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Cloning and functional characterization of two peptidoglycan recognition protein isoforms (PGRP-LC) in Bactrocera dorsalis (Diptera: Tephritidae) 被引量:2
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作者 WEI Dong WANG Zhe +2 位作者 XU Hui-qian NIU Jin-zhi WANG Jin-jun 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2020年第12期3025-3034,共10页
The innate immune system of insects is the front line of self-defense against pathogen invasion. Peptidoglycan recognition proteins (PGRPs) are important components and play key roles in insect immune systems by recog... The innate immune system of insects is the front line of self-defense against pathogen invasion. Peptidoglycan recognition proteins (PGRPs) are important components and play key roles in insect immune systems by recognizing peptidoglycan (PGN) in bacterial cell walls. We characterized two isoforms of the PGRP-LC gene, BdPGRP-LCa and BdPGRP-LCb, from Bactrocera dorsalis (Hendel), an important fruit and vegetable pest worldwide. These two isoforms contain an open reading frames of 1 668 bp and 1 731 bp, encoding a protein of 555 and 576 amino acids, respectively. Quantitative real-time PCR results showed that both transcripts were prominently expressed in midgut and fat body of B. dorsalis adult. Inoculation of pathogens showed that both isoforms actively responded to Escherichia coli PGN. We also observed a light response to Staphylococcus aureus PGN. Upon Beauveria bassiana inoculation, the expression of BdPGRP-LCa was enhanced, but the expression of BdPGRP-LCb was suppressed. Suppression of both transcripts by RNA interference led to increased mortality of flies challenged by E. coli, indicating that the two isoforms are involved in sensing Gram-negative bacterial infections. 展开更多
关键词 oriental fruit fly innate immunity pgrps Gram-negative bacterium
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小鼠PGRP-L分子PGRP结构域基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
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作者 何智 左大明 陈政良 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期472-475,共4页
目的克隆小鼠长型肽聚糖识别蛋白(PGRP-L)的PGRP结构域基因并在大肠杆菌中表达。方法采用RT-PCR技术,从Balb/C小鼠肝组织总RNA中扩增PGRP-L的PGRP结构域基因片段,将其克隆入pUCm-T载体,以PCR、酶切和测序进行鉴定。以PCR从含PGRP结构... 目的克隆小鼠长型肽聚糖识别蛋白(PGRP-L)的PGRP结构域基因并在大肠杆菌中表达。方法采用RT-PCR技术,从Balb/C小鼠肝组织总RNA中扩增PGRP-L的PGRP结构域基因片段,将其克隆入pUCm-T载体,以PCR、酶切和测序进行鉴定。以PCR从含PGRP结构域基因的重组质粒中扩增目的基因片段,插入表达质粒pQE-30构建重组表达质粒,转化大肠杆菌M15,诱导表达并纯化目的蛋白。结果 RT-PCR扩增得到约500bp的基因片段,将其与pUCm-T 载体连接构建成重组质粒pmPGRPd,其酶切图谱与计算机分析结果一致,该基因片段长518 bp,序列与Genbank中相应基因序列相同。构建成重组表达载体pQE-PGRPd,在大肠杆菌M15中表达,表达产物主要存在于菌体裂解液上清中,为一相对分子质量约29 000的可溶性蛋白。结论成功克隆并原核表达了小鼠PGRP-L分子PGRP结构域基因,为 PGRP-L分子的研究奠定了一定基础。 展开更多
关键词 小鼠肽聚糖识别蛋白 PGRP结构域 基因克隆 原核表达
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昆虫免疫系统中IMD信号通路的研究进展 被引量:3
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作者 杨静 马玉堃 +2 位作者 付海燕 刘春光 杨峰山 《中国农学通报》 2019年第24期100-108,共9页
先天免疫反应是昆虫抵御病原体入侵的第一道防线,IMD信号通路是昆虫正常免疫调控大多数抗菌肽基因表达的最重要途径,本文回顾了昆虫IMD信号通路最新文献,从肽聚糖识别蛋白种类和作用方式、Imd、dFADD和Dredd信号复合体形成与调控途径、R... 先天免疫反应是昆虫抵御病原体入侵的第一道防线,IMD信号通路是昆虫正常免疫调控大多数抗菌肽基因表达的最重要途径,本文回顾了昆虫IMD信号通路最新文献,从肽聚糖识别蛋白种类和作用方式、Imd、dFADD和Dredd信号复合体形成与调控途径、Relish的激活和正调节因子等方面总结了IMD信号通路正调节作用机制。并系统总结了IMD信号通路负调节因子种类及作用方式,重点阐述了PGRPs负调节、泛素相关负调节和细胞核内负调节因子参与IMD信号通路负调控作用机制。本文为深入了解昆虫免疫应答通路分子机制提供了参考。 展开更多
关键词 昆虫 IMD信号通路 PGRP 负调节 肠道免疫
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