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PCV2a-ORF3基因缺失株感染性克隆的构建 被引量:7
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作者 湛洋 胡意 +2 位作者 王东亮 蔡杰 邓治邦 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期351-355,共5页
为构建猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的感染性克隆及其ORF3缺失的感染性克隆,本研究通过比较分析Gen Bank中8种亚型的PCV2基因组序列(各3株),设计了PCV2基因全长克隆引物,以从江西省萍乡市某猪场疑似感染断奶仔猪多系统衰竭综合征病死猪的病料... 为构建猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的感染性克隆及其ORF3缺失的感染性克隆,本研究通过比较分析Gen Bank中8种亚型的PCV2基因组序列(各3株),设计了PCV2基因全长克隆引物,以从江西省萍乡市某猪场疑似感染断奶仔猪多系统衰竭综合征病死猪的病料中提取的DNA为模板,利用PCR方法扩增PCV2全长基因序列并进行测序。利用分子生物学软件对测序结果分析,结果表明所获得的克隆为PCV2a-2A基因型。采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增病毒全长基因组DNA,克隆于p SP72载体中构建野生型PCV2a病毒株感染性克隆。此外,采用SOE-PCR方法,缺失野生型PCV2a感染性克隆中的阅读框3(ORF3),并将这两种重组质粒分别转染PK15细胞,盲传6代后经PCR和间接免疫荧光方法检测显示,构建的PCV2a病毒株与PCV2a-ORF3突变株克隆均具有感染性。本研究为进一步探究ORF3基因对PCV2致病机理和免疫原性的影响奠定了基础。 展开更多
关键词 PCV2 ORF3基因 基因缺失 重叠延伸PCR
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PCV2d的出现给商品化PCV2疫苗(PCV2a和PCV2b)带来的新挑战 被引量:2
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作者 张坤 刘小兵 《今日养猪业》 2019年第3期83-85,共3页
近几年证实了业内PCV2b向2d的基因型变化,并且PCV2d成了主要流行基因型,甚至在临床PCV2阳性样本中占比高达73%。那么,目前的商品化疫苗集中在PCV2b和2a两个基因型,是否对PCV2d有很好的交叉保护?
关键词 PCV2d 基因型 疫苗免疫 交叉保护
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PCV2a、PCV2b和PCV2d多重PCR检测方法的建立及应用
3
作者 谭健梅 赵雨欣 +10 位作者 黄艳玲 周小汇 陈媛 雷磊 罗施乐 郝裕波 杜红梅 雷红宇 苏建明 王乃东 湛洋 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期896-904,共9页
为了建立一种能够快速鉴别PCV2a、PCV2b和PCV2d的方法,本研究针对PCV2a、PCV2b和PCV2d这3个基因型分别设计3组特异性引物,通过构建阳性标准质粒,筛选出最适引物组合,建立了一种PCV2分型的多重PCR检测方法,并对该方法进行优化后,开展特... 为了建立一种能够快速鉴别PCV2a、PCV2b和PCV2d的方法,本研究针对PCV2a、PCV2b和PCV2d这3个基因型分别设计3组特异性引物,通过构建阳性标准质粒,筛选出最适引物组合,建立了一种PCV2分型的多重PCR检测方法,并对该方法进行优化后,开展特异性、灵敏度、重复性试验以及临床样品检测。结果显示,利用筛选出的最适引物组合建立了多重PCR检测方法,能特异性扩增出3个目的条带:PCV2a(321bp)、PCV2b(190 bp)和PCV2d(561 bp),探索出最佳退火温度和循环数分别为60℃和25个,与其他病原(PPV、PRV、PEDV、TGEV、PRRSV、CSFV)无交叉反应;对构建的阳性标准质粒的最低检测拷贝数为103copies;同一模板的3次重复性试验结果一致;检测2个猪场流行的PCV2基因型毒株,并通过测序和进化分析进一步验证了该检测方法的准确性。结果表明,本研究建立的多重PCR检测方法有助于开展PCV2a、PCV2b和PCV2d的快速鉴别诊断,为PCV2的防控以及流行病学研究提供了技术支持。 展开更多
关键词 pcv2a PCV2b PCV2d 共感染 多重PCR
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鉴别检测PCV2a与PCV2b的PCR的建立与应用 被引量:4
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作者 朱雪蛟 白娟 +1 位作者 王先炜 姜平 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期50-56,共7页
为了快速鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)的2个基因型PCV2a与PCV2b,根据PCV2a和PCV2b基因序列特征,设计PCR引物,成功建立了鉴别检测PCV2a与PCV2b的PCR,并进行了敏感性试验和特异性试验。结果显示,该方法对PCV2a和PCV2b的敏感性分别为9.74fg/μL... 为了快速鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)的2个基因型PCV2a与PCV2b,根据PCV2a和PCV2b基因序列特征,设计PCR引物,成功建立了鉴别检测PCV2a与PCV2b的PCR,并进行了敏感性试验和特异性试验。结果显示,该方法对PCV2a和PCV2b的敏感性分别为9.74fg/μL和16.3fg/μL;与猪细小病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等没有交叉反应性。用该方法对采自我国华东地区的125份断奶仔猪多系统衰竭综合征病猪的淋巴组织样品进行检测,结果显示,单独感染PCV2a占8.0%(10/125),PCV2b占41.6%(52/125),PCV2a或PCV2b共感染占50.4%(63/125)。选取PCV2a或PCV2b单独感染的淋巴结组织病料进行病毒分离和全基因序列分析,结果分离获得4株PCV2b和1株PCV2a,与该鉴别PCR的检测结果一致,说明本研究建立的PCR可以有效鉴别PCV2a与PCV2b,具有较高的特异性和敏感性,可用于断奶仔猪多系统衰竭综合征病猪的临床样品中PCV2的快速检测。 展开更多
关键词 pcv2a PCV2b PCR
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保育仔猪猪圆环病毒2型和副猪嗜血杆菌混合感染的诊疗
5
作者 薛翼鹏 吴忻 《天津农业科学》 CAS 2024年第6期44-48,共5页
为查清山西省吕梁市中阳县某猪场从山东购买的保育仔猪大量出现的急性死亡、关节发炎、呼吸困难、高热等症状的病原,无菌采集病猪并带回实验室进行临床剖检,随后采集血液、淋巴结、肺、肾脏和脾脏进行实验室诊断,做出初步判断,制定综合... 为查清山西省吕梁市中阳县某猪场从山东购买的保育仔猪大量出现的急性死亡、关节发炎、呼吸困难、高热等症状的病原,无菌采集病猪并带回实验室进行临床剖检,随后采集血液、淋巴结、肺、肾脏和脾脏进行实验室诊断,做出初步判断,制定综合防治策略,病情得到控制。本研究采用灵敏度和准确度较高的实时荧光PCR技术定性检测病料样品中的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、非洲猪瘟病毒(ASFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)和副猪嗜血杆菌(HPS)。结果表明:中阳县某猪场保育仔猪为PCV2与HPS混合感染。基于诊断结论对保育猪免疫治疗程序和消毒进行合理调整,综合防治13 d后,猪群无新增发病率和新增死亡率,最大程度地减少了经济损失。本研究为猪场后续的治疗与预防提供了诊断依据。 展开更多
关键词 保育仔猪 猪圆环病毒2型(PCV2) 副猪嗜血杆菌病(HPS) 混合感染 诊疗
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猪圆环病毒2型和3型检测方法建立及初步应用 被引量:2
6
作者 李桐 赵润泽 +5 位作者 李博天 李春琪 王妍 郭利伟 杨小林 刘国平 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第2期151-159,共9页
为快速检测并鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)病毒。本文研究参考GenBank中PCV2和PCV3高度保守片段分别设计了探针引物,成功建立了一种双重TaqMan荧光定量检测方法。结果显示:该方法特异性好,可鉴别PCV2、PCV3与其他猪病... 为快速检测并鉴别猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)病毒。本文研究参考GenBank中PCV2和PCV3高度保守片段分别设计了探针引物,成功建立了一种双重TaqMan荧光定量检测方法。结果显示:该方法特异性好,可鉴别PCV2、PCV3与其他猪病病毒;PCV2最低检测下限为1.00×10^(1)copies/μL,PCV3最低检测下限为1.00×10^(0)copies/μL;重复性高,批内、批间的变异系数分别为0.01%~0.02%和0.02%~0.05%;本研究采用建立的方法与商品试剂盒同步检测猪只样品440份,PCV2样品符合率为97.47%,PCV3样品符合率为96.85%;测序结果显示,PCV2均为2d亚型,PCV3均为3c亚型。结果表明,建立的双重TaqMan荧光定量检测方法具有良好的特异性、敏感性且快速、准确,节约成本,可为PCV2和PCV3的监测与防控提供技术支撑。 展开更多
关键词 PCV2 PCV3 双重TaqMan qPCR方法建立 混合感染
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昆虫杆状病毒表达的猪圆环病毒2d型Cap蛋白-VLP对仔猪的免疫保护效果
7
作者 王亚文 张亚楠 +4 位作者 袁晨 任静 苏恺 杨柳 宋勤叶 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期76-84,共9页
猪圆环病毒2d基因型(Porcine circovirus type 2d,PCV2d)为猪场当前流行的PCV2优势基因型,为了研究针对PCV2d基因型的病毒样颗粒(Virus-like particle,VLP)疫苗,提高猪圆环病毒病的防控效果。本研究利用杆状病毒表达系统表达了能够自组... 猪圆环病毒2d基因型(Porcine circovirus type 2d,PCV2d)为猪场当前流行的PCV2优势基因型,为了研究针对PCV2d基因型的病毒样颗粒(Virus-like particle,VLP)疫苗,提高猪圆环病毒病的防控效果。本研究利用杆状病毒表达系统表达了能够自组装为VLP的PCV2d-Cap蛋白,然后将9头21日龄健康仔猪随机分为VLP组、攻毒对照组和空白对照组(n=3)。VLP组的每头仔猪经颈部肌肉注射400μg Cap蛋白-佐剂复合物(PCV2d-VLP),攻毒组注射等体积的PBS与佐剂混合物,空白组注射等体积的PBS。共接种2次,每次间隔14 d。于第2次免疫后21 d,VLP组和攻毒对照组的仔猪通过鼻腔感染PCV2 HBDX-2018株(106TCID50/头),评价PCV2d-VLP诱导的免疫效果。结果表明PCV2d-VLP能够诱导仔猪产生高水平的特异性IgG抗体和中和抗体,刺激IFN-γ水平升高,引起外周血淋巴细胞增殖能力增强,降低病毒经鼻腔和直肠的排毒率及病毒血症阳性率,减轻腹股沟淋巴结和脾脏的病理损伤,降低组织中的病毒载量。上述研究表明,应用杆状病毒表达的PCV2d-Cap蛋白能自组装为VLP,并能诱导仔猪产生良好的免疫保护效应,具有进一步开发为PCV2d-VLP疫苗的潜力。 展开更多
关键词 PCV2d CAP蛋白 病毒样颗粒 杆状病毒 免疫效果
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表达PCV2 ORF2的重组T7噬菌体在猪体内的存留分析
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作者 杨柳 牟豪 +5 位作者 吕林丹 胡霞 许国洋 郑华 张邑帆 沈克飞 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第8期38-43,共6页
为了检测经颈部肌肉注射入猪体的、表达猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白(ORF2)的重组T7噬菌体(T7-ORF2)在体内的存留情况,本试验将PCV2抗原和抗体均为阴性的20日龄仔猪随机分为试验组和对照组,每组5只;试验组猪只以1.5mL/只剂量颈部肌肉注... 为了检测经颈部肌肉注射入猪体的、表达猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白(ORF2)的重组T7噬菌体(T7-ORF2)在体内的存留情况,本试验将PCV2抗原和抗体均为阴性的20日龄仔猪随机分为试验组和对照组,每组5只;试验组猪只以1.5mL/只剂量颈部肌肉注射增殖收获的T7-ORF2,对照组猪只以相同途径注射等体积的洗脱液;于注射前1 d、注射后10 h、1~7 d测量体温,观察猪只的临床症状和死亡情况;分别于注射后1 h、3 h、5 h、10 h、1 d、3 d、5 d和7 d采集猪只的血液和粪便样品,注射后10 h、1 d、3 d、5 d和7 d采集肝脏、脾脏和腹股沟淋巴结样品;将收集的各样品处理上清与宿主菌(大肠埃希菌BLT5403株)混合培养,通过细菌裂解分析T7-ORF2的感染性;以细菌裂解液提取的基因组DNA为模板进行PCR,检测ORF2基因;通过免疫组织化学检测T7-ORF2在肝脏、脾脏和腹股沟淋巴结中的分布和存留时间。结果显示,试验组猪只在试验期体温、采食、饮水和精神状态正常,无不良症状和死亡发生;注射后5 d能从血清和粪便中检测到感染性的T7-ORF2;注射后3 d能从肝脏、脾脏和腹股沟淋巴结中检测到感染性的T7-ORF2;从细菌裂解液中可扩增检测到PCV2 ORF2基因片段;免疫组织化学切片观察结果显示,T7-ORF2在机体中逐渐被清除,在脾脏中存留至少5 d,在肝脏和腹股沟淋巴结中存留至少7 d。结果表明,T7-ORF2可进入猪只的血液循环、肝脏、脾脏和腹股沟淋巴结中,并随粪便排出体外。本试验为利用T7-ORF2深入开发PCV2新型疫苗提供数据支撑。 展开更多
关键词 重组T7噬菌体 猪圆环病毒2型(PCV2) 肌肉注射 检测 疫苗
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猪圆环病毒2型感染性克隆的构建及拯救病毒的双抗体夹心ELISA鉴定
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作者 贺紫琴 宁李纳 +6 位作者 范杰 凌同 刘甜甜 李欣 陈志雄 黎满香 葛猛 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第7期95-101,共7页
旨在构建猪圆环病毒2型(PCV2)感染性克隆,并利用双抗体夹心ELISA对拯救病毒进行鉴定。通过PCR从阳性病料中扩增出PCV2两种基因型2b与2d的全基因组DNA,并分别克隆入pMD-19T载体,获得2个重组质粒,命名为p19T-PCV2b与p19T-PCV2d。利用Sac... 旨在构建猪圆环病毒2型(PCV2)感染性克隆,并利用双抗体夹心ELISA对拯救病毒进行鉴定。通过PCR从阳性病料中扩增出PCV2两种基因型2b与2d的全基因组DNA,并分别克隆入pMD-19T载体,获得2个重组质粒,命名为p19T-PCV2b与p19T-PCV2d。利用SacⅡ酶切获得l 767 bp的PCV2全基因组,并在体外分别用T4连接酶连接而环化,将环状基因组转染至PK-15细胞,传至P6代,利用间接免疫荧光试验(IFA)对拯救病毒进行鉴定,结果表明PCV2b与PCV2d感染性克隆可拯救出病毒。利用PCV2单克隆抗体(单抗)作为捕获抗体,用辣根过氧化酶(HRP)标记的PCV2多抗作为检测抗体,建立检测PCV2病毒粒子的双抗体夹心ELISA方法,用于PCV2拯救病毒的鉴定。将该检测方法与IFA和半数组织细胞感染量(TCID_(50))结果进行对比分析,结果显示,ELISA检测值与Image-J所计算的IFA荧光强度及TCID_(50)的相关系数分别达到0.7和0.8以上,说明该方法与IFA及TCID_(50)检测结果均具有较强的一致性,可以用于PCV2拯救病毒的快速鉴定。 展开更多
关键词 PCV2 感染性克隆 ELISA
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PCV2a/2b灭活疫苗与PCV2b亚单位疫苗免疫效力比较试验 被引量:3
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作者 董林 王艳萍 +2 位作者 唐娜 王金良 沈志强 《畜牧与兽医》 北大核心 2015年第4期116-119,共4页
比较猪圆环病毒(PCV)2a、PCV2b基因型全病毒灭活疫苗和PCV2b亚单位疫苗对PCV2b基因型强毒株免疫攻毒保护效力。取3种类型PCV2疫苗,分2次免疫PCV2抗原和特异性抗体阴性的BALB/c小鼠和14日龄仔猪,间隔21d,分别于免疫后14、21和35 d进行PCV... 比较猪圆环病毒(PCV)2a、PCV2b基因型全病毒灭活疫苗和PCV2b亚单位疫苗对PCV2b基因型强毒株免疫攻毒保护效力。取3种类型PCV2疫苗,分2次免疫PCV2抗原和特异性抗体阴性的BALB/c小鼠和14日龄仔猪,间隔21d,分别于免疫后14、21和35 d进行PCV2特异性ELISA抗体测定。使用临床分离鉴定的PCV2b基因型强毒株进行攻毒,通过攻毒前后临床观察、体温变化、平均相对日增重及PCV2核酸载量检测等对疫苗免疫效果进行评价。结果:不同类型PCV2疫苗免疫BALB/c小鼠后14 d能检测到PCV2特异性抗体,在35 d时抗体水平持续升高,其中PCV2b亚单位疫苗产生抗体水平高于全病毒灭活疫苗;不同类型疫苗均能刺激仔猪产生较好的免疫应答,其中PCV2b亚单位疫苗刺激机体免疫应答强于灭活疫苗;仔猪免疫攻毒试验表明,3种类型疫苗均可刺激机体产生抵御PCV2强毒攻击的特异性免疫应答,免疫组体温变化、相对日增重及PCV2核酸载量检测均与攻毒对照组间存在显著性差异,3种类型疫苗之间差异不显著。试验表明:3种类型PCV2疫苗免疫小鼠和仔猪后均能诱导产生抵御PCV2b基因型强毒攻击的特异性免疫应答反应,有效抵抗PCV2感染和提高猪的生长性能。 展开更多
关键词 PCV2 灭活疫苗 亚单位疫苗 疫苗效力
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血凝试验和反向间接血凝试验定量检测PCV2 Cap抗原的研究 被引量:2
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作者 李晶梅 谢红玲 +8 位作者 薛霜 李文静 黄涛 王焕君 刘项羽 张飞雁 朱薇 李婷婷 石宝兰 《中国兽药杂志》 2024年第1期1-5,共5页
为研究能否用血凝和反向间接血凝方法定量检测重组杆状病毒表达的PCV2 Cap抗原,分别使用不同稀释液和不同的动物红细胞测定PCV2Cap抗原的凝集效价,同时使用PCV2Cap单抗致敏绵羊红细胞,检测PCV2Cap抗原、空杆状病毒、CSFV等的反向间接血... 为研究能否用血凝和反向间接血凝方法定量检测重组杆状病毒表达的PCV2 Cap抗原,分别使用不同稀释液和不同的动物红细胞测定PCV2Cap抗原的凝集效价,同时使用PCV2Cap单抗致敏绵羊红细胞,检测PCV2Cap抗原、空杆状病毒、CSFV等的反向间接血凝效价(RIHA效价)。结果显示,用猪、鸡、绵羊红细胞在不同稀释液条件下测得的同一批次PCV2Cap抗原凝集效价为3log2~9log2,说明PCV2Cap抗原可凝集猪、鸡、绵羊红细胞,但红细胞不同、稀释液不同,测得的PCV2Cap抗原凝集效价也不同。使用PCV2Cap单抗致敏绵羊红细胞,测得的PCV2Cap抗原RIHA效价为14log2,且纯化后和未纯化的PCV2Cap抗原的RIHA效价均与ELISA定量检测结果有平行关系;空杆状病毒、CSFV、PRRSV、PRV、PEDV、TCEV的RIHA效价均小于1log2。说明反向间接血凝方法可定量检测重组杆状病毒表达的PCV2Cap抗原,该方法敏感、特异,适用于疫苗生产中的PCV2Cap抗原的定量检测。 展开更多
关键词 PCV2 Cap抗原 反向间接血凝 血凝 红细胞
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猪圆环病毒2型相关疾病常见问题解析与对策
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作者 李彦超 降浩琳 白挨泉 《广东畜牧兽医科技》 2024年第3期77-82,共6页
PCV2是猪圆环病毒相关疾病的首要致病因子,会引起断奶仔猪多系统性衰竭综合征(PMWS)、繁殖障碍(PCV2-RD)以及猪皮炎肾病综合征(PDNS)等疾病,给养猪生产造成巨大的经济损失。该文从PCV2的流行特点、免疫存在问题以及对策等进行分析和讨论... PCV2是猪圆环病毒相关疾病的首要致病因子,会引起断奶仔猪多系统性衰竭综合征(PMWS)、繁殖障碍(PCV2-RD)以及猪皮炎肾病综合征(PDNS)等疾病,给养猪生产造成巨大的经济损失。该文从PCV2的流行特点、免疫存在问题以及对策等进行分析和讨论,旨在为养猪生产人员提供PCVD的防控思路。PCV2主要存在猪场流行率高、种猪群亚临床感染普遍、保育及育肥前期感染压力大、精液和初乳垂直传播等流行特点。种猪场的亚临床感染会引起仔猪PCV2的早期感染;保育及育肥前期感染压力大的主要原因是仔猪出现早期感染、母源抗体干扰、初乳摄入量不足、免疫抑制等;后备母猪的引种混乱和免疫驯化不到位,会导致后备母猪繁殖障碍及后代的早期感染;公猪精液受到PCV2的污染,会引起母猪的繁殖障碍,同时助推了PCV2在猪群中的流行。因此,对于PCVD的综合防控,需要从后备母猪、基础母猪、仔猪以及公猪出发,制订出适合猪场的免疫程序;配合减少交叉寄养、减低保育舍群体规模和密度、减少使用带毒精液、以及选择合适的消毒剂和消毒程序等管理措施,尽量减低PCV2带来的危害。 展开更多
关键词 PCV2 流行特点 免疫 问题解析 对策
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湖南省某育肥猪场4种主要疫病的病原和抗体检测及分析
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作者 丁振宇 陈媛 湛洋 《今日养猪业》 2024年第2期17-21,共5页
【目的】对湖南省某育肥猪场新引仔猪进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的血清学和病原学调查,旨在了解猪群中各病毒的抗体水平和病原感染情况,为猪场的疫病防控和净化提... 【目的】对湖南省某育肥猪场新引仔猪进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的血清学和病原学调查,旨在了解猪群中各病毒的抗体水平和病原感染情况,为猪场的疫病防控和净化提供科学依据。【方法】采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采集的81份血清样本进行抗体检测;并随机抽取30份抗凝全血样本提取核酸后使用商业化qPCR检测试剂盒进行病原检测。【结果】血清学调查结果显示,81份血清样本中CSFV抗体阳性率为13.58%(11/81),PRRSV抗体阳性率为95.06%(77/81),PRV-gE抗体阳性率为0.00%(0/81),PCV2抗体阳性率为93.82%(76/81);病原调查结果显示,CSFV病原阳性率为0.00%(0/30),PRRSV病原阳性率为90.00%(27/30),PRV病原阳性率为0.00%(0/30),PCV2病原阳性率为80.00%(24/30)。批次猪群CSFV抗体水平未达到国家规定标准(> 70.00%),且存在PRRSV和PCV2感染。对该批次猪群紧急补免CSF(猪瘟)活疫苗,接种疫苗2周后再次随机抽取81份血清样本进行抗体检测,CFSV抗体阳性率为27.16%(22/81),仍未达到国家规定标准(> 70.00%)。【结论】该批次猪群中存在PRRSV和PCV2的感染,这可能导致猪只免疫抑制,导致CSF疫苗的免疫失败。结果提示该猪场需做好PRRSV和PCV2的防控与净化,定期监测猪场常见疫病的抗体水平和病原感染情况,优化免疫方案,加强生物安全,保障猪场正常生产活动的开展。 展开更多
关键词 抗体检测 CSFV PRRSV PRV PCV2
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五种常用猪2型圆环病毒疫苗的效果比较与分析
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作者 邓清文 秦乐娟 +3 位作者 胡泽奇 徐舟 王江平 李润成 《湖南畜牧兽医》 2024年第1期25-28,共4页
为了比较不同厂家疫苗对圆环病毒2d亚型(PCV2d)的防控效果,试验将相同批次的28 d龄断奶仔猪525头,分成5组,每组105头,分别接种A、B、C、D和E五个厂家的PCV2疫苗。免疫前从每个组中挑选15头断奶仔猪,采血监测PCV2抗体,根据抗体结果再将... 为了比较不同厂家疫苗对圆环病毒2d亚型(PCV2d)的防控效果,试验将相同批次的28 d龄断奶仔猪525头,分成5组,每组105头,分别接种A、B、C、D和E五个厂家的PCV2疫苗。免疫前从每个组中挑选15头断奶仔猪,采血监测PCV2抗体,根据抗体结果再将小猪均衡调配至各疫苗组并标记为后续跟踪监测对象,于60、88、97、107、117、127、137、149、158和181 d龄进行采血监测PCV2感染情况。试验前称取并记录各组猪只的重量,试验期间记录猪只的死淘情况和饲料消耗量,试验后再次称重并计算日增重和料重比。结果显示:感染后各时间点血液PCV2抗原的阳性率整体上,疫苗D组>疫苗A组>疫苗E组>疫苗B组>疫苗C组;死淘率和料重比,疫苗C组<各疫苗组;日增重,疫苗C组>各疫苗组;疫苗C组猪只的血液PCV2抗原阳性率低、病毒血症维持时间短、死淘率低(8.57%)、日增重高(0.738 kg/d)、料重比低(2.644)。说明疫苗C相较其他厂家的疫苗效果更好,更能有效防控PCV2d型毒株的感染。 展开更多
关键词 PCV2d 疫苗免疫 病毒血症 日增重 料重比
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四川地区一株PCV2的分离鉴定及基因组序列分析 被引量:1
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作者 陈劲松 郭紫晶 +2 位作者 黄雄挺 张志东 李彦敏 《四川畜牧兽医》 2024年第2期23-27,共5页
为了解猪圆环病毒2型(PCV2)当前流行分离株的基因型和进化特征,本研究对PCV2阳性临床样品进行分离鉴定,并对分离毒株进行全基因组序列扩增、测序及遗传进化分析,利用MegAlign7.0和DNAstar软件对分离株ORF2基因编码的Cap蛋白进行氨基酸... 为了解猪圆环病毒2型(PCV2)当前流行分离株的基因型和进化特征,本研究对PCV2阳性临床样品进行分离鉴定,并对分离毒株进行全基因组序列扩增、测序及遗传进化分析,利用MegAlign7.0和DNAstar软件对分离株ORF2基因编码的Cap蛋白进行氨基酸变异分析和抗原指数预测分析。测序结果显示,PCV2分离株(SMU-2022)的全基因组序列长度为1 767 nt。全基因组和Cap蛋白的遗传进化树结果均显示分离株属于PCV2d基因型,与国内外46株参考毒株的相似性在91.8%~99.1%之间,其中与QZ1410毒株的相似性最高,亲缘关系最接近。关键氨基酸位点变异分析表明,在Cap蛋白上有2个氨基酸特异性突变位点,分别是V30L和T232K。抗原指数分析发现,分离株的Cap蛋白抗原指数与4株疫苗株相比差异较大,主要集中在第20-30、40-75、90-100、130-140、195-205、210-220位氨基酸这6个区域。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型(PCV2) ORF2基因型 CAP蛋白 抗原指数 遗传进化分析
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猪圆环病毒2型重组亚单位疫苗抗原纯化工艺优化和佐剂筛选
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作者 冯英伟 孙涛 《上海畜牧兽医通讯》 2024年第1期6-10,共5页
为优化重组毕赤酵母表达PCV2 Cap的纯化工艺和筛选佐剂。对破碎压力、循环次数、PEG相对分子质量、PEG终质量分数、pH和NaCl浓度进行筛选,用BCA(bicinchoninic acid)法测定PCV 2Cap质量浓度,并用电镜负染法观察纯化后PCV2 Cap颗粒。分... 为优化重组毕赤酵母表达PCV2 Cap的纯化工艺和筛选佐剂。对破碎压力、循环次数、PEG相对分子质量、PEG终质量分数、pH和NaCl浓度进行筛选,用BCA(bicinchoninic acid)法测定PCV 2Cap质量浓度,并用电镜负染法观察纯化后PCV2 Cap颗粒。分别用国产白油、MONTANIDE^(TM) IMS 2215 VG ST和ISA 206 VG配制PCV 2Cap佐剂疫苗,测定免疫小鼠血清中的抗体水平。结果显示:高压均质仪设定130MPa、破碎循环2次,酵母细胞破碎率达89.74%;PEG纯化PCV2 Cap的优化条件为5%(终质量分数)PEG6000、pH 7.5、0.20 mol/L NaCl,PCV2Cap回收率可达91%,电镜下观察PCV 2 Cap颗粒完整;MONTANIDE^(TM) IMS 2215 VG ST PCV 2 Cap佐剂疫苗接种小鼠后,抗体水平最高,可达1∶5 120。 展开更多
关键词 毕赤酵母 PCV2 Cap PEG MONTANIDE^(TM)IMS 2215 VG ST
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猪圆环病毒2型和3型引起母猪繁殖障碍的研究进展
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作者 李苏尧 杨青 《湖南畜牧兽医》 2024年第2期56-58,共3页
猪圆环病毒(PCV)是圆环病毒科圆环病毒属的成员,目前已报道发现4种基因型,猪圆环病毒病对全球养猪业造成重大影响。文章重点对猪圆环病毒2型(PCV2)和3型(PCV3)所引起的母猪繁殖障碍进行了综述,旨在进一步提高大家对PCV感染的认识,并为... 猪圆环病毒(PCV)是圆环病毒科圆环病毒属的成员,目前已报道发现4种基因型,猪圆环病毒病对全球养猪业造成重大影响。文章重点对猪圆环病毒2型(PCV2)和3型(PCV3)所引起的母猪繁殖障碍进行了综述,旨在进一步提高大家对PCV感染的认识,并为猪场提高生产效益提供参考。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型(PCV2) 猪圆环病毒3型(PCV3) 繁殖障碍
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一株高病毒载量PCV2毒株的基因组特征及序列分析
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作者 常鑫 蒋智勇 +4 位作者 卞志标 徐民生 杨冬霞 杨傲冰 翟少伦 《广东农业科学》 CAS 2024年第3期124-135,共12页
【目的】了解广东省某猪群中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)流行毒株的遗传进化情况,丰富PCV2分子流行病学数据,为当地PCV2疫苗候选株的选用和研发提供参考。【方法】使用qPCR方法对疑似PCV2的样品进行检测,发现1株具... 【目的】了解广东省某猪群中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)流行毒株的遗传进化情况,丰富PCV2分子流行病学数据,为当地PCV2疫苗候选株的选用和研发提供参考。【方法】使用qPCR方法对疑似PCV2的样品进行检测,发现1株具有高病毒载量的PCV2毒株,命名为GD222858。通过PCR方法进行全基因组分子克隆及遗传进化分析。使用MegAlign软件将该毒株ORF1、ORF2基因编码的氨基酸序列与PCV2同亚型参考毒株进行比对,分析氨基酸序列的相似性;采用DNAStar预测该毒株的Cap蛋白二级结构及B细胞表位,并与4株疫苗株DBN-SX07-2(HM641752)、LG(HM038034)、SH(HM038027)、ZJ(AY686764)的Cap蛋白抗原指数进行比对分析。【结果】GD222858毒株基因组长度为1767 bp。遗传进化分析表明该毒株属于PCV2d亚型。与国内外82株参考毒株的核苷酸相似性为91.4%~99.6%,与越南毒株Han8(GenBank登录号:JQ181600)的亲缘关系最近。在ORF1编码的Rep蛋白处发现多个特异性突变位点F70Y、F77L、W202R、N256S;ORF2编码的Cap蛋白相对保守。Protean预测Cap蛋白的氨基酸第5~18、24~25、39~41、48~49、57~65、99、101、112~114、139~140、145~150、162~165、175~181、188~189、205~211、227~232位置处均可能存在潜在的B细胞表位。GD222858毒株的Cap蛋白抗原指数与4株疫苗株均有差异,在氨基酸45~57、124~132、223~233位置处抗原指数明显高于4株疫苗株,且与疫苗株HM038034差异最大。【结论】GD222858毒株感染猪群的原因可能是Rep蛋白多个位点发生特异性突变及疫苗株选用不当所致。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型(PCV2) 遗传进化分析 ORF1基因 ORF2基因 B细胞表位 抗原指数
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改良的RIHA方法定量检测PCV2 Cap抗原的研究
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作者 谢红玲 李晶梅 +8 位作者 冯钊 雷环城 杨思谊 黄泳芳 刘项羽 程敏华 秦红刚 田丽娜 孙文 《中国兽药杂志》 2024年第10期1-7,共7页
为提高反向间接血凝试验(reverse indirect hemagglutination assay,RIHA)定量检测PCV2 Cap抗原的稳定性和精准性,将RIHA方法改良为:1)将被检样品稀释为几个适宜稀释度,分别做RIHA检测;2)检测孔100%、75%、50%、25%、0%凝集分别记录为4... 为提高反向间接血凝试验(reverse indirect hemagglutination assay,RIHA)定量检测PCV2 Cap抗原的稳定性和精准性,将RIHA方法改良为:1)将被检样品稀释为几个适宜稀释度,分别做RIHA检测;2)检测孔100%、75%、50%、25%、0%凝集分别记录为4、3、2、1、0分,将几个稀释度的被检样品全部检测孔的分数加和;3)同法检测参照品并将参照品分数加和;4)被检样品与参照品总分数对比计算,获得被检样品抗原含量。改良的RIHA方法进行稳定性评价并与ELISA方法做比较。结果显示,改良RIHA方法的批内差异为6.8%~19.4%、批间差异为11.4%~23.6%、检测同一个样品差异系数为8.5%,均优于常规RIHA方法。改良RIHA方法检测纯化前和纯化后的PCV2 Cap抗原共30份,与ELISA方法检测结果比较相关系数为0.9568。研究结果表明,改良的PCV2 Cap抗原RIHA定量检测方法稳定性良好,且与ELISA方法检测结果有相关性,可在PCV2 Cap抗原生产中做定量检测,也可在毒种筛选、生产工艺优化中快速定量检测PCV2 Cap抗原含量。 展开更多
关键词 PCV2 Cap抗原 改良 反向间接血凝试验(RIHA) ELISA 定量检测
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猪圆环病毒病的综合防控
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作者 王景阳 《北方牧业》 2024年第7期35-35,共1页
猪圆环病毒病(Porcine circovirus disease,PCVD)是由猪圆环病毒引起的一种重要的猪类传染病。该病毒包括PCV1至PCV4四种不同基因型,其中PCV2在断奶后多系统衰竭综合征等严重疾病中发挥重要作用,带来了严重的危害。此外,PCV2还与其他临... 猪圆环病毒病(Porcine circovirus disease,PCVD)是由猪圆环病毒引起的一种重要的猪类传染病。该病毒包括PCV1至PCV4四种不同基因型,其中PCV2在断奶后多系统衰竭综合征等严重疾病中发挥重要作用,带来了严重的危害。此外,PCV2还与其他临床疾病如猪呼吸系统疾病、肠炎、生殖障碍、猪皮炎和肾病综合征相关联,对养猪业产生了负面影响。猪圆环病毒病的流行对养猪业产生了严重的危害,包括经济损失和动物福利问题。因此,加强对PCVD的防控工作显得尤为重要。 展开更多
关键词 猪圆环病毒病 不同基因型 防控工作 养猪业 PCV2 猪皮炎 肾病综合征 PCVD
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