PD-L1/PD-L2对食管鳞癌细胞恶性表型的影响及耐药研究

目的探讨程序性死亡配体1/2(PD-L1/PD-L2)对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及对化疗药物的敏感性。方法在体外食管鳞癌KYSE150细胞系水平上,分别构建PD-L1杂合子敲除细胞系,慢病毒转染PD-L2过表达,将细胞分为WT组(PD-L1野生型)和PD-L1^(+/-)组(PD-L1杂合子敲除)、Ctrl组(对照)和OE-PD-L2组(PD-L2过表达),用RT-qPCR和Western blot验证PD-L1杂合子敲除和慢病毒转染PD-L2过表达效果以用于后续实验。采用EdU、细胞克隆形成实验、Transwell实验检测各组细胞增殖、迁移和侵袭能力。通过CCK8法检测细胞增殖能力并计算抑制率来评估细胞对化疗药物的敏感性。结果与野生型WT组相比,PD-L1^(+/-)组细胞增殖(P<0.001)、迁移(P<0.01)和侵袭能力(P<0.05)明显降低,差异有统计学意义。与Ctrl组相比,OE-PD-L2组细胞增殖和迁移能力增加(P<0.05),而侵袭能力无明显差异(P>0.05)。在顺铂药物梯度浓度干预下,与WT组相比较,PD-L1^(+/-)组细胞增殖活力明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。当顺铂药物浓度为20μmol/L时,与Ctrl组相比,OE-PD-L2组细胞增殖活力无明显变化(P>0.05),而在40μmol/L药物浓度作用下,与Ctrl组相比,OE-PD-L2组细胞增殖活力显著上升,差异有统计学意义(P<0.001)。加入不同浓度的五氟尿嘧啶后发现,与WT组相比,PD-L1^(+/-)组细胞增殖活力显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与Ctrl组相比,OE-PD-L2组细胞增殖活力显著下降(P<0.01)。比较WT组与PD-L1^(+/-)组特异性表达差异的蛋白,共获得25个差异表达蛋白质,其中差异倍数最为显著的上调蛋白为EGFR(Ser1070),下调蛋白为Smad4。结论PD-L1能够促进食管鳞癌细胞的恶性表型;PD-L2可以促进食管鳞癌细胞(ESCC)的增殖和迁移;PD-L1/PD-L2可以影响肿瘤细胞对顺铂和五氟尿嘧啶化疗药物的敏感性。

共刺激分子PD-L1、PD-L2和B7-H4在人子宫颈癌的表达及意义

目的：研究共刺激分子程序性死亡配体1（Programmed death ligand 1,PD-L1）、程序性死亡配体2（Programmeddeath ligand 2,PD-L2）和B7-H4在人子宫颈癌的表达及其与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学PV-6000法检测PD-L1、PD-L2和B7-H4在10例正常人宫颈组织、10例高级别CIN（CINⅡ~Ⅲ级）和67例子宫颈癌中的表达,并分析3种共刺激分子的表达与子宫颈患者临床病理特征的相关性。结果：正常人宫颈组织上皮不表达PD-L1和B7-H4,而基底层细胞微弱表达PD-L2;CINⅡ~Ⅲ的瘤变宫颈上皮微弱表达PD-L1、PD-L2和B7-H4;子宫颈癌细胞表达PD-L1、PD-L2和B7-H4的阳性率分别为70%（47/67）、51%（34/67）和46%（31/67）。统计学分析显示宫颈癌细胞PD-L1的表达与癌细胞浸润深度明显相关（P〈0.01）,与年龄、组织学类型无关;PD-L2的表达与肿瘤的淋巴结转移（P〈0.05）有关;B7-H4的表达与肿瘤的淋巴结转移（P〈0.05）和局部血管内瘤栓形成（P〈0.05）相关。结论：人子宫颈癌细胞异常表达PD-L1、PD-L2和B7-H4,且与肿瘤浸润和转移密切相关。PD-L1、PD-L2和B7-H4可能成为子宫颈癌免疫治疗的潜在靶点。

表达PD-L1/PD-L2的人胎盘间充质干细胞对外周血T细胞分泌IL-17的拮抗作用

目的探讨程序性死亡因子配体1(PD-L1)和PD-L2在人胎盘源性间充质干细胞(hPMSCs)上表达对外周血T细胞分泌IL-17的影响。方法应用酶消化法分离人胎盘间充质干细胞(hPMSCs),并进行表型及分化鉴定;RT-PCR、激光扫描共聚焦显微镜技术(LSCM)及流式细胞术(FCM)检测hPMSCs上PD-L1及PD-L2的表达;应用化学合成的PD-L1 siRNA、PD-L2 siR-NA沉默hPMSCs上PD-L1及PD-L2表达;密度梯度离心法分离纯化人外周血T细胞;细胞胞内因子染色法分析沉默PD-L1或PD-L2后hPMSCs对PMA活化的T细胞分泌IL-17的影响。结果除PD-L1外,hPMSCs高表达PD-L2;siRNA能够有效阻断PD-L1和PD-L2在hPMSCs上的表达;胞内染色结果显示,hPMSCs能够上调T细胞IL-17的分泌,阻断PD-L1或PD-L2后,T细胞IL-17的分泌被进一步上调,且PD-L1和PD-L2具有叠加作用。结论 PD-L1和PD-L2在hPMSCs上表达,可拮抗hPMSCs刺激外周血T细胞分泌IL-17的作用。

系膜增生性肾小球肾炎患者外周血单个核细胞及肾组织PD-L1/PD-L2的表达变化

目的观察系膜增生性肾小球肾炎患者外周血单个核细胞(PBMC)及肾组织活检标本中抑制性协同刺激分子PD-L1/PD-L2表达的变化。方法收集2007年11月-2008年5月在第三军医大学新桥医院住院的25例原发性系膜增生性肾小球肾炎患者作为病例组,另外选择10例正常人作为正常对照组。全血法多色流式细胞染色技术检测两组的PBMC CD4+和CD8+ T细胞上PD-L1和PD-L2的表达水平;免疫组化方法检测肾组织活检标本中PD-L1和PD-L2的表达情况。结果病例组患者PBMC CD4+ T细胞比例(31.78%±8.48%)明显高于正常对照组(22.17%±8.00%,P<0.05),而CD8+T细胞比例(23.06%±10.32%)与正常对照组(21.56%±5.32%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。病例组患者PBMC CD4+和CD8+ T细胞上PD-L1表达阳性率(分别为14.21%±11.87%、12.92%±12.86%)均较正常对照组(分别为5.39%±4.92%、5.06%±4.61%)显著升高(P<0.05);而两组PBMC CD4+及CD8+ T细胞上PD-L2的表达很少甚至无表达,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。正常对照组中肾组织PD-L1表达很少甚至无表达,病例组肾小管上皮细胞可见PD-L1阳性表达;两组肾活检组织中均未检测到PD-L2表达。结论系膜增生性肾小球肾炎患者中抑制性协同刺激分子PD-L1表达上调,可能参与了疾病的免疫发病机制。

PD-L1和PD-L2在树突状细胞上的表达及其生物学意义

探讨小鼠髓系DC (CD8α )中PD L1和PD L2的表达及其在T淋巴细胞活化中的作用。采用mCD4 0L CHO和TNF α分别刺激凋亡肿瘤细胞负载DC 4 8h ;免疫荧光标记检测DC表型 ;RT PCR和realtime PCR检测PD L1和PD L2mRNA转录水平 ;ELISA测定IL 2的分泌水平 ;3 H TdR掺入试验和51Cr释放试验测定DC体外激发T细胞的增殖和细胞毒杀伤率。结果显示 :PD L1和PD L2随着DC的成熟呈上调表达 ,CD4 0配基化DC的PD L1和PD L2均为中度表达 ,TNF α激发的DC为高度表达 ,二者呈现差异性表达 (P <0 0 5 ) ;CD4 0配基化髓系DC分泌IL 2的量明显高于TNF α组 (P <0 0 5 ) ,体外刺激T增殖和激活CTL能力在CD4 0配基化DC组最高 (P <0 0 5 )。提示CD4 0配基化的小鼠髓系DC呈现PD L1和PD L2的中度表达 ,IL 2大量分泌 。

猪PD-1及其配体PD-L1和PD-L2 SYBR Green Ⅰ Real-time PCR检测方法的建立及应用

本试验旨在研究猪PD-1及其配体在疾病状态下的转录水平,建立检测猪PD-1及其配体的Real-time PCR方法。根据GenBank中猪PD-1、PD-L1和PD-L2基因序列,分别设计3对特异性引物,PCR扩增目的基因片段,回收目的基因片段与pMD18-T连接后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞中,提取重组质粒,经PCR及测序鉴定正确,作为标准品绘制标准曲线,并进行特异性和重复性检测。结果显示,Real-time PCR的Ct值与模板浓度对数呈良好的线性反比关系,相关系数R2>0.99,熔解曲线出现狭窄单一峰;Real-time PCR产物经琼脂糖凝胶电泳,呈单一目的条带,无引物二聚体,特异性强;组内和组间重复性检测结果显示,组内和组间的变异系数均小于3%,重复性好;用建立的Real-time PCR方法检测猪自然感染PCV2后PD-1及其配体转录水平,PD-L1和PD-L2转录水平极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05),PD-1转录水平无显著变化(P>0.05)。本试验建立了检测猪PD-1、PDL1和PD-L2mRNA的Real-time PCR方法并进行了初步应用,为猪PD-1、PD-L1和PD-L2基因表达模式研究奠定基础。

人乳腺癌中共刺激分子PD-L1、PD-L2的表达及其临床意义

目的探讨共刺激分子PD-L1、PD-L2在人乳腺癌的表达及其与临床病理特征、预后的相关性。方法采用免疫组化SP两步法检测PD-L1、PD-L2在10例正常乳腺组织、18例乳腺导管内癌和40例乳腺浸润性导管癌中的表达,并分析两种共刺激分子的表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系。结果正常人乳腺腺上皮不表达PD-L1和PD-L2,乳腺导管内癌弱表达PDL1和PD-L2,乳腺浸润性导管癌中PD-L1和PD-L2的阳性率分别为45%(18/40)、35%(14/40),显著高于PD-L1和PD-L2在乳腺导管内癌的表达。统计学分析结果显示PD-L1和PD-L2表达与乳腺癌淋巴结转移(P<0.05)密切相关。PD-L1和PD-L2表达与ER、PR表达(P<0.05)有相关性,但PD-L1、PD-L2表达与乳腺癌其他临床病理特征无相关性。PD-L1和PD-L2表达在ER、PR、HER-2均阴性的乳腺癌患者中高表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论人乳腺癌癌细胞异常表达PD-L1和PD-L2,且与淋巴结转移密切相关;PD-L1和PD-L2有望成为乳腺癌免疫治疗的潜在靶点。

PD-L1mRNA与PD-L2mRNA在口腔扁平苔藓中的表达特点及可能作用

目的:研究PD-L1mRNA、PD-L2mRNA在口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)患者外周血与损害组织,以及在不同临床类型与病理分型中的表达特点。方法:采用实时定量PCR方法检测60例OLP患者(斑纹型35例,充血糜烂型25例;不伴异常增生38例,伴轻度异常增生22例)PD-L1mRNA、PD-L2mRNA表达水平,并以10名正常人外周血与黏膜组织作为对照,比较不同临床类型和病理类型OLP患者间PD-L1mRNA、PD-L2mRNA表达水平差异,并分析PD-L1mRNA、PD-L2mRNA在OLP患者外周血与损害组织中表达的相关性。利用SAS6.12软件包中的非配对两样本均数比较的Wilcoxon秩和检验,比较不同组别间的差异。结果:PD-L2mRNA在OLP患者外周血中表达降低,损害组织中表达升高,且在不同临床类型OLP患者之间存在显著差异(P<0.05)。PD-L1mRNA在OLP组与正常对照组之间的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PD-L2分子可能在OLP患者全身与损害局部对OLP的发生、发展产生不同的影响。

舒尼替尼抑制小鼠骨髓来源树突状细胞表面PD-L1和PD-L2的表达

目的观察小鼠髓源性树突状细胞(DC)在舒尼替尼刺激下,其表面程序性死亡分子1配体1(PD-L1)和PD-L2的表达变化。方法取小鼠骨髓细胞,对照组加入二甲基亚砜,实验组分别加入(100、200、300)ng/m L舒尼替尼,刺激48 h,用流式细胞术检测DC表面PD-L1和PD-L2的表达水平。结果与对照组相比,实验组中成熟DC(m DC)和总DC(包括m DC和im DC)表面PD-L1的表达水平显著降低;表达PD-L1的未成熟DC(im DC)、m DC和DC百分比均显著降低,表达PD-L2的m DC百分比显著降低;表达PD-L2的DC百分比在100 ng/m L、300 ng/m L舒尼替尼组中显著降低。结论舒尼替尼可显著降低小鼠DC表面PD-L1、PD-L2的表达。

卵巢癌组织中PD-L1及PD-L2的表达及其预后判断价值

目的探讨卵巢癌组织中PD-L1及PD-L2的表达及其预后判断价值。方法选择58例卵巢癌石蜡包埋的组织标本,取同期行卵巢囊肿手术的组织标本45例作为良性对照组。2组均用Elivision TM免疫组化方法进行染色,对比PD-L1、PD-L2在卵巢癌及卵巢囊肿组织中的表达;对卵巢癌组织中PD-L1与PD-L2蛋白表达与卵巢癌病理参数的关系、卵巢癌组织中PD-L1与PD-L2与患者术后总生存期的关系进行分析对比。结果卵巢癌组织中PD-L1、PD-L2阳性表达率明显高于卵巢囊肿(P<0.05)。PD-L1、PD-L2在卵巢癌组织中的表达与患者的年龄、FIGO分期有明显相关性(P<0.05),而与患者的细胞分级、肿瘤大小、肿瘤转移不相关(P>0.05)。采用Kaplan-Meier法分析发现,卵巢癌患者PD-L1及PD-L2阴性表达患者的总生存期明显高于阳性表达患者(P<0.05)。结论PD-L1及PD-L2可能参与卵巢癌的发生、发展,可用于卵巢癌的诊断及预后分析。

食管鳞状细胞癌(ESCC)中PD-1/PD-L1/PD-L2的表达与临床因素及预后的相关性

目的检验程序性细胞死亡分子1(programmed cell death-1,PD-1)/PD配体1(PD ligand-1,PD-L1)/PD配体2(PD-L2)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)患者中的表达,并评估其与临床特征及预后的关系。方法收集2007年1月至12月在复旦大学附属中山医院胸外科接受手术治疗的325例食管肿瘤患者的临床数据,通过免疫组织化学染色分析石蜡包埋的肿瘤样品及部分对应的癌旁组织中PD-1、PD-L1和PD-L2的表达,用免疫反应评分并分析其与临床特征及预后的关系。结果 PD-1、PD-L1、PD-L2三者阳性表达率分别为12.0%、52.6%、32.9%,PD-L(P<0.001)、PD-L1(P<0.001)、PD-L2(P=0.023)在癌旁组织和癌组织中的表达有差别。PD-L1的阳性表达与T分期(P<0.001)、术后分期(P=0.006)相关,PD-L2的阳性表达与T分期(P<0.001)、术后分期(P=0.002)及淋巴结转移(P=0.044)相关,与其他临床因素的相关性无统计学意义。PD-1(P=0.500)、PD-L1(P=0.058)、PD-L2(P=0.096)单阳性与患者生存状况均无明显关联。但三者表达均阴性的患者预后要显著优于仅其中一个因子表达阳性(HR=1.669)或二个以上因子表达阳性的患者(HR=1.606)。结论 PD-L1和PD-L2与ESCC患者的多个临床特征有关。虽然PD-1、PD-L1、PD-L2各自与患者预后之间无统计学意义关联,但表达均阴性的患者预后相对较好。

PD-1/PD-L1/2通路在多发性骨髓瘤中的研究进展

多发性骨髓瘤(MM)是一种浆细胞恶性克隆增殖性疾病,近年来,蛋白酶体抑制剂、免疫调节剂在多发性骨髓瘤中的应用明显延长了患者的生存期并提高了生存质量,但因疾病的异质性、易复发及耐药性,目前仍无法治愈。免疫检查点抑制剂如Pembrolizumab、Nivolumab、Pidilizumab、Atezolizumab及Durvalumab等为MM带来了曙光。本文通过回顾近年来国内外的相关文献,综述MM的免疫发病机制、PD-1/PD-L1/2相关的免疫通路及免疫治疗的现状,希望为MM的免疫治疗提供参考。

PD-L1、PD-L2、CD30、CD23和BCL-6在原发纵隔大B细胞淋巴瘤诊断和预后评估中的应用价值

目的探讨治疗相关标志物PD-L1、PD-L2、CD30、CD23、BCL-2、BCL-6、MUM1和GATA3在原发纵隔大B细胞淋巴瘤(PMBL)诊断和预后评估中的应用价值。方法收集PMBL的34例患者进行回顾性研究,31例非纵隔原发的非特指型弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL-NOS)作为对照组,免疫组织化学染色方法检测8种蛋白的表达情况。结果PD-L1、PD-L2和CD30在PMBL组阳性肿瘤细胞百分比的中位数分别为70%(30%,90%)、25%(0,70%)和17.5%(0,60%),显著高于DLBCL-NOS组,差异有统计学意义(P<0.05);CD30和CD23在PMBL组的阳性率分别为61.76%(21/34)和76.47%(26/34),与DLBCL-NOS组之间差异有统计学意义(P=0.000)。伴有CD30或BCL-6表达的PMBL患者生存曲线尽管P>0.05,仍显示出预后差的趋势。结论PMBL中PD-L1、PD-L2和CD30的表达水平较高,有助于精准识别更多可能对免疫或靶向治疗有反应的患者。免疫组织化学标记PD-L1、PD-L2、CD30和CD23有助于PMBL与DLBCL-NOS鉴别诊断。CD30和BCL-6作为PMBL的候选预后指标应该在更大量的样本中进一步研究。

PD-1：PD-L1/PD-L2通路在结核感染中的免疫作用

PD-1:PD-L1/PD-L2通路在肿瘤和某些感染性疾病中发挥免疫抑制作用,而在结核病中的免疫作用尚不明确。结核菌感染后,免疫细胞上PD-1:PD-L1/PD-L2通路高表达,体外实验显示:用该通路的抗体阻断后保护性T细胞增强,而体内免疫作用不明确。PD-1与配体PD-L1结合后可能发挥免疫抑制作用,其中PD-L1表达受Th1细胞因子调控;PD-1与配体PD-L2结合后可能发挥免疫保护作用,其中PD-L2表达受Th2型细胞因子调控。利用Cas9-CRISPR基因敲除方法分别敲除特定免疫细胞上PD-1、PD-L1和PD-L2,可研究PD-1、PD-L1和PD-L2在结核感染中免疫作用及机制,为结核病的防控提供理论依据。

共刺激分子PD-L1、PD-L2和B7-H4在宫颈癌中的表达及病理特征研究

目的:探讨共刺激分子PD-L1、PD-L2和B7-H4在宫颈癌中的表达及病理特征。方法:收治宫颈癌患者35例作为试验组,另选择宫颈上皮组织正常患者34例作为对照组。结果:PD-L1、B7-H4在正常宫颈中几乎不表达,在上皮细胞瘤变组织中PD-L2和B7-H4值与对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05);患者的肿瘤浸润度>10 mm的组织中,PD-L1的表达情况明显高于浸润的深度,其高出的部分≤10 mm(P<0.05);发生淋巴转移患者组织中PD-L2的表达情况明显高于无淋巴转移者(P<0.05);淋巴癌患者的宫颈癌组织中的B7-H4表达情况明显高于淋巴转移者(P<0.05)。结论:宫颈癌患者高表达与肿瘤的淋巴侵袭力以及转移有关,即PD-L1、PD-L2和B7-H4发生高表达现象。

白山毛桃根提取物抑制黑色素瘤M21细胞增殖作用及其机制研究

目的:研究白山毛桃根提取物对黑色素瘤M21细胞增殖影响,并进一步探讨其作用潜在的分子机制。方法:MTT法检测白山毛桃根提取物对M21细胞增殖抑制作用;细胞划痕实验检测M21细胞侵袭迁移力;采用Real-Time PCR及Western blot方法检测M21细胞上免疫共刺激分子Program death ligand 1(PD-L1)、PD-L2基因及蛋白表达变化。结果:白山毛桃根提取物可以抑制M21细胞增殖,有统计学意义(P<0.05),呈时间和浓度依赖性;而在同条件下对人正常上皮色素RPE细胞无抑制作用,无统计学差异(P>0.05);其次该药能抑制M21细胞侵袭迁移能力及明显下调M21细胞上PD-L1、PD-L2基因及蛋白表达。结论:白山毛桃根提取物能抑制M21细胞增殖、侵袭迁移能力,其机制可能是通过下调与肿瘤细胞免疫逃逸密切相关的PD-L1、PD-L2分子基因和蛋白表达而实现的。

B7家族及其受体PD-1在人NK/T细胞淋巴瘤中的表达及临床意义

目的:探讨B7家族及其受体(programmed death-1,PD-1)在人NK/T细胞淋巴瘤(NKTL)中的表达及临床意义。方法:荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative PCR,RQ-PCR)及免疫组织化学SP法检测PD-1及B7家族PD-L1、PD-L2在人NKTL细胞系(SNK-6、YTS)及NKTL组织中的表达,并分析其与临床病理学参数及临床疗效之间的关系。结果:PD-L1和PD-L2mRNA在SNK-6、YTS中的表达明显高于正常NK细胞。PD-L1和PD-L2蛋白在NKTL组织中的表达阳性率(分别为60.0%、63.3%)明显高于鼻炎组织(22.2%、16.7%);NKTL组织中PD-1+肿瘤浸润T淋巴细胞(TIL)数与PD-L1、PD-L2的表达均呈负相关;PD-L1和PD-L2的表达水平与分期均呈正相关,PD-L1与LDH、Ki-67水平呈正相关,PD-L1与IPI评分呈负相关,PD-L1及PD-L2与其他临床病理学参数无显著相关性。PD-L1与治疗疗效呈负相关,而PD-L2与治疗疗效无明显相关性。结论:B7家族及其受体PD-1在人NKTL中高表达且具有一定的临床意义,PD-L/PD-1信号途径可能参与了NKTL的免疫逃逸,有望成为人NK-TL免疫治疗的新靶点。

口腔扁平苔藓组织中PD-L1和PD-L2的表达

目的:探讨PD-L1和PD-L2在口腔扁平苔藓(OLP)组织中的表达及意义。方法:用免疫组化方法检测30例口腔扁平苔藓组织和10例正常黏膜组织中PD-L1、PD-L2的表达,并对其表达与年龄、性别、病程、是否伴有异常增生等进行相关分析,以及对口腔扁平苔藓组织中PD-L1和PD-L2表达的相关性进行分析。结果:PD-L1在OLP组织的表达高于正常黏膜组织,差异有统计学意义(p=0.04),而PD-L2的表达亦高于正常组织,且具有统计学意义(p<0.01)。PD-L1、PD-L2的表达与性别、年龄、病程、临床分型、活检部位、是否伴有异常增生无关(p>0.05)。PD-L1和PD-L2在OLP组织的表达相关性无统计学意义(p>0.05),但在OLP组织上皮层两者表达相关性有显著的统计学意义(R=1.000,p<0.01)。结论:PD-L1和PD-L2在OLP的发生及发展中起重要作用,可能成为治疗OLP的一个新的靶点。

原发性肝癌PD-L1和PD-L2表达

目的研究原发性肝癌和癌旁组织中PD-L1和PD-L2的表达。方法采用组织芯片和免疫组化方法,检测40例HCC、36例癌旁组织PD-L1和PD-L2表达,其中36例HCC和27例癌旁组织有病理临床资料。结果 PD-L1在HCC和癌旁组织中的表达率分别为50%和77.8%(P<0.05),PD-L2的表达率分别为70%和80.6%(P>0.05),未发现PD-L1或PD-L2的表达和年龄、性别、HBV的感染状态、转移等有相关性。配对分析显示PD-L1和PD-L2在癌旁组织的表达有同样的趋势,而HCC中PD-L2表达高于PD-L1。结论HCC中有较高的PD-L1和PD-L2表达率,PD-L1可能在肝癌发病早期起重要作用。

PD-1与其他蛋白质的互作网络分析及验证

目的构建程序性死亡-1(PD-1)及其配体与其他蛋白质的相互作用网络,加深对PD-1信号通路研究的认识,为PD-1及其相关配体的基础及临床应用研究提供理论资料。方法通过PubMed检索PD-1及其配体的研究文献,基于文献挖掘对已报道的与PD-1及其配体存在相互作用的蛋白质进行统计,并以这部分蛋白质进行二次检索及文献挖掘统计,最后用软件Cytoscape构建相互作用网络并进行分析;寻找网络中与细胞迁移有关的分子及其与PD-L1之间的关系,并利用荧光定量PCR及迁移试验进行验证。结果在构建出的PD-1/PD-L1及PD-1/PD-L2分子互作网络中分别共计122个、126个分子,这些分子在T细胞受体信号通路、细胞黏附、JAK-STAT信号通路及细胞因子间相互作用等众多生物过程中起到重要作用;基于互作网络显示,PD-L1会间接影响到CXCR4的表达,这一推测被荧光定量PCR及迁移试验结果所支持。结论通过生物信息学手段对互作网络蕴含的信息进行挖掘发现,PD-1/PD-L1通路与PD-1/PD-L2通路的作用机制存在差异。同时,利用基于文献挖掘及生物信息学的方法研究PD-1信号通路是1种可以合理利用生物文献数据,为实际试验提供指导的好方法。