NLR和SII对PD1/PDL1抑制剂治疗晚期子宫内膜癌患者预后的预测价值

目的 研究中性粒细胞-淋巴细胞比率(NLR)和系统免疫炎症指数(SII)对PD1/PDL1抑制剂治疗晚期子宫内膜癌(EC)患者预后的预测价值。方法 选取2019年11月—2021年11月就诊的146例晚期EC,收集其临床病理资料;以无进展生存期为标准,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算NLR和SII的最佳截断值,根据最佳截断值分为H/L-NLR组、H/L-SII组,计算各组治疗客观缓解率和疾病控制率,绘制生存曲线评价NLR、SII对PD1/PDL1抑制剂治疗晚期EC患者生存的影响。结果 ROC曲线分析结果显示,当NLR最佳截断值为5.71时,诊断敏感度为52.1%,特异度为79.1%;当SII最佳截断值为803.23时,诊断敏感度为85.1%,特异度为59.9%。L-NLR组和L-SII组疾病控制率分别高于H-NLR组和H-SII组(P<0.01)。L-NLR组和L-SII组中位生存期显著长于H-NLR组和H-SII组。结论 NLR和SII预测PD1/PDL1抑制剂治疗晚期EC患者的价值较高,低于最佳截断值的NLR和SII患者预后较好。

PD1/PDL1信号途径在小鼠变应性鼻炎发病中的作用

目的探讨PD1/PDL1信号途径在小鼠变应性鼻炎发病中的作用。方法将24只BALB/c小鼠随机分为四组,每组6只。模型组、PDL1单克隆抗体组、PDL1重组蛋白组均给予卵清蛋白(OVA)诱发变应性鼻炎,PDL1单克隆抗体组和PDL1重组蛋白组再分别给予PDL1单克隆抗体、PDL1重组蛋白处理;对照组在相同时间点给予生理盐水。采用叠加量化记分法进行搔鼻、喷嚏及鼻溢症状评价;采用免疫组化检测鼻黏膜组织PD1、PDL1阳性细胞积分光密度值;采用ELISA法检测血清TGF-β、IL-10、IL-17水平;采用Western blotting法检测鼻黏膜组织调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞17(Th17)特异性转录因子Foxp3、RORγt表达。结果对照组、模型组、PDL1单克隆抗体组、PDL1重组蛋白组行为学评分分别为0、(6.17±0.98)、(7.33±0.82)、(3.17±1.17)分,四组间比较P均<0.01。与对照组比较,模型组、PDL1单克隆抗体组血清TGF-β、IL-10水平降低,血清IL-17水平升高,鼻黏膜组织Foxp3蛋白相对表达量降低、RORγt蛋白相对表达量升高,组间比较P均<0.01。与模型组比较,PDL1单克隆抗体组血清TGF-β、IL-10水平下降,血清IL-17水平增加,PDL1单克隆抗体组鼻黏膜组织Foxp3蛋白相对表达量降低、RORγt蛋白相对表达水平升高;PDL1重组蛋白干预组血清TGF-β、IL-10水平升高,血清IL-17水平降低,鼻黏膜组织Foxp3蛋白相对表达量升高、RORγt相对表达量降低;组间比较P<0.05或<0.01。结论 PD1/PDL1信号通路参与过敏性鼻炎的发生、发展,下调TGF-β、IL-10、Foxp3表达,上调IL-17、RORrt表达,可能是PDL1抑制过敏性鼻炎发生的机制之一。

PD1及PDL1在乳腺癌中的表达变化及其与患者临床病理参数和预后的关系

目的探讨程序性死亡受体1(PD1)及细胞程序性死亡配体1(PDL1)在乳腺癌中的表达情况及其与患者临床病理参数、预后的关系。方法回顾性选取2017年2月至2019年2月新疆维吾尔自治区人民医院收治的乳腺癌患者186例。检测乳腺癌组织和癌旁组织PD1及PDL1表达情况,分析乳腺癌组织PD1及PDL1表达情况及其与临床病理参数、预后的关系。结果乳腺癌组织PD1及PDL1表达阳性率为79.57%、79.57%,均高于癌旁组织(48.39%、22.58%),阴性率为20.43%、20.43%,均低于癌旁组织(51.61%、77.42%),差异均有统计学意义(P<0.05)。组织学分级Ⅱ级、Ⅲ级患者的乳腺癌组织PD1表达阳性率为87.10%、87.18%,高于Ⅰ级患者(56.52%),有淋巴结转移患者的乳腺癌组织PD1表达阳性率为90.48%,高于无淋巴结转移患者(70.59%),差异均有统计学意义(P<0.05)。临床分期Ⅲ~Ⅴ期患者的乳腺癌组织PDL1表达阳性率为93.55%,高于Ⅰ~Ⅱ期患者(72.58%),组织学分级Ⅱ级、Ⅲ级患者的乳腺癌组织PDL1表达阳性率为87.18%、83.87%,高于Ⅰ级患者(60.87%),差异均有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌组织PD1及PDL1表达阳性患者的生存时间为(29.80±1.07)、(30.48±1.03)个月,均短于阴性患者[(34.73±1.22)、(34.04±1.36)个月],3年生存率59.46%、60.81%,均低于阴性患者(94.74%、84.21%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论PD1及PDL1在乳腺癌中的表达阳性率增高,且与患者临床病理参数、预后的关系密切。

PD-L1-Ig融合蛋白的酵母表达及其对T细胞的抑制作用

目的:利用毕赤酵母表达系统表达PD-L1-Ig融合蛋白,检测该融合蛋白的生物学活性。方法:化学合成hPD-L1-IgG4融合基因,构建携带该基因的酵母表达载体,转化GS115酵母菌株后分泌表达融合蛋白,亲和层析和离子交换层析法纯化,SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定。ELISA法检测融合蛋白与受体PD-1的结合能力,混合淋巴细胞反应检测融合蛋白对T细胞功能的抑制能力,51Cr稀释法检测其对CTL杀伤人结肠癌SW480细胞效应的抑制作用。结果:成功构建酵母表达载体pPIC9K-PD-L1-IgG4,转化菌株分泌表达PD-L1-IgG4融合蛋白,相对分子质量为55000,含量为120μg/ml。发酵菌株,纯化制备融合蛋白。融合蛋白与受体PD-1具有良好的结合能力,能够显著抑制T细胞增殖、活化(P<0.01),并抑制CTL对结肠癌细胞的杀伤(P<0.01)。结论:成功制备了酵母表达PD-L1-IgG4融合蛋白,该融合蛋白具有良好的生物学活性,为深入研究其在肿瘤免疫应答中的调控效应奠定了良好基础。

三阴性乳腺癌细胞裂解物通过PD1/PDL1相互作用抑制免疫细胞活性

目的:研究三阴性乳腺癌肿瘤细胞裂解物(TCL)通过PD1/PDL1相互作用对T淋巴细胞系H9凋亡、活化及细胞因子分泌情况的影响。方法:Western blot检测MDA-MD-231、MCF-10A细胞中的PDL1和H9、PBMC中的PD1表达;反复冻融法制备231-TCL,将不同剂量231-TCL作用H9细胞,于不同时间点观察231-TCL诱导细胞凋亡的剂量与时间;适量的231-TCL与PD1/PDL1抑制剂共同作用H9细胞,观察H9细胞凋亡、CD69表达及IL-2、IL-4、TNF-β的分泌。结果:MDA-MD-231、MCF-10A细胞中均有PDL1表达,H9、PBMC中表达PD1;当231-TCL∶H9为2∶1,且作用时间为48 h时,231-TCL可诱导H9细胞凋亡;231-TCL和PD1/PDL1抑制剂联合作用于H9细胞后,H9细胞凋亡减少,CD69表达增加,IL-2、TNF-β分泌增加,IL-4分泌量不变。结论:三阴性乳腺癌TCL通过PD1/PDL1相互作用诱导H9细胞凋亡,抑制其活化及IL-2、TNF-β等细胞因子的分泌。

程序性死亡因子配体1修饰供者DC对大鼠异体胰岛移植存活的影响

目的探讨共刺激信号阻断剂PDL1基因修饰的树突状细胞(dendritic cells,DC)对胰岛移植存活的影响。方法以BN、Lewis大鼠为胰岛移植供、受体;用PDL1(程序性死亡因子配体1)基因重组腺病毒转染供、受体骨髓源性DC使之表达PDL1;将供、受体DC于胰岛移植前24h经股静脉分别注入受体(设为组1、组2),供、受体DC混合后注入受体(组3),注射生理盐水的为空白对照组(组4);观察各组糖尿病鼠高血糖改善情况及存活时间,术后第20天,MTT法检测受体脾细胞对供体及无关抗原刺激的反应。结果与对照组相比,组1和组3血糖维持正常时间和受体存活时间显著延长〔组1:(22.47±11.72)d和(41.25±12.98)d,P<0.01;组3:(37.67±14.71)d和(52.31±15.47)d,P<0.001)〕差异有统计学意义,组2移植胰岛存活时间无延长〔(3.75±1.33)d与(7.33±1.97)d,P>0.05〕差异无统计学意义。术后第20天,组1、组3脾细胞对供体抗原刺激的反应均明显低于正常对照(0.27±0.08和0.23±0.06与0.70±0.09,P<0.001),而对无关抗原刺激的反应与正常对照差异无统计学意义(0.66±0.07和0.66±0.07与0.69±0.05,P>0.05)。结论PDL1基因修饰的供体DC可以明显延长大鼠移植胰岛的存活时间,而受体DC则无此作用,但两种DC联合应用可以使移植胰岛获得更长的存活时间。

清利健脾补肾方对糖尿病大鼠肾和膀胱组织TGF-β、α-SMA、PD1、PDL1蛋白表达的影响

目的:研究清利健脾补肾方对糖尿病大鼠肾和膀胱组织转化生长因子-β(TGF-β)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、程序性细胞死亡受体1 (PD1)及其配体(PDL1)蛋白表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠一次性腹腔注射55 mg/kg链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型。取造模成功的大鼠,随机分为模型组、二甲双胍(100 mg/kg)组及中药低剂量(清利健脾补肾方药液,4.5 g/kg)、高剂量(清利健脾补肾方药液,18 g/kg)组,每组8只。另设8只大鼠为正常组。各组灌胃给予相应药物,连续28 d。干预期间,测量各组大鼠血糖水平。末次给药后,收集大鼠的肾脏和膀胱组织;HE染色后光镜下观察大鼠肾脏和膀胱组织形态学变化;Western blot分别检测大鼠肾脏和膀胱组织TGF-β、α-SMA、PD1和PDL1蛋白表达。结果:(1)干预第14天,二甲双胍组和中药高剂量组大鼠血糖水平较模型组明显降低(P<0.05);干预第28天,二甲双胍组和中药低、高剂量组大鼠的血糖水平较模型组均显著降低(P<0.05,P<0.01),且中药高剂量组血糖水平明显低于低剂量组(P<0.05)。(2)模型组大鼠可见肾小管上皮细胞肿胀和坏死,局部肾小管扩张,肾小球上皮细胞增生;膀胱平滑肌肌细胞肥大,出现间质黏液样变性,且排列紊乱。二甲双胍组和中药低、高剂量组大鼠的病变程度明显减轻。(3)模型组大鼠肾组织TGF-β和α-SMA蛋白表达较正常组显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组相比,二甲双胍组和中药低、高剂量组肾组织TGF-β和α-SMA蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),中药高剂量组PD1蛋白表达亦显著降低(P<0.05),且中药高剂量组PD1蛋白表达较二甲双胍组和中药低剂量组显著降低(P<0.05)。(4)模型组大鼠膀胱组织TGF-β、α-SMA、PD1和PDL1蛋白表达水平较正常组均明显升高(P<0.05);与模型组相比,二甲双胍组和中药高剂量组膀胱组织TGF-β、α-SMA、PD1和PDL1蛋白表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01),中药低剂量组TGF-β、α-SMA和PD1蛋白表达水平明显降低(P<0.05),且中药高剂量组PDL1蛋白表达明显低于低剂量组(P<0.05)。结论:清利健脾补肾方可降低STZ诱导的糖尿病大鼠的血糖水平,减轻肾脏和膀胱组织病理损伤,其作用机制可能与下调肾脏和膀胱组织TGF-β、α-SMA以及膀胱组织PD1、PDL1的蛋白表达水平有关。

干扰程序性死亡分子1及其配体信号通路的免疫治疗

程序性死亡分子1(programmed death-1,PD1)及其配体(programmed death ligand,PDL)属于B7家族的共刺激分子,介导免疫反应的负性调节信号,在肿瘤发生、病毒感染以及自身免疫病中都发挥了特异性的调节作用。利用PD1/PDL1信号途径调节机体的免疫应答从而达到免疫治疗的目的,该文就此展开综述。

左右半结肠癌与Programmed Death-1信号通路

目的探讨程序性杀伤因子1(PD1)信号通路对左、右半结肠癌预后的影响以及在左、右半结肠癌差异中所起到的作用。方法采用数据分析等手段分析左右半结肠癌的差异基因,分析PD1信号通路主要的PD1(PDCD1),PDL1(CD274),PDL2(PDCD1L2)在左右半结肠癌中的表达和预后差异,并采用免疫组化方法对数据分析结果进行验证。结果TCGA数据分析结果显示,左、右半结肠癌差异基因富集于免疫相关信号通路,其中包括PD1信号通路。PDCD1,CD274,PDCD1L2在右半肠癌的表达量显著高于左半肠癌。Kaplan-Meier生存分析显示,右半结肠癌总体生存率(OS)差于左半结肠癌,在PDCD1,CD274,PDCD1L2高表达组,右半结肠癌总体生存率差于左半结肠癌(P<0.05)。免疫组化结果显示PD1,PDL1在左、右半结肠癌中的蛋白表达与TCGA数据分析具有相同的结果,Kaplan-Meier生存分析结果显示PDL1的蛋白表达影响结肠癌的预后,表达量越高总体生存率越低。结论PD1/PDL1信号通路的表达差异影响左、右半结肠癌的预后。

免疫检查点与常见头颈部鳞状细胞癌的临床研究现状

近年来,T细胞免疫检查点信号通路因参与了肿瘤免疫逃逸机制而成为了新的研究热点.T细胞免疫检查点及其配体的表达不仅调控着肿瘤的免疫微环境,也和恶性肿瘤的发生、分期及预后密切相关,还有望成为肿瘤复发和转移的生物学监测指标.目前免疫检查点抑制剂在包括头颈部鳞状细胞癌（head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC）在内的多种实体肿瘤中开展了大量的临床试验,并展示出良好的治疗前景,已经成为肿瘤免疫治疗的新靶点.本文将针对T细胞免疫检查点相关基因及蛋白在HNSCC免疫微环境中的表达、与临床预后相关性及其抑制剂在HNSCC临床免疫治疗中的应用现状作一综述.

结外NK/T细胞淋巴瘤免疫治疗的研究进展

结外NK/T细胞淋巴瘤(ENKTCL)是一组比较少见的高度侵袭性的非霍奇金淋巴瘤。该病临床进展迅速、恶性程度高、预后较差,传统的放化疗方案并没有显示出良好的疗效。近几年来,肿瘤的免疫治疗迅猛发展,目前已在多种实体肿瘤如非小细胞肺癌、前列腺癌、黑色素瘤、肾癌的治疗中展示出了强大的治疗活性,多个肿瘤免疫治疗药物已经获得美国食品药品监督管理局批准上市并应用于临床。本文综述了近年来ENKTCL的新型免疫治疗方案,希望能够改变这种恶性疾病的治疗模式。

Spycatcher作为一种新的高效促溶标签蛋白的探讨

目的探究spycatcher可作为一种新的高效促溶标签蛋白。方法通过分子生物学方法将spycatcher基因与包涵体PD1及MPD1基因融合构建到表达载体PET21a中,然后通过ELISA和fortebio验证其融合蛋白活性。结果 spycatcher与包涵体靶蛋白PD1及MPD1融合后为可溶性表达,融合蛋白纯化后能够与其配体PDL1有效结合。结论 Spycatcher可作为一种新的高效促溶标签蛋白,这将为不可溶表达蛋白的表达纯化带来诸多便利。

细胞焦亡及其在肿瘤治疗中的应用潜能

细胞焦亡(pyroptosis)又称细胞炎性坏死,是由消皮素(gasdermins)介导的细胞程序性坏死,其过程中伴有炎症因子的释放。近年来,关于细胞焦亡的研究取得了较大的进展,细胞焦亡被证实与包括肿瘤在内的多种炎症相关疾病的发生发展关系密切,并展现出在肿瘤治疗中的巨大潜能。该文就细胞焦亡的生物学特点,其在肿瘤CAR-T疗法、抗PD-1治疗和化疗等治疗中的作用及机制进行了讨论,并重点阐述了细胞焦亡相关分子作为恶性肿瘤治疗预后和化疗方案选择的指示因子,以及作为治疗靶点协调免疫治疗、改变微环境增强疗效等方面的应用潜能。