人牙周膜成纤维细胞的细胞培养技术

目的人牙周膜成纤维细胞的细胞培养技术两种方法的比较。方法采用组织块法和酶消化法进行人牙周膜成纤维细胞的原代培养,绘制PDLFs的生长曲线。用Envision免疫组化方法进行细胞来源的鉴定。结论组织块培养方法更适合PDLFs的原代培养。

静态拉伸应变对人牙周膜成纤维细胞的影响

目的 :研究人牙周膜成纤维细胞 (PDLF)在机械拉伸应变作用下 ,细胞和细胞核投影面积及其细胞骨架的改变情况 ,探讨PDLF的形态、功能和应变之间的关系。方法 :采用自制的细胞体外静态机械加载装置用不同的拉伸应变量加力于细胞上 ,通过激光扫描共聚焦显微镜观察细胞骨架的形态及其改变情况 ,并进行统计分析。结果 :在 8%、12 %、16%力值组 ,细胞和细胞核投影面积随着加力时间和力值的增加而每天递增 ,肌动蛋白纤维也随之逐渐增粗 ,排列更有规律 ;而在 2 0 %力值组 ,其结果则反之。结论

应用Label-free技术研究人牙囊细胞和牙周膜成纤维细胞的差异蛋白质

目的:应用Label-free蛋白定量技术研究牙囊细胞(h DFCs)和牙周膜成纤维细胞(h PDLFs)差异表达蛋白质,为发现h DFCs向h PDLFs转化过程中的重要蛋白质提供参考。方法:应用Label-free蛋白定量技术,结合ultramate 3000 nano-UPLC软件,对h DFCs和h PDLFs总蛋白提取液进行蛋白定性定量检测。然后分别对蛋白质的鉴定结果行重复性、关联性、蛋白相对含量和差异表达蛋白等进行分析;对总体蛋白质和差异表达蛋白质行生物信息学GO或KEGG分析。结果:h DFCs和h PDLFs蛋白相对含量及总体蛋白GO分析结果相似。定量分析显示,当h DFCs分化形成h PDLFs后,有22个差异表达蛋白质,其中下调蛋白15个(P<0.05,FC>2),上调蛋白7个(P<0.05,FC>2)。结论:h DFCs和h PDLFs蛋白质表达谱相似;22个差异表达蛋白质为研究h DFCs向h PDLFs的转化机制提供了方向。

尼古丁对牙周膜成纤维细胞线粒体信号通路的影响

目的探讨尼古丁诱导的牙周膜成纤维细胞(periodontal ligament fibroblasts,PDLFs)凋亡的信号转导机制。方法本研究用0.001、0.01和0.1 g/L不同浓度的尼古丁干预PDLFs细胞24 h后,采用激光扫描共聚焦显微镜检测尼古丁实验组干预PDLFs细胞后Ca2+水平的变化,运用RT-PCR方法检测Bcl-2、BAX和Caspase3转录水平的表达变化,用Western blot检测Caspase3翻译水平的表达变化。结果尼古丁作用于PDLFs细胞24 h后,细胞内Ca2+水平随着尼古丁剂量而逐渐增加;Bcl-2表达下调,而BAX表达上调;Caspase3转录和翻译增加。结论尼古丁与PDLFs细胞结合后,启动了促凋亡程序,发生细胞凋亡事件,这可能是吸烟人群牙周病高发的分子机制之一。