透明细胞肾细胞癌组织中PBRM1和BAP1表达缺失对患者预后的影响

目的:检测透明细胞肾细胞癌(clear cell renal carcinomas,cc-RCC)组织中PBRM1和BAP1的表达情况,探讨两者临床病理特征及对肾癌患者预后的影响。方法:采用免疫组化Elivision检测60例cc-RCC组织和16例正常肾组织中PBRM1和BAP1的表达。结果:60例cc-RCC组织中PBRM1和BAP1的高表达阳性率分别为46.7%和35%,对照组16例正常肾组织中PBRM1和BAP1均强阳性表达。PBRM1和BAP1表达缺失与cc-RCC高核级、肿瘤晚期及肿瘤组织坏死密切相关(P<0.05)。PBRM1表达缺失患者的PFS(P=0.002)和OS(P=0.036)低于PBRM1高表达患者。结论:PBRM1在cc-RCC缺失表达可能促使肿瘤侵袭与转移,是预后不良的标志。

移植肾缺血/再灌注损伤后PBRM1分子表达及作用分析

目的探讨PBRM1分子在移植肾缺血/再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)中的表达及其作用机制。方法选取3组肾脏组织(每组5例),分为正常肾脏组(Control组)、移植术后肾功能稳定组(STA组)、移植肾缺血/再灌注损伤组(IRI组)。采用免疫组化技术检测多溴蛋白1(polybromo 1,PBRM1)在3组中的蛋白表达。结合基因表达数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)数据集分析PBRM1在肾脏IRI后的表达,探讨其机制,并通过体外实验验证Pbrm1分子在Th17细胞的表达。结果免疫组化染色结果显示,与Control组和STA组相比,IRI组的PBRM1表达程度显著高于其他两组。经GSE180420数据库分析显示,与Control相比,IRI组PBRM1分子表达水平显著升高,GSEA结果提示PBRM1可促进Th17细胞的功能。体外实验证实,与Th0细胞相比,Pbrm1基因的转录水平在Th17细胞中显著升高。结论移植肾IRI后PBRM1分子表达水平显著升高,PBRM1分子可能通过影响Th17细胞的功能,从而加重肾脏IRI。

PBRM1和P53在子宫内膜癌的表达及临床意义研究

目的:探讨PBRM1和抑癌基因(P53)在子宫内膜癌中的表达及其临床意义。方法:应用RT-PCR、Western blot、免疫组化方法对105例子宫内膜癌组织及癌旁正常组织(对照组)进行PBRM1和P53mRNA和蛋白表达水平的检测,结果:子宫内膜癌组织PBRM1mRNA及P53 mRNA表达阳性率分别为71.43%、81.90%,对照组分别为28.57%、18.10%,子宫内膜癌组织表达高于对照组(P<0.01)。子宫内膜癌组织PBRM1和P53蛋白表达阳性率分别为62.86%和46.67%,对照组分别为45.71%和7.62%,子宫内膜癌组织表达高于对照组(P<0.05)。PBRM1和P53蛋白阳性表达与组织学类型、浸润深度、淋巴结转移、病理分级、临床TNM分期有关(P<0.05)。PBRM1和P53的表达呈正相关(r=0.205,P<0.05)。结论:PBRM1和P53在子宫内膜癌的表达增高,其表达水平随着子宫内膜癌组织的病理分级和临床分期的增高而增高,可能与肿瘤的生物学行为有一定关系,且两者可能有协同作用。

PBRM1缺失通过TNF-α/exosome信号轴促进肾癌细胞PD-L1分泌

目的探讨PBRM1和PD-L1在肾癌患者组织中的表达相关性以及PBRM1调控PD-L1的分子机制,为肾癌患者免疫治疗筛选提供实验数据。方法免疫组化检测PBRM1和PD-L1的蛋白表达。TCGA数据库分析PBRM1和PD-L1 mRNA表达及与患者生存相关性。使用exoEasy Maxi Kit提取外泌体,免疫印迹检测外泌体生物标志物CD63和CD9的表达,并用透射电子显微镜鉴定其生物学形态;免疫印迹检测IFN-γ、IL-6和TNF-α不同因子处理对肾癌细胞PD-L1的诱导表达。结果PBRM1在肾透明细胞癌肿瘤中的组织表达量显著低于癌旁组织(P<0.001),患者肿瘤组织PBRM1表达缺失率高达76.4%。肾透明细胞癌组织芯片免疫组化和TCGA数据库结果显示PBRM1表达与PD-L1表达没有相关性,TCGA数据库及分子生物学实验证实PBRM1突变后激活TNF-α/exosome信号通路增加PD-L1蛋白含量,并包裹于外泌体中被运输到细胞外。结论肾癌组织PBRM1与PD-L1蛋白表达无相关性,但PBRM1突变导致炎症信号通路激活,诱导细胞表达PD-L1,并被包裹于外泌体分泌到细胞外,影响肾癌免疫治疗响应。

基于数据挖掘分析VHL,PBRM1,TTN,SETD2,BAP1在肾透明细胞癌中的表达及预后意义

目的:研究相关基因在肾透明细胞癌中的表达变化,评价相关基因与肾透明细胞癌的关系及其对预后的影响。方法:在TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库中配对肾透明细胞癌组织和正常肾细胞组织相关基因表达谱数据,通过数据挖掘技术挖掘相关基因(VHL,PBRM1,TTN,SETD2,BAP1)与肾透明细胞癌表达及预后的关系。结果:相对比正常肾透明细胞组织,VHL,PBRM1,SETD2,BAP1均呈低表达,TTN呈高表达,通过建立相关生存曲线,可知PBRM1低表达与TTN高表达能够减少肾透明细胞癌患者的生存时间,而VHL、SETD2、BAP1基因低表达与肾透明细胞癌患者的生存时间无统计学差异。结论:PBRM1的低表达与TTN高表达是影响肾透明细胞癌预后的不良因素,因此PRBM1、TTN基因的表达对判断肾透明细胞癌患者的生存预后具有参考价值。

PBRM1——肿瘤靶向及免疫检查点治疗的潜在标志物

PBRM1基因在多种肿瘤中表现为抑癌基因,其突变或表达状态对不同肿瘤预后的评估价值不一。机制研究提示JAK/STAT3,PBRM1/RLR等信号的活化参与了PBRM1激活肿瘤患者免疫功能、诱发炎性反应并启动炎癌转化,从而影响患者生物靶向治疗和免疫检查点治疗的敏感度。免疫检查点抑制剂与靶向药物的联合治疗策略是未来肿瘤治疗的发展趋势。本文分析PBRM1在不同肿瘤患者预后指导中的作用,并阐述PBRM1检测在指导患者对上述药物和治疗策略的选择及疗效评估中的重要意义。

53例国人肾透明细胞癌中PBRM1基因的突变分析

目的分析Polybromo 1(PBRM 1)基因在国人肾透明细胞癌中的突变特点,探讨基因突变与临床病理特征和预后的关系。方法选取53例肾透明细胞癌患者,利用PCR结合直接测序的方法检测PBRM 1基因2～5号外显子、15～17号外显子的突变情况。分析PBRM 1基因突变与临床病理特征和预后的相关性。结果 53例样本中检测出PBRM 1基因突变14例,突变率为26%。突变较集中分布在第15、17外显子,第15外显子5例,第17外显子6例。PBRM 1基因突变组和无突变组的中位无进展生存期分别为5个月(95%CI:1.6～8.4个月)和14个月(95%CI:9.7～18.3个月),中位生存期分别为7个月(95%CI:2.6～11.4个月)和18个月(95%CI:5.6～30.4个月),差异均有统计学意义(P<0.05)。PBRM 1基因突变与性别、年龄、发病部位、分期及疾病控制率等无关(P>0.05)。结论中国人肾透明细胞癌中PBRM 1基因突变率较高,突变主要位于第15、17外显子。PBRM 1基因突变可能是肾透明细胞癌患者预后不良的危险因素。

FOXP1和PBRM1在结肠癌中的表达及临床意义

目的:探讨FOXP1和PBRM1在结肠癌组织以及癌旁组织中表达情况,分析其与结肠癌患者临床病理特征及预后的关系。方法:选取75例结肠癌患者癌组织及对应癌旁组织,采用qRT-PCR法检测FOXP1和PBRM1基因表达水平,免疫组织化学法检测FOXP1和PBRM1蛋白表达,使用Kaplan-Meier方法计算FOXP1和PBRM1表达对结肠癌患者存活率的影响,Spearman相关性分析FOXP1和PBRM1表达之间的相关性,Cox回归模型分析结肠癌预后的影响因素。结果:与癌旁组织相比,结肠癌组织中FOXP1基因表达水平上调,PBRM1基因表达水平下调,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结肠癌组织中FOXP1和PBRM1阳性表达率分别为65.33%和41.33%,癌旁组织中FOXP1和PBRM1阳性表达率分别为24.00%和77.33%。与癌旁组织相比,结肠癌组织中FOXP1阳性表达明显上升,PBRM1阳性表达明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。FOXP1和PBRM1在结肠癌组织中的表达均与患者的年龄、性别以及肿瘤大小无关(P﹥0.05),而与TNM分期、分化程度和淋巴结转移相关(P<0.05)。FOXP1阳性表达患者存活率显著低于阴性表达患者(P<0.05),PBRM1阳性表达患者存活率显著高于阴性表达患者(P<0.05),FOXP1阳性表达患者存活率明显低于PBRM1阳性表达患者(P<0.05)。Spearman相关性分析结果表明,FOXP1和PBRM1表达呈负相关(r=-0.547,P<0.05)。Cox回归模型分析结果显示,FOXP1和PBRM1均是影响结肠癌预后的独立因素。结论:FOXP1和PBRM1在结肠癌中表达异常,两者均参与结肠癌发生、发展过程,可能成为结肠癌诊治的新肿瘤标记物。

Eur Urol:PARP1用于预测携带PBRM1基因突变的透明细胞型肾癌患者对PD-1抑制剂免疫治疗效果的价值研究

免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibi⁃tors,ICIs)已成为包括透明细胞型肾细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)在内的多种不同肿瘤的新型治疗策略。但是,这类药物仅对病理类型为ccRCC的肾癌患者有效,而且有时很难对疗效进行预测。为解决这一问题,有必要对预测ICIs疗效的生物学标志物进行筛选及评估。另外,前期研究发现聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)与DNA损伤的发生有关,已成为多种癌症重要治疗靶点。

染色质重构复合体蛋白PBRM1对膀胱癌细胞生物学功能的影响

目的探讨染色质重构复合体蛋白PBRM1对膀胱癌细胞株EJ、T24细胞生物学功能的影响。方法针对PBRM1 mRNA序列设计合成siRNA,转染膀胱癌细胞,沉默PBRM1基因后进行如下检测:RT-PCR法检测PBRM1 mRNA表达变化及凋亡、迁移相关指标;MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western印迹法检测凋亡蛋白Caspase3表达水平;划痕实验及Matrigel实验检测细胞迁移及侵袭能力变化。结果 PBRM1siRNA能有效抑制膀胱癌细胞中PBRM1的表达。PBRM1基因沉默后,与空白对照组相比,细胞增殖能力显著增强,同时细胞凋亡减少,细胞迁移及侵袭能力明显减弱。凋亡及迁移相关基因mRNA水平及蛋白水平也出现相应变化。结论 PBRM1对膀胱癌细胞株EJ、T24生物学功能有重要影响,可抑制细胞增殖,促进细胞凋亡、迁移及侵袭。

科学家发现PBRM1基因突变是肾癌发生的重要诱因

英国科学家Varela等于近期宣布,其发现的SWI/SNF染色质重构复合物基因——PBRM1基因与肾透明细胞癌（ccRCC）的发生和发展密切相关。

肾细胞癌细胞中PBRM1-SWI/SNF复合体通过E2F1参与细胞周期控制

目的探讨敲减PBRM1是否会影响ccRCC细胞增殖以及在转录水平上PBRM1如何调控这一过程。方法通过RNA干扰、RT-PCR、Western blot、MTT和FACS实验,对于敲减PBRM1后的细胞增殖、E2F1家族成员的表达进行了分析;同时也通过ChIP实验研究了E2F1与PBRM1的相互转录调控机制。结果数据显示,在SN12C细胞中敲减PBRM1显著增加有丝分裂指数(MI),并伴随E2F1转录因子的上调。PBRM1被招募到E2F1启动子,与该启动子的活性组蛋白修饰共同发生。E2F1也被招募到PBRM1启动子,并通过结合其应答元件对PBRM1的表达起抑制作用。结论含有PBRM1的SWI/SNF复合体具有抗增殖作用;PBRM1缺陷以及PBRM1和(或)E2F成员的下游调控基因,可能在ccRCC的发生和发展中起协同作用。

PBRM1和P21蛋白在子宫内膜癌的表达及意义

目的:探讨PBRM1和P21蛋白在子宫内膜癌中的表达和临床意义。方法:应用免疫组化方法对105例子宫内膜癌组织进行PBRM1和P21蛋白检测。结果:子宫内膜癌中PBRM1和P21的阳性表达率分别为62.86%和80%;癌旁组织PBRM1和P21阳性表达率分别为45.71%和34.2%,子宫内膜癌组织表达高于癌旁组织(P<0.05);PBRM1和P53阳性表达与组织学类型、浸润深度、淋巴结转移、组织学分级、临床TNM分期相关(P<0.05),与患者年龄无关(P>0.05)。PBRM1和P21的表达呈正相关(P<0.05)。结论:PBRM1和P21表达水平与子宫内膜癌组织的病理分级和临床分期的增高而增高,对其进行监测对子宫内膜癌的诊断、治疗及预后有指导意义。

PBRM1和P53在子宫内膜癌中的表达及其与病理分期的相关性研究

目的:探讨PBRM1和P53在子宫内膜癌中的表达及其与病理分期的相关性,为临床诊断子宫内膜癌提供参考建议。方法:采用免疫组化法对60例子宫内膜癌患者的癌组织、癌旁组织及20例正常子宫内膜组织中的PBRM1和P53蛋白表达阳性率进行测定,并比较不同分期与PBRM1和P53蛋白表达阳性率的相关性。结果:子宫内膜癌组织中的PBRM1和P53蛋白(++)、(+++)比例均明显高于癌旁组织和正常组织(P<0.05);癌旁组织中的PBRM1和P53蛋白(++)、(+++)比例均明显高于正常组织,且差异有统计学意义(P<0.05)。PBRM1和P53蛋白表达阳性率具有相关性(P=0.00,r=0.722)。结论:子宫内膜组织中的PBRM1和P53蛋白表达阳性率变化可以早期诊断子宫内膜癌并判断其病理分期,PBRM1和P53与子宫内膜癌的病理分期呈正相关,两者可能还具有协同作用。

肾细胞癌PBRM1表达缺失抑制CD8^(+)T细胞浸润

[目的]探讨PBRM1调控CD8^(+)T在肾透明细胞癌组织中细胞浸润的分子机制。[方法]以肾透明细胞癌患者肿瘤临床标本为研究对象,探讨CD8^(+)T细胞在人肾癌中的浸润及其与临床病理特征的关系,以免疫印迹、荧光免疫、ELISA等分子生物学方法明确PBRM1调控CD8^(+)T细胞浸润的分子机制。免疫荧光检测CD63、EZH2及PHK26在细胞中的分布。免疫印迹检测IFN-γ,IL-6和TNF-α不同因子处理对肾癌细胞EZH2的诱导表达。实验结果经GraphPad Prism软件,t检验对两组间差异进行统计学分析。[结果]肾透明细胞癌组织免疫组化结果显示,在肿瘤组织中CD8^(+)T细胞浸润数量显著性下降(P<0.001),CD8^(+)T细胞浸润与患者总生存期呈正相关(P<0.001)。患者肿瘤组织PBRM1着色和CD8^(+)T细胞浸润数量结果显示:PBRM1表达与CD8^(+)T细胞浸润数量呈正相关(P<0.001)。IFN-γ,IL-6和TNF-α细胞因子促进EZH2在细胞表达升高,同时被外泌体包载被运输到受体细胞,外泌体EZH2进入受体细胞抑制CXCL9和CXCL10细胞因子分泌。[结论] PBRM1缺失激活exo-EZH2/CXCL9(10)信号轴抑制CD8^(+)T细胞肿瘤组织浸润。

胃癌组织PBRM1基因缺失/突变的临床病理意义和分子改变

目的探讨胃癌布罗莫结构域1(PBRM1)基因改变及其相关的临床病理特征和分子改变。方法应用cBioPortal(258例)及LinkedOmics(393例)数据集统计分析PBRM1基因缺失/突变与胃癌临床病理参数、预后及分子改变的关系。收集2016-01-01-2016-12-31南京医科大学附属无锡人民医院233例胃癌组织通过免疫组化法进行初步统计验证。结果公开数据库显示,胃癌中PBRM1缺失/突变占9.30%(24/258),其PBRM1 mRNA表达显著减少,LogFC=-0.538,P<0.001。PBRM1缺失/突变与富集分析的拷贝数(χ^(2)=11.063)及甲基化(χ^(2)=24.056)、CpG岛甲基化表型(CIMP)类别(χ^(2)=23.635),MLH1沉默(χ^(2)=22.437)、微卫星稳定(MSI)状态(χ^(2)=35.696)、分子亚型(χ^(2)=38.125)、ARID1A突变(χ^(2)=23.689)、超突变(χ^(2)=31.404)以及PIK3CA突变(χ^(2)=29.917)有显著关联性,均P<0.01.PBRM1 mRNA表达与其启动子甲基化呈显著负相关,Pearson相关系数=-0.359,P<0.001。PBRM1突变与免疫抑制分子细胞程序性死亡配体1(PDL1;CD274)及细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)mRNA高表达显著相关,LogFC分别为0.898和0.683,均P<0.001。PBRM1基因突变患者预后较好,χ^(2)=-0.501,P=0.231。病例收集验证部分显示,233例中34例(14.6%)PBRM1表达缺失,并与错配修复(MMR)蛋白丢失显著相关,χ^(2)=8.592,P=0.003;与p53异常表达显著负相关,χ^(2)=-4.414,P=0.036。PBRM1表达缺失患者预后显著较好,χ^(2)=3.958,P=0.047。结论PBRM1基因异常在-部分胃癌亚群中可能具有重要的致癌作用及预后意义,PBRM1基因异常检测及相关机制的应用可能成为胃癌的新型预后标志物及治疗策略。