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增强PHA-LAK细胞诱导激活新途径的研究 被引量:3
1
作者 范亚欣 程一櫂 +2 位作者 郭连英 王艳 钱振超 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1998年第1期32-35,共4页
本研究应用PHA、抗CD3单抗(aCD3)和rIL-2共同刺激人外周血单个核细胞(PBMC),诱生、扩增新型抗肿瘤效应细胞PHA-aCD3LAN,并与PHA-LAk和CD3AK细胞在某些生物学特性方面进行了比较,结果表明,PHA、aCD3和IL-2具有协同增强效应、使PHA-aCD3LA... 本研究应用PHA、抗CD3单抗(aCD3)和rIL-2共同刺激人外周血单个核细胞(PBMC),诱生、扩增新型抗肿瘤效应细胞PHA-aCD3LAN,并与PHA-LAk和CD3AK细胞在某些生物学特性方面进行了比较,结果表明,PHA、aCD3和IL-2具有协同增强效应、使PHA-aCD3LAK细胞的增殖能力、细胞毒活性、mIL-2Ra的表达水平及对IL-2的利用均高于PHA-LAK和CD3AK细胞;三组效应细胞均为异质性细胞群体,均以CD3^+ CD8^+T细胞为主,而PHA-aCD3LAK的CD8^+细胞百分率高于其它两组细胞.采用PHA-aCD3LAK可进一步提高LAK细胞的数量和活性。 展开更多
关键词 肿瘤 LAK细胞 pha-lak αCD3 治疗 IL-2 IL-2R
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恶性实体瘤患者自体PHA-LAK细胞过继性免疫治疗对淋巴细胞表型及功能的影响 被引量:2
2
作者 罗锋 毛咏秋 +5 位作者 阚兵 何秋明 田玲 杨莉 彭枫 姜愚 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2004年第3期243-246,共4页
目的 :研究回输自体PHA LAK细胞对恶性实体瘤患者淋巴细胞表型及功能状态的影响。方法 :入组2 0 4例实体瘤患者 ,并以 10例健康成人作为对照 ,采集与分离外周血单个核细胞 ,体外扩增PHA LAK细胞 ,采用流式细胞术分析淋巴细胞表型 ,MTT... 目的 :研究回输自体PHA LAK细胞对恶性实体瘤患者淋巴细胞表型及功能状态的影响。方法 :入组2 0 4例实体瘤患者 ,并以 10例健康成人作为对照 ,采集与分离外周血单个核细胞 ,体外扩增PHA LAK细胞 ,采用流式细胞术分析淋巴细胞表型 ,MTT法检测淋巴细胞杀伤活性。结果 :实体瘤患者较正常人淋巴细胞亚群CD3 + /CD4+ 细胞、CD3 + /CD8+ 细胞、B细胞、NK细胞减少 ,淋巴细胞杀伤活性下降。扩增的PHA LAK是以激活的淋巴细胞亚群CD3 + /CD8+ 细胞、CD3 + /CD56+ 细胞、CD4+ /CD2 8+ 细胞为主的异质性群体 ,其数量及杀伤活性明显增加 ,激活淋巴细胞标记性抗原分子表达亦增加。PHA LAK细胞回输治疗后 ,患者外周血上述激活淋巴细胞亚群数量增加 ,淋巴细胞杀伤活性增强。结论 :实体瘤患者淋巴细胞亚群数量及功能低下 ,PHA LAK细胞过继性免疫治疗使患者体内激活淋巴细胞亚群数量增加 。 展开更多
关键词 实体瘤 pha-lak纲胞 过继性免疫治疗
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PHA-LAK/IL-2疗法的应用与评价——60例实体瘤患者临床试验分析 被引量:1
3
作者 程一櫂 郭连英 +6 位作者 王艳 钱振超 刘洪民 高春章 钱宗鸣 李荫田 叶成通 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1996年第2期130-134,共5页
取健康“O”型供血者的PBMC经PHA预刺激后制成PHA-LAK,其表型以CD3^+、CD8^+为主,IL-2R表达水平、增殖能力、体外存活时间及细胞毒活性等均明显优于常规LAK。用该PHA-LAK(PHA预刺激的LAK细胞)与rIL-2(TGP-3,日本,武田)治疗60例实体瘤患... 取健康“O”型供血者的PBMC经PHA预刺激后制成PHA-LAK,其表型以CD3^+、CD8^+为主,IL-2R表达水平、增殖能力、体外存活时间及细胞毒活性等均明显优于常规LAK。用该PHA-LAK(PHA预刺激的LAK细胞)与rIL-2(TGP-3,日本,武田)治疗60例实体瘤患者(肾癌24例,肝癌、恶性淋巴瘤、结肠癌各5例,肺癌12例,其它恶性肿瘤9例)。Ⅰ、Ⅱ期临床试验结果表明,本PHA-LAK/IL-2疗法毒副作用甚轻或无,对肾癌、肝癌、恶性淋巴瘤的近期疗效较好,从而为肿瘤的继承性细胞免疫治疗开拓了新路。 展开更多
关键词 pha-lak/IL-2疗法 应用 评价 实体瘤 临床试验
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PHA-LAK细胞的制备 被引量:2
4
作者 秦北宁 沈丽英 《中国肿瘤临床与康复》 1997年第2期26-26,共1页
关键词 杀伤细胞 pha-lak细胞 制备
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LAK、CD3AK和PHA-LAK细胞体外增殖和杀瘤活性比较 被引量:5
5
作者 张彩 田志刚 +1 位作者 张建华 孙汭 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1998年第4期204-205,共2页
本文对LAK、CD3AK、PHA-LAK细胞的体外增殖能力、杀伤谱进行了同步比较.结果表明,三种效应细胞对悬浮和贴壁的肿瘤细胞系及新鲜分离的脑胶质瘤细胞均有较高的杀伤活性.由于LAK细胞增殖慢、IL-2用量大,PHA-LAK细胞体外存活时间短,而CD3A... 本文对LAK、CD3AK、PHA-LAK细胞的体外增殖能力、杀伤谱进行了同步比较.结果表明,三种效应细胞对悬浮和贴壁的肿瘤细胞系及新鲜分离的脑胶质瘤细胞均有较高的杀伤活性.由于LAK细胞增殖慢、IL-2用量大,PHA-LAK细胞体外存活时间短,而CD3AK细胞扩增倍数最高、细胞存活时间长、培养体系总的杀伤单位明显高于LAK和PHA-LAK细胞,且IL-2用量少.因此,我们认为CD3AK细胞是优于LAK和PHA-LAK细胞的较为安全、有效、经济的用于过继免疫治疗的抗癌效应细胞. 展开更多
关键词 LAK CD3AK pha-lak 细胞增殖 肿瘤 生物疗法
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PHA-LAK细胞激活培养过程中多项免疫学指标的动态分析 被引量:9
6
作者 袁小林 程一棹 +2 位作者 王艳 郭连英 钱振超 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1997年第4期204-207,共4页
本文用APAAP、ELISA、MTT等方法检测了PHA—LAK细胞激活培养过程中某些免疫学指标的动态变化,结果表明:(1)在PHA-LAK细胞预刺激阶段,CD3^+、CD4^+、CD8^+及mIL-2Ra^+细胞百分率均持续升高(P均<0.01);上清液中sIL-2R水平和IL-2活性也... 本文用APAAP、ELISA、MTT等方法检测了PHA—LAK细胞激活培养过程中某些免疫学指标的动态变化,结果表明:(1)在PHA-LAK细胞预刺激阶段,CD3^+、CD4^+、CD8^+及mIL-2Ra^+细胞百分率均持续升高(P均<0.01);上清液中sIL-2R水平和IL-2活性也升高,且前者与MIL-2Ra^+细胞百分率呈正相关(r=0.84,P<0.05);(2)在rIL2激活培养阶段,CD3^+、mIL-2Ra^+细胞百分率居高不下,CD4^+细胞百分率逐渐降低,而CD8^+细胞百分率则逐渐升高,培养上清液中sIL-2R水平增加和IL-2活性降低的幅度以激活培养的初期(0~3d)为最大.从而提示PBMC经预刺激后可迅速被外源性的rIL-2激活,这不仅可以提高rIL-2的利用率,也可能是PHA-LAK细胞具有较高增殖能力和细胞毒活性的原因. 展开更多
关键词 pha-lak细胞 T细胞表型 白细胞介素-2 受体
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植物血凝素及淋巴因子激活的杀伤细胞体外抗肿瘤作用的MTT比色法分析 被引量:5
7
作者 吴军 王晓怀 +1 位作者 杨太成 冼江 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第11期841-843,共3页
目的 检测植物血凝素及淋巴因子激活的杀伤细胞(PHA-LAK)的体外广谱抗肿瘤作用。方法 用MTT比色法测定 PHA-LAK对体外培养的K562、MGc80-3、143TK-、HeLa、LoVo等5种肿瘤细胞的杀伤活性... 目的 检测植物血凝素及淋巴因子激活的杀伤细胞(PHA-LAK)的体外广谱抗肿瘤作用。方法 用MTT比色法测定 PHA-LAK对体外培养的K562、MGc80-3、143TK-、HeLa、LoVo等5种肿瘤细胞的杀伤活性。结果PHA-LAK对5种不 同组织器官来源的肿瘤细胞均有明显杀伤活性,在效靶比为7.5:1.0时,PHA-LAK对143TK-细胞的杀伤率可高达 57.3%,杀伤效应随效靶比增加而升高;但在效靶比为15:1时,杀伤效应不随效靶比增加而增高数。结论 (1)来自健康献血 员的PHA-LAK对肿瘤细胞具非特异性杀伤活性,能较好解决传统过继免疫治疗中免疫效应细胞的数量和活性问题; (2)在一定的条件下,MTT法用于检测免疫效应细胞的杀瘤作用时才具灵敏、可靠的优点。 展开更多
关键词 MTT比色法 pha-lak 细胞毒性 植物血凝素 淋巴因子 肿瘤细胞 LAK TIL
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肿瘤患者脾来源的LAK特性及杀伤功能 被引量:1
8
作者 郝希山 邵莹 +7 位作者 张执萍 王津成 和世岩 任宝柱 戴荣增 李霈霈 崔寒柏 黎广宇 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期170-172,共3页
肿瘤患者脾来源的LAK细胞其增殖用的最低rlL_2量为250u/ml.LAK细胞泳动速率与脾细胞相比明显增快,其表型特征为T细胞系统.CD_3^+ CD_4^+/CD_^+ NK^-。4小时^(51)Cr释放试验显示其对NK敏感的K_(562)杀伤力为82%,对NK抵抗的Raji杀伤力为3... 肿瘤患者脾来源的LAK细胞其增殖用的最低rlL_2量为250u/ml.LAK细胞泳动速率与脾细胞相比明显增快,其表型特征为T细胞系统.CD_3^+ CD_4^+/CD_^+ NK^-。4小时^(51)Cr释放试验显示其对NK敏感的K_(562)杀伤力为82%,对NK抵抗的Raji杀伤力为39%。PHA可诱导肿瘤患者脾来源的单个核细胞Tac抗原的表达增强,PHA联合rIL_2应用可使LAK增殖力增强,但其杀伤力却减低,因而PHA不能用于LAK细胞诱导。 展开更多
关键词 杀伤功能 天然 杀伤细胞 肿瘤
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人LAK细胞的诱导及其体外抗肿瘤作用
9
作者 钟瑜 谢琪璇 +2 位作者 张春雪 潘善培 刘学高 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 1998年第S1期56-60,共5页
采用IL-2或IL-2+PHA-P对人外周血单核细胞进行体外淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK、LI-LAK细胞)的诱导及对其体外抗肿瘤细胞活性进行研究,结果显示:300~500IU/mL.IL-2+5μg/mLPHA-P,孵育时间8~10d为最适的诱导条件,最... 采用IL-2或IL-2+PHA-P对人外周血单核细胞进行体外淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK、LI-LAK细胞)的诱导及对其体外抗肿瘤细胞活性进行研究,结果显示:300~500IU/mL.IL-2+5μg/mLPHA-P,孵育时间8~10d为最适的诱导条件,最高可诱导细胞增殖100倍以上。诱导出的LAK及LI-LAK细胞对数种自然杀伤细胞(NK)敏感或不敏感的瘤细胞均有明显杀伤作用。实验还显示,PHA-P的主要作用可能是促进细胞扩增,而非肿瘤杀伤活性的诱导。 展开更多
关键词 LAK细胞 白细胞介素2 植物血凝素 肿瘤细胞 IDH释放法
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植物血凝素激活的LAK细胞激活培养条件与其生物学特性关系的研究
10
作者 靖学芳 《首都医科大学学报》 CAS 1997年第2期105-109,共5页
将PHA和rIL2合理配伍应用于LAK细胞的激活培养中,研究了PHALAK细胞的增殖、细胞毒活性及表型。结果表明:培养条件中加入适量PHA可促进PHALAK的增殖(P<0.05),不影响其细胞毒活性。PHA/r... 将PHA和rIL2合理配伍应用于LAK细胞的激活培养中,研究了PHALAK细胞的增殖、细胞毒活性及表型。结果表明:培养条件中加入适量PHA可促进PHALAK的增殖(P<0.05),不影响其细胞毒活性。PHA/rIL2共同预刺激组于培养第2d细胞数明显下降(30%~40%),但其到达增殖高峰的时间、峰值及扩增倍数与同一培养条件下的PHA单独预刺激组相比,差别无显著性(均为P>0.05);但前者对K562和Raji的杀伤高峰值大于后者(P<0.01)。各组PHALAK中有0.60~0.77的细胞为CD3+T细胞,但PHALAK/rIL2共同预刺激者的CD3+、CD8+细胞所占比率较PHA单独预刺激者为高(P<0.05)。 展开更多
关键词 LAK细胞 细胞毒活性 植物血凝素
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制备脐血LAK细胞的一种简单有效的方法
11
作者 李继梅 姜平 +3 位作者 王秦秦 郝萍 董坚 陈新明 《昆明医学院学报》 1997年第3期74-76,共3页
以健康脐带血为来源,采用3%明胶沉降法分离获取LAK前体细胞,并在培养体系中增加植物血凝素诱导因子.结果:该法与常规淋巴细胞分层液分离法均能从脐带血中获取大量的LAK前体细胞,且两者体外增殖情况及杀瘤活性并无明显差异... 以健康脐带血为来源,采用3%明胶沉降法分离获取LAK前体细胞,并在培养体系中增加植物血凝素诱导因子.结果:该法与常规淋巴细胞分层液分离法均能从脐带血中获取大量的LAK前体细胞,且两者体外增殖情况及杀瘤活性并无明显差异(P>0.05).提示新法简单快速,能从脐带血中制备出大量高抗肿瘤活性的LAK细胞. 展开更多
关键词 LAK细胞 胎血 植物血凝素 肿瘤 免疫疗法
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Experimental Studyon Anti-tumor Effect of SplenocytesInduced by Anti-CD3McAb,PHA and IL-2 被引量:1
12
作者 沈关心 张悦 +2 位作者 邵静芳 王晓林 朱慧芬 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 1994年第1期12-15,共4页
The proliferation of splenocytes from healthy adults was induced by anti-CD3 McAb,PHA and IL-2.The proliferative capability and anti-tumor activity as well as phenotypes of the splenocytes cultured in different medium... The proliferation of splenocytes from healthy adults was induced by anti-CD3 McAb,PHA and IL-2.The proliferative capability and anti-tumor activity as well as phenotypes of the splenocytes cultured in different medium systems were studied.The results showed that anti-CD3 McAb and PHA not only enhanced the proliferation of splenocytes induced by IL-2,but also produced synergism if used simultaneously.The expressions of CD4 and Tac of cellular surface markers were increased after splenocytes were induced by anti-CD3 McAb and PHA.The results of anti-tumor activity of LAK cells suggested that PHA had the capability to promote anti-tumor activity of LAK cells by both direct and in direct pathways,but anti-CD3 McAb indirectly promoted anti-tumor activity of LAK cellsby enhanctng splenocyte proliferation. 展开更多
关键词 Anti-CD3 McAb PHA IL-2 LAK cells
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LAK细胞之诱导条件的探讨
13
作者 肖云珍 詹建湘 +2 位作者 李翠娥 黄嘉凌 肖定璋 《微创医学》 2001年第6期765-766,共2页
目的 探讨 L AK细胞的诱导条件。方法 采用不同含量的 r- IL- 2 T和 PHA制备 L AK细胞 ,经台盼兰拒染实验计数法及 MTT比色法检验 L AK细胞数目及活性。结果 在 r- IL- 2 30 0 μ/ ml和 PHA10 μg/ ml时 ,制备的 L AK细胞数量多 ,杀... 目的 探讨 L AK细胞的诱导条件。方法 采用不同含量的 r- IL- 2 T和 PHA制备 L AK细胞 ,经台盼兰拒染实验计数法及 MTT比色法检验 L AK细胞数目及活性。结果 在 r- IL- 2 30 0 μ/ ml和 PHA10 μg/ ml时 ,制备的 L AK细胞数量多 ,杀伤活性较高。结论 结论 r- IL- 2和 PHA可诱导 L AK细胞增殖。 展开更多
关键词 LAK细胞 RIL-2 PHA
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人类LAK细胞体外实验性扩增及生物学活性分析 被引量:4
14
作者 张滨学 唐尧 +3 位作者 殷■ 由■ 王洁良 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1993年第10期733-736,共4页
由癌症患者外周血中分离出少量LAK前体细胞。在LAK细胞培养体系中加入重组人类白细胞介素2,植物血球凝集素以及辅助细胞,明显提高了LAK细胞的体外增殖能力并延长了LAK细胞的存活时间。表型分析发现,LAK-L细胞的1L 2受体(1L 2 R^-)表达... 由癌症患者外周血中分离出少量LAK前体细胞。在LAK细胞培养体系中加入重组人类白细胞介素2,植物血球凝集素以及辅助细胞,明显提高了LAK细胞的体外增殖能力并延长了LAK细胞的存活时间。表型分析发现,LAK-L细胞的1L 2受体(1L 2 R^-)表达水平明显高于LAK-S细胞,LAK-L细胞的体外大量增殖具有以OkT_2表型为主的单亚群增殖特性。体外杀伤实验及裸小鼠体内成瘤抑制实验结果表明.用此法扩增的LAK细胞(LAK-L)与体外短时间激活的LAK细胞(LAK-S)具有同样的抗肿瘤效应。 展开更多
关键词 杀伤细胞 白细胞介素2 凝集素
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PHA胸导管来源诱生的LAK细胞的作用
15
作者 李利 姚晓锐 +2 位作者 赵凤瑞 孙逸平 辛育龄 《中日友好医院学报》 1992年第S1期215-218,共4页
利用胸导管引流治疗哮喘病的机会,研究了PHA在rIL-2诱导胸导管淋巴细胞成为LAK细胞中的作用。结果表明:PHA和rIL-2共同诱导TDL2周,细胞数量扩增约34倍。同时明显促进了DL的~3H-TdR和~3H-Leucine的参入,较对照组有明显差异(P【0.01)。其... 利用胸导管引流治疗哮喘病的机会,研究了PHA在rIL-2诱导胸导管淋巴细胞成为LAK细胞中的作用。结果表明:PHA和rIL-2共同诱导TDL2周,细胞数量扩增约34倍。同时明显促进了DL的~3H-TdR和~3H-Leucine的参入,较对照组有明显差异(P【0.01)。其中rIL-2 100~1000U/ml和PHA组作用最佳,但PHA和rIL-2的协同作用持续时间短,第6d即开始下降,而且PHA参与诱导的TDL-LAK细胞的杀伤活性有所下降。 展开更多
关键词 PHA 胸导管淋巴细胞 LAK细胞
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PHA-LAK与常规LAK细胞生物学特性的比较 被引量:9
16
作者 刘乐琴 程一櫂 +4 位作者 柯丹兵 袁保和 郭连英 王艳 钱振超 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1994年第6期321-324,共4页
本文对来自正常人O型外周血单个核细胞(PBMC),经PHA预刺激48小时,然后用rIL-2诱导的LAK细胞(PHA-LAK)和直接用rIL-2诱导的常规制备的LAK细胞的生物学特性进行了比较。结果表明PHA-LAK和... 本文对来自正常人O型外周血单个核细胞(PBMC),经PHA预刺激48小时,然后用rIL-2诱导的LAK细胞(PHA-LAK)和直接用rIL-2诱导的常规制备的LAK细胞的生物学特性进行了比较。结果表明PHA-LAK和常规LAK在细胞形态、核型和细胞化学等方面均相似;而在增殖能力、体外存活时间、细胞毒活性方面PHA-LAK明显优于常规LAK。FACS表型分析表明:PHA-LAK的表型以CD3+CD8+为主,而常规LAK则以CD3+NKH ̄+_1为主,且PHA-LAKIL-2R的表达水平高于常规LAK。采用PHA-LAK可较好地解决LAK细胞的数量和活性问题,这在IL-2/LAK疗法中有重要的实用价值。 展开更多
关键词 外周血 单个核细胞 自然杀伤细胞 制备
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