植物凝集素PHA-L对小鼠急性辐射防护作用

观察植物凝集素PHA-L对小鼠急性辐射损伤的保护作用及相关机制。采用动物30 d存活率实验,即小鼠全身辐照至吸收剂量为7.2 Gy后观察其存活情况;利用外周血和免疫学实验,小鼠全身照射至吸收剂量为7.2 Gy后测外周血白细胞数(White blood cell,WBC)、股骨有核细胞数(The number of nucleated cells in bone marrow,BMNC)、骨髓DNA含量以及各脏器指数;对小鼠进行9.0 Gy腹部照射,取小肠组织做病理切片观察。结果显示,照射给药组小鼠30 d存活率比单纯照射组均有提高,特别是高剂量组提高约60%;与单纯照射组相比,照射给药高剂量组的白细胞数、骨髓DNA含量和脾结节数均有提高,分别从0.74±0.16、1.02±0.17和9.80±6.46提高到1.18±0.40、1.22±0.17和18.10±6.87,数据均有统计学意义(p<0.05),并且PHA-L对脏器也有一定的保护作用;与单纯照射组相比,照射给药高剂量组小鼠肠道组织损伤恢复明显。提示植物凝集素PHA-L对急性辐射损伤具有保护作用,但其作用机制有待进一步研究。

大鼠延髓网状背侧亚核传出投射的PHA-L顺行追踪法研究

目的 :显示大鼠延髓网状背侧亚核向内源性镇痛系统的直接传出纤维投射。方法 :将顺行追踪剂PHA - L注入大鼠单侧延髓网状背侧亚核 ,术后存活 2 0天后取脑 ,连续冠状切片 ,继而对切片进行 PHA- L免疫组织化学染色。结果 :发现中缝大核、蓝斑核、巨细胞网状核、中缝背核、中脑导水管周围灰质以及丘脑室旁核等均有阳性终末。结论 :延髓网状背侧亚核与内源性镇痛系统之间有广泛的纤维联系 ,提示该核与痛觉调节活动有关。

大鼠下丘脑室旁核对脑干和脊髓的传出投射——PHA-L法研究

对24只Wistar系大鼠,用PHA-L法追踪研究了下丘脑室旁核(Pa)向脑干和脊髓的投射。 Pa向中脑中央灰质和E-W核、脑干网状结构和中缝核、蓝斑臂旁区、孤束迷走复合体、疑核和疑核周区、延髓腹侧区等脑干结构,对脊髓外侧颈核、外侧脊核、胸腰骶节中间外侧柱及中央管周围区域等部位有广泛的投射。其中向脑干和脊髓的自主神经节前神经元区、脑干调节自主活动的中枢以及儿茶酚胺能神经细胞群所在区域的投射相对丰富。本文就Pa的下行传出投射进行了讨论。认为Pa是心血管活动中枢调节的重要部位,同时认为Pa的作用不是单系统、单方面的,它在下丘脑对自主活动的中枢调节中似占据一个关键性的位置。

大鼠腹侧间脑至室管膜的传出联系——PHA-L法研究

用PHA-L免疫组织化学顺行追踪技术对20只大鼠腹侧间脑至室管膜的传出联系进行了研究。在脑室系统一些部位的室管膜层或其下方见有丰富的标记纤维,并附有许多膨体。这些纤维似乎参与构成室管膜上、下丛,是脑-脑脊液神经体液回路的重要组成环节。

大鼠下丘脑室旁核的传出投射——PHA-L研究

下丘脑室旁核(PVN)的传出投射在24只Wistar大鼠用PHA-L免疫组化顺行追踪的方法予以研究。PVN对隔区、斜角带、杏仁体、视前区、下丘脑前区、下丘脑许多部位、丘脑中线若干核团和盖前区等基底前脑结构;对中脑中央灰质和艾魏核、脑干网状结构和中缝核、兰斑臂旁区、孤束迷走复合体、疑核和疑核周区、延髓腹侧区等脑干结构,对脊髓外侧颈核、外侧脊核、胸腰骶节中间外侧柱及中央管周围区域等部位有广泛的投射。其中对正中隆起和漏斗柄,脑干和脊髓的自主神经节前神经元区,脑干调节自主活动的中枢以及儿茶酚胺能神经细胞群所在区域有特别丰富的投射。本文就PVN的传出投射进行了讨论。认为PVN是心血管活动中枢调节的重要部位,同时认为PVN的作用不是单系统单方面的,它在下丘脑对自主活动的中枢调节中似乎占据一个关键性的位置。

微量免疫法制备兔抗PHA-L抗血清及PHA-L顺行追踪给药条件的探讨

用菜豆凝集素免疫纯种New Zealand家兔,得到兔抗PHA-L多克隆抗血清。琼脂双扩法测效价为1:32-1:64。将PHA-L用正电电泳方法导入大鼠尾壳核及终纹床核吻侧部,用上述自备的抗PHA-L抗血清作免疫细胞化学染色,清楚地显示了黑质及下丘脑室周部的PHA-L阳性标记终支及注射部位的阳性反应细胞,抗血清稀释度以1:3000～1:4000为佳。本文比较了间断正电、间断负电、连续负正交替、间断负电后间断正电电泳及静置不通电五种给药条件,结果表明,唯有通以正电时,才见阳性反应细胞及终支。本文讨论了正电流的作用。

大鼠脊髓向中央颈核和外侧颈核的投射——PHA-L顺行追踪研究

将菜豆白细胞凝集素(PHA-L)分别注入下颈髓、胸髓、腰髓和骶髓等不同脊髓节段,顺行追踪脊髓向中央颈核和外侧颈核的投射。观察结果表明,脊髓不同节段注入PHA-L,在中央颈核和外侧颈核均可见到标记末梢;比较各节段脊髓的投射分布,未能发现明显的定位关系。一侧脊髓灰质注入,在两侧中央颈核均观察到标记末梢,但主要见于同侧;外侧颈核的标记末梢仅见于同侧。结果提示,各节段脊髓均发出纤维投射到同侧中央颈核和外侧颈核。

大鼠终纹床核向结合臂旁核的投射 Ⅰ.HRP、PHA-L顺行追踪研究

应用HRP、PHA-L顺行标记技术对大鼠终纹床核向结合臂旁核的投射进行了研究。在尾侧结合臂旁核,投射终支分布于臂旁外侧核的腹外侧亚核及臂旁内侧核,在腹外侧亚核与臂旁内侧核之间的结合臂中也可见标记纤维;在中吻部结合臂旁核标记终支分布于臂旁外侧核的外外侧亚核、背外侧亚核、中央外侧亚核、腹外侧亚核及内外侧亚核;在结合臂背内侧端背侧可见许多标记终支分布;在臂旁内侧核亦见标记终支。

大鼠外侧楔核向小脑投射的追踪研究——PHA-L法

用菜豆白细胞凝集素(PHA-L)顺行追踪大鼠外侧楔核向小脑的投射。将PHA-L溶液电泳导入大鼠的外侧楔核后,用ABC免疫组织化学法可以清楚地显示出被标记神经细胞、纤维及终末的形态。结果表明,大鼠外侧楔核的投射纤维经同侧绳状体进入小脑。终末区主要包括小脑前、后叶的双侧蚓部、同侧前叶的半球部、同侧Ⅷ小叶的旁蚓部、Ⅸa小叶及同侧旁正中小叶的内侧部。Ⅳ-Ⅴ小叶上终末密度最高,并形成三条平行于正中矢状平面的终末带。在同侧脚Ⅰ及Ⅸb小叶上发现少量终末。结果还提示,外侧楔核无纤维终末至小脑中央核。

大鼠腹侧间脑至软脑膜的传出联系——PHA-L法研究

用16只Wistar大鼠以PHA-L免疫组化顺行追踪技术研究了腹侧间脑主要是下丘脑室旁核及其邻近区域至某些部位软脑膜的传出联系。在乳头体、丘脑背外侧份、中脑与间脑相接部背面中线旁等部位脑表软脑膜和软脑膜下见有丰富的标记纤维,并附有许多膨体和终扣。这些纤维似乎构成脑-脑脊液神经体液回路的一个组成环节。

黑素细胞痣的S—100蛋白和菜豆凝集素—L染色分析

作者对24例经病理诊断证实的黑素细胞痣进行了 S-100蛋白免疫组化染色,结果发现黑素细胞和痣细胞内均含有 S-100蛋白,支持两者为同一来源的学说。用菜豆凝集素L对痣细胞进行染色,结果表明真皮浅层及深层的痣细胞均染色,进一步支持痣细胞来源的一元论观点,同时也为检查痣细胞提供一种新方法。另一方面,表皮内黑素细胞并不染色,提示它的膜蛋白有异于痣细胞。

大鼠延髓网状背侧亚核下行投射终末在脊髓灰质的分布

本研究应用PHA－L顺行追踪技术研究了大风延髓网状背测亚核（SRD）至脊髓灰质下行投射的终止部位。结果表明：SRD发出的下行纤维走行于脊髓的背外侧京中，从高位至低位，脊髓灰质中的PHA－L顺标终末的密度逐渐降低。SRD的下行投射终未在脊髓中具有明显的同侧分布优势，主要终止在同侧脊历灰质的Ⅳ～Ⅶ层和X层，Ⅰ、Ⅱ层中只有少量的标记终末，对侧脊髓灰质中除了在Ⅳ层和X层中有中等密度的颁标终末分布外，其余各层中几乎无标记终未、PHA－L顺标终未与BSI-B4标记的初级传入C纤维终末在Ⅰ．Ⅱ层内重叠公布．本研究为SRD在调控脊髓的伤害性信息传递方面也起重要作用这一论点提供了直接的形态学依据．

大鼠孤束核和最后区向中脑导水管周围灰质的直接投射

应用神经束路追踪技术对大鼠孤束核(NTS)和最后区(AP)向中脑导水管周围灰质(PAG)的直接投射进行了观察。结果表明: (1)中、尾段NTS的内侧亚核和连合亚核向PAG的投射最多,腹侧亚核与背侧亚核次之,中段多于尾段,内侧亚核多于连合亚核和腹侧亚核; (2)这些亚核向PAG的腹外侧区投射最多,向外侧区投射较少,向背侧区投射最少,向背外侧区无投射; (3 )AP区的吻侧部向尾段PAG的腹外侧区投射最多,向其他部位投射较少; (4)在PAG的吻尾方向上,这些投射从吻段到尾段逐渐增加; (5)NTS和AP向PAG的两侧均有投射,但以同侧投射占优势。上述结果为进一步揭示PAG与NTS和AP之间的功能关系奠定了形态学基础。

一种敏感的辣根过氧化物酶反应法:葡萄糖氧化酶-二氨基联苯胺-硫酸镍铵法

神经系统束路追踪法或免疫组化法的最后步骤,常常需要用辣根过氧化物酶的呈色来显示。显示辣根过氧化物酶最常用的色素为二氨基联苯胺,其呈色产物为棕色,稳定,而且电子密度高,适于作光镜和电镜研究。但该法不够敏感,不能显示低浓度的过氧化物酶是其缺点。我们用葡萄糖氧化酶和葡萄糖代替双氧水供氧,并用镍盐增强二氨基联苯胺的呈色强度,得出一种黑色反应产物,比棕色产物的二氨基联苯胺原法及其他二氨基联苯胺法均敏感。能显示免疫反应阳性的细微结构,对显示阳性反应的纤维和终末效果极佳。并可与二氨基联苯胺原法或其他法合用作免疫组化双标记或免疫组化与束路追踪双标记。

大白鼠扣带回3区向杏仁体及其他核群的纤维投射——菜豆白细胞凝集素顺行示踪研究

本文用菜豆自细胞凝集素免疫组织化学顺行示踪技术,观察大白鼠扣带回3区(Cg3)向皮质下核团的纤维投射。其投射区自前向后主要有:伏核、尾壳核内侧1/3、终纹床核、外侧视前区、带旁核、丘脑前内侧核、背内侧核、前室旁核、网状核、外侧缰核、后室旁核、束旁核及丘脑筛状核等。在丘脑下方,标记纤维密集于未定带、内囊的内侧边缘区和乳头丘脑束的周围。自这些区域,有纤维投射至下丘脑外侧区。本文着重分析了标记纤维在杏仁体的分布情况,标记纤维密集于基底外侧前核和外侧核的腹内侧亚核。从而证实Cg3皮质的纤维投射参与基底外侧核一边缘系环路,即所谓记忆环路。而杏仁体中央核仅偶见极稀疏的标记纤维。所以我们认为,Cg3皮质未参与“内脏环路”。标记纤维自注射侧经胼胝体膝至对侧半球,其投射区与注射侧的投射区一致,但标记纤维比较稀疏。

大鼠耳蜗核团向前庭终末器官的神经投射研究

目的利用顺行荧光示踪剂研究Wistar大鼠耳蜗核团向前庭终末器官的神经投射。方法 Wistar大鼠20只随机分为实验组和对照组2组,每组10只动物。顺行示踪剂组Wistar大鼠10只,10只动物在脑干耳蜗核团注射绿色顺行荧光示踪剂PHA-L,10只动物在脑干耳蜗核团注射生理盐水作为对照。5d后处死动物,获取耳蜗和前庭外周器官,EDTA脱钙后行迷路连续冰冻切片,在荧光显微镜下观察荧光细胞在前庭终末器官的分布。结果在Wistar大鼠脑干耳蜗核团注射绿色顺行荧光示踪剂PHA-L后在注射同侧听神经和前庭终末器官发现绿色示踪剂。结论 Wistar大鼠耳蜗核团存在向前庭终末器官的神经投射。

鸽中脑半圆隆枕传出投射的研究

应用ＰＨＡ－Ｌ和Ｂｉｏｃｙｔｉｎ两种神经示踪物对非鸣禽环鸽（Ｓｔｒｅｐｔｏｐｅｌｉａｒｉｓｏｒｉａ）中脑半圆隆枕（ｔｏｒｕｓｓｅｍｉｃｉｒｃｕｌａｒｉｓ）的传出投射进行了分区研究。结果发现半圆隆枕丘间核内缘（ＩＣＭ）发出两束纤维分别向尾端投射至外侧丘系背核腹侧（ＬＬＤｖ）周围和向首端投射至丘脑卵形壳（Ｏｖ－ｓｈｅｌｌ）；丘间核（ＩＣｏ）发出的纤维直接投射至下丘脑前内侧核（ＡＭ）。从脑桥至听丘各级听神经核周围，均存在疏松网状神经纤维结构区，它们相互连接形成了一条与经典听觉神经通路相平行的旁听觉神经通路。这是首次关于鸟类发声、听觉和内分泌三维系统存在直接神经环路联系的较为完正的报道。

大鼠下丘脑室旁核及其邻近区域至室管膜的传出联系

用20只Wistar大鼠以PHA—L免疫组织化学顺行追踪技术研究了下丘脑室旁核及其邻近区域对脑室系统室管膜的传出联系。在脑室系统某些部位的室管膜层或其下方见有丰富的标记纤维并见许多膨结和终末膨突。这些纤维似乎参与形成室管膜上、下丛,构成脑—脑脊液神经体液回路的重要环节。

大鼠脊髓向后柱核投射的纤维行径的研究

后柱核由薄束核、楔束核和外楔核组成。用菜豆白细胞凝集素（ＰＨＡ－Ｌ）倾行追踪技术研究大鼠脊髓向后柱核的纤维投射。结果显示，颈膨大注入例的标记纤维见于后索背侧部的外侧区（腹侧部行径皮质脊髓束），标记末梢分布于楔束核和外楔核；胸髓注入例的标记纤维见于后索背侧部的中间区，标记末梢分布于楔束核内侧部和薄束核外侧部；腰膨大注入例的标记纤维见于后索背侧部的内侧区，标记末梢分布于薄束核大部；骶髓注入例的标记纤维见于后索背侧部的最内区，标记末梢分布于薄束核的最内侧部。实验结果表明，大鼠脊髓向后柱核的投射行径存在明确的定位分布。

大鼠腹腔-肠系膜上神经节内交感节前神经纤维的来源、走行和分布

目的 :探讨大鼠腹腔 -肠系膜上神经节内交感节前神经纤维的来源、走行及分布。方法 :用嗜神经追踪剂菜豆白血球凝集素 (phaseolus vulgavis leucoagglutinin,PHA - L )顺行性追踪 ,行 PHA- L免疫组化反应 ABC法。结果 :分布到腹腔 -肠系膜上神经节的交感节前神经纤维 ,来自胸 8～ 10脊髓节段侧柱 ,随内脏大神经走行 ,在内脏大神经进入腹腔 -肠系膜上神经节时 ,标记纤维集中成束 ,进入节后则立即分散分布。在节内腹侧部只见少量的标记纤维 ,节的中间部有大量互相交织成网状和树枝状集中分布的标记纤维 ,节的背侧部也只见有少量的标记纤维。节的吻侧端的标记纤维多于尾侧端。结论 :来自胸 8～ 10脊髓节段侧柱中间外侧核的交感节前神经纤维随内脏大神经走行 ,进入腹腔 -肠系膜上神经节 ,在节内呈广泛型分布。