shRNA干扰PLCε1基因对人食管癌Eca109细胞增殖和细胞周期的影响

目的探讨沉默PLCε1基因对食管癌Eca109细胞增殖和细胞周期的影响及其可能的机制。方法 PLCε11、PLCε12和PLCε13质粒表达载体用于沉默PLCε1,通用阴性对照质粒表达载体HK作为对照。用阳离子脂质体进行转染,筛选出干扰效果最好的质粒表达载体(PLCε12)。实验分为Eca109组、HK组和PLCε12组。MTT检测细胞的存活率。FCM检测细胞周期,RT-PCR检测细胞P16、Cyclin D1基因mRNA表达。结果 HK、PLCε12质粒表达载体转染Eca109细胞后48和72 h,PLCε12组Eca109细胞的存活率分别为80.73%和75.88%,显著低于HK组(P<0.001)。Eca109细胞转染后24 h,PLCε12组处于S期的细胞比例明显低于HK组(P<0.01),细胞周期阻滞于G0/G1期。质粒表达载体转染Eca109细胞48 h后,PLCε12组Eca109细胞P16基因mRNA表达水平明显高于HK组(P<0.01)。结论沉默PLCε1基因可能通过上调Eca109细胞P16基因的表达,阻止细胞周期从G1期向S期的过渡,抑制Eca109细胞的增殖活性。

PLCε1基因多态性与食管癌遗传易感性的关联研究

目的:探讨PLCε1基因rs2274223 A/G单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)和rs11599672 T/G SNP与河北省磁县高发区人群食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)遗传易感性之间的关系。方法:采用聚合酶链反应-连接酶检测反应(polymerase chain reaction-ligase detection reaction,PCR-LDR)方法对527例ESCC患者和527例健康对照PLCε1基因rs2274223 A/G SNP和rs11599672 T/G SNP进行基因分型。结果:ESCC患者组上消化道肿瘤(upper gastrointestinal can-cer,UGIC)家族史阳性个体比例为48.6%,显著高于健康对照组(39.3%,χ2=9.25,P=0.002)。ESCC患者组及健康对照组PLCε1基因rs2274223 A/G SNP AA、AG、GG基因型频率分别为48.0%、43.9%、8.1%和57.1%、37.5%、5.4%。与AA基因型相比,携带AG、GG、AG/GG基因型可能增加ESCC的发病风险,经年龄、性别、吸烟状况、UGIC家族史校正后的OR值分别为1.41(95%CI=1.09~1.83)、1.71(95%CI=1.03~2.86)、1.45(95%CI=1.13~1.85)。PLCε1基因rs11599672 T/G SNP等位基因频率和基因型频率总体分布在ESCC患者组及健康对照组之间无显著性差异(P>0.05)。应用2LD软件对PLCε1基因rs2274223 A/G SNP和rs11599672 T/GSNP进行联合分析显示,两个多态性位点间不存在连锁不平衡现象(D'=0.11)。与最常见的AT单体型相比,GT单体型增加了ES-CC的发病风险(OR=1.36,95%CI=1.08~1.71)。结论:PLCε1基因rs2274223 A/G SNP可以作为高发区人群ESCC遗传易感性的标志物。UGIC家族史阳性个体、携带PLCε1基因rs2274223 A/G SNP AG、GG基因型的个体罹患ESCC的风险较高,应定期接受食管内镜检查,以便真正实现ESCC的早期诊断、早期治疗。

PLCε1基因rs2274223A〉G多态性与上消化道肿瘤遗传易感性的关系的meta分析

目的综合评价磷脂酶Cel（PLCε1）基因rs2274223A〉G多态性与上消化道肿瘤遗传易感性的关系。方法通过计算机检索PubMed数据库，并结合文献追溯、手工检索等方法收集所有符合纳入标准的病例对照研究。应用meta分析的方法合并rs2274223多态性与上消化道肿瘤易感性关系的优势比（OR）值，并进行亚组、敏感性、回归分析和文献发表偏倚检验。结果共纳入18篇文献（23项研究数据），其中食管癌16项，胃癌7项；累计患者组16938例，对照组16680例。PLCel基因rs2274223A〉G多态性与上消化道肿瘤发病风险有关；等位基因G较A可增加发病风险。共显性杂合子比较模型、共显性纯合子比较模型、显性遗传模型、隐性遗传模型、等位基因模型均可发挥作用，以共显性纯舍子基因模型为著，GG与AA比较差异有统计学意义[0R=1．37，95％可信区间（95％CI）：1．16～1．62，P=0．001]。PLCε1基因rs2274223A〉G多态性在以上5种基因模型中均显著增加食管鳞状细胞癌（ESCC）的发病风险。与之相反，PLCε1基因rs2274223A〉G多态与胃癌、食管腺癌的发病风险无关。rs2274223多态仅与中国人上消化道肿瘤的发病风险显著相关，与高加索人和其他亚洲人（包括北印度人和朝鲜族人）发病风险无关。结论PLCε1基因rs2274223A〉G多态性与上消化道肿瘤易感性显著相关，尤其是在中国人群及ESCC中。

PLCE1基因突变与激素耐药性肾病综合征的关系

磷脂酶Cε1(phospholipase C epsilon-1,PLCE1)基因定位于常染色体10q23.32-q24.1,其编码蛋白为磷脂酶Cε1(phospholipase C epsilon-1,PLCε1)。PLCε1蛋白是最新发现的一种磷脂酶C(phospholipase C,PLC)同工酶,在成熟的肾小球足细胞表达,参与肾小球毛细血管袢的形成和正常发育。近来发现PLCE1基因突变可以引起常染色体隐性遗传性肾病综合征。PLCE1基因移码或无义突变可导致婴儿早发性肾病综合征,其病理特征为弥漫性肾小球硬化(diffuse mesangial sclerosis,DMS);而错义突变可导致局灶性节段性肾小球硬化(focal segmental glo-merulosclerosis,FSGS)。但其确切发病情况及机制目前尚不清楚,本文就PLCE1基因及其编码蛋白与激素耐药性肾病综合征之间的关系作一简要综述。

胰腺癌中磷脂酶Cε1和B淋巴细胞瘤-2表达的研究

目的获取胰腺癌组织,检测并探究PLCε1和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)在其中的表达及与胰腺癌临床资料的关系。方法收集中南大学湘雅医院胰腺癌患者(2013年1月至2016年12月确诊)病理石蜡标本69份。另取11个正常的胰腺组织作为对照。应用免疫组织化学的方法,检测所得标本组织中PLCε1和Bcl-2的染色情况。所得数据按临床资料进行分组并分析其相关意义。结果PLCε1和Bcl-2在胰腺癌组织中表达高于正常组织(P<0.05)。肿瘤组中PLCε1和Bcl-2的阳性表达强度在肿瘤大小组之间(P<0.05)和淋巴结转移组之间差异存在统计学意义(P<0.05)。PLCε1与Bcl-2的表达强度呈正相关(相关系数r=0.639,P<0.05)。结论PLCε1可能与胰腺癌的发生、发展有关;PLCε1和Bcl-2可能在某些信号通路中扮演重要角色,对胰腺癌内信号通路的调节发挥一定的作用。

磷脂酶Cε1在结肠癌组织中的表达及意义

目的通过检测结肠癌组织及其癌旁组织中磷酸肌醇特异性的磷脂酶Cε1(PI-PLCε1)的表达情况,探讨PI-PLCε1在结肠癌发病过程中的临床意义。方法采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)及免疫组化的方法检测42例结肠癌组织及其相对应的癌旁组织中PI-PLCε1的表达情况,并分析肿瘤分化程度及肿瘤部位对于结肠癌组织中PI-PLCε1表达情况的影响。结果 qRT-PCR结果显示,结肠癌组织中PI-PLCε1基因的表达低于其癌旁组织(P<0.05),不同肿瘤分化程度及肿瘤部位结肠癌组织中PIPLCε1基因的表达差异没有统计学意义(P>0.05)。免疫组化结果显示,结肠癌组织中PI-PLCε1蛋白的阳性表达率低于其癌旁组织(P<0.05)。不同肿瘤分化程度结肠癌组织中PI-PLCε1蛋白的阳性表达率差异没有统计学意义(P>0.05),但不同肿瘤部位中PI-PLCε1蛋白的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PI-PLCε1在结肠癌组织中的表达显著减少,且与肿瘤分化程度无关。