玉米PDI基因家族鉴定和表达模式分析

蛋白质二硫键异构酶(PDI,protein disulfide isomerase)作为硫氧还蛋白家族的一员,是一种氧化还原酶,广泛存在于动物、植物及微生物中。在植物中,蛋白质二硫键的形成和异构主要由二硫键蛋白催化完成,在参与蛋白质正确组装折叠方面至关重要。本研究以拟南芥PDI家族基因序列信息为基础,利用同源序列比对方法,从玉米中鉴定出21个PDI基因,除8号染色体外,非均匀地分布在其余玉米9条染色体上。进化树分析表明,玉米PDI基因家族分为4个进化分支11个发育组,同一发育组的基因结构和保守基序相似。顺式作用元件分析表明,PDI基因家族启动子含响应逆境胁迫、植物激素及胚乳特异表达的顺式作用元件。表达模式分析表明,PDI基因家族在胚、胚乳和籽粒中表达量较高,在授粉后10~20 d的胚乳中表达量呈下降趋势,然后表达量又呈现上升趋势。生物多样性分析发现:ZmPDIL1-1基因存在多样性。亚细胞定位结果表明ZmPDIL1-1定位在内质网。本研究结果为玉米PDI家族基因功能研究提供参考。

PDI自动化检测软件设计

PDI(Pre Delivery Inspection) 售前检查是汽车经销商将新车交付给消费者之前必须履行的检查程序。本文基于传统 PDI 检测流程,提出一种针对整车电控模块的 PDI 自动化检测程序,通过在云端配置数据,VCI 蓝牙与移动端数据交互,实现对车辆简单便捷的故障诊断和功能检测,确保了汽车在总装下线入库到车主提车的 PDI 检测常态化,对交付车辆的产品质量具有显著提升作用。

脆壁克鲁维酵母蛋白二硫化物异构酶KfPDI的结构分析

利用ＤＮＡ限制性内切酶图谱分析将一个带有脆壁克鲁维酵母 （Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｆｒａｇｉｌｉｓ） 蛋白二硫化物异构酶基因（ＫｆＰＤＩ） 的１０ ｋｂ 初始克隆缩短为４ ｋｂ 的亚克隆，并测定了该基因的ＤＮＡ全序列。经分析发现： （１）该基因编码产物由５２０个氨基酸残基组成。（２） 它与乳酸克鲁维酵母（Ｋ． ｌａｃｔｉｓ） 蛋白二硫化物异构酶在氨基酸序列上的同源性为７８。（３） 它与其他物种的ＰＤＩ基因在核苷酸和蛋白质水平上的同源性较弱，

脆壁克鲁维酵母KfPDI基因高表达菌株的构建

通过构建脆壁克鲁维酵母 (Kluyveromycesfragilis)蛋白二硫化物异构酶基因KfPDI强表达单元并克隆到不同类型的酵母载体上转化酵母菌株 ,经筛选得到了带有不同拷贝数KfPDI基因的酵母转化子。酶活性测定结果表明这些转化子中的蛋白二硫化物异构酶表达水平不仅与其KfPDI基因拷贝数有关 ,而且与该基因是否整合入宿主染色体也密切相关。

丹参酮Ⅱ_A对I/R大鼠脑组织GFAP、ATPase与PDI的调控研究

目的:观察丹参酮ⅡA(TanⅡA)对不同时期缺血-再灌注(I/R)的大鼠脑组织GFAP、ATPase与PDI表达的影响,探讨TanⅡA对I/R脑组织的神经保护作用及其分子机理。方法:线栓法建立局灶性脑缺血-再灌注模型,本实验采用64只雄性SD大鼠随机分为假手术组,I/R模型3、7、15 d组及丹参酮ⅡA高、低剂量7、15 d组,实验完成后观察各组脑组织病理学变化,同时用免疫组化法检测脑组织神经胶质原纤维酸性蛋白质(GFAP)、三磷酸腺苷酶(ATPase)及蛋白质二硫化异构酶(PDI)的表达水平。结果:(1)TanⅡA高、低剂量干预7、15 d组脑组织缺血损伤病理学改变明显改善,TanⅡA高剂量组与I/R模型组相比更为显著。(2)I/R模型组GFAP表达增加,TanⅡA高剂量7 d与15 d组和模型组相比较,脑组织GFAP阳性反应显著减弱(P<0.05),TanⅡA高、低剂量组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)TanⅡA干预组脑组织ATPase与PDI表达增强,TanⅡA高剂量组与I/R模型组比较更为显著(P<0.05)。结论:TanⅡA通过抑制GFAP的产生,减轻了由过量胶质细胞产生的脑组织炎性反应,同时上调神经元内ATPase与PDI的表达,改善脑缺氧所致的能量代谢障碍,维持细胞内环境稳定,从而起到对I/R脑损伤的神经保护作用。

阿尔茨海默病模型大鼠PDI及P53的表达及丁苯酞对其的影响

目的研究阿尔茨海默病模型大鼠PDI、P53的表达及丁苯酞对其影响。方法成年雄性SD大鼠60只,随机分为模型组、丁苯酞组及对照组,每组20只;通过向大鼠海马内注射Aβ1-42建立阿尔茨海默病模型,喂养60d后用Y型迷宫检测大鼠学习记忆能力、免疫组织化学染色检测大鼠脑组织PDI和P53的表达。结果与对照组比较,模型组大鼠学习记忆能力下降,其海马CA1区PDI阳性细胞减少,皮层P53表达增加,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,丁苯酞组大鼠海马CA1区PDI阳性细胞数明显增加,皮层P53表达减少,差异有统计学意义(P<0.01)。结论丁苯酞改善阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力可能与其增加PDI、抑制P53的表达有关。

小麦品种“陕253”PDI基因的克隆、原核表达及蛋白纯化

为进一步研究控制小麦蛋白二硫键形成的关键蛋白即蛋白质二硫键异构酶(PDI),运用RT-PCR方法克隆出小麦品种"陕253"PDI基因的cDNA序列,基因登陆号为HQ911363。序列分析表明,HQ911363全长为1 539 bp,编码512个氨基酸,含有PDI典型的异构酶活性的催化位点-CGHC-和内质网驻留信号肽-KDEL-。构建该基因的原核表达载体,在宿主菌E.coliBL21(DE3)中经IPTG诱导表达融合蛋白,并对表达蛋白进行了纯化。SDS-PAGE及Western-blot检测证实融合蛋白诱导表达并纯化成功。

基于垂直干旱指数(PDI)的灌区实际灌溉面积遥感监测方法

灌溉面积及其分布的准确信息对于灌区的现代化管理非常重要,传统获取灌溉面积的方式并不能满足现在的需要,而卫星遥感技术则为获取灌溉面积和分布提供了新的方法与途径。构建了基于干旱指数差异阈值的灌溉面积遥感监测模型,并以宁夏地区秦汉灌区作为研究区域,进行模型的应用研究。根据实际需要,选取了环境减灾卫星(HJ1A/1BCCD)数据,计算和分析了研究区域内的垂直干旱指数(PDI)的分布和变化,通过实地考察当地情况确定了差异阈值为0.082,计算出灌区春灌第一次灌水时期各阶段的灌溉面积。经与地面监测和统计数据校验,计算结果准确率可以达到75%以上,说明了遥感干旱指数用于灌溉监测的可行性。

一种颗粒饲料PDI测试方法的研究

研究旨在针对饲料厂目前测定颗粒饲料耐久度PDI值(Pellet Durability Index)存在的问题,提出一种新型而且简单有效的颗粒饲料耐久度测定方法,即MPE法(Method for Pelleting Evaluation)。通过测得MPE值,利用线性相关方程得到PDI值,提高传统测定PDI值的效率。选取同一生产厂家生产的5种不同品种颗粒饲料共计541个,其中262个用回转箱法测定PDI,279个用来测定MPE,利用SPSS统计软件建立起回转箱法测PDI与MPE法测PDI的线性相关性方程。通过试验分析,得到了5种不同颗粒饲料的MPE与PDI的回归模型的预测模型。将预测值与实际值比较,结果显示该预测模型能够比较好地预测这5种不同颗粒饲料的PDI值(R2>0.96)。

Aspen苯乙烯聚合过程转化率和PDI的分析

利用Aspen Tech Inc.的Polymer Plus软件建立了以过氧化特丁基TBP为引发剂,三釜温度分别为110℃,120℃和160℃的苯乙烯三釜连续本体常压聚合的反应过程模型,利用灵敏度分析方法对影响产品转化率和分子量分散度(PDI)的引发剂浓度、反应温度等因素进行了分析;得出了引发剂量的增加可以提高产品转化率同时使分子量分散度下降;链转移剂量的增加使产品转化率下降同时使分子量分散度上升;在首釜温度107℃出现MW的最大值;增加釜的体积可以同时提高转化率,降低分子量分散度。

PDI测桩仪的应用及砼检桩的技术问题

详细论述了使用美国PDI测桩仪进行判桩的方法和手段。对现阶段的桩基分类进行了详细分析 ,解剖了测桩实践中的经验教训。

hBMP-3成熟肽与人PDI分子片段在大肠杆菌中的共表达

0 引言 人骨形成蛋白-3(human Bone Morphogenetic Protein-3,hBMP-3)是TGF-β超家族成员之一,具有显著的诱骨功能,并且在胚胎发育、神经胶质细胞发育及诱导细胞凋亡方面有着重要作用,hBMP-3已在COS及CHO等真核系统中表达,产物具有良好活性,但真核系统表达产量低、生产成本高,限制了它的应用,大肠杆菌表达系统虽然有产量高。

早期强直性脊柱炎(AS)的能量多普勒(PDI)表现

目的:探讨早期强直性脊柱炎患者骶髂关节PDI表现,总结、分析其对早期AS的诊断价值。材料与方法:运用PDI检查31例经临床确诊AS的62个骶髂关节(病例组)和20例健康体检者的40个骶髂关节(健康对照组),超声探测骶髂关节区域的彩色血流并计算血流阻力指数(RI)。结果:病例组62个骶髂关节,其中有52个骶髂关节显示血流信号而且可以测到RI,RI平均值(0.53+0.07);健康对照组中,11个骶髂关节显示有血流,5个骶髂关节血流信号频谱多普勒测得RI平均值(0.86+0.08);另外6个血流信号在频谱多普勒上呈现为舒张期反相血流。结论:早期AS患者的骶髂关节内部血流增多,PDI可显示骶髂关节低速血流、为诊断早期AS提供了重要的参考依据,分析PDI发现的骶髂关节低速血流与定量超声测量法(QUS)测量骨密度的关系:当骶髂关节内部血流分级增多、骨含量降低程度可能越明显。PDI联合HLA-B27、RF、CRP的检测不但对诊断早期AS有很大帮助,还可为AS治疗效果做随访观察。

3D-PDI联合血清AFP水平测定在孕晚期胎盘植入患者产前诊断中的价值

目的 分析三维能量多普勒超声（3D-PDI）联合血清甲胎蛋白（AFP）水平测定在孕晚期胎盘植入患者产前诊断中的价值.方法 选取2014年12月至2017年1月我院82例伴胎盘植入高危因素孕晚期孕妇的临床资料,按照分娩后的病理结果分为植入组（n=30）与未植入组（n=52）,统计两组患者血清AFP水平和3D-PDI诊断结果,并对比两者联合诊断结果与病理结果,单项诊断及两者联合诊断灵敏度、特异度、准确度.结果 植入组血清AFP水平明显高于未植入组（P＜0.05）;三维能量多普勒超声及血清AFP两者联合诊断灵敏度、准确度均高于单一诊断,且差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 三维能量多普勒超声联合血清AFP水平测定可用作孕晚期胎盘植入孕妇产前诊断,其具有较高的灵敏度及准确度.

PDI抑制α-synuclein纤维化聚集作用机制研究

天然无结构蛋白?-synuclein在帕金森症(PD)患者脑部的路易小体中异常聚集,被认为是引起PD的重要原因之一,但是目前关于?-synuclein的聚集机制仍没有定论.蛋白质二硫键异构酶(PDI)是细胞内质网中重要的分子伴侣蛋白,能够阻止内质网中无结构蛋白的聚集.在PD患者的脑细胞内发现PDI过量表达,且酶活性位点半胱氨酸被亚硝基化使其活性受到抑制.体外实验证明,PDI能够抑制?-synuclein的聚集,但其具体的分子机制还不清楚,研究PDI抑制?-synuclein聚集的具体机制可能对于PD治疗有重要意义.该文利用核磁共振(NMR)方法研究了?-synuclein与PDI的相互作用,发现?-synuclein与PDI的结合位点位于?-synuclein的N端;将PDI所有的6个半胱氨酸突变成丝氨酸,得到突变体PDI C-S,发现?-synuclein与PDI C-S的结合位点则位于其C末端;荧光实验结果表明突变体PDI C-S对?-synuclein纤维化聚集的抑制作用减弱,说明PDI抑制?-synuclein的纤维化聚集主要是通过与?-synuclein的N端残基结合来实现的.

纯电动车辆PDI作业

PDI作业是汽车经销商将新车交付给消费者之前必须履行的检查程序,纯电动车辆与传统车辆在结构上的差异使得二者的PDI作业必然不同。文章介绍了纯电动车辆PDI作业的内容和要求,以便消除质量事故隐患,为客户提供更优质的服务。

咪唑基改性的水溶性PDI荧光材料的合成和表征及对Cu^(2+)离子的荧光检测

以3,4,9,10-苝四甲酸二酐为原料合成了水溶性荧光材料-N,N’-二(1-氨丙基-3-丙基咪唑盐)-3,4,9,10-苝四羧酸二酰亚胺(PDI),引入的咪唑基团使PDI不仅溶于DMSO、DMF等有机溶剂,可溶于EtOH/H2O、Acetone/H2O、THF/H2O等的混合溶液,不仅提高了PDI在有机相和有机相/水相的溶解性,同时扩展了PDI的适用范围。对比不同的混合溶剂发现,PDI在EtOH/H2O中的荧光较强,UV-Vis最大吸收波长和荧光最大发射波长分别为526nm和540nm。进而在EtOH/H2O溶剂中,比较了PDI对各种离子的荧光识别作用,其中PDI作为Cu2+的荧光探针时,受干扰小,选择性较高。TG结果表明,PDI拥有高的热稳定性,温度达353℃时质量损失仅为5%。

玉米蛋白质二硫键异构酶(PDI)基因的特征和表达(英文)

蛋白质二硫键异构酶(PDI)对蛋白的折叠和二硫键的形成起重要的作用.此外,PDI还执行许多其他的生物功能,是1个多功能酶.本文通过研究玉米中1个PDI基因的特征和表达,探讨它的功能作用.玉米中的PDI基因编码513个氨基酸.同源分析表明,该基因和水稻、小麦的PDI基因聚为一类,有很高的蛋白相似性.蛋白结构分析表明,该基因具有明显的PDI基因的结构特点,包括硫氧还蛋白活性位点(CGHC)以及内质网定位信号(KDEL).Northern杂交分析显示,该基因在发育种子的表达量高,同时受干旱、冷、ABA和盐等逆境胁迫诱导表达.PDI与GFP融合表达研究基因的亚细胞定位,表明该基因定位在除细胞膜外的细胞质和细胞器上.

基于PDI的湖北漳河灌区土壤含水量遥感监测

选择湖北漳河灌区作为研究区域，利用经过大气校正的LandsatETM＋近红外（NIR）、红光（Red）波段反射率建立NIR—Red光谱特征空间，计算垂直干旱指数（PDI），并与5～20am实测土壤水分数据相比较，结果表明：模型观测值与实莉I土壤水分的相关系数为0．76，其变化曲线和实测土壤水分变化趋势保持一致。NIR—Red光谱特征空闻法具有比较明确的生物物理意义，能够反映地表覆盖、水热组合及其变化。建模简单实用，易于操作和获取，适宜于在南方湿润地区土壤水分快速监测中推广应用。

外源PDI基因导入CHO细胞及其对HBsAg分泌的影响

在前期的研究工作中发现,当培养基中添加1.5%DMSO(二甲基亚砜)会使CHO细胞的HBsAg(乙肝表面抗原)产量提高80%以上。与此同时,DMSO引起了HBsAg在细胞胞内的大量积累,其含量提高了8倍。同时,DMSO引起了CHO细胞中PDI(二硫键异构酶)含量降低。由此怀疑是由于PDI不足造成了HBsAg的胞内积累。根据NCBI上查阅到的中华仓鼠小肠中PDI基因序列,通过RT-PCR的方法,从CHO细胞中获得了PDI序列,并构建重组质粒pGFP-PDI。通过阳离子脂质体转染技术,导入外源PDI,使各单克隆CHO细胞的PDI酶活提高30%～90%。但分析这些克隆在1.5%DMSO下HBsAg的胞内积累情况,发现没有改善,从而排除了PDI不足而引起外源蛋白积累的可能。