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黄瓜叶片蛋白质双向电泳样品分级优化 被引量:9
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作者 任丽萍 范海延 +3 位作者 王珊珊 郝宇涵 宫玉洁 朱延姝 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1706-1710,共5页
以‘津研4号’苗期叶片为材料,采用聚乙二醇(PEG)分级沉淀法对黄瓜叶片蛋白质样品进行分级分离,将黄瓜叶片中存在的高丰度蛋白1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶特异性地集中于一个组分之中,以提高对黄瓜叶片蛋白质双向电泳中低丰度蛋白质... 以‘津研4号’苗期叶片为材料,采用聚乙二醇(PEG)分级沉淀法对黄瓜叶片蛋白质样品进行分级分离,将黄瓜叶片中存在的高丰度蛋白1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶特异性地集中于一个组分之中,以提高对黄瓜叶片蛋白质双向电泳中低丰度蛋白质的检测率。结果表明:(1)分级后各组分和全蛋白在SDS-PAGE谱带中差异显著,全蛋白得到了有效的分离。(2)二维电泳图谱上点的分辨率有很大的提高,所有组分的点数是未分级前的3倍之多。(3)浓度为24%的PEG-4000富集高丰度蛋白Rubisco的效果最好。该方法可推广应用于黄瓜叶片蛋白质组分析的样品制备。 展开更多
关键词 黄瓜叶片 1 5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶 聚乙二醇 双向电泳
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不同条件制备的血管样蚕丝编织物小口径管状支架及其形态结构与细胞毒性测定 被引量:1
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作者 殷音 郝云霞 +2 位作者 刘志武 魏雅丽 王建南 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期361-366,共6页
为了开发适合临床应用的新型人工血管,以蚕丝编织物为芯层,模拟天然血管组织结构制备了一种丝素蛋白(SF)多孔管状支架。研究丝素蛋白与交联剂聚乙二醇双环氧甘油醚(PEG-DE)的配比、丝素蛋白浓度和冷冻温度对管状支架成型及结构的影... 为了开发适合临床应用的新型人工血管,以蚕丝编织物为芯层,模拟天然血管组织结构制备了一种丝素蛋白(SF)多孔管状支架。研究丝素蛋白与交联剂聚乙二醇双环氧甘油醚(PEG-DE)的配比、丝素蛋白浓度和冷冻温度对管状支架成型及结构的影响,并进行管状支架的体外细胞毒性试验。交联剂和丝素蛋白的配比与管状支架上丝素蛋白的覆盖度密切相关,SF与PEG-DE的质量比在1.0∶0.5-1.0∶1.0范围内,管状支架成型较好;丝素蛋白浓度越高,管状支架内部孔径越小,孔密度越高;冷冻温度越低,管状支架孔径越小。通过调节丝素蛋白浓度和冷冻温度可以控制支架内部孔径在50-300μm之间。采用MTT法测定PEG-DE交联的丝素蛋白管状支架没有明显的细胞毒性,具有进一步临床应用研究的价值。 展开更多
关键词 人工血管 丝素蛋白 编织物 聚乙二醇双环氧甘油醚 管状支架 形态结构 细胞毒性
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Preparation and Characterization of PEGDE Crosslinked Silk Fibroin Film 被引量:3
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作者 魏雅丽 SUN Dan +2 位作者 YI Honggen ZHAO Huanrong 王建南 《Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science)》 SCIE EI CAS 2014年第5期1083-1089,共7页
To obtain water-insoluble silk fibroin (SF) materials, polyethylene glycol diglycidyl ether (PEG-DE) was selected as a crosslinking agent to prepare SF films (blends). The reaction conditions were optimized for ... To obtain water-insoluble silk fibroin (SF) materials, polyethylene glycol diglycidyl ether (PEG-DE) was selected as a crosslinking agent to prepare SF films (blends). The reaction conditions were optimized for the crosslinking of the SF molecules. The hot water stability of the blends was measured using BCA protein assay and gravimetric analysis. The molecular conformation and crystalline structure of the blends were analyzed by FTIR and XRD, respectively. When the mass ratio of SF:PEG-DE was 1.0:0.8, the hot water loss rate of the SF blends was minimized. PEG-DE could induce SF molecules to form fl-sheets during the gel reaction process, resulting in improved crystallinity and hot water dissolved resistance of the blend films. In order to demonstrate the eytotoxicity of the chemical reagents used to crosslink SF, L929 cells were seeded on the blend film (SF:PEG-DE = 1:1) and cultured for 3 days. Cells of L929 readily adhered and spread in the fusiform on the blend film resulting in high cell viability. The extracted liquid from the SF porous film did not inhibit cell proliferation, as estimated by the MTT assay. 展开更多
关键词 SILKWORM silk fibroin peg-de FTIR XRD cell compatibility
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聚乙二醇胁迫下茶树叶片的蛋白质组分析 被引量:12
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作者 郭春芳 孙云 +1 位作者 赖呈纯 张木清 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期79-88,共10页
应用差异蛋白质组学方法分析了铁观音茶树幼苗在聚乙二醇(Polyethylene Glycol,PEG)胁迫下叶片蛋白质组的变化。对18个蛋白质点在PEG胁迫下的变化特点进行了分析,并对有差异表达的16个蛋白质点进行了质谱分析,共鉴定出14个蛋白质点,代表... 应用差异蛋白质组学方法分析了铁观音茶树幼苗在聚乙二醇(Polyethylene Glycol,PEG)胁迫下叶片蛋白质组的变化。对18个蛋白质点在PEG胁迫下的变化特点进行了分析,并对有差异表达的16个蛋白质点进行了质谱分析,共鉴定出14个蛋白质点,代表了10种不同的蛋白,其中5个点是同一个蛋白(1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶大亚基,RubisoLSU),另9个蛋白是PEG胁迫响应蛋白,包括光合系统II23kDa多肽、叶绿体伴侣蛋白21(ch-Cpn21)、磷酸丙糖异构酶(TPI)、三磷酸腺苷合酶β亚基、S-腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMS1)、磷脂酰乙醇胺结合蛋白(CEN)、新生多肽相关复合物α亚基(α-NAC)、20S蛋白酶体α亚基(PAE2)、翻译起始因子5A(eIF5A)等,这些蛋白质分别参与了叶绿体组成、糖代谢、能量代谢、硫代谢、蛋白质代谢、信号转导、基因表达调节和细胞程序性死亡等生命活动过程。 展开更多
关键词 茶树 聚乙二醇胁迫 蛋白质组 双向电泳 质谱
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汇率制度、路径依赖与东亚货币合作 被引量:1
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作者 方卫星 《华东师范大学学报(哲学社会科学版)》 CSSCI 北大核心 2002年第1期23-30,共8页
布雷顿森林体系崩溃后东亚国家(地区)所实行的实际钉住美元汇率制度是引发1997年亚洲金融危机的主要根源,但近两年东亚部分国家(地区)又重新恢复了这种汇率制度安排;同时由于欧洲货币合作的成功示范,也大大激发了东亚国家(地区)对于实... 布雷顿森林体系崩溃后东亚国家(地区)所实行的实际钉住美元汇率制度是引发1997年亚洲金融危机的主要根源,但近两年东亚部分国家(地区)又重新恢复了这种汇率制度安排;同时由于欧洲货币合作的成功示范,也大大激发了东亚国家(地区)对于实现区域货币合作的广泛兴趣。重归实际钉住美元的汇率制度只是各国(地区)在危机后过渡时期内的次优选择,东亚国家(地区)短期内努力的方向应该是选择实际钉住货币篮子的汇率制度;而从长远趋势来看,通过对欧洲货币合作动力机制的经验考察,东亚国家(地区)的当务之急应当是积极为推动实现区域货币合作创造有利条件。 展开更多
关键词 汇率制度 实际钉住美元汇率制度 路径依赖 动力机制 区域货币合作 制度变迁 东亚地区
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一种有效检测水稻叶鞘低丰度蛋白的方法 被引量:3
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作者 王莹 崔为同 +1 位作者 杨明峰 沈世华 《草业学报》 CSCD 北大核心 2011年第3期192-197,共6页
蛋白质组学研究中,低丰度蛋白的富集、检测和鉴定是主要的技术难题。植物组织中核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶(rubisco)等高丰度蛋白占细胞全蛋白很大比例,严重影响双向凝胶电泳(2-DE)对低丰度蛋白的检测。为探索一种适用于叶鞘低丰度... 蛋白质组学研究中,低丰度蛋白的富集、检测和鉴定是主要的技术难题。植物组织中核酮糖-1,5-二磷酸羧化/加氧酶(rubisco)等高丰度蛋白占细胞全蛋白很大比例,严重影响双向凝胶电泳(2-DE)对低丰度蛋白的检测。为探索一种适用于叶鞘低丰度蛋白的有效检测方法,本研究采用聚乙二醇(PEG)沉淀法以减少rubisco等高丰度蛋白,富集低丰度蛋白。以Mg/NP-40法为对照,分别使用15%和20%PEG分离水稻叶鞘可溶性全蛋白,并将对照和各PEG分离组分进行2-DE。2-DE图谱经软件分析结果表明,20%PEG沉淀法适用于灌浆期叶鞘低丰度蛋白检测。 展开更多
关键词 叶鞘 低丰度蛋白 PEG 双向凝胶电泳
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两种花吊丝竹叶片蛋白提取方法的2-DE比较 被引量:3
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作者 沈少炎 吴玉香 +2 位作者 荣俊冬 何天友 郑郁善 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2017年第1期50-57,共8页
以2年生花吊丝竹的扦插苗为研究材料,对2种方法(TCA/酚提结合法和PEG法)提取的蛋白质的2-DE差异进行研究.结果表明:PEG法的5个组分的条带差异明显,全蛋白得到了有效分离,在F3中富集到了2条高丰度蛋白带;2种方法的2-DE图谱的均一性分析发... 以2年生花吊丝竹的扦插苗为研究材料,对2种方法(TCA/酚提结合法和PEG法)提取的蛋白质的2-DE差异进行研究.结果表明:PEG法的5个组分的条带差异明显,全蛋白得到了有效分离,在F3中富集到了2条高丰度蛋白带;2种方法的2-DE图谱的均一性分析发现,PEG法中F3富集了高丰度蛋白,提高了2-DE中蛋白质的检测率和分辨率,PEG法中F1-F5共检测的蛋白总数超过了1700个,但是相邻组存在一定的重叠率,而TCA丙酮/酚提结合法只检测到约571个蛋白点,5个组与NF平均有439个蛋白点匹配,达到77.9%以上;质谱鉴定了5种差异蛋白,生物信息学分析发现这5种蛋白是糖酵解、糖异生和ATP合成的重要辅酶.2种方法的比较发现,PEG法能够将花吊丝竹叶片全蛋白中高丰度蛋白单一富集在16%的组分中,从而显著提高了2-DE的分辨率,再通过质谱技术能够检测到更多的影响生物体生长发育的低丰度蛋白,所以PEG法是一种切实可行的且较为理想的蛋白质提取方法. 展开更多
关键词 花吊丝竹 TCA/酚提结合法 PEG法 双向电泳 生物信息学
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适合杨树叶片蛋白质组学样品制备方法的比较(英文)
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作者 甄艳 郑秀化 施季森 《南京林业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期33-39,共7页
【目的】为了提高植物叶片中低丰度蛋白质的检测效率,建立有效的杨树叶片蛋白质组学分析的蛋白质提取方法。【方法】利用三氯乙酸-丙酮结合PEG分级提取方法和SDS-酚结合PEG分级提取方法对杨树叶片蛋白质进行提取,并采用SDS-PAGE和双向... 【目的】为了提高植物叶片中低丰度蛋白质的检测效率,建立有效的杨树叶片蛋白质组学分析的蛋白质提取方法。【方法】利用三氯乙酸-丙酮结合PEG分级提取方法和SDS-酚结合PEG分级提取方法对杨树叶片蛋白质进行提取,并采用SDS-PAGE和双向凝胶电泳(2-DE)对提取结果进行评价。【结果】SDS-PAGE实验结果显示,三氯乙酸-丙酮结合PEG方法优于SDS-酚结合PEG分级方法。三氯乙酸-丙酮结合PEG分级和非结合PEG分级提取蛋白质的双向电泳结果表明,PEG分级能有效地去除高丰度蛋白质Rubisco,提高低丰度蛋白质的检测。三氯乙酸-丙酮结合PEG分级法检测的蛋白质比非结合PEG分级法多90个蛋白质点。【结论】以LTQ-Orbitrap XL分析三氯乙酸-丙酮结合PEG分级分离的一些蛋白质显示,三氯乙酸-丙酮结合PEG分级对于2-DE和MS鉴定低丰度蛋白质是一种有效的分离方法。 展开更多
关键词 核酮糖-1 5-二磷酸羧化-加氧酶 聚乙二醇分级 杨树叶片 双向电泳
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