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浙江地区青霉素耐药肺炎链球菌PBPs基因及氨基酸序列研究 被引量:3
1
作者 林峰 郑敏巧 +3 位作者 曾爱平 丁玎 文思远 王升启 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期965-971,共7页
为阐明浙江地区青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)的青霉素结合蛋白(PBPs)的基因和氨基酸序列的变异特点,对温州医学院自2000年11月~2004年1月收集的26份肺炎链球菌进行分离、鉴定及青霉素药敏实验,并对每株链球菌的PBP1A、PBP2B、PBP2X基因... 为阐明浙江地区青霉素耐药肺炎链球菌(PRSP)的青霉素结合蛋白(PBPs)的基因和氨基酸序列的变异特点,对温州医学院自2000年11月~2004年1月收集的26份肺炎链球菌进行分离、鉴定及青霉素药敏实验,并对每株链球菌的PBP1A、PBP2B、PBP2X基因进行PCR扩增和直接测序,通过序列比对与生物信息学分析.结果表明,研究中的PBP1A的主要突变位点是保守基序KTG之后的4个连续氨基酸替换Thr574Ala、Ser575Thr、Gln576Gly、Phe577Tyr和保守序列STMK内的氨基酸替换Thr371Ser;PBP2B的主要突变位点是保守序列SSN之后的氨基酸替换Thr451Ala;PBP2X的主要突变位点是保守基序STMK内的氨基酸替换Thr338Ala.以上突变类型以及菌株的青霉素耐药水平与文献报道相符.研究检测的PRSP的PBPs基因中暂未发现本地区特有的(新的)基因突变,也未检测出文献报道的某些与青霉素抗性相关的氨基酸替换. 展开更多
关键词 肺炎链球菌(SP) 青霉素耐药的肺炎链球菌(PRSP) 青霉素结合蛋白(pbps)
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耐甲氧西林金葡球菌PBPs的研究方法 被引量:1
2
作者 李寨 李耘 李家泰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期281-284,共4页
描述了由我所在Sprat经典方法基础上加以改进的MRSAPBPs分离方法。包括:(1)细菌的培养;(2)膜蛋白的制备;(3)聚丙烯酰胺凝胶电泳;(4)放射自显影。
关键词 金葡萄球菌 MRSA 青霉素结合蛋白 pbps
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一种适用于B3G移动通信系统下行共享信道的调度算法 被引量:6
3
作者 赵新胜 鞠涛 尤肖虎 《电子学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1173-1176,共4页
本文针对后三代(B3G)移动通信系统中的宽带无线信道特性和流媒体业务特征,分析了可用于高速下行共享信道的各种传统分组调度算法,提出面向流媒体业务能够提高系统吞吐量的基于优先级公平调度(Priority-BasedFairnessScheduling,PBFS)算... 本文针对后三代(B3G)移动通信系统中的宽带无线信道特性和流媒体业务特征,分析了可用于高速下行共享信道的各种传统分组调度算法,提出面向流媒体业务能够提高系统吞吐量的基于优先级公平调度(Priority-BasedFairnessScheduling,PBFS)算法.该算法根据各移动用户收发信道质量和业务传输的QoS要求动态调整各用户的业务传输优先级,确定下行共享信道的调度方案.并给出该算法的简化形式S-PBFS.仿真结果表明,与传统调度算法相比,S-PBFS算法在数据包传输时延受限的条件下具有无线信道利用率高、实现复杂度低等特点. 展开更多
关键词 B3G移动通信系统 下行共享信道 流媒体 pbps算法 S-pbps算法
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妊娠晚期感染B族链球菌孕妇早产的危险因素及其pbp2x基因突变分析 被引量:1
4
作者 文强 王秀 +2 位作者 丁小莉 胡芷晴 徐志红 《现代医药卫生》 2024年第13期2206-2210,共5页
目的 分析某院感染B族链球菌(GBS)孕妇发生早产的危险因素及观察早产孕妇感染GBS的pbp2x基因突变情况。方法 选取2022年1月至2023年5月在该院分娩且感染GBS的孕妇199例,根据早产与否分为观察组(41例)和对照组(158例)。采用二分类logisti... 目的 分析某院感染B族链球菌(GBS)孕妇发生早产的危险因素及观察早产孕妇感染GBS的pbp2x基因突变情况。方法 选取2022年1月至2023年5月在该院分娩且感染GBS的孕妇199例,根据早产与否分为观察组(41例)和对照组(158例)。采用二分类logistic回归模型和受试者操作特征(ROC)曲线分析感染GBS的孕妇发生早产的危险因素;对早产孕妇的GBS样本进行pbp2x基因一代测序分析。结果 199例感染GBS孕妇中发生早产41例,发生率为20.6%。Logistic回归分析显示,年龄[比值比(OR)=1.151,P=0.004)]和口服葡萄糖耐量试验(OGTT)异常项数(OR=2.995,P<0.001)是感染GBS孕妇发生早产的独立危险因素。两危险因素联合预测早产的曲线下面积(AUC)为0.783,最佳敏感度为75.6%,特异度为69.0%,较单项危险因素预测价值高。pbp2x基因测序发现3个错义突变(1129G>A、1148T>G、1528A>G),未发现影响GBS对青霉素敏感性的基因突变。结论 年龄和OGTT异常项数是感染GBS孕妇发生早产的危险因素,两者联合预测的效能优于单项,早产孕妇感染的GBS中尚未发现影响青霉素敏感性的pbp2x基因突变。 展开更多
关键词 B族链球菌 孕妇 早产 危险因素 pbp2x基因
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异源表达盐单胞属(Halomonas)周质磷酸盐结合蛋白基因PBP降低转基因烟草砷积累研究
5
作者 黄仁权 袁婷 +1 位作者 宋拉拉 秦利军 《中国农学通报》 2024年第12期70-79,共10页
为探讨PBP基因在异源烟草中的生物学功能,筛选出低砷(As)积累亲本烟草种质。以转PBP基因烟草T2代种子和野生型烟草(Nicotiana tabacum K326)种子为材料,利用Real-time PCR分析外源PBP的时空表达模式,测定As胁迫下转基因烟株抗氧化酶(AO... 为探讨PBP基因在异源烟草中的生物学功能,筛选出低砷(As)积累亲本烟草种质。以转PBP基因烟草T2代种子和野生型烟草(Nicotiana tabacum K326)种子为材料,利用Real-time PCR分析外源PBP的时空表达模式,测定As胁迫下转基因烟株抗氧化酶(AOEs)活性变化及分析转基因烟草株系中As积累差异。AOEs活性测定表明,As胁迫第5天时CK植株中SOD和POD酶活性达到极值,分别为80.25 U/g和152.02 U/g,显著高于转基因植株;在胁迫后期(3~5 d)CK植株中H2O2和MDA含量也显著高于转基因植株。另外,在第7天和14天时转基因植株中As含量比CK植株均显著降低。离子转运蛋白基因表达分析表明,As胁迫不仅诱导转基因植株PBP基因表达显著上调,而且也引起转基因和CK植株中HAK1和PHT4等通道蛋白基因的显著上调,且CK植株中HAK1和PHT4的平均表达水平为转基因植株的1.5倍和3.75倍。外源PBP基因导入可有效降低转基因烟草对As的积累。 展开更多
关键词 盐单胞属 周质磷酸盐结合蛋白 PBP基因 转基因烟草 低As积累
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Rapid fabrication of modular 3D paper-basedmicrofluidic chips using projection-based 3D printing
6
作者 Mingjun Xie Zexin Fu +5 位作者 Chunfei Lu Sufan Wu Lei Pan Yong He Yi Sun Ji Wang 《Bio-Design and Manufacturing》 SCIE EI CAS CSCD 2024年第5期611-623,共13页
Paper-based microchips have different advantages,such as better biocompatibility,simple production,and easy handling,making them promising candidates for clinical diagnosis and other fields.This study describes ametho... Paper-based microchips have different advantages,such as better biocompatibility,simple production,and easy handling,making them promising candidates for clinical diagnosis and other fields.This study describes amethod developed to fabricate modular three-dimensional(3D)paper-based microfluidic chips based on projection-based 3D printing(PBP)technology.A series of two-dimensional(2D)paper-based microfluidic modules was designed and fabricated.After evaluating the effect of exposure time on the accuracy of the flow channel,the resolution of this channel was experimentally analyzed.Furthermore,several 3D paper-based microfluidic chips were assembled based on the 2D ones using different methods,with good channel connectivity.Scaffold-based 2D and hydrogel-based 3D cell culture systems based on 3D paper-based microfluidic chips were verified to be feasible.Furthermore,by combining extrusion 3D bioprinting technology and the proposed 3D paper-based microfluidic chips,multiorgan microfluidic chips were established by directly printing 3D hydrogel structures on 3D paperbased microfluidic chips,confirming that the prepared modular 3D paper-based microfluidic chip is potentially applicable in various biomedical applications. 展开更多
关键词 Paper-based microfluidic chip Projection-based 3D printing(PBP) Modularization Cell culture
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穿心莲内酯对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌关键耐药蛋白PBP2a的抑制作用
7
作者 李彩霞 刘盼盼 +2 位作者 陈晓慧 罗小凤 王桂琴 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第3期31-38,共8页
本试验旨在为探究穿心莲内酯(andrographolide, AP)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)关键耐药蛋白青霉素结合蛋白2a(penicillin binding protein 2a, PBP2a)的抑制作用。采用实时荧光定量... 本试验旨在为探究穿心莲内酯(andrographolide, AP)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)关键耐药蛋白青霉素结合蛋白2a(penicillin binding protein 2a, PBP2a)的抑制作用。采用实时荧光定量PCR检测AP对PBP2a编码基因mecA的转录影响,通过在线软件SWISS-MODEL等对蛋白质结构进行分析,经PyMOL以及AutoDock Tools软件进行分子对接来探究AP与PBP2a结合的可能机制,运用动力学模拟来验证AP与PBP2a蛋白结合的可靠性,进一步原核表达PBP2a并制备其多克隆抗体,通过蛋白质免疫印迹检测AP作用下MRSA中PBP2a蛋白含量的变化。结果显示:64μg/mL的AP即可显著下调mecA的转录水平,AP与PBP2a蛋白的GLU170、GLU239和THR238之间可以形成稳定的氢键作用力;成功表达并纯化获得38 kDa的PBP2a蛋白转肽酶区,且制备出的多克隆抗体可以与PBP2a蛋白特异性结合;随着AP浓度的升高,PBP2a的表达量逐渐降低。总之,本研究分子模拟提示AP对PBP2a蛋白存在抑制潜力,试验结果表明AP可以通过抑制mecA的转录进而抑制PBP2a表达,从而揭示了AP使MRSA对β-内酰胺类抗生素增敏的可能机制。 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 PBP2A 穿心莲内酯 分子模拟
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青霉素结合蛋白研究进展 被引量:12
8
作者 熊亚莉 范昕建 《国外医药(抗生素分册)》 CAS 2004年第5期193-197,共5页
青霉素结合蛋白 (PBPs)相关性耐药是细菌对 β -内酰胺类抗生素耐药一个重要方面。其数量的增多、与抗生素亲和力的下降以及出现新的青霉素结合蛋白均直接导致抗生素耐药。对青霉素结合蛋白的结构、功能。
关键词 青霉素结合蛋白 pbps 细菌耐药性 抗生素 细胞膜
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昆虫气味结合蛋白基因家族序列多样性分析
9
作者 余海忠 祝增荣 +3 位作者 杨璞 刘慧宏 杨霄 肖作安 《信阳师范学院学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2008年第1期64-69,共6页
运用PCR技术,获得了全长为416 bp的二化螟(Chilo suppressalis)触角普通气味结合蛋白(General Odorant Binding Proteins2,GOBPs2)保守区片段(GenBank:DQ447635),它编码的138个氨基酸残基中含有6个保守的半胱氨酸位点,具有气味结合蛋白... 运用PCR技术,获得了全长为416 bp的二化螟(Chilo suppressalis)触角普通气味结合蛋白(General Odorant Binding Proteins2,GOBPs2)保守区片段(GenBank:DQ447635),它编码的138个氨基酸残基中含有6个保守的半胱氨酸位点,具有气味结合蛋白的典型特征.凝胶电泳检测PCR产物表明GOBPs2基因在二化螟成虫触角中特异性表达且雌雄虫表达水平相当,但在除触角外的组织中不表达.统计了GenBank中已登录的54种昆虫130余条OBPs序列的分布类型,分别运用Clustal W、MEGA软件比对分析了GOBPs的相似性和同源性以及重新构建了OBPs、PBPs、GOBPs序列的系统发生树. 展开更多
关键词 昆虫 OBPs GOBPs pbps 同源性 系统树
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青霉素结合蛋白测定技术的研究
10
作者 钱海伦 查永喜 +2 位作者 余江河 阎晓菊 李广银 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第5期308-310,共3页
当前,细菌耐药性问题日趋严重,给临床治疗带来困难,对β-内酰胺类抗生素而言,某些菌青霉素结合蛋白(PBPs)改变造成的耐药性,是β-内酰胺类抗生素的特点。
关键词 pbps 氘标记 测定
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家蚕蛹和成虫期GOBP/PBP亚家族基因簇基因定位与表达分析 被引量:8
11
作者 张升祥 张瑶 +4 位作者 徐世清 王更先 胡增娟 赵春晓 崔为正 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1069-1076,共8页
昆虫的气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)在昆虫与外界环境化学信息交流过程中起着重要作用,对昆虫觅食、求偶、繁殖具有重要意义。普通气味结合蛋白/性信息素结合蛋白(general odorant binding protein/pheromone binding p... 昆虫的气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)在昆虫与外界环境化学信息交流过程中起着重要作用,对昆虫觅食、求偶、繁殖具有重要意义。普通气味结合蛋白/性信息素结合蛋白(general odorant binding protein/pheromone binding protein,GOBP/PBP)是鳞翅目昆虫OBP家族的一个重要单系群。为进一步明确家蚕Bombyx moriGOBP/PBP基因的结构、表达及功能,本研究利用染色体定位及半定量表达分析方法对其进行了分析。染色体定位分析显示,这些基因以基因簇的形式存在于第19染色体的nscaf3052上,基因结构相似,转录方向一致,表明这些基因可能由同源基因复制产生,并具有类似功能。对家蚕蛹和成虫不同发育阶段的雌、雄虫多种组织中进行表达分析发现,这些基因的表达在不同发育时期和不同组织间差异明显(P<0.05),相对表达量均以触角中为最高,其他非嗅觉组织中也多有表达,性别间差异不大,说明了该基因簇基因除了具有嗅觉相关的功能外,很可能具有其他尚未被发现的功能。 展开更多
关键词 家蚕 气味结合蛋白 PBP1-GOBP2亚家族 基因簇 表达分析 染色体定位
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四溴双酚-A和五溴酚对红鲫甲状腺激素和脱碘酶的影响 被引量:17
12
作者 瞿璟琰 施华宏 +1 位作者 刘青坡 沈江帆 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1625-1630,共6页
将红鲫(Carassius auratus)分别暴露于0.5mg·L-1四溴双酚-A(TBBPA)和0.1mg·L-1五溴酚(PBP)中28d,采用放射性免疫分析法和化学发光酶联免疫分析法检测红鲫的血清甲状腺激素水平和肝脏脱碘酶活性.结果显示,TBBPA能使红鲫血清TT4... 将红鲫(Carassius auratus)分别暴露于0.5mg·L-1四溴双酚-A(TBBPA)和0.1mg·L-1五溴酚(PBP)中28d,采用放射性免疫分析法和化学发光酶联免疫分析法检测红鲫的血清甲状腺激素水平和肝脏脱碘酶活性.结果显示,TBBPA能使红鲫血清TT4和TT3水平降低,rT3水平、肝脏脱碘酶ID2和ID3活性升高.PBP对红鲫甲状腺系统的干扰要小于TBBPA,它对红鲫血清TT3水平和ID2活性几乎没有影响.上述结果表明,TBBPA和PBP能够干扰红鲫体内甲状腺激素的稳态,加速甲状腺激素在肝脏内的转化和代谢;这可能是通过抑制甲状腺激素与运载蛋白的结合来实现的. 展开更多
关键词 四溴双酚-A(TBBPA) 五溴酚(PBP) 甲状腺激素(THs) 脱碘酶(IDs) 红鲫
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金龟子嗅感器及嗅觉机理的研究进展 被引量:7
13
作者 孙凡 王广利 赵奎军 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2007年第3期411-415,共5页
昆虫利用触角上的嗅觉感受器来识别化学信号。金龟子触角的嗅觉感受器为板形感器和锥形感器。与鳞翅目昆虫一样,金龟子嗅感器对化学气味具有选择性,并且雌雄两性间常常存在嗅觉差异。目前金龟子嗅觉信号转导的分子生物学研究也开展起来... 昆虫利用触角上的嗅觉感受器来识别化学信号。金龟子触角的嗅觉感受器为板形感器和锥形感器。与鳞翅目昆虫一样,金龟子嗅感器对化学气味具有选择性,并且雌雄两性间常常存在嗅觉差异。目前金龟子嗅觉信号转导的分子生物学研究也开展起来,已鉴定了多种金龟子的气味结合蛋白(OBP)和信息素结合蛋白(PBP),同一类群金龟子的PBPs相互之间同源性很高。 展开更多
关键词 金龟子 嗅感器 OBP PBP 气味降解酶
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沙棘多糖对D半乳糖致衰老小鼠的抗氧化作用 被引量:23
14
作者 包晓玮 李建瑛 +3 位作者 任薇 魏晨业 曾兰君 张亚涛 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2020年第4期293-297,306,共6页
评价PBP(polysaccharide from Hippophae rhamnoides,PBP)对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的抗氧化作用。小鼠分为空白组、衰老模型组、阳性组(VE170 mg/kg)、PBP低(100 mg/kg)、中(200 mg/kg)、高(400 mg/kg)剂量组,连续灌胃30 d,测定... 评价PBP(polysaccharide from Hippophae rhamnoides,PBP)对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的抗氧化作用。小鼠分为空白组、衰老模型组、阳性组(VE170 mg/kg)、PBP低(100 mg/kg)、中(200 mg/kg)、高(400 mg/kg)剂量组,连续灌胃30 d,测定其脏器指数、肝、脑组织及血清的SOD、GSH-Px活性及MDA含量;HE染色观察各组动物肝脏及脑组织细胞及结构变化。结果表明,与模型组相比,PBP高剂量及VE组小鼠体质量增长幅度最大,PBP高、中及VE组的脑、心脏及脾脏指数与模型组相比均显著提高(P<0.05,P<0.01);PBP高、中剂量组中肝、脑及血清中的GSH-Px均极显著高于模型组(P<0.01),PBP高剂量中肝、脑及血清中的SOD均极显著高于模型组(P<0.01),PBP高剂量及VE组中肝、脑及血清中的MDA均极显著低于模型组(P<0.01)。组织切片HE染色发现PBP对衰老导致小鼠肝、脑组织细胞及结构损伤具有保护作用。PBP对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的保护作用可能与其具有抗氧化作用有关。 展开更多
关键词 PBP D-半乳糖 衰老模型 抗衰老
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四溴双酚-A和五溴酚对红鲫肝脏组织和超微结构的影响 被引量:10
15
作者 陈玛丽 瞿璟琰 +1 位作者 刘青坡 施华宏 《安全与环境学报》 CAS CSCD 2008年第4期8-11,共4页
将红鲫(Carassius auratus)分别暴露于0.025 mg/L、0.25 mg/L四溴双酚-A(TBBPA)与0.002 5 mg/L、0.025 mg/L五溴酚(PBP)中12周,采用组织切片和透射电镜的方法,分别观测红鲫肝脏的组织和超微结构。结果显示,TBBPA和PBP低剂量暴露能够引... 将红鲫(Carassius auratus)分别暴露于0.025 mg/L、0.25 mg/L四溴双酚-A(TBBPA)与0.002 5 mg/L、0.025 mg/L五溴酚(PBP)中12周,采用组织切片和透射电镜的方法,分别观测红鲫肝脏的组织和超微结构。结果显示,TBBPA和PBP低剂量暴露能够引起红鲫肝脏脂肪化、空泡化和线粒体囊泡化等现象,而高剂量暴露还导致肝脏细胞核损伤和细胞间隙增大等现象。研究表明,TBBPA和PBP能造成红鲫肝脏的损伤。这两种溴化阻燃剂可能是通过引起肝脏的物质代谢紊乱而造成肝毒性的。 展开更多
关键词 生态毒理学 四溴双酚-A(TBBPA) 五溴酚(PBP) 红鲫 肝脏 组织结构 超微结构
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耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的检测及耐药性分析 被引量:11
16
作者 廖璞 洪波 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第3期449-451,共3页
目的:探讨不同方法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的敏感性,并对其耐药性进行分析。方法:应用PCR检测mecA基因、E-test、青霉素结合蛋白2a(PBP2a)乳胶凝集法、苯唑西林(OXA)琼脂筛选法和K-B法对临床分离的200株凝固酶阴性葡萄... 目的:探讨不同方法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的敏感性,并对其耐药性进行分析。方法:应用PCR检测mecA基因、E-test、青霉素结合蛋白2a(PBP2a)乳胶凝集法、苯唑西林(OXA)琼脂筛选法和K-B法对临床分离的200株凝固酶阴性葡萄(CNS)球菌进行MRCNS检测,并用WHONET4软件进行耐药性分析。结果:各方法MRCNS检测阳性率分别为:OXA琼脂筛选法74%;OXAK-B法72%;E-test71%;PBP2a乳胶凝集法73.5%,mecA基因检测法70%,检测结果无显著性差异(χ2=1.5124,P>0.05)。MRCNS对青霉素(PEN)、庆大霉素(GEN)、复方磺胺(SXT)、环丙沙星(CIP)、四环素(TET)、克林霉素(CLI)、红霉素(ERY)等传统抗生素耐药率均在50%以上;甲氧西林敏感凝固酶阴性的葡萄球菌(MSCNS)除PEN、ERY耐药率为80.4%和57.1%以外,其他抗生素均小于或在50%左右,CNS中耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)达70%以上,未发现耐万古霉素(VAN)的CNS。结论:五种方法均能满足MRCNS的临床筛选,其中以乳胶凝集法最为简便、快速,临床值得推广;MRCNS对氨基甙类、喹诺酮类、四环素类、大环内酯类、磺胺存在严重的交叉耐药现象,经验用药首选VAN,而MSCNS除VAN外,还可选用GEN、SXT、CIP、TET、CLI。 展开更多
关键词 MRCNS MECA基因 PBP2A 耐药性
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2个甜菜夜蛾信息素结合蛋白cDNA片段的克隆和序列分析 被引量:6
17
作者 修伟明 董双林 +1 位作者 苗慧 穆兰芳 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1501-1504,共4页
通过比较几种已发表夜蛾科昆虫的信息素结合蛋白(PBP)氨基酸序列,设计合成一对简并性引物,利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术从甜菜夜蛾(SpodopteraexiguaHübner)雄虫触角扩增得到2个分别为275bp和281bp的cDNA片段SexigPBP1和S... 通过比较几种已发表夜蛾科昆虫的信息素结合蛋白(PBP)氨基酸序列,设计合成一对简并性引物,利用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术从甜菜夜蛾(SpodopteraexiguaHübner)雄虫触角扩增得到2个分别为275bp和281bp的cDNA片段SexigPBP1和SexigPBP2,其分别由92个氨基酸残基和94个氨基酸残基组成。通过在GenBank中进行序列的同源性比较,表明这2个序列与已知几种昆虫的PBP氨基酸序列具较高同源性。 展开更多
关键词 结合蛋白 甜菜夜蛾 CDNA片段 信息素 序列分析 多聚酶链式反应 GenBank 氨基酸序列 氨基酸残基 克隆 同源性比较 设计合成 夜蛾科 简并性 反转录 PBP 昆虫 雄虫
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DnaJ类分子伴侣PBP基因的原核表达及兔抗PBP抗体的制备 被引量:2
18
作者 刘成刚 朱美财 +4 位作者 李文 石樱 占志 王荫静 向培德 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期456-458,共3页
目的:在原核系统中表达DnaJ类分子伴侣感光受体外周蛋白结合蛋白(PBP)基因,并制备兔抗PBP的抗体鉴定其特性。方法:应用RTPCR从人胎脑组织总RNA中扩增PBPcDNA。测序后将其克隆到表达载体pET28a中,并在大肠杆菌中以IPTG诱导表达。表达产物... 目的:在原核系统中表达DnaJ类分子伴侣感光受体外周蛋白结合蛋白(PBP)基因,并制备兔抗PBP的抗体鉴定其特性。方法:应用RTPCR从人胎脑组织总RNA中扩增PBPcDNA。测序后将其克隆到表达载体pET28a中,并在大肠杆菌中以IPTG诱导表达。表达产物经NiNTA亲和层析柱纯化后,用SDSPAGE进行鉴定。以所获纯化的PBP免疫新西兰白兔,制备兔抗PBP抗体。抗体的效价及特异性用Westernblot进行测定和分析。结果:扩增和克隆出了720bp的PBP基因。构建的重组质粒pET28aPBP在大肠杆菌中得到高表达,诱导表达的蛋白存在于包涵体和细菌裂解上清中,纯化的PBP经SDSPAGE鉴定呈单一条带。以纯化的PBP免疫兔,制备了兔抗PBP抗体。Westernblot鉴定证实,该抗体可与原核表达的PBP特异性结合,抗体效价为1∶1600。结论:在原核细胞中表达了具有生物学活性的PBP,并以其为免疫原制备了兔抗PBP的抗体,为进一步研究PBP的结构与生物学活性奠定了基础。 展开更多
关键词 PBP 热休克蛋白 基因表达 多克隆抗体
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MRSA-PBP2a蛋白的体外诱导、抗体制备及鉴定 被引量:3
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作者 苏明权 杨柳 +2 位作者 岳乔红 樊新 郝晓柯 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第9期802-804,共3页
目的:探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistantstaphylococcusaureus,MRSA)蛋白的体外诱导;抗MRSA PBP2a(pencillinbindingprotein2a,PBP2a)蛋白抗体的制备及效价鉴定.方法:采用NCCLS推荐的琼脂板稀释法和PCR法筛选MRSA,以... 目的:探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistantstaphylococcusaureus,MRSA)蛋白的体外诱导;抗MRSA PBP2a(pencillinbindingprotein2a,PBP2a)蛋白抗体的制备及效价鉴定.方法:采用NCCLS推荐的琼脂板稀释法和PCR法筛选MRSA,以β内酰胺抗生素作为诱导剂,进行体外诱导产生PBP2a蛋白.免疫家兔后产生抗MRSA PBP2a蛋白抗体,采全血分离血清,用改良双向免疫扩散法进行抗体滴度测定.结果:11株临床分离的金葡菌采用二种方法均检测出2株MRSA,SDS PAGE和Westernblot结果均显示从MRSA菌株中均能诱导出了PBP2a蛋白;免疫后均能产生较高的效价抗体,分别为1∶32和1∶64.结论:成功诱导出产生耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a蛋白菌株,并制备获得PBP2a蛋白,以及制备抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌PBP2a蛋白抗体,为研究MRSA PBP2a蛋白活性、MRSA的免疫治疗和MRSA快速鉴定方法学的建立奠定基础. 展开更多
关键词 MRSA PBP2a蛋白 体外诱导 动物免疫
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布氏杆菌PBP_(39)蛋白抗原表达及免疫效果的研究 被引量:2
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作者 罗德炎 曾政 +4 位作者 李非 高永辉 李鹏 王希良 何凤田 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期817-820,共4页
目的 获得纯化的布氏杆菌PBP3 9重组蛋白抗原,观察PBP3 9重组蛋白的免疫原性。方法 扩增不同种布氏杆菌PBP3 9基因,测序、连接表达载体PET3 2a ,诱导表达,柱纯化PBP3 9重组蛋白抗原,免疫BALB/c小鼠,ELISA检测抗体及抗体亚型。结果 ... 目的 获得纯化的布氏杆菌PBP3 9重组蛋白抗原,观察PBP3 9重组蛋白的免疫原性。方法 扩增不同种布氏杆菌PBP3 9基因,测序、连接表达载体PET3 2a ,诱导表达,柱纯化PBP3 9重组蛋白抗原,免疫BALB/c小鼠,ELISA检测抗体及抗体亚型。结果 我国牛、羊、猪布氏杆菌PBP3 9基因与国外已报道的PBP3 9编码基因不完全相同。在蛋白N端5 8位碱基后多一G ,造成移码突变。故在85、86、87位编码终止子TCA。而在13 4、13 5、13 6位的ATG又编码了新的起始密码。布氏杆菌PBP3 9蛋白在大肠杆菌高效表达,表达量达40 % ,纯化重组蛋白抗原免疫BALB/c小鼠,产生了较高水平的特异性抗体免疫应答,抗体亚型主要是IgG1。结论 我国牛、羊、猪布氏杆菌PBP3 9编码抗原蛋白同国外已报道的不完全相同,纯化的PBP3 9重组蛋白抗原可诱导高水平的抗体反应,为筛选布氏杆菌病新型疫苗保护性抗原分子奠定了基础。 展开更多
关键词 布氏杆菌PBP39 重组蛋白抗原 免疫原性
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