17-DMAG对PD-1人源化小鼠肝癌移植瘤的抑制作用

目的 探讨17-二甲基胺乙基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-DMAG)对PD-1人源化小鼠人肝癌移植肿瘤生长的抑制作用。方法 选取30只PD-1人源化小鼠,将HepG2细胞悬液注射于小鼠右侧腹股沟皮下组织,构建人肝癌移植瘤模型;将荷瘤人源化小鼠随机分为3组(每组10只):(1)模型组(注射生理盐水10 mg/kg);(2)17-DMAG组(按25 mg/kg腹腔注射17-DMAG,3次/周);(3)顺铂组(腹腔注射20 mg/kg, 2次/周),实验持续4周。注射结束后测量人源化小鼠移植瘤的长、短径计算体积,测量肿瘤质量计算抑瘤率,同时采用免疫组化方法检测肿瘤组织中CD31(以阳性细胞数计算肿瘤微血管密度(MVD))及血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果 17-DMAG组和顺铂组的肿瘤体积和质量均较模型组显著减小(P<0.05),17-DMAG组的抑瘤率略高于顺铂组,但17-DMAG组和顺铂组肿瘤质量和体积以及抑瘤率均不存在显著性差异。17-DMAG组和顺铂组MVD标记微血管数量及VEGF表达均低于模型组(P<0.05),且17-DMAG组又低于顺铂组(P<0.05)。结论 17-DMAG可显著降低肝癌移植瘤中VEGF的表达,抑制新生血管在肿瘤中发生发展,从而对人源化小鼠肝癌移植瘤发挥抑制作用。

鼻渊舒口服液对CRS模型小鼠鼻窦黏膜IFN-γ及免疫检查点B7-H1/PD-1 mRNA表达的影响研究

目的:探讨鼻渊舒口服液对慢性鼻-鼻窦炎(CRS)模型小鼠γ干扰素(IFN-γ)的影响,并基于协同刺激分子B7同源物l(B7-H1)/程序性死亡因子1(PD-1)免疫检测点探讨其可能机制。方法:将雄性C57小鼠随机分为正常组、假手术组、化学药对照组(克拉霉素,103 mg/kg)和鼻渊舒低、中、高剂量组(鼻渊舒口服液,3.1、6.2、12.4 mL/kg),每组20只。除正常组不作任何处理外,其余各组小鼠均开放上颌窦,假手术组不填充带菌海绵,模型组和各给药组填充带菌海绵以复制CRS模型。自造模后第8周开始,正常组、假手术组和模型组小鼠均灌胃生理盐水0.2 mL,各给药组小鼠灌胃相应药物,每日1次,连续14 d。观察小鼠的鼻部症状和一般情况,采用苏木精-伊红染色法观察小鼠鼻窦黏膜的病理变化;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测小鼠鼻窦黏膜中IFN-γ、B7-H1、PD-1 mRNA的表达情况。结果:正常组、假手术组小鼠未见鼻部异常,鼻窦黏膜上皮及纤毛完整,两组IFN-γ、B7-H1、PD-1 mRNA的相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。模型组小鼠可见流涕且频繁挠鼻、喷嚏,鼻腔内有少量黄色分泌物,脱毛严重;其鼻窦黏膜严重缺损、纤毛脱落,黏膜下层腺体增生,可见淋巴细胞浸润;鼻窦黏膜中IFN-γ、B7-H1、PD-1mRNA的相对表达量均较正常组显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠的鼻部症状、一般情况及鼻窦组织病理学变化均有不同程度的改善,化学药对照组和鼻渊舒中、高剂量组小鼠鼻窦黏膜中IFN-γ、B7-H1 mRNA以及各给药组PD-1 mRNA的相对表达量均显著降低,且鼻渊舒中、高剂量上述指标均显著低于低剂量组,而鼻渊舒高剂量组IFN-γmRNA的相对表达量显著高于中剂量组。鼻渊舒低、高剂量组IFN-γmRNA,低剂量组B7-H1 mRNA以及各剂量组PD-1 mRNA的相对表达量均显著高于化学药对照组(P<0.05或P<0.01);鼻渊舒中剂量组上述指标水平与化学药对照组相当(P>0.05)。结论:鼻渊舒口服液可改善CRS模型小鼠鼻窦黏膜的慢性炎症,其机制可能与通过抑制IFN-γmRNA表达从而干预B7-H1/PD-1 mRNA过度表达有关。

中药软肝饮对HBV转基因小鼠iNKT细胞及其表面PD-1、PD-L1表达的影响

目的:研究中药软肝饮对HBV转基因小鼠iNKT细胞及其表面PD-1、PD-L1表达的影响,探讨中药软肝饮对HBV转基因小鼠抗病毒的作用机制。方法:将50只雌雄各半HBV转基因小鼠随机分为治疗组(高、中、低剂量软肝饮)、模型组、阳性对照组(恩替卡韦分散片)等5组,另用10只非HBV转基因小鼠作为空白对照。药物干预灌胃4周后处死小鼠,观察各组小鼠外周血及肝脏中iNKT细胞及其表面PD-1、PD-L1的表达。结果:与空白对照组相比,模型组小鼠外周血iNKT细胞表达明显降低,iNKT细胞表面PD-1、PD-L1的表达水平明显增高,差异有显著性意义(P<0.01);与模型组相比,治疗后软肝饮高剂量组和阳性对照组小鼠外周血iNKT细胞表达明显增高,iNKT细胞表面PD-1、PD-L1的表达水平有一定程度的降低,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);软肝饮中剂量组小鼠外周血iNKT细胞表达有一定增加,有一定差异性(P<0.05),而iNKT细胞表面PD-1、PD-L1的表达水平无明显变化,无明显差异性;软肝饮低剂量组小鼠外周血iNKT细胞表达及iNKT细胞表面PD-1、PD-L1的表达无明显变化,无明显差异性(P>0.05)。HBV转基因小鼠肝脏中细胞iNKT的表达明显低于空白对照组,iNKT细胞表面PD-1、PD-L1的表达明显高于空白对照组,均有统计学意义(P<0.05);结论:中药软肝饮调控HBV转基因小鼠的免疫机制可能通过阻断iNKT细胞上PD-1/PD-L1信号通路,调控iNKT细胞功能发挥抗HBV作用。

黄芪多糖对Lewis荷瘤小鼠PD-1/PD-L1表达的影响

目的:探究黄芪多糖对Lewis肺癌小鼠的抗肿瘤作用及免疫功能的影响。方法:选取40只雄性C57BL/6小鼠随机分为模型组、阳性药组、黄芪多糖低剂量组和黄芪多糖高剂量组,每组10只。各组使用Lewis细胞建立肺癌小鼠模型。造模成功后阳性对照组小鼠隔日腹腔注射顺铂2 mg/kg;黄芪多糖低剂量组每日灌胃黄芪多糖200 mg/kg;黄芪多糖高剂量组每日灌胃黄芪多糖400 mg/kg。造模给药结束后,计算各组小鼠抑瘤率、脾指数和胸腺指数;流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群比率;ELISA检测血清中干扰素γ(IFN-γ)和白介素-2(IL-2)含量;Western blot法检测脾组织中程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)、肿瘤组织中程序性细胞死亡蛋白配体1(PD-L1)蛋白表达量。结果:黄芪多糖能显著提高抑瘤率,增加肺癌小鼠脾指数和胸腺指数;流式细胞术结果表明黄芪多糖增加CD4^(+)T细胞比率及CD4^(+)/CD8^(+)T细胞比率;酶联接免疫吸附剂测定(ELISA)结果表明黄芪多糖可以升高肺癌小鼠血清中IFN-γ和IL-2含量;Western blot结果表明黄芪多糖可以降低肺癌小鼠脾组织中PD-1和肿瘤组织中PD-L1的蛋白表达量。结论:黄芪多糖可以抑制肺癌小鼠肿瘤生长,提高免疫功能是其可能机制。

罗米司亭对血小板减少性紫癜小鼠BMNC中Notch信号以及PBMC中GATA-3和PD-1表达的影响

目的探究罗米司亭对血小板减少性紫癜(ITP)小鼠骨髓单个核细胞(BMNC)中Notch信号通路,以及外周血单个核细胞(PBMC)中转录因子结合蛋白-3(GATA-3)和程序性细胞死亡受体-1(PD-1)水平的影响。方法48只小鼠随机均分为对照组、ITP组和罗米司亭组。腹腔注射抗血小板抗体建立ITP模型,罗米司亭组皮下注射罗米司亭2μg/kg。分别检测3组小鼠的血小板计数变化情况。使用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot、流式细胞术检测BMNC中Notch和Jagged1,以及PBMC中GATA-3和PD-1水平。结果建模后小鼠血小板计数显著降低(P<0.05),罗米司亭干预第7天和第14天罗米司亭组血小板计数显著高于ITP组(P<0.05)。建模后小鼠BMNC中Notch信号通路表达水平显著升高(P<0.05),罗米司亭组Notch、Jagged1蛋白和mRNA表达水平显著低于ITP组(P<0.05)。建模后小鼠GATA-3 mRNA和PD-1水平显著降低(P<0.05),罗米司亭组GATA-3 mRAN和PD-1水平显著高于ITP组(P<0.05)。结论罗米司亭可提高ITP小鼠血小板计数,并且抑制BMNC中Notch信号通路表达水平,上调PBMC中GATA-3和PD-1表达。

解毒通络生津方对干燥综合征NOD小鼠PD-1/PD-L1信号通路的影响

目的观察解毒通络生津方对干燥综合征(SS)模型NOD小鼠PD-1/PD-L1通路的影响,探讨其作用机制。方法将24只8周龄雌性NOD小鼠随机分为3组,即模型组(Model)、解毒通络生津方组(TCM)、解毒通络生津方加抗PD-L1单抗阻断组(TCM+α-PD-L1),每组8只。另选8只8周龄雌性ICR小鼠作为正常对照组(Ctrl)。12周龄时开始中药干预,TCM组按照每天24.4 g·kg^(-1)解毒通络生津方灌胃,TCM+α-PD-L1组在每天给予24.4 g·kg^(-1)解毒通络生津方灌胃的基础上,腹腔注射抗PD-L1抗体,1周2次,每次100μg,Ctrl组和Model组给予同等剂量的生理盐水灌胃,实验期间记录各组小鼠第9、12、16、20周龄时的日均饮水量,干预8周后,小鼠统一麻醉下摘取颌下腺。HE染色观察各组小鼠颌下腺中炎症细胞浸润情况;流式细胞仪检测小鼠颌下腺CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)PD-1^(+)Treg细胞的表达;Western Blot检测小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达。结果随着小鼠周龄的增长,Ctrl组小鼠日均饮水量基本不变,Model组小鼠的日均饮水量有明显上升趋势,TCM组小鼠日均饮水量下降,TCM+α-PD-L1组小鼠日均饮水量上升;与Model组比较,TCM组炎症细胞浸润灶明显减少(P<0.001);与TCM组比较,TCM+α-PD-L1组炎症细胞浸润增多(P<0.001);与Ctrl组比较,Model组CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)PD-1^(+)Treg的表达降低(P<0.001),与Model组比较,TCM组CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)PD-1^(+)Treg表达升高(P<0.01);与TCM组比较,TCM+α-PD-L1组CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)PD-1^(+)Treg的表达降低(P<0.01);与Ctrl组比较,Model组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达降低(P<0.01);与Model组比较,TCM组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达升高(P<0.01);与TCM组比较,TCM+α-PD-L1组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达降低(P<0.001)。结论解毒通络生津方可能通过PD-1/PD-L1信号通路促进SS模型小鼠Treg细胞活化,上调Foxp3的表达,增强Treg细胞抑制免疫炎症的作用,PD-1/PD-L1可能是解毒通络生津方治疗SS的一个作用靶点。

PD-1人源化小鼠构建繁殖与基因型鉴定

目的探讨PD-1人源化小鼠的繁育与基因型鉴定,为进一步研究相关小分子抑制剂的体内药效评价提供动物模型。方法通过构建PD-1人源化小鼠,获得F1代鼠4只,雌雄交配进行培育繁殖。对每窝仔鼠的数量,存活率等进行记录观察,随后对仔鼠剪尾提取基因组DNA,用PCR法扩增目的基因,然后进行核酸电泳,鉴定基因型。选用F2代纯合型与纯合型雌雄交配,野生型与野生型雌雄交配。结果鉴定的F2代小鼠有野生型、纯合型和杂合型3种基因型。纯合型与纯合型交配获得F3代仔鼠基因型全部为纯合型。野生型与野生型交配获得F3代仔鼠基因型全部为野生型。结论成功筛选出PD-1人源化小鼠纯合子基因型,并有效地进行扩群保种,为今后应用该小鼠模型提供实验保障。

阻断巨噬细胞介导的PD1/PD-L1通路对小鼠结核复发的抑制作用

目的利用功能性PD-L1(programmed cell death ligand-1,PD-L1)单抗阻断巨噬细胞介导的PD1/PD-L1通路,研究其对小鼠结核治疗后复发的免疫干预作用和机制。方法 10~6CFU H37Rv经尾静脉感染C57BL/6雌性小鼠获得结核的急性感染,两周之后分别给予异烟肼(10 mg/kg)和异烟肼联合PD-L1单抗(每只50μg)连续治疗四周,获得潜伏感染,在潜伏期用TNF-α抗体(每只50μg)诱导四周使其复发。通过对各时间点的肺、脾和肝组织病理及荷菌量的定量分析,探讨PD-L1单抗对小鼠活动性结核及结核复发的干预作用。利用体外实验,进一步阐明敲低PD-L1对结核菌感染的巨噬细胞凋亡的影响。结果小鼠感染后,前两周肺、脾和肝荷菌量较高(3~4 Lg CFU/mL)、肉芽肿病变较重,表现为活动性结核,异烟肼和异烟肼联合PD-L1单抗分别治疗四周之后,肺、脾和肝荷菌量均较模型对照组显著性地降低,肉芽肿样病变也显著减轻,但是两个治疗组之间没有显著性的差异。而在复发期,相比较于异烟肼治疗组,异烟肼联合PD-L1单抗治疗组能够显著降低复发期组织荷菌量,减轻病理病变。体外实验证实:用PD-L1抗体或siRNA敲低巨噬细胞上PD-L1,结果发现二者都能能促进结核感染的巨噬细胞凋亡。结论功能性的PD-L1抗体可以抑制结核复发,敲低巨噬细胞上PD-L1或阻断PD1/PD-L1通路能促进巨噬细胞凋亡,提示阻断PD-L1能够有效的协助异烟肼治疗结核病,并且显著地抑制结核的复发。

二苯乙烯苷对MPTP诱导的帕金森病小鼠模型黑质多巴胺转运体的影响

目的:研究2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-o-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4’-tetrahydroxystibene-2-o-β-D-gluco-side,TSG)对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠黑质多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)表达的影响。方法:将1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)注入小鼠腹腔制作PD模型,然后采用爬杆实验和悬挂实验检测小鼠的行为学变化,免疫荧光组织化学法观察黑质DAT阳性神经元数目。结果:行为学检测结果表明:模型组小鼠较正常对照组爬杆时间延长,悬挂能力下降(P<0.01),而TSG干预后可有效缩短小鼠的爬杆时间,并提高其悬挂能力(P<0.05,P<0.01)。免疫荧光结果显示:模型组小鼠黑质DAT阳性神经元的数目明显少于正常对照组(P<0.01),而TSG干预后,小鼠DAT阳性神经元数目的减少降低(P<0.05,P<0.01)。结论:TSG可改善PD小鼠的行为学、提高黑质DAT阳性神经元的存活数目,表明TSG对黑质多巴胺能神经元有一定的保护作用。

多年生藤本豆蛋白对小鼠免疫功能的影响

目的:研究多年生藤本豆蛋白对小鼠免疫功能的影响。方法测定多年生藤本豆蛋白对小鼠淋巴细胞增殖、巨噬细胞吞噬活力及溶血素生成的影响。结果:多年生藤本豆蛋白明显增强B淋巴细胞和T淋巴细胞的增殖,促进小鼠巨噬细胞的吞噬活力和溶血素抗体生成。结论:多年生藤本豆蛋白明显增强小鼠的细胞免疫和体液免疫功能。

烟酸促进小鼠体内胆固醇逆转运

【目的】观察烟酸干预后小鼠血清脂质,血清、肝脏及粪便中3H-胆固醇占注射总量的百分比,探讨烟酸对小鼠体内胆固醇逆转运的影响。【方法】14只C57BL/6小鼠随机分为两组,分别给予普通饲料、烟酸添加饲料喂养4周后,腹腔注射经ac-LDL及3H-胆固醇处理过的小鼠巨噬细胞悬液,单独笼养24 h后取血,酶法测定血清脂质;测定血清、肝脏和粪便中的3H-胆固醇含量。【结果】与对照组比较,烟酸降低小鼠血清总胆固醇、低密度脂蛋白-胆固醇和血清甘油三酯水平,升高高密度脂蛋白-胆固醇14%;肝脏及粪便中的胆固醇流出分别增加19%和21%。【结论】烟酸能促进体内胆固醇逆转运,加速胆固醇由粪便清除,有益于动脉粥样硬化的防治。

丹参口服液对实验性肝损伤的防护作用

实验结果表明,丹参口服液按20g/kg体重、40g/kg体重剂量经小鼠口服(灌胃)给药12天,能明显降低四氯化碳和醋氨酚肝毒剂量所致的小鼠SGPT升高,抑制肝细胞脂质过氧化物丙二醛(MDA)的生成,并能提高肝毒物质中毒小鼠的存活率。提录对实验性肝损伤具有明显的防护作用。此外,本品尚可增加正常小鼠肝糖原、DNA、RNA含量。降低肝细胞总脂的含量。

川芎嗪对MPTP所致小鼠多巴胺能神经元损伤的保护作用及机制

目的探讨川芎嗪对MPTP所致小鼠多巴胺能神经元损伤的保护作用及可能机制。方法C57BL/6J雄性小鼠32只,随机分为4组:生理盐水对照组(NS+NS)、生理盐水组(NS+MPTP)、川芎嗪高剂量组(LT50+MPTP)、川芎嗪低剂量组(LT20+MPTP),每组8只动物。分别采用HPLC法检测纹状体中DA的含量,免疫组化检测黑质中TH阳性细胞数,荧光显色法检测黑质SOD活力、GSH含量。结果LT50+MPTP组纹状体DA含量、黑质DA神经元数量、黑质SOD活力、黑质GSH含量较NS+MPTP组显著增高(P<0.01)。结论川芎嗪对对MPTP所致的小鼠多巴胺能神经元损伤具有保护作用,其保护机制可能与其调节调节小鼠黑质中的SOD、GSH含量有关。

粪便菌群移植通过调节Th17/Treg平衡发挥对帕金森小鼠的保护作用

目的:探讨粪菌移植对Th17/Treg平衡的调控及帕金森病(PD)小鼠的神经保护作用。方法:将18只小鼠均分为正常对照组、粪菌移植对照组及粪菌移植组,后两组采用—方法建立PD模型;粪菌移植组小鼠在建立PD模型后、以正常对照组小鼠的粪便菌悬液灌胃,粪菌移植对照组和正常对照组予生理盐水灌胃;爬杆实验评价小鼠的行动能力,牵引实验评价小鼠肌肉力量及平衡能力;Real-time PCR、Western blot检测小鼠黑质致密部(SNpc)RORγt、Foxp3 m RNA及蛋白表达;免疫荧光双染检测小鼠SNpc中Th17细胞(RORγt+CD4+)及Treg细胞(Foxp3+CD4+)的表达;ELISA检测小鼠纹状体中DA、5-HT的表达以及外周血与SNpc中IL-17A、IL-22、TGF-β、IL-10的表达。结果:与粪菌移植对照组比较,粪菌移植组小鼠爬杆实验中返回到杆底部的时间明显缩短(P<0.01),牵引实验中得分明显增加(P<0.01),小鼠SNpc中RORγt m RNA和蛋白的表达明显下调(P<0.01),粪菌移植组小鼠Foxp3 m RNA及蛋白表达明显上调(P<0.01),小鼠纹状体内DA及5-HT的含量明显升高(P<0.01),小鼠外周血与SNpc中IL-17A与IL-22的含量明显下调(P<0.01),IL-10与TGF-β明显上调(P<0.01),小鼠SNpc中Th17细胞(RORγt+CD4+)的数量有所下调,而Treg细胞(Foxp3+CD4+)的数量有所上调。结论:粪便移植对PD小鼠有神经保护作用,其机制可能与调节Th17/Treg平衡、DA与5-HT含量有关。

内皮抑制素对脓毒症小鼠急性肺损伤的保护作用

【目的】研究内皮抑制素（Endostatin，ES）对脓毒症小鼠急性肺损伤的保护作用及其可能机制。【方法】雄性昆明小鼠（20-22g）150只随机分为假手术组、脓毒症模型组、内皮抑制素干预组，通过盲肠结扎穿孔（Cecalligationandpuncture，CLP）建立脓毒症模型。术后用内皮抑制素（2mg／kg，ip）干预，假手术组及模型组于同时间点给予等量生理盐水。在术后6h、12h留取标本，检测血清肿瘤坏死因子a（TNF—d）、白介素6（IL-6）、血管内皮生长因子（VEGF）水平，同时行肺组织微血管渗漏实验、测肺湿千重比值（W／D），取部分肺组织进行组织病理学分析，并检测肺组织p38MAPK信号通路活化情况。【结果】与脓毒症模型组比较，内皮抑制素能提高脓毒症CLP模型存活率，降低血清TNF-a、IL-6、VEGFc水平，减轻肺组织的微血管渗漏、湿千重比和病理改变，同时抑制脓毒症CLP模型诱导的肺组织p38MAPK的磷酸化。【结论】内皮抑制素对脓毒症小鼠急性肺损伤具有保护作用，其机制可能与内皮抑制素能抑制过度的炎症反应、改善血管通透性及调节p38MAPK信号通路有关。

p38 MAPK蛋白在米诺环素抑制小鼠EAE发病中的表达变化及意义

【目的】探讨米诺环素抑制小鼠实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)发病过程中,p38 MAPK蛋白的表达变化及意义。【方法】将小鼠随机分为对照组、EAE模型组和米诺环素治疗组。在动物发病高峰期取小鼠脑组织和脊髓,行HE组织染色观察病理改变,以及Western Blot方法检测p-p38 MAPK蛋白的表达。【结果】①EAE组脑组织和脊髓有多部位的血管炎,血管周围大量炎性细胞浸润,小血管明显扩张,改变以白质为著。治疗组的血管炎范围、数量及程度均明显减轻。②p-p38 MAPK蛋白在对照组仅有少量表达;在EAE组表达明显升高,达3倍左右;治疗组的表达显著降低,但仍较对照组为高。【结论】p38 MAPK途径可能参与了米诺环素对小鼠EAE发病过程的抑制作用。

补肾解毒方阻断程序性死亡受体1/程序性死亡配体1信号通路对辅助慢性乙型肝炎树突状细胞疫苗抗乙型肝炎病毒的免疫效果与机制研究

目的研究补肾解毒方阻断程序性死亡受体1(PD-1)/程序性死亡配体1(PD-L1)信号通路对辅助慢性乙型肝炎(以下简称乙肝)树突状细胞(DC)疫苗抗乙肝病毒(HBV)的免疫效果与机制。方法将40只BALB/c HBV转基因小鼠按照随机数字表法分为补肾解毒方组、PD-L1抗体组、磷酸缓冲液(PBS)组及联合组4组,每组10只。4组分别予补肾解毒方、PD-L1单克隆抗体、PBS溶液及补肾解毒方联合PD-L1单克隆抗体,持续给药2周后处死小鼠,观察小鼠脾脏组织γ干扰素(IFN-γ)水平、CD8^+T淋巴细胞的PD-1表达情况及乙肝表面抗原(HBsAg)特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的杀伤活性。结果联合组小鼠脾脏组织IFN-γ水平高于补肾解毒方组、PD-L1抗体组、PBS组(P<0.05);补肾解毒方组、PD-L1抗体组小鼠脾脏组织IFN-γ水平高于PBS组(P<0.05);补肾解毒方组与PD-L1抗体组小鼠脾脏组织IFN-γ水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。联合组小鼠脾脏组织CD8^+T淋巴细胞PD-1表达均低于补肾解毒方组、PD-L1抗体组、PBS组(P<0.05);补肾解毒方组、PD-L1抗体组CD8^+T淋巴细胞PD-1表达均低于PBS组(P<0.05);PD-L1抗体组CD8^+T淋巴细胞PD-1表达低于补肾解毒方组(P<0.05)。当效靶比为100∶1、50∶1时,联合组小鼠脾脏组织HBsAg特异性CTL杀伤活性均高于补肾解毒方组、PD-L1抗体组、PBS组(P<0.05);PD-L1抗体组HBsAg特异性CTL杀伤活性均高于补肾解毒方组、PBS组(P<0.05);补肾解毒方组与PBS组HBsAg特异性CTL杀伤活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。当效靶比为25∶1时,补肾解毒方组、PD-L1抗体组、联合组小鼠脾脏HBsAg特异性CTL杀伤活性均高于PBS组(P<0.05);补肾解毒方组、PD-L1抗体组、联合组小鼠脾脏HBsAg特异性CTL杀伤活性两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 HBV感染时阻断PD-1/PD-L1信号通路可起到恢复特异性T淋巴细胞功能的作用,补肾解毒方能有效发挥对HBV感染时的T淋巴细胞免疫功能的调整作用,补肾解毒方联合PD-L1抗体更具明显协同作用。

不同时程MPTP造模小鼠焦虑症状的评价

目的 比较同剂量的1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶制作不同帕金森病模型小鼠的焦虑症状.方法 将60只8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分成6组：急性模型组、急性对照组、亚急性模型组、亚急性对照组、慢性模型组、慢性对照组,每组10只.模型组每次均以20 mg·kg^-1的剂量注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶,急性模型组连续腹腔注射2 d（4次·d^-1）,亚急性模型组连续腹腔注射8 d（1次·d^-1）,慢性模型组连续腹腔注射4周（每周2次）;同时相应对照组以等量生理盐水腹腔注射.造模结束,使用高架十字迷宫和明暗箱检测小鼠的焦虑症状. 结果 高架十字迷宫实验：小鼠进入开臂次数与总入臂次数的百分比及在开臂内运动时间与在开臂闭臂内总时间的百分比,急性模型组与急性对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,亚急性模型组、慢性模型组显著低于相应对照组（P〈0.05或0.01）.明暗箱实验：模型组小鼠进入暗箱次数显著少于相应对照组（P〈0.05或0.01）,停留在暗箱的时间显著长于相应对照组（P〈0.05或0.01）.结论 使用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶亚急性、慢性造模出现的焦虑症状一致性好,是帕金森病伴焦虑障碍的理想模型.

苯扎贝特对小鼠血清屏氧酶-1活性的影响

【目的】观察苯扎贝特对小鼠血清屏氧酶-1(PON1)活性的影响,探讨苯扎贝特抗氧化作用。【方法】C57BL/6小鼠(8周龄)32只,随机分为4组,A组普通饲料饲养;B组普通饲料添加苯扎贝特50mg/(kg·d);C组普通饲料添加苯扎贝特100mg/(kg·d);D组普通饲料添加苯扎贝特150mg/(kg·d)。饲养8周后取血清,以苯乙酸作为PON1的底物,用分光光度仪测定小鼠血清PON1活性。【结果】A组血清PON1活性为[32.71±4.40nmol/(min·mL)],B组干预后小鼠血清PON1活性[33.08±5.78nmol/(min·mL)]稍有增加但差异无显著性,C组、D组小鼠血清PON1活性分别为[66.71±11.41nmol/(min·mL),P<0.01]、[120.97±39.83nmol/(min·mL),P<0.01]均显著高于A组和B组。随着苯扎贝特剂量增加高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈剂量依赖性增加,同时甘油三脂(TG)降低,并观察到血清PON1活性与HDL-C(r=0.472,P=0.02)呈正相关。【结论】苯扎贝特能增加血清PON1活性,提示苯扎贝特具有抗氧化作用,这可能与升高HDL-C相关。

拉帕替尼对人卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤的影响

【目的】探讨新型靶向治疗药物拉帕替尼对人卵巢癌SKOV3裸鼠移植瘤生长的影响。【方法】将人SKVO3细胞株接种于裸小鼠胸壁皮下建立卵巢癌裸小鼠移植瘤模型。随机将其分为空白对照组（A组）和实验组（B组），实验组根据拉帕替尼药物浓度的不同分为两个亚组：100 mg/kg （B1）和200 mg/kg （B2），检测各组拉帕替尼用药前后荷瘤体积及裸鼠体质量的变化。【结果】拉帕替尼可显著抑制SKOV3裸小鼠移植瘤的生长，呈剂量依赖性，B2组抑瘤率显著高于B1组，其差异有统计学意义（P＜0．05），但小鼠体质量用药前后比较无显著性差异（P＞0．05）。【结论】拉帕替尼可显著缩小人卵巢癌细胞株SKVO3裸鼠移植瘤的体积，为卵巢癌新型靶向治疗提供了理论基础。