PCA3调控miR-185对霍奇金淋巴瘤细胞L428增殖和凋亡的影响

目的探讨PCA3对霍奇金淋巴瘤细胞L428增殖和凋亡的影响及可能机制。方法收集39例霍奇金淋巴瘤患者淋巴瘤组织和正常瘤旁组织,RT-qPCR检测组织中PCA3和miR-185表达水平。体外培养淋巴瘤L428细胞,分为si-NC组、si-PCA3组、si-PCA3+NC组、si-PCA3+miR-185 inhibitor组,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,RT-qPCR法检测PCA3和miR-185表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证PCA3和miR-185的调控关系。结果淋巴瘤组织中PCA3的表达升高,miR-185的表达降低(P<0.05);转染si-PCA3可抑制细胞增殖,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡。PCA3靶向负调控miR-185表达。共转染si-PCA3、miR-185 inhibitor可降低转染si-PCA3对细胞增殖、细胞周期、凋亡的作用。结论干扰PCA3表达可靶向负调控miR-185抑制淋巴瘤细胞L428增殖,并促进L428细胞凋亡。

尿液中PCA3 mRNA和融合基因TMPRSS2:ERG mRNA的检测在前列腺癌早期临床诊断中的应用

目的研究前列腺按摩后尿液中PCA3 mRNA联合融合基因TMPRSS2:ERG亚型T1E4 mRNA的定量检测在早期前列腺癌临床诊断中的应用价值。方法收集前列腺癌(PCa)患者53例和前列腺增生(BPH)患者37例,收集前列腺按摩后尿液,离心取细胞沉淀物,提取总RNA,用实时荧光定量RT-PCR的方法检测PSA mRNA、PCA3 mRNA和T1E4 mRNA的含量,以PSA mRNA来校正尿液中的前列腺癌细胞。以PCA3 mRNA/PSA mRNA表示PCA3 mRNA的含量,以T1E4 mRNA/PSA mRNA表示融合基因T1E4 mRNA的含量。用ROC曲线对T1E4 mRNA及PCA3 mRNA诊断PCa的性能进行分析。结果尿T1E4 mR-NA/PSA mRNA比值诊断PCa的ROC曲线下面积(AUC)为0.802(95%CI:0.709～0.895),以0.007为截断值时,其诊断前列腺癌的敏感度和特异度分别为56.6%和94.6%。尿PCA3 mRNA/PSA mRNA比值诊断PCa的ROC曲线下面积(AUC)为0.646(95%CI:0.533～0.758),以0.001为截断值时,其诊断前列腺癌的敏感度和特异度为47.2%和73.0%。PCa组PCA3 mRNA(P=0.009)及T1E4 mRNA(P=0.000)的含量均高于BPH组,T1E4 mRNA联合PCA3 mRNA定量检测的敏感度为81.1%,比单独应用PCA3 mRNA和T1E4 mRNA检测的敏感度分别提高了33.9%和24.5%。结论前列腺癌按摩后尿沉渣中可以检测到TMPRSS2:ERG亚型T1E4 mRNA,联合PCA3 mRNA和T1E4 mRNA两个指标定量检测,可以显著提高检出前列腺癌的敏感度。此联合检测方法可以用于早期的前列腺癌诊断。

长链非编码PCA3靶向miR-194影响前列腺癌细胞增殖和凋亡行为

目的:探讨长链非编码PCA3靶向miR-194的表达通过ERK信号通路对前列腺癌细胞增殖和凋亡的作用及机制。方法:q PCR检测PCA3和miR-194在不同前列腺癌细胞中的表达情况;双荧光素酶报告基因检测PCA3与miR-194的相互作用;克隆形成实验和凋亡实验检测抑制PCA3后前列腺细胞增殖能力和凋亡行为的变化,及过表达miR-194后前列腺细胞增殖能力和凋亡行为的变化;Western blot检测抑制PCA3后ERK信号通路蛋白的表达水平及过表达miR-194后ERK信号通路蛋白的表达水平变化。裸鼠体内成瘤试验检测PCA3对前列腺癌细胞成瘤能力的影响。结果:与其他前列腺癌细胞相比,LNCa P细胞中PCA3的表达水平最高,miR-194的表达水平较低;双荧光素酶试验证实PCA3可以调控miR-194的表达及活性,抑制PCA3的表达可以减弱前列腺癌细胞的增殖能力,加强其凋亡行为;过表达miR-194后前列腺癌细胞的增殖能力和凋亡行为得到一定的恢复;抑制PCA3的表达可以下调ERK信号通路的蛋白表达,抑制ERK信号通路的激活;同时过表达miR-194后可以逆转PCA3对ERK信号通路的抑制作用。抑制PCA3的表达后可以有效减弱前列腺癌细胞的体内成瘤能力。结论:PCA3可以靶向调节miR-194通过ERK信号通路调控前列腺癌细胞的增殖和凋亡行为。

前列腺癌标志物PCA3的研究进展

前列腺癌是男性泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤,患者多数无明显临床症状,常在直肠指检时偶然发现,也可在前列腺增生手术标本中发现。早期诊断、及时治疗是提高前列腺癌患者疗效的重要措施。但目前对前列腺癌的早期筛查仍停留在检测血清前列腺特异性抗原(PSA)水平上,而PSA对于前列腺癌诊断的特异性不高,存在一定局限性。近年研究发现,前列腺癌抗原基因3(PCA3)可能为前列腺癌的特异性标志物。本文就该领域的前沿进展做一小结。

外周血中PCA3基因表达及其在前列腺癌诊断中的意义

目的探讨PCA3对活检阴性的前列腺癌(Pca)临床诊断的应用价值研究。方法收集2011年01月至2012年12月间在我院就诊病理诊断为前列腺癌及前列腺增生患者。同时纳入健康的男性志愿者为正常对照。对所有监测对象,采用荧光定量PCR检测外周血PCA3 mRNA的表达。结果共纳入66例做为对象,其中前列腺癌患者26例,良性前列腺增生共30例,正常对照组10例。健康男性及前列腺增生患者外周血均无PCA3基因的表达,前列腺癌患者有21例表达,PCA3表达阳性率为80.8%(21/26)。前列腺癌组与健康组及增生组均有明显统计学差异(P<0.01)。PCA3阳性率与PCa临床病理差异无统计学意义,但PCA3基因的表达与PCa临床病理参数差异有统计学意义。结论PCA3基因在外周血的mRNA表达在前列腺癌诊断上有良好特异性。

lncRNA PCA3高表达促进前列腺癌细胞增殖、迁移并抑制细胞凋亡

目的探究lncRNA PCA3高表达在前列腺癌细胞中的功能。方法将构建的含有PCA3全长的pc DNA3.1质粒及对照瞬时转染PC3细胞,提取细胞总RNA进行反转录,并采用实时定量PCR检测转染效率;采用MTS的方法检测PCA3高表达对细胞增殖能力的影响;利用Transwell实验检测PCA3高表达对细胞迁移能力的影响;采用流式细胞仪检测PCA3高表达对细胞凋亡的影响。结果高表达后lncRNA PCA3、PC3细胞的增殖、迁移能力增强,UV诱导的凋亡降低。结论 lncRNA PCA3高表达可以促进PC3细胞的恶性表型。

环巴胺对人前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡作用及对PCA3基因表达的影响

目的:探讨环巴胺对人前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡的作用及对PCA3基因表达的影响。方法:不同浓度环巴胺(1、5、10、15μmol/L)干预LNCaP细胞,以只加入RPMI 1640培养液为空白对照组,分别在不同作用时间(24、48、72h),用MTT法检测其对细胞增殖的抑制、流式细胞术观察细胞凋亡率变化、Hoechst染色观察凋亡细胞形态变化、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)观察对PCA3基因表达的影响。结果:5、10、15μmol/L环巴胺对LNCaP细胞增殖均有显著抑制作用,与空白对照组相比差异有显著性(P<0.01),10μmol/L组于48h达到半数抑制量(IC50);10、15μmol/L组24、48、72hLNCaP细胞的凋亡率分别为37.21%、57.38%、57.98%和21.16%、71.31%、72.90%,与空白对照组相比差异均有显著性(P<0.01)。随着环巴胺浓度增大和作用时间的延长,LNCaP细胞凋亡显著增加。PCA3基因的表达随着环巴胺浓度的上升呈现明显的递减趋势,较空白对照组显著降低(P<0.01)。浓度为10μmol/L时,不同作用时间PCA3基因的表达均极低。结论:环巴胺浓度为10、15μmol/L作用48、72h时能够明显抑制LNCaP细胞的增殖,诱导细胞凋亡,并显著下调LNCaP细胞PCA3基因的表达。

LncRNA PCA3在甲基丙烯酸环氧丙酯诱导16HBE恶性转化细胞中的表达及意义

目的:探讨长链非编码RNA PCA3(LncRNA PCA3)在甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)诱导的16HBE恶性转化细胞中的表达水平及意义。方法:收获经8μg/mL GMA诱导的第30代16HBE恶性转化细胞及同代龄DMSO溶剂对照组细胞,应用高通量LncRNA芯片比较两组样本表达谱的差异,通过差异倍数、邻近编码基因信息分析等策略初步筛选出16HBE恶性转化细胞中LncRNA PCA3及其最可能的相关蛋白编码基因PRUNE2,采用实时荧光定量PCR(qPCR)和全基因组表达谱芯片分析LncRNA PCA3和PRUNE2的表达量,并与同代龄DMSO对照组细胞比较。结果:LncRNA芯片结果显示,与同代龄DMSO组相比,GMA诱导的16HBE恶性转化细胞中LncRNA PCA3上调7.17倍,PRUNE2下调2.54倍;qPCR结果显示,与同代龄DMSO组[(1.36±0.44)×10^(-5)]相比,GMA诱导的恶性转化细胞[(2.67±0.63)×10^(-5)]中LncRNA PCA3表达上调(P<0.05);全基因组表达谱芯片显示,16HBE恶性转化细胞的PRUNE2表达量(10.95)较DMSO组(19.46)明显下调,与LncRNA芯片结果一致。结论:LncRNA PCA3可作为GMA诱导的16HBE恶性转化细胞中相关特异分子标志之一。

前列腺癌特异性基因DD3^(PCA3)的研究进展

DD3PCA3 是一种非编码RNA的基因 ,定位于 9q2 1～ 2 2染色体。它为前列腺癌特异性基因之一 ,DD3PCA3 mRNA仅在前列腺癌细胞中表达 ,而在其他正常组织和癌组织以及细胞系中均不表达。现就DD3PCA3 基因结构和功能、DD3PCA3 mRNA实验室检测技术以及临床意义作一综述。DD3PCA3 mRNA有望成为前列腺癌早期诊断和预后监测的有价值标志物。

前列腺癌基因3(PCA3)与前列腺癌的研究进展

前列腺癌是男性泌尿外科系常见的恶性肿瘤之一,但其诊断缺乏特异性标志物。近年为发现前列腺基因3(PCA3)是前列腺癌特异性的基因之一。作者就PCA3的研究现状做一综述。

PCA3特异性启动TRAIL诱导前列腺癌PC3细胞凋亡效应研究

目的研究PCA3启动子调控TRAIL/TNFSF10的真核表达载体在体外特异性诱导前列腺癌PC3细胞凋亡效应。方法已构建好pHBAd-PCA3-TRAIL重组质粒及对照组质粒转染前列腺癌PC3细胞及对照组细胞,MTT法及流式细胞术检测各组凋亡效应,RealTimePCR及Westernblot检测TRAIL表达情况及DR5、caspase-8水平。结果各组质粒成功转染靶细胞,体外实验可观察到实验组细胞活力明显低于各对照组,差距有统计学意义;进一步检测显示仅实验组导入的TRAIL基因可特异性表达且DR5、caspase-8水平明显升高。结论pHBAd-PCA3-TRAIL在前列腺癌PC3细胞中特异性表达TRAIL,并激活DR5、caspase-8相关通路在体外对前列腺癌PC3细胞表现出特异性诱导凋亡作用,为后续前列腺癌治疗研究中基于PCA3启动子相关探索打下基础。

前列腺癌患者PCA3 mRNA的表达及其临床意义

目的:评价PCA3在前列腺癌诊断、临床分期及Gleason评分中的临床应用价值。方法:选取2005年11月～2006年9月在我院住院的前列腺癌患者56例,其中T2期12例,T3期21例,T4(N0～3,M0～1)期23例;Gleason评分5～7分27例,8～10分29例;BPH患者23例,健康男性9例。分别获取其外周血及前列腺按摩液,采用RT-PCR方法检测两种体液标本中PCA3的表达阳性情况,使用SPSS12.0统计软件包对其结果进行分析。结果:BPH和对照组两种体液标本未见PCA3阳性表达,而PCa患者外周血标本PCA3阳性率为88.9%(48/54),前列腺按摩液标本PCA3阳性率为81.3%(39/48),差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:两种体液标本PCA3的阳性表达有明显的前列腺癌特异性,并且随着前列腺癌的临床分期增高,其阳性率越高,有望成为诊断前列腺癌的新肿瘤标志物和判断预后的指标。

PCA3在前列腺癌患者前列腺按摩后尿液中的表达

目的检测PCA3在前列腺癌(PCa)患者前列腺按摩后尿液中的表达情况,并讨论其临床意义。方法从56例PCa患者、23例良性前列腺增生(BPH)患者和9例健康男性志愿者(对照组)前列腺按摩后初始尿液中分离细胞,采用RT-PCR方法检测其中PCA3的表达情况。结果BPH和对照组未见PCA3阳性表达,而PCa患者PCA3阳性率为81.3%(39/48),两者差异具有统计学意义(P<0.01)。结论前列腺按摩后尿液中PCA3的检测有望成为早期诊断PCa的一种较敏感的方法,也有望成为PCa治疗后监测的一种方法。

PCA3基因在前列腺组织发育中的表达

探索PCA3基因在前列腺组织发育过程中的表达情况。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)方法检测18例胎儿、27例良性前列腺增生(BPH)患者和15例前列腺癌(PCa)患者前列腺组织中的PCA3 mRNA、AMACR mRNA和PSA mRNA的表达情况。结果在胎儿前列腺组18例标本中均未检测到PCA3 mRNA的表达,不同胎龄组(13～17周、18～21周、22～25周)中PSA mRNA含量无统计学差异(P>1.05),13～17周组与18～21周组、13～17周组与22～25周组中AMACR mRNA含量都有显著性差异(P<0.05),18～21周组与22～25周组AMACR mRNA含量无统计学差异(P>0.05)。胎儿前列腺组、BPH组和PCa组中的AMACR mRNA和PSA mRNA含量逐步增加,且差异有统计学意义(P<0.05)。PCA3基因在胚胎组织中不表达,在前列腺肿瘤时过表达,提示PCA3基因可能是作为前列腺肿瘤发生时的重要的调节基因。而AMACR和PSA基因在胚胎组织中表达,只是在前列腺肿瘤发生时过表达。

PCA3联合mMRI在前列腺癌诊断中的意义

目的探讨前列腺癌基因3(prostate cancer gene 3,PCA3)和多参数磁共振成像(multiparametric magnetic resonance imaging,mMRI)对前列腺癌的诊断意义。方法对56例首次穿刺结果为阴性但PSA持续升高的患者在第二次穿刺活检之前行PCA3和mMRI检查。评估PCA3评分和mMRI对前列腺癌诊断的准确性和可靠度及其对前列腺穿刺结果的预测性。结果 mMRI结果显示20例(35.7%)患者具有前列腺癌特征;PCA3评分(截断值为35时)显示15例(26.8%)患者疑为前列腺癌;前列腺穿刺活检结果显示23例(41.1%)患者确诊为前列腺癌。PCA3和mMRI对前列腺癌诊断的敏感性和特异性分别为67%、49%及74%、89%。结论 mMRI增加了PCA3对前列腺癌诊断的准确性和敏感性,可以减少不必要的前列腺穿刺。

前列腺特异性抗原测定PCA3基因表达在前列腺癌诊断中的应用价值

中国前列腺癌发病率呈现为持续增长的趋势,根据流行病学调查数据显示,自1993年的每10万男性人口1.71人逐渐增长到了2010年每10万男性人口14.2人,年增长幅度达到了13%。根据该增长比例推算,预计到2020年,我国前列腺癌的发病率将超过40/10万人,成为严重危害男性健康的主要杀手。

前列腺癌特异基因PCA3的研究进展

前列腺癌（carcinoma of prostate）在欧美国家发病率极高,在高龄男性仅次于肺癌,但在我国比较少见,随着人均寿命的不断增长,近年发病率迅速增加。前列腺癌多数无明显临床症状,常在直肠指检时偶然被发现,也可在前列腺增生手术标本中发现。临床上大多数前列腺癌患者因转移病灶引起的症状来就诊如骨痛、脊髓压迫神经症状及病理性骨折，已经处于前列腺癌的晚期，失去治疗的最佳时机，往往预后不良容易复发。

前列腺腺癌中DD3(Pca3)基因的表达及其意义

目的评价DD3(Pca3)检测在前列腺腺癌活检标本病理诊断中的应用价值。方法观察DD3(Pca3)基因在196例前列腺腺癌和相关疾病前列腺标本中的原位杂交表达情况。结果在149例前列腺腺癌病例中,DD3(Pca3)染色阳性率为94.6%,染色情况与Gleason评分、患病年龄、血清总PSA值的关系无统计学意义。52例癌周有前列腺上皮内肿瘤(PIN)4,7例DD3(Pca3)阳性;149例腺癌癌巢周18例DD3(Pca3)阳性。在42例良性前列腺增生(BPH)中1例DD3(Pca3)阳性(2.38%)。结论 DD3(Pca3)是诊断前列腺腺癌有价值的阳性标记物。

CgA和PCA3的表达在前列腺癌患者诊断中的应用研究

目的探讨血液及尿液中CgA、PCA3的表达在列腺癌患者诊断中的临床应用意义.方法采用随机数字表法随即抽取62例患者和62例健康受检者,试验组为前列腺癌患者,对照组为健康受检者,对两组受检者血液及尿液中CgA、PCA3进行定量检测,讨论其在前列腺癌患者的诊断中的临床意义.结果前列腺癌组的CgA、PCA3阳性表达率明显高于对照组的健康受检者,且前列腺癌患者CgA值会随着病情的进展而增加,健康受检者CgA值基本不变,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 CgA、PCA3的组织特异性阳性表达可对前列腺癌的诊断提供可靠的依据,可以成为前列腺癌的肿瘤标志物,显著提高前列腺癌诊断的敏感度,值得进一步推广.

PCA3在前列腺癌中的应用研究进展

目的PCA3是新型且理想的前列腺癌标志物,且血液、尿液和精液中均可检测到PCA3的表达,对诊断前列腺癌的特异度也非常高,本文将对PCA3在前列腺癌中的应用情况进行综述。