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WIN55212-2通过调控mTOR/HIF-1α/PFKFB3信号通路抑制糖酵解并减轻脓毒症小鼠急性肺损伤 被引量:3
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作者 段倩雯 董旭鹏 +3 位作者 马源 刘澈 张铭 马玉清 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期521-526,共6页
目的:探究大麻素受体激动剂WIN55212-2(WIN)对脓毒症小鼠急性肺损伤(ALI)的影响,并探讨其通过糖酵解发挥作用的可能机制。方法:采用腹腔注射脂多糖(LPS)创建小鼠脓毒症ALI模型。将雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组:对照(control)组、LPS组(... 目的:探究大麻素受体激动剂WIN55212-2(WIN)对脓毒症小鼠急性肺损伤(ALI)的影响,并探讨其通过糖酵解发挥作用的可能机制。方法:采用腹腔注射脂多糖(LPS)创建小鼠脓毒症ALI模型。将雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组:对照(control)组、LPS组(腹腔注射10 mg/kg LPS)、LPS+WIN组(注射LPS前30 min腹腔注射1 mg/kg WIN)和LPS+WIN+MHY1485[哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)活化剂]组(LPS造模前1 d腹腔注射10 mg/kg MHY1485,并在造模前30 min腹腔注射1 mg/kg WIN和10 mg/kg MHY1485),每组6只。造模24 h后取材,计算肺指数;HE染色观察肺组织病理变化;ELISA检测肺组织炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)和IL-10表达水平,以及血清乳酸和乳酸脱氢酶A(LDHA)水平;Western blot检测mTOR/缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-双磷酸酶3(PFKFB3)信号通路相关蛋白水平。结果:相比于control组,LPS组小鼠肺指数增加,HE染色显示肺组织受损,肺组织中IL-10水平降低(P<0.05),IL-1β水平升高(P<0.05),血清乳酸和LDHA水平升高(P<0.05),磷酸化mTOR(p-mTOR)、HIF-1α和PFKFB3蛋白水平升高(P<0.05)。相较于LPS组,LPS+WIN组肺指数降低(P<0.05),HE染色显示肺组织受损减轻,肺组织IL-1β水平降低(P<0.05),IL-10水平升高(P<0.05),血清乳酸和LDHA水平降低(P<0.05),p-mTOR、HIF-1α和PFKFB3蛋白水平降低(P<0.05)。相较于LPS+WIN组,LPS+WIN+MHY1485组肺指数增加,HE染色显示肺组织受损,肺组织IL-1β水平升高(P<0.05),IL-10水平降低(P<0.05),血清乳酸和LDHA水平升高(P<0.05),p-mTOR、HIF-1α和PFKFB3蛋白水平升高(P<0.05)。结论:WIN55212-2可以减轻脓毒症小鼠ALI,其机制可能是通过调控mTOR/HIF-1α/PFKFB3信号通路,抑制糖酵解,减轻炎症反应。 展开更多
关键词 WIN55212-2 脓毒症 急性肺损伤 糖酵解 mTOR/HIF-1α/pfkfb3信号通路
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PFKFB3在结肠癌患者中的表达及其临床意义 被引量:1
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作者 章密密 何跃君 《中国临床医学》 2017年第4期587-590,共4页
目的:检测6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)在大样本结肠癌患者中的表达情况及其临床意义。方法:用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化法分别检测156例结肠癌患者癌和癌旁组织中PFKFB3的mRNA和蛋白表达水平,分析其... 目的:检测6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)在大样本结肠癌患者中的表达情况及其临床意义。方法:用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化法分别检测156例结肠癌患者癌和癌旁组织中PFKFB3的mRNA和蛋白表达水平,分析其与结肠癌临床病理特征及预后的关系。结果:PFKFB3的mRNA和蛋白表达在114例(73.1%)患者的结肠癌组织中高表达。结肠癌组织中PFKFB3的mRNA水平高表达与脉管内癌栓形成、淋巴结转移和TNM分期相关(P<0.05)。PFKFB3 mRNA高表达患者的生存期短于低表达患者(P<0.05)。结论:PFKFB3在结肠癌患者癌组织中高表达,PFKFB3的mRNA水平高表达与患者恶性表型及不良预后相关。 展开更多
关键词 结肠癌 pfkfb3 临床病理特征 预后
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PFKFB3激活MAPK信号通路促进卵巢癌增殖和转移 被引量:4
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作者 霍春霞 谢玲 赵得雄 《肿瘤药学》 CAS 2020年第5期552-558,563,共8页
目的探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)在卵巢癌组织中的表达及其与卵巢癌临床病理特征之间的关系,并通过体外实验初步探讨PFKFB3的促癌作用及可能的作用机制。方法采用免疫组化法检测45例卵巢癌组织和33例输卵管组织... 目的探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)在卵巢癌组织中的表达及其与卵巢癌临床病理特征之间的关系,并通过体外实验初步探讨PFKFB3的促癌作用及可能的作用机制。方法采用免疫组化法检测45例卵巢癌组织和33例输卵管组织中PFKFB3蛋白的表达,分析PFKFB3蛋白表达与卵巢癌临床病理特征之间的相关性。将卵巢癌SKOV3细胞分为三组:空白组(Blank组)不作任何处理,阴性对照组(si-NC组)转染空载质粒,si-PFKFB3组转染PFKFB3特异性干扰质粒。Western blotting检测PFKFB3蛋白表达验证敲减效率,CCK-8检测各组细胞活力,平板克隆形成实验检测各组细胞克隆形成能力,Transwell实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力,Western blotting检测MAPK信号通路蛋白p-p38、t-p38的表达。结果PFKFB3主要在细胞核和细胞浆中表达,且在卵巢癌组织中的阳性表达率显著高于输卵管组织(P<0.05);卵巢癌组织学分级越低,FIGO分期越高,PFKFB3蛋白表达阳性率越高(P<0.05)。与Blank组和si-NC组比较,si-PFKFB3组PFKFB3蛋白表达水平显著降低,细胞活力显著下降,细胞克隆形成能力显著降低,细胞迁移和侵袭能力显著下降,p-p38蛋白表达水平及p-p38/p38比值显著降低(P<0.05)。结论PFKFB3在卵巢癌组织中呈高表达,敲减PFKFB3可抑制卵巢癌的增殖、转移和MAPK信号通路激活。 展开更多
关键词 pfkfb3 卵巢癌 MAPK信号通路 增殖 转移
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PFKFB3抑制剂减轻高磷诱导的大鼠血管平滑肌细胞钙化 被引量:1
4
作者 牛津 张敏 +8 位作者 王巧娟 刘振华 顾晓明 冯娜 张淑苗 贾敏 樊荣 李娟 裴建明 《心脏杂志》 CAS 2021年第2期117-122,共6页
目的探究果糖-2,6-二磷酸酶3(6-bisphosphatase 3,PFKFB3)抑制剂3-PO对高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)钙化的作用及其潜在机制。方法将原代培养的VSMC随机分为:对照(Con)组、高磷诱导(β-GP)组、高磷诱... 目的探究果糖-2,6-二磷酸酶3(6-bisphosphatase 3,PFKFB3)抑制剂3-PO对高磷诱导大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)钙化的作用及其潜在机制。方法将原代培养的VSMC随机分为:对照(Con)组、高磷诱导(β-GP)组、高磷诱导+3-PO(β-GP+3-PO)组、对照+乳酸钠(Con+Lactate)组、对照+乳酸钠+3-PO(Con+Lactate+3-PO)组。实验前后用微板法检测细胞内钙和碱性磷酸酶(ALP)含量;茜素红染色检测VSMC钙化程度;CCK 8试剂盒检测细胞活力;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测表型转化相关蛋白(RUNX2,BMP-2,SM22a)及糖酵解相关蛋白(PFKFB3,HKⅡ,GLUT1与GLUT4)表达水平,比色法检测乳酸含量及乳酸脱氢酶(LDH)活力。结果与Con组比较,β-GP组VSMC钙化程度及成骨蛋白表达显著增加(P<0.01),细胞活力显著降低(P<0.01),而给予3-PO可显著逆转β-GP组的VSMC表型转化蛋白的表达变化(P<0.05),并使细胞活力增加(P<0.01)。进一步的研究证实,β-GP组中PFKFB3表达水平,乳酸含量及LDH活力显著增加(P<0.01),而在β-GP+3-PO组中显著下调(P<0.01),其余糖酵解蛋白表达水平未明显改变。另外,乳酸钠也可引起VSMC钙化程度及表型转化蛋白表达的增加(P<0.01),给予3-PO可逆转乳酸钠引起的VSMC钙化和表型转化(P<0.05)。结论PFKFB3抑制剂3-PO可能通过降低PFKFB3表达抑制糖酵解水平,从而抑制了高磷诱导的VSMC的钙化,研究结果为临床治疗血管钙化提供了潜在的药物靶点。 展开更多
关键词 pfkfb3 血管钙化 血管平滑肌细胞 糖酵解
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PFKFB3敲减抑制肺腺癌细胞A549增殖和转移
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作者 王希方 雷雨 +6 位作者 刘屹 岳青芳 侯银银 曹菲 孙超 王海鹏 陆王锋 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2020年第6期15-19,共5页
目的探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)敲减对肺腺癌细胞A549增殖和转移的影响。方法将人肺腺癌细胞系A549分3组,si-ctrl转染阴性对照序列组、si-PFKFB3#1组和si-PFKFB3#2组,分别转染2种不同的敲减siRNA序列。WB检测P... 目的探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)敲减对肺腺癌细胞A549增殖和转移的影响。方法将人肺腺癌细胞系A549分3组,si-ctrl转染阴性对照序列组、si-PFKFB3#1组和si-PFKFB3#2组,分别转染2种不同的敲减siRNA序列。WB检测PFKFB3蛋白表达,MTT检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期,transwell检测细胞转移能力。结果与si-ctrl组比较,si-PFKFB3#1组(0.103±0.024)和si-PFKFB3#2组(0.106±0.028)PFKFB3/GAPDH蛋白相对表达量显著降低(P<0.05);孵育48、72和96 h,si-PFKFB3#1组和si-PFKFB3#2组细胞活力降低,细胞增殖抑制率升高(P<0.05);si-PFKFB3#1组[(63.51±3.87)%]和si-PFKFB3#2组[(61.26±3.66)%]细胞G1期比例增加,si-PFKFB3#1组[(25.64±2.71)%]和si-PFKFB3#2组[(24.79±2.59)%]S期比例减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。与si-ctrl组(305±27)比较,si-PFKFB3#1组(125±20)和si-PFKFB3#2组(136±18)转移细胞数显著降低(P<0.05)。结论PFKFB3敲减可以抑制肺腺癌细胞A549增殖和转移。 展开更多
关键词 pfkfb3 肺腺癌 A549 增殖 转移
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PFKFB3在肝癌中的表达及其临床意义 被引量:3
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作者 吴二斌 李莉华 郭子健 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2014年第6期508-511,共4页
目的探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PFKFB3在42例HCC组织及其对应癌旁组织中的表达情况,并研究其与临床病理参数... 目的探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测PFKFB3在42例HCC组织及其对应癌旁组织中的表达情况,并研究其与临床病理参数(性别、年龄、肿瘤直径、淋巴转移、静脉癌栓、治疗前甲胎蛋白、分化程度及肝内转移)间的关系,采用Kaplan-Meier法分析PFKFB3 mRNA表达对HCC患者生存的影响。结果 HCC和癌旁组织中PFKFB3 mRNA的阳性表达率分别为73.81%(31/42)和52.38%(22/42),相对表达量为1.075±0.171和0.877±0.451,HCC组织中PFKFB3mRNA的阳性表达率及相对表达量均高于癌旁组织(P<0.05);PFKFB3 mRNA的表达与肿瘤TNM分期、分化程度、肝内转移及总生存期有关(P<0.05)。结论 PFKFB3在HCC的发生发展中发挥作用,且影响肝癌的分化、转移并提示肝癌患者预后不佳;可作为评估HCC恶性程度的生物学指标。 展开更多
关键词 6-磷酸果糖激酶-2 果糖双磷酸酶-2同工酶3 肝细胞癌 逆转录-聚合酶链反应 预后
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乳腺癌PFKFB3表达及其临床意义
7
作者 章小霞 顾丽丽 +2 位作者 姜晨霞 王燕 任晓燕 《交通医学》 2018年第6期544-548,共5页
目的:初步探讨PFKFB3在乳腺癌组织中的表达及其与临床预后的相关性。方法:采用免疫组织化学和q RT-PCR法检测乳腺癌组织PFKFB3蛋白及mRNA的表达情况,分析PFKFB3表达与临床病理特征及患者预后的关系。结果:乳腺癌组织PFKFB3蛋白阳性表达... 目的:初步探讨PFKFB3在乳腺癌组织中的表达及其与临床预后的相关性。方法:采用免疫组织化学和q RT-PCR法检测乳腺癌组织PFKFB3蛋白及mRNA的表达情况,分析PFKFB3表达与临床病理特征及患者预后的关系。结果:乳腺癌组织PFKFB3蛋白阳性表达率为60.8%,高于癌旁组织的20.0%,差异有统计学意义(P<0.001)。乳腺癌组织PFKFB3mRNA相对表达量1.73±0.21,高于癌旁组织的0.78±0.21,差异有统计学意义(P<0.05)。PFKFB3蛋白表达与肿瘤分级、原发肿瘤大小(T)、淋巴结的转移(N)、TNM分期及分子分型正相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示PFKFB3阳性组术后生存时间短于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05),单因素分析显示,PFKFB3蛋白表达、肿瘤分级、原发肿瘤大小(T)、淋巴结转移(N)、TNM分期及分子分型与乳腺癌患者预后相关(P<0.05),多因素分析显示PFKFB3蛋白表达、TNM分期为乳腺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论:PFKFB3在乳腺癌组织中高表达,且与肿瘤的侵袭和转移密切相关,其高表达提示乳腺癌患者预后不良。 展开更多
关键词 乳腺癌 pfkfb3 免疫组织化学 定量即时聚合酶链锁反应
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PFKFB3在缺氧条件下调节血管新生的作用
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作者 邹蓉 袁源智 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期691-695,共5页
病理性血管新生是癌症和各种缺血性和炎性疾病的标志,尤其是眼部疾病,如年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)、增生性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)等。目前抗血管新生的药物治疗主... 病理性血管新生是癌症和各种缺血性和炎性疾病的标志,尤其是眼部疾病,如年龄相关性黄斑变性(age-related macular degeneration,AMD)、增生性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)等。目前抗血管新生的药物治疗主要是针对血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等促血管生成因子,但是长期局部抑制VEGF或与神经元毒性和一些眼部并发症有关,因此需要寻找其他治疗靶点。内皮细胞代谢在血管新生过程中具有重要调节作用,可独立于VEGF等促血管生成分子的调节过程,有望成为抗血管新生的另一个治疗靶点。目前在一些疾病的血管新生过程中发现了糖酵解的重要调节剂6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-双磷酸酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3),本文将介绍PFKFB3的作用,并探讨其作为抗血管新生治疗的内皮细胞代谢靶点的潜力。 展开更多
关键词 pfkfb3 血管内皮细胞 血管新生 糖酵解 缺氧
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PFKFB3在胶质瘤组织中的表达及其对H4细胞恶性生物学行为的影响 被引量:1
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作者 陈向荣 杜菊梅 吴宗涛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期363-369,共7页
目的:探讨恶性胶质瘤组织中糖酵解限速酶6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3)的表达水平及PFKFB3抑制剂PFK15对胶质瘤H4细胞增殖、迁移、克隆形成和体内成瘤的影响... 目的:探讨恶性胶质瘤组织中糖酵解限速酶6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3)的表达水平及PFKFB3抑制剂PFK15对胶质瘤H4细胞增殖、迁移、克隆形成和体内成瘤的影响。方法:采集2015年2月1日至2016年1月31日安康市中医医院神经外科手术切除的31例恶性脑胶质瘤及相应瘤旁组织标本,应用免疫组化技术和Western blotting检测胶质瘤和瘤旁组织中PFKFB3的表达水平。用不同浓度的(1.25、2.5、5.0μmol/L)PFK15抑制胶质瘤H4细胞的PFKFB3表达,通过MTT法、EdU细胞增殖实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验、克隆形成实验和裸鼠体内成瘤实验分别观察PFK15对H4细胞增殖、迁移、侵袭、克隆形成和体内成瘤的影响。结果:PFKFB3在胶质瘤组织中阳性率显著高于瘤旁组织[(80.60±8.98)%vs(41.57±10.16)%,P<0.05]。MTT和EdU实验结果显示,PFK15可明显抑制H4的增殖活性(P<0.05),且抑制作用具有浓度依赖性。PFK15处理后的H4细胞迁移、侵袭和克隆形成能力明显低于对照组(均P<0.05)。注射PFK15的裸鼠H4细胞移植瘤体积明显小于对照组裸鼠[(254.15±154.25)vs(801.52±224.25)mm3,P<0.01]。结论:PFKFB3在恶性胶质瘤组织中高表达,下调PFKB3可显著抑制胶质瘤H4细胞的恶性生物学行为和体内成瘤,PFKFB3可作为恶性胶质瘤生物治疗潜在的分子靶点。 展开更多
关键词 恶性胶质瘤 H4细胞 糖酵解 6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3 PFK15
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PFKFB3、S1P2在2型糖尿病大鼠视网膜中的表达及tBHQ的干预作用 被引量:4
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作者 田敏 余曦 吕红彬 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第2期131-135,共5页
目的研究6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3,PFKFB3)、1-磷酸鞘氨醇受体2(sphingosine 1-phosphate receptor 2,S1P2)在2型糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠视网膜中的... 目的研究6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-bisphosphatase-3,PFKFB3)、1-磷酸鞘氨醇受体2(sphingosine 1-phosphate receptor 2,S1P2)在2型糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠视网膜中的表达,并探讨叔丁基对苯二酚(tertiary butylhydroquinone,t BHQ)与PFKFB3、S1P2的关系。方法雄性Sprague Dawley大鼠60只,分为正常对照组(NC组)、DM组和t BHQ组。后两组诱导2型DM模型,其中t BHQ组于造模成功后7 d在高脂高糖饲料中添加10 g·L-1t BHQ进行干预,DM组大鼠继续使用高脂高糖饲料喂养。于t BHQ干预后4周和12周各组大鼠心脏采血,检测血清空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、空腹血清胰岛素(fasting serum insulin,FINs)含量。采用免疫组织化学法及实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法定量检测各组大鼠视网膜中PFKFB3、S1P2、VEGF蛋白及m RNA的分布和表达。采用TUNEL法检测各组大鼠视网膜神经节细胞的凋亡指数。结果三组大鼠在4周和12周的FPG、FINs总体比较差异均有统计学意义(均为P=0.000)。4周和12周时各组中均可见PFKFB3、S1P2、VEGF蛋白的阳性表达,且主要分布于视网膜神经节细胞层、内核层。免疫组织化学及q RT-PCR检测结果显示,各组大鼠在造模后不同时间点视网膜中PFKFB3、S1P2、VEGF蛋白及m RNA的相对表达量的总体比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。4周和12周时,DM组PFKFB3、S1P2、VEGF的表达较NC组增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05);t BHQ组PFKFB3、S1P2、VEGF的表达较DM组降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与4周比较,12周时DM组PFKFB3、S1P2、VEGF的蛋白和m RNA表达均增加(均为P<0.05),t BHQ组S1P2蛋白和m RNA的表达较4周降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。TUNEL法检测结果显示,4周和12周时DM组凋亡指数均较NC组增多,t BHQ组均较DM组减少(均为P<0.05);与4周比较,12周时DM组凋亡指数增高,t BHQ组降低(均为P<0.05)。结论PFKFB3、S1P2及VEGF共同参与2型DM大鼠视网膜的病理过程,其可能是通过PFKFB3/VEGF/S1P2信号途径起作用,并可能与视网膜神经节细胞的凋亡相关;tBHQ对2型DM大鼠视网膜有一定的保护作用。 展开更多
关键词 6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3 1-磷酸鞘氨醇受体2 叔丁基对苯二酚 糖尿病 视网膜
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PFKFB3在急性心肌梗死时多形核髓源性抑制细胞炎性活化中的作用 被引量:1
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作者 虞宗颖 吴艳君 刘大东 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期44-49,共6页
目的探讨6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(PFKFB3)与急性心肌梗死(AMI)时多形核髓源性抑制细胞(PMN-MDSC)炎性活化的相关性,评价靶向PFKFB3的干预措施在AMI时PMN-MDSC炎性活化中的作用。方法①临床试验部分:采用观察性研究方法,... 目的探讨6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(PFKFB3)与急性心肌梗死(AMI)时多形核髓源性抑制细胞(PMN-MDSC)炎性活化的相关性,评价靶向PFKFB3的干预措施在AMI时PMN-MDSC炎性活化中的作用。方法①临床试验部分:采用观察性研究方法,选择镇江市第四人民医院收治的急性冠脉综合征(ACS)患者作为研究对象,根据临床诊断结果分为AMI组和非AMI组。取两组患者外周静脉血,检测PMN-MDSC比例,采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测单个核细胞PFKFB3的基因表达量。②基础实验部分:将30只6~8周龄雄性C57小鼠按随机数字表法分为正常对照组(n=5)、假手术(Sham)组(n=5)、AMI模型组(n=10)和PFKFB3抑制剂PKF-15干预组(n=10)。采用结扎左冠状动脉前降支(LADCA)的方法建立小鼠AMI模型;Sham组小鼠开胸后不结扎动脉;PKF-15干预组于结扎LADCA的同时,腹腔注射PKF-15(20μg/g)进行干预;正常对照组小鼠不进行任何处理。制模后24 h取小鼠外周静脉血,随后处死小鼠取心肌组织,分别检测小鼠外周血PMN-MDSC比例和心肌组织PMN-MDSC浸润量;苏木素-伊红(HE)染色后,光镜下观察小鼠心肌组织炎症性损伤程度;采用流式细胞仪分选出小鼠PMN-MDSC,并采用RT-qPCR法检测PFKFB3及相关炎症因子基因表达量。结果①临床试验部分:AMI组(n=25)患者外周血PMN-MDSC比例较非AMI组(n=20)明显升高〔(8.53±0.96)%比(1.13±0.39)%,P<0.01〕,外周血单个核细胞PFKFB3基因表达量显著高于非AMI组(2^(-ΔΔCt):1.18±0.19比0.96±0.16,P<0.01);Pearson相关分析显示,AMI患者外周血PMN-MDSC比例与单个核细胞PFKFB3基因表达量呈显著正相关(r=0.608,P=0.001)。②基础实验部分:AMI小鼠外周血及心肌组织PMN-MDSC比例均较正常对照组和Sham组明显增高;PFK-15干预后能够明显降低AMI小鼠外周血及心肌组织PMN-MDSC比例〔外周血:(26.33±5.27)%比(75.12±5.02)%,心肌组织:(20.87±2.97)%比(35.28±4.36)%,均P<0.01〕。光镜下显示,AMI模型组小鼠心肌细胞排列紊乱,大量炎症细胞浸润;PFK-15干预后能够维持较为正常的心肌细胞排列,减少炎症细胞浸润。AMI模型组小鼠外周血及心肌组织PMN-MDSC的PFKFB3与心肌组织炎症因子的基因表达量均显著高于正常对照组和Sham组;给予PKF-15干预后能够有效降低AMI小鼠外周血及心肌组织PMN-MDSC的PFKFB3和心肌组织炎症因子的基因表达量〔PFKFB3 mRNA(2^(-ΔΔCt)):外周血为1.01±0.09比1.40±0.12,心肌组织为0.95±0.09比1.47±0.10;心肌组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA(2^(-ΔΔCt))为14.55±3.99比29.66±3.90,白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA(2^(-ΔΔCt))为8.72±1.35比18.53±2.43,IL-6 mRNA(2^(-ΔΔCt))为11.87±2.97比19.82±4.32,均P<0.01〕。结论PFKFB3与AMI时PMN-MDSC炎性活化密切相关,干预PFKFB3活性可抑制PMN-MDSC炎性活化,减轻心肌炎症性损伤。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 多形核髓源性抑制细胞 炎性活化 pfkfb3
原文传递
PFKFB3基因增强阿帕替尼对胃癌凋亡的影响及机制 被引量:5
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作者 胡智慧 段亚男 +2 位作者 韩鲁军 张静 张红欣 《中国中西医结合消化杂志》 CAS 2019年第7期495-500,共6页
[目的]探讨沉默PFKFB3基因对阿帕替尼处理的胃癌细胞凋亡的影响及机制。[方法]通过Western blotting检测人胃黏膜上皮细胞株GES1及SGC-7901、BGC823和MKN45胃癌细胞PFKFB3蛋白表达。将PFKFB3特异性siRNA(si-PFKFB3)转染SGC-7901细胞,Wes... [目的]探讨沉默PFKFB3基因对阿帕替尼处理的胃癌细胞凋亡的影响及机制。[方法]通过Western blotting检测人胃黏膜上皮细胞株GES1及SGC-7901、BGC823和MKN45胃癌细胞PFKFB3蛋白表达。将PFKFB3特异性siRNA(si-PFKFB3)转染SGC-7901细胞,Western blotting检测转染效果。MTT法检测转染siPFKFB3或不同浓度(10、20、30、40μmol/L)阿帕替尼处理SGC-7901细胞48h的细胞活力。流式细胞术检测转染si-PFKFB3或/和40μmol/L阿帕替尼处理SGC-7901细胞48h的细胞凋亡率,Western blotting检测Bcl-2、Bax、PI3K、AKT和p-AKT蛋白表达。[结果]与对照GES1细胞相比,PFKFB3在SGC-7901、BGC823和MKN45胃癌细胞中的表达均明显升高(P<0.05)。si-PFKFB3转染SGC-7901细胞后,PFKFB3蛋白表达明显降低(P<0.05)。转染si-PFKFB3及不同浓度阿帕替尼均可抑制SGC-7901细胞活力,阿帕替尼对细胞活力抑制呈现浓度依赖性(P<0.05)。转染si-PFKFB3及阿帕替尼均可诱导SGC-7901细胞凋亡,下调Bcl-2、PI3K和p-AKT表达,上调Bax表达,二者合用对SGC-7901细胞凋亡诱导更明显(P<0.05)。[结论]沉默PFKFB3基因表达可明显增强阿帕替尼对胃癌细胞的凋亡诱导作用,机制可能与下调PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 胃癌 pfkfb3基因 阿帕替尼 凋亡 PI3K/AKT信号通路
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甲状腺乳头状癌组织PFKFB3表达及其意义 被引量:1
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作者 陈永诚 卢冠铭 +7 位作者 潘运龙 陆金兰 韦忠恒 李震东 马燕飞 覃强 黄前方 罗志斋 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2018年第4期250-257,共8页
目的肿瘤细胞产生能力的方式是糖酵解,且糖酵解与恶性肿瘤的发生、发展及转移关系非常密切。本研究的目的是评估甲状腺中糖酵解限速酶6磷酸果糖2激酶/果糖-2,6-二磷酸酶(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3... 目的肿瘤细胞产生能力的方式是糖酵解,且糖酵解与恶性肿瘤的发生、发展及转移关系非常密切。本研究的目的是评估甲状腺中糖酵解限速酶6磷酸果糖2激酶/果糖-2,6-二磷酸酶(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3)的表达水平,及其在甲状腺细胞生长、迁移、体内成瘤的影响,以期为甲状腺治疗提供新思路。方法收集2015-01-01-2016-12-31右江民族医学院附属医院病理科存档蜡块标本28例及11例癌周正常甲状腺组织标本。应用免疫组织化学技术检测甲状腺和正常甲状腺组织中PFKFB3的表达。采用PFKFB3的抑制剂PFK15抑制甲状腺细胞PFKFB3的表达,并观察PFKFB3抑制对甲状腺癌细胞生长、迁移、体内成瘤的影响。结果免疫组化结果显示,PFKFB3在甲状腺组织中表达阳性率达85.7%(24/28),明显高于正常甲状腺组织中的PFKFB3的18.2%(2/11),F=3.24,P<0.001。蛋白质印迹检测结果同样证实,甲状腺癌组织中PFKFB3蛋白表达水平明显高于正常甲状腺组织。MTT试验表明,与对照组(1.1±0.12)相比,0.25(0.82±0.08)、2.5(0.61±0.16)和5μmol/L(0.15±0.05)PFK15可明显抑制SW579细胞的增殖活性(F值分别为3.47、2.35和3.77,均P<0.05)和增殖相关分子的表达。细胞划痕实验结果显示,刮除细胞24h后,0.25、2.5和5μmol/L PFK15处理组的SW579细胞向划痕区域迁移,但其划痕区域的细胞数量分别为86±14(F=2.59,P<0.001)、57±12(F=3.52,P<0.001)和46±8(F=2.15,P<0.001),明显少于对照组的102±13。Transwell小室表明,0.25、2.5和5μmol/L PFK15处理组中,穿过基质胶的SW579细胞数量分别为71±6(F=2.35,P<0.001)、58±11(F=3.68,P<0.001)和41±7(F=2.38,P<0.001),明显少于对照组的91±8。裸鼠移植瘤实验结果显示,注射浓度为1[(661±168)mm^3,F=3.42,P<0.01]和5mg/kg[(514±147)mm^3,F=2.87,P<0.001)]组裸鼠的肿瘤体积明显小于对照组的(924±254)mm^3,且0.25、2.5和5μmol/L PFK15组肿瘤质量[(201±74)mg,F=1.27,P>0.05;(142±42)mg,F=3.56,P<0.01;(112±32)mg,F=3.57,P<0.001]明显小于对照组的(223±87)mg。裸鼠肺转移模型结果显示,0.25、2.5和5μmol/L PFK15组裸鼠肺部转移灶数目[(12±4)个,F=3.66,P<0.05;(4±3)个,F=2.86,P<0.01;(2±1.5)个,F=3.31,P<0.001]明显少于对照组的(16±5)个。结论 PFKFB3在甲状腺组织中高表达,且在甲状腺癌的增殖、迁移、侵袭和转移中起重要作用。抑制PFKFB3可作为甲状腺生物治疗的潜在分子靶点。 展开更多
关键词 甲状腺癌 糖酵解 pfkfb3 PFK15
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靶向内皮细胞糖酵解限速酶PFKFB3的抗肿瘤血管生成研究进展
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作者 刘飞飞 刘静 +3 位作者 吴谓 刘颖 罗瑛 张继虹 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期103-109,共7页
血管生成对肿瘤的发生、生长和转移至关重要。血管内皮细胞分化、形成新生血管的过程离不开新陈代谢的能量供给和调控作用,尤其是糖酵解途径对肿瘤血管生成的起始点——血管出芽具有非常重要的作用。研究发现,糖酵解过程中的一个关键限... 血管生成对肿瘤的发生、生长和转移至关重要。血管内皮细胞分化、形成新生血管的过程离不开新陈代谢的能量供给和调控作用,尤其是糖酵解途径对肿瘤血管生成的起始点——血管出芽具有非常重要的作用。研究发现,糖酵解过程中的一个关键限速酶——磷酸果糖激酶-2/果糖-2,6-二磷酸酶3(phosphofructokinase-2/fructose-2,6-bisphosphatase 3,PFKFB3)具有较强的激酶活性,若抑制其活性可降低糖酵解速率,从而抑制血管出芽,影响肿瘤血管生成。已经证实,PFKFB3的抑制剂3PO[3-(3-pyridinyl)-1-(4-pyridinyl)-2-propen-1-one]可以显著减少糖酵解,从而抑制病理性血管的生成。因此,近年来通过抑制或破坏肿瘤血管内皮细胞的新陈代谢来进行肿瘤治疗的新方案已成为肿瘤医学领域中一个新的研究热点。本文就内皮细胞糖酵解过程中PFKFB3对肿瘤血管生成的作用,以及以PFKFB3为靶点的肿瘤治疗研究进展进行综述。 展开更多
关键词 肿瘤 糖酵解 内皮细胞 磷酸果糖激酶2 抗血管生成 pfkfb3
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人胰腺癌组织中PFKFB3表达及其与MVD相关性的研究 被引量:1
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作者 胡伟 陆晔斌 +2 位作者 宋堃 刘杰仁 孙维佳 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第1期72-75,共4页
目的:检测人胰腺癌组织6磷酸果糖激酶2/果糖双磷酸酶2同工酶3(PFKFB3)的表达及微血管密度(MVD),并探讨二者临床意义和相关性。方法:采用免疫组化SP法检测41例胰腺癌组织和11例癌旁组织石蜡块中PFKFB3的表达情况,并对CD34标记阳性的血管... 目的:检测人胰腺癌组织6磷酸果糖激酶2/果糖双磷酸酶2同工酶3(PFKFB3)的表达及微血管密度(MVD),并探讨二者临床意义和相关性。方法:采用免疫组化SP法检测41例胰腺癌组织和11例癌旁组织石蜡块中PFKFB3的表达情况,并对CD34标记阳性的血管进行微血管密度计数,分析PFKFB3、MVD与胰腺癌临床病理特征的相关性及二者之间的相关性。结果:胰腺癌组织和癌旁组织中PFKFB3的阳性表达率分别为63.41%和9.09%,胰腺癌组织显著高于癌旁组织(P<0.01);PFKFB3呈阳性和阴性表达的胰腺癌组织MVD值分别为(49.12±12.04)、(35.40±8.12),两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。PFKFB3表达与胰腺癌的分化程度显著相关(P=0.035),MVD与胰腺癌TNM分期及淋巴结转移显著相关(P<0.05)。Spearman等级相关分析显示:胰腺癌PFKFB3表达与MVD值呈显著正相关(r=0.551,P<0.01)。结论:胰腺癌组织中PFKFB3呈高表达,可能通过促进血管生成,在胰腺癌的发生发展、转移过程中发挥重要作用,并可能作为胰腺癌预防、治疗和预后评估的参考指标。 展开更多
关键词 胰腺癌 pfkfb3 微血管密度 血管生成
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PFKFB3参与了11'-deoxyverticillin A(C42)诱导的HeLa细胞自噬和凋亡 被引量:2
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作者 秦鹏钧 陈同洋 +2 位作者 鲁倩倩 胡风庆 杨怀义 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1392-1401,共10页
【目的】明确糖酵解调节基因PFKFB3参与11-脱氧轮枝菌素A(11'-deoxyverticillin A,C42)诱导He La细胞自噬和凋亡中的作用。【方法】利用电镜、荧光显微镜、蛋白免疫杂交、转染、MTS活性检测、siRNA干扰、定量RT-PCR等对C42处理的He... 【目的】明确糖酵解调节基因PFKFB3参与11-脱氧轮枝菌素A(11'-deoxyverticillin A,C42)诱导He La细胞自噬和凋亡中的作用。【方法】利用电镜、荧光显微镜、蛋白免疫杂交、转染、MTS活性检测、siRNA干扰、定量RT-PCR等对C42处理的He La细胞自噬和凋亡情况进行了检测。【结果】C42能够引起He La细胞不同的死亡。敲降自噬关键基因BECN1或LC3后,明显增加PARP-1的切割和促进C42引起的细胞活性丢失。尽管高浓度C42能更明显地抑制细胞增殖,但却不能增加细胞的自噬流;C42促进的自噬能被糖酵解调节基因PFKFB3的抑制剂所降低;而过量表达糖酵解调节基因PFKFB3能促进细胞自噬。【结论】糖酵解调节基因PFKFB3直接参与了C42诱导的He La细胞自噬,这种自噬的发生抑制了其诱导的细胞凋亡。 展开更多
关键词 C42 自噬 凋亡 糖酵解 pfkfb3
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Roles of PFKFB3 in cancer 被引量:10
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作者 Linlin Shi Hongming Pan +2 位作者 Zhen Liu Jiansheng Xie Weidong Han 《Signal Transduction and Targeted Therapy》 SCIE 2017年第1期33-42,共10页
The understanding of 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3(PFK-2/FBPase 3,PFKFB3)has advanced considerably since its initial identification in human macrophages in the mid-1990s.As a vital regulator of... The understanding of 6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3(PFK-2/FBPase 3,PFKFB3)has advanced considerably since its initial identification in human macrophages in the mid-1990s.As a vital regulator of glycolysis,accumulating studies have suggested that PFKFB3 is associated with many aspects of cancer,including carcinogenesis,cancer cell proliferation,vessel aggressiveness,drug resistance and tumor microenvironment.In this review,we summarize current knowledge of PFKFB3 regulation by several signal pathways and its function in cancer development in different cell types in cancer tissues.Ubiquitous PFKFB3 has emerged as a potential target for anti-neoplastic therapy. 展开更多
关键词 pfkfb3 CANCER CARCINOGENESIS
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MRI影像组学对135例肝癌耐药蛋白PFKFB3的预测价值
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作者 靳新娟 左立平 +2 位作者 邓展昊 李安宁 于德新 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2023年第6期79-86,共8页
目的探讨原发性肝细胞肝癌(HCC)MRI强化特点、影像组学特征与癌组织中PFKFB3表达的相关性,建立HCC耐药相关蛋白的影像组学预测模型。方法回顾性分析2015年1月至2020年12月接受手术治疗并行术前增强MRI HCC患者135例,统计患者的临床数据... 目的探讨原发性肝细胞肝癌(HCC)MRI强化特点、影像组学特征与癌组织中PFKFB3表达的相关性,建立HCC耐药相关蛋白的影像组学预测模型。方法回顾性分析2015年1月至2020年12月接受手术治疗并行术前增强MRI HCC患者135例,统计患者的临床数据(年龄、性别、吸烟史、饮酒史、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、甲胎蛋白、病理分级、乙型肝炎病毒感染)、传统影像学指标(肿瘤大小、包膜、动脉期强化特征、肿瘤坏死、门静脉侵犯、肿瘤供血类型、出血、肝内卫星灶、动脉期肿瘤-肝差异)及影像组学特征,并通过免疫组织化学法检测PFKFB3表达。二元Logistic分析筛选出独立预测因素(P<0.05),根据筛选后的训练集特征构建影像组学预测模型。利用受试者工作特征(ROC)曲线评估预测模型的准确性并在验证集中进行验证。结果HCC患者丙氨酸氨基转移酶(OR=0.36,95%CI:0.16~0.83,P=0.017)及肝内卫星灶(OR=6.89,95%CI:1.76~27.03,P=0.006)是PFKFB3阳性表达的独立预测因子,MRI影像组学模型训练集AUC值为0.99,在验证集AUC值为0.80、95%CI为0.61~1.00、灵敏度为0.78、特异度为0.75。结论增强MRI影像组学预测模型可一定程度预测原发性HCC中PFKFB3的表达,可为HCC治疗肿瘤耐药提供重要的信息。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 耐药 pfkfb3 影像组学 磁共振成像
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PFKFB3基因在前列腺癌中的表达及其对前列腺癌细胞糖酵解及生长的影响 被引量:2
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作者 李骏 张倩 +2 位作者 江东根 陈楚杰 庞俊 《中华腔镜泌尿外科杂志(电子版)》 2020年第6期460-465,共6页
目的探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)基因在前列腺癌中的表达及其对前列腺癌细胞糖酵解及生长的影响。方法收集我院病理科前列腺增生和前列腺癌蜡块组织,应用免疫组化技术检测PFKFB3的表达水平。通过荧光定量PCR和W... 目的探讨6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3(PFKFB3)基因在前列腺癌中的表达及其对前列腺癌细胞糖酵解及生长的影响。方法收集我院病理科前列腺增生和前列腺癌蜡块组织,应用免疫组化技术检测PFKFB3的表达水平。通过荧光定量PCR和Western blot实验检测正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)和四种前列腺癌细胞系(PC3、LNCaP、DU145、C4-2)中PFKFB3的表达。应用RNA干扰技术敲低PFKFB3表达,采用细胞糖酵解试剂盒、CCK-8和克隆形成实验检测PFKFB3对前列腺癌细胞的糖酵解和增殖活性的影响。结果与前列腺增生组织相比,前列腺癌组织中的PFKFB3表达量明显增高[(59.7±0.25)vs(3.08±0.16),P<0.05],且病理Gleason评分越高,PFKFB3表达量也越高。同样PFKFB3在不同前列腺癌细胞系中均明显高表达。抑制PFKFB3基因表达后,前列腺癌细胞的糖酵解和增殖能力显著降低。结论PFKFB3基因在前列腺癌恶性进展中表达上调,促进肿瘤细胞的糖酵解和增殖,靶向PFKFB3可能为前列腺癌分子诊断和治疗提供潜在的应用价值。 展开更多
关键词 前列腺癌 细胞系 6-磷酸果糖激酶-2/果糖双磷酸酶-2同工酶3 RNA干扰 糖酵解 增殖
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PFKFB3和PFKFB4在乳腺癌中的研究进展
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作者 王浩辰 蒋树龙 《肿瘤研究与临床》 CAS 2023年第11期870-874,共5页
乳腺癌发病率已跃居恶性肿瘤首位,给女性健康带来严重威胁。与正常细胞氧化磷酸化代谢不同,乳腺癌细胞常发生以有氧糖酵解为特征的代谢重编辑。磷酸果糖激酶2/果糖双磷酸酶2(PFK-2/FBPase-2)家族同工酶PFKFB3和PFKFB4在有氧糖酵解代谢... 乳腺癌发病率已跃居恶性肿瘤首位,给女性健康带来严重威胁。与正常细胞氧化磷酸化代谢不同,乳腺癌细胞常发生以有氧糖酵解为特征的代谢重编辑。磷酸果糖激酶2/果糖双磷酸酶2(PFK-2/FBPase-2)家族同工酶PFKFB3和PFKFB4在有氧糖酵解代谢过程中发挥关键作用,参与乳腺癌的生长增殖、侵袭迁移、自噬以及药物耐药等多个环节。文章就PFKFB3和PFKFB4与乳腺癌的关系进行综述,以期为今后乳腺癌相关研究及临床转化提供借鉴和参考。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 糖酵解 pfkfb3 PFKFB4 治疗结果
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