3的深入研究与... PBP3作为肺炎链球菌唯一的D,D羧肽酶,能够从肽聚糖五肽上移除最后一个末端D-Ala,导致转肽反应中供体不可用,因此控制了肽聚糖的网状交联水平,在细胞分裂和生长中起重要作用。文中对PBP3的功能与结构进行了综述,为今后PBP3的深入研究与应用提供了基础资料。 展开更多
关键词 青霉素结合蛋白pbp3 肺炎链球菌 结构与功能
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肺炎链球菌中青霉素结合蛋白PBP3在大肠杆菌中的可溶性表达及活性鉴定 被引量:2
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作者 周宇 王长振 +2 位作者 侯粲 李爽跃 杨曙明 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期327-333,共7页
【目的】克隆肺炎链球菌R6的pbp3基因,构建原核表达载体并转化大肠杆菌表达,为PBP3的结构及应用研究创造条件。【方法】利用PCR法克隆肺炎链球菌R6中N端截短的pbp3基因(15-413 aa),BamHⅠ和XhoⅠ酶切后插入pGEX-6p-1构建pGEX-6p-pbp3*... 【目的】克隆肺炎链球菌R6的pbp3基因,构建原核表达载体并转化大肠杆菌表达,为PBP3的结构及应用研究创造条件。【方法】利用PCR法克隆肺炎链球菌R6中N端截短的pbp3基因(15-413 aa),BamHⅠ和XhoⅠ酶切后插入pGEX-6p-1构建pGEX-6p-pbp3*表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中胞内表达GST-PBP3融合蛋白,Glutathione-Sepharose 4B column亲和纯化GST-PBP3融合蛋白,PreScission Protease切除GST标签,再次过谷胱甘肽亲和层析柱获得纯化的PBP3蛋白。利用PBP3对头孢喹诺的结合试验来鉴定表达蛋白是否有活性。【结果】经测序鉴定成功扩增出N端截短的pbp3基因,成功构建了pGEX-6p-pbp3*表达载体,并纯化出可溶性PBP3蛋白,而且有活性。【结论】肺炎链球菌pbp3基因原核表达系统的成功构建以及有活性重组蛋白的获得,为PBP3蛋白的结构及应用研究奠定了基础。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 pbp3 可溶性表达 纯化 活性鉴定
原文传递
靶向铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)粘肽合成酶PBP3的抗菌先导化合物的虚拟筛选及活性研究
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作者 喻召武 宋立华 +3 位作者 童丽艳 王远 郑雯 宫兴文 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期219-231,共13页
【目的】开发出与铜绿假单胞菌粘肽合成酶PBP3有高亲和力,具有全新结构的先导化合物。【方法】以铜绿假单胞菌粘肽合成酶PBP3为靶点,通过分子对接软件DOCK6.5,对含有104万个小分子化合物的数据库进行了大规模虚拟筛选,选取结构相对简单... 【目的】开发出与铜绿假单胞菌粘肽合成酶PBP3有高亲和力,具有全新结构的先导化合物。【方法】以铜绿假单胞菌粘肽合成酶PBP3为靶点,通过分子对接软件DOCK6.5,对含有104万个小分子化合物的数据库进行了大规模虚拟筛选,选取结构相对简单的中选化合物进行合成,得到先导化合物,并验证其抑菌活性。【结果】通过grid score进行第一轮初筛,筛选出grid score分值小于–30 kcal/mol的6万个化合物,接着以amber score进行第二轮筛选,筛出amber score分值小于–20 kcal/mol的化合物约200个。最终,经过观察分析,从中挑选出4种打分高并且结构新颖的小分子化合物作为先导化合物。合成出的先导化合物及其衍生物对铜绿假单胞菌等常见微生物的最小抑菌浓度(MIC)在175–275μg/m L之间,对革兰氏阴性菌和阳性菌均有效,MIC值比作为阳性对照的磺胺嘧啶更低,说明先导化合物具有较好的抗菌活性。【结论】这些先导化合物可以进一步开发为新型抗菌药物,用于解决铜绿假单胞菌的耐药性问题。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 粘肽合成酶pbp3 耐药性 虚拟筛选 抑菌活性
原文传递
Rapid fabrication of modular 3D paper-basedmicrofluidic chips using projection-based 3D printing
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作者 Mingjun Xie Zexin Fu +5 位作者 Chunfei Lu Sufan Wu Lei Pan Yong He Yi Sun Ji Wang 《Bio-Design and Manufacturing》 SCIE EI CAS CSCD 2024年第5期611-623,共13页
Paper-based microchips have different advantages,such as better biocompatibility,simple production,and easy handling,making them promising candidates for clinical diagnosis and other fields.This study describes ametho... Paper-based microchips have different advantages,such as better biocompatibility,simple production,and easy handling,making them promising candidates for clinical diagnosis and other fields.This study describes amethod developed to fabricate modular three-dimensional(3D)paper-based microfluidic chips based on projection-based 3D printing(PBP)technology.A series of two-dimensional(2D)paper-based microfluidic modules was designed and fabricated.After evaluating the effect of exposure time on the accuracy of the flow channel,the resolution of this channel was experimentally analyzed.Furthermore,several 3D paper-based microfluidic chips were assembled based on the 2D ones using different methods,with good channel connectivity.Scaffold-based 2D and hydrogel-based 3D cell culture systems based on 3D paper-based microfluidic chips were verified to be feasible.Furthermore,by combining extrusion 3D bioprinting technology and the proposed 3D paper-based microfluidic chips,multiorgan microfluidic chips were established by directly printing 3D hydrogel structures on 3D paperbased microfluidic chips,confirming that the prepared modular 3D paper-based microfluidic chip is potentially applicable in various biomedical applications. 展开更多
关键词 Paper-based microfluidic chip Projection-based 3D printing(PBP) Modularization Cell culture
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Rapid printing of 3D porous scaffolds for breast reconstruction 被引量:2
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作者 Pengcheng Zhao Biling Wang +5 位作者 Lu Wang Zexin Fu Jun Hu Yande Liu Ji Wang Yong He 《Bio-Design and Manufacturing》 SCIE EI CAS CSCD 2023年第6期691-703,共13页
Prosthesis implantation and fat transplantation are common breast reconstructionmethods.In general,prosthesis implantation alone does not achieve a realistic enough appearance,and fat transplantation alone is difficul... Prosthesis implantation and fat transplantation are common breast reconstructionmethods.In general,prosthesis implantation alone does not achieve a realistic enough appearance,and fat transplantation alone is difficult to achieve in the correct capacity.To date,no reports have focused on methods of combining fat with implanted prostheses for breast reconstruction.Using a newly designed bionic ink(i.e.,polyether F127 diacrylate(F127DA)&poly(ethylene glycol)diacrylate(PEGDA))and projection-based three-dimensional bioprinting(PBP),we report the development of a new method for printing porous prostheses.PEGDA was used to improve the printing precision of the prosthesis by increasing the gel point of F127DA and reducing the impact of external temperature.The compression modulus of the printed prosthesis was very close to that of prostheses currently used in clinical practice and to that of natural breasts.Finally,stromal vascular fraction gel(SVF-gel),a human fat extract,was injected into the pores of the synthesized prostheses to prepare a prosthesis mixed with adipose tissue.These were implanted subcutaneously in nude mice to observe their biological performance.After 14 and 28 days of observation,the prosthesis showed good biocompatibility,and adipose tissues grew well in and around the prosthesis.This result shows that a porous prosthesis containing pre-placed adipose tissues is a promising breast reconstruction material. 展开更多
关键词 Projection-based 3D bioprinting(PBP) F127DA Breast reconstruction Fat transplantation
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