不同产地桔梗的聚丙烯酰胺凝胶电泳指纹图谱鉴别研究

目的建立不同产地桔梗药材的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)指纹图谱鉴别方法。方法蛋白质(Pro)、过氧化物酶同工酶(POD)、酯酶同工酶(EST)PAGE指纹图谱分析。结果不同产地桔梗的Pro-PAGE图谱差异极小;POD-PAGE与EST-PAGE图谱在谱带分布及数量上均具有显著性差异,分别具有各自的鉴别谱带。结论POD-PAGE与EST-PAGE指纹图谱可作为鉴别不同产地桔梗的有效方法。

同工酶PAGE凝胶电泳在大白菜品种鉴定中的应用研究

利用ＰＡＧＥ凝胶电泳对９个大白菜品种子叶期ＥＳＴ同工酶和ＰＯＤ同工酶进行了品种鉴定分析。结果表明，８０－７、山东４号和山东６号可利用ＥＳＴ同工酶酶谱加以区分，小杂５６、山东６号和山东７号可利用ＰＯＤ同工酶酶谱加以区分。单纯利用ＥＳＴ同工酶或ＰＯＤ同工酶不能将供试的９个品种完全鉴别出来。由于ＥＳＴ和ＰＯＤ２种同工酶酶谱综合多态性要比单一的一种同工酶酶谱丰富，将这２种同工酶结合起来，可将供试的９个大白菜品种完全鉴别出来。

不同含水量菜豆种子老化过程中生理特性的研究

对不同含水量的菜豆种子(2·1%、3·4%、3·8%、6·9%和9·0%)老化过程中的生理特性进行了研究。结果表明,菜豆种子在含水量为3·8%时,发芽率,保护酶系统(SOD、POD和CAT)活性和脱氢酶活性明显高于其它含水量的种子,而脂氧合酶(LOX)活性和丙二醛(MDA)含量显著低于其它含水量的种子,表现出较高的生活力。此结果表明适度降低菜豆种子的含水量可以提高其抗老化劣变能力;不同生活力的菜豆种子POD同工酶酶谱表现不同,而SDS-PAGE蛋白质谱带则基本相同。

水分胁迫对苦荞幼苗生理生化特性的影响

用30%PEG-6000模拟干旱环境对苦荞幼苗进行水分胁迫,研究水分胁迫对苦荞幼苗生理生化特性的影响。结果表明,在水分胁迫下,叶片相对含水量(RWC)下降,叶片POD活性、脯氨酸(Pro)和可溶性蛋白含量显著升高;复水后,RWC增加,POD活性、脯氨酸含量(Pro)下降,可溶性蛋白含量继续增加。研究还表明,在水分胁迫下膜脂过氧化产物MDA含量变化不显著。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明,水分胁迫下叶片49.0 kD和45.5 kD的蛋白表达减弱,复水后表达恢复到正常水平。

苏丹草品种纯度鉴定技术的研究——过氧化物酶同功酶标记

对我国审定登记的 5个苏丹草品种 ,应用幼苗叶片过氧化物酶同功酶电泳技术进行品种鉴定。结果表明 ,5个品种过氧化物酶同功酶表现出明显的谱带差异 :首先根据相对迁移率 (Rf)为 0 .834位置酶带的形状将 5个品种划分为 3组。其中 ,新苏 2号和盐池两品种呈连续的条形 ,宁农和乌拉特 1号下方有 1三角形谱带 ,而奇台苏丹草在该谱带左下方有 1圆点。其次 ,新苏 2号和盐池两品种在 Rf为 0 .4 5 5和 0 .4 93位置存在酶带 ,但新苏 2号酶带颜色明显深于盐池。另外 ,宁农和乌拉特 1号相比 ,Rf为 0 .834位置下方的三角形谱带乌拉特 1号居中而宁农偏右 ,可据此进一步区分该 2品种。

盐胁迫、辐射条件下耐盐与不耐盐水稻POD同工酶、全蛋白变化的研究

耐盐水稻品种９３４３经盐胁迫后，根系内诱导出一条活性很强的ＰＯＤ３同工酶谱带，而对盐敏感的１１８７、中作３２１、中作９３盐胁迫后活性很强的ＰＯＤ１谱带消失．蛋白质的变化呈现出与ＰＯＤ变化相类似的趋势，耐盐品种９３４３盐胁迫后某些蛋白质谱带含量增加，出现分子量与调渗蛋白相类似的２６ｋＤ蛋白质，但对盐敏感的三个品种则蛋白质含量下降，没有检测到２６ｋＤ蛋白．辐射后经ＮａＣｌ胁迫，耐盐的９３４３中同工酶和蛋白质均无明显变化，但不耐盐的三个品种，辐射后经盐胁迫出现同工酶谱带和蛋白质谱带增多．

低温胁迫对小麦品种过氧化物酶的影响

新发现小麦材料SCREEM具有较强的抗寒性,为了充分了解该材料抗寒能力,以另外4个不同抗寒类型的小麦品种为对照,对其大田条件下的旗叶和幼穗进行过氧化物酶(POD)的酶活性测定和POD同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE);并对其水培幼苗设置了25℃、0℃、-10℃和-20℃4个温度参数的胁迫,测定了各温度条件下的POD酶活性,也进行了POD同工酶PAGE。酶活测定和PAGE结果表明:①相同的大田条件和试验条件下,各品种(系)幼穗的酶活力要大于旗叶叶片的酶活力;幼穗的POD同工酶PAGE谱带要比旗叶叶片的同工酶谱带丰富;两个冬性材料京冬8号和SCREEM分别在幼穗和叶片有较高的酶活力。②4种温度条件下25℃时的酶活力较强,0℃次之,-10℃和-20℃较低,且-10℃和-20℃下的酶活力基本一样;在各温度条件下,冬性品种京冬8号和SCREEM均表现出较强的酶活力,但没有特殊的同工酶谱带。

毛茛属两种植物的过氧化物酶同工酶和酯酶同工酶的研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对毛茛属的毛茛 (RanunculusjaponicusscusThunb .)和扬子毛茛 (Ranuncu lussiebodiiMiq .)在不同生境中的叶、茎、果实进行了过氧化物酶同工酶及酯酶同工酶的分析 ,2个种的各组织器官均存在相似的酶谱 ,其中过氧化物酶的分离效果较酯酶的分离效果好 ,茎、果的酶带较叶的酶带多且分离效果好 .结果表明 ,不同种之间、同一种类在不同生境中及同一种类不同组织器官中的同工酶谱有差异 .

四个春箭舌豌豆品系原种及第三代过氧化物酶同工酶分析

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对引自国际干旱农业研究中心的4个春箭舌豌豆品系原种(F0)和在甘肃省甘南藏族自治州经过3个世代选育的F3代,进行幼苗下胚轴过氧化物酶同工酶分析。结果表明,2505品系F3代在相对迁移率(Rf)为0.725位置和原种相比酶带缺失,而Rf值为其它位置处谱带颜色均较原种为浅;2556F3代在Rf值为0.725处呈现酶带,而原种该谱带缺失,其它位置各谱带明显较原种为深;2560F3代在Rf值为0.211和0.266位置处酶带变宽,颜色加深;2566F3代在Rf值为0.725处呈现酶带而原种该谱带缺失,在Rf值为0.211和0.266处2酶带较原种位置偏上,颜色偏深。供试8个品系过氧化物酶同工酶酶谱与对照品种333/A相比,均存在较大差异。由此对以上4品系原种和F3代呈现出的宏观上的生态适应性提供了分子水平上遗传变异依据。

26个草地早熟禾品种同工酶的谱带特征

分析了26个草地早熟禾Poa pratensis品种的过氧化物酶和酯酶同工酶谱带特征，对凝胶进行双波长实物扫描，以品种间欧氏距离为遗传参数进行聚类分析。酯酶同工酶谱带特征为：谱带数为12～36，其中Bar 5469谱带最多（36条），Fortuna谱带最少（12条），在相对迁移率（Rf）为0.05～0.15的位点供试各品种Bar5469谱带最多（8条），Limousine最少（1条）；在Rf＞0.67的位点各品种谱带均较少，当欧氏距离大于5.4时，26个品种可聚为2个一级类群，当欧氏距离大于4.3时可分为3个二级类群，当欧氏距离大于2.8时分为4个三级类群。过氧化物酶同工酶酶谱特征为：谱带数较酯酶少，为5～23条，Geronino谱带数最多（23条），Bar5649和18号Merit最少（5条），在Rf＜0.65的位点，Bar5649和Merit谱带数最少（4条），Barlin、Cynthia和Geronino最多（10条）；在Rf为0.67～0.98位点处，Merit最少（1条），Geronino最多（13条）。当欧氏距离大于5.3时，可以分为2个一级类群，当欧氏距离大于3.4时，分为3个2级类群，当欧氏距离大于2.7时可分为4个三级类群，结合2种谱带特征为草地早熟禾品种利用和区分提供间接依据。

低锌和缺锌对玉米生长发育的影响

以玉米沈单10号为材料,用溶液培养的方法研究了缺锌、低锌和正常供锌对玉米生长发育的影响,进一步明确了一定量低锌比缺锌对玉米的伤害更大,并对其POD、SOD、CAT同工酶谱及蛋白质表达进行了分析.结果表明:一定浓度的低锌培养使玉米生长受抑及受害最重,且地上部分比地下部分更敏感.低锌和缺锌处理时3种同工酶的酶谱和蛋白表达与正常供锌时均有明显的差异,尤其在一定量低锌浓度时,有些同工酶的表达增强或被特异性诱导,而另一些酶的合成受阻;低锌和缺锌处理都诱导出了新的蛋白组分,也缺失了部分蛋白组分,且低锌比缺锌时缺失的蛋白组分更多,这些变化可能与玉米生长发育及受害密切相关.

低含量Pb^(2+)对Cd^(2+)污染下冬小麦幼苗根系过氧化物同工酶的影响

【目的】研究Pb2+含量低于国家"土壤环境质量标准(GB 15618-1995)"规定的Ⅱ类土壤环境基准值(300.0mg/kg)时,其对Cd2+污染下冬小麦幼苗根系过氧化物(POD)同工酶表达的影响,为正确评价土壤重金属污染条件下冬小麦生长发育的安全性和稳定性提供科学依据。【方法】采用盆栽试验,在不同含量Cd2+和Pb2+/Cd2+污染条件下培育冬小麦幼苗,待幼苗生长3周、7周和12周时,采集冬小麦幼苗根系,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),分析低含量Pb2+对Cd2+污染下冬小麦幼苗根系POD同工酶的影响。【结果】在幼苗生长的3周、7周和12周3个阶段中,土壤Cd2+污染对冬小麦根系POD同工酶的表达表现出了抑制效应;3周龄时,冬小麦根系POD同工酶表达量受Cd2+抑制影响最强,随着冬小麦生长时间的延长,Cd2+的影响开始减弱,且在冬小麦3周和7周龄时,20.0mg/kg Cd2+对冬小麦根系POD同工酶表达量的抑制作用最强。除3周龄时120.0mg/kg Pb2+可减缓20.0mg/kg Cd2+对冬小麦根系POD同工酶表达的抑制作用外,低含量Pb2+对Cd2+污染条件下冬小麦根系POD同工酶的表达均起协同抑制效应。【结论】冬小麦幼苗生长初期,土壤Cd2+污染对其根系POD同工酶表达表现出较强的抑制作用,随着冬小麦生长时间的延长,Cd2+的抑制作用减弱;当土壤中Pb2+含量低于国家"土壤环境质量标准"规定的Ⅱ类土壤环境基准值(300.0mg/kg)时,其增强了Cd2+污染对冬小麦根系POD同工酶表达的抑制作用。

菜豆豆荚多酚氧化酶的酶学特性研究

目的:了解菜豆豆荚多酚氧化酶(polyphenol Oxidase,PPO)的酶学特性。方法:采用聚丙烯酰氨凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)法对菜豆豆荚PPO的最适pH值、最适温度、底物专一性、激活剂及抑制剂进行研究。结果:菜豆豆荚PPO最适pH值为6.0;最适温度为30℃,且温度为30℃时,该酶具有较强的热稳定性,80℃可使其完全失活;该酶对不同酚类物质表现出不同的底物专一性,邻苯二酚为该酶的最适底物;抗坏血酸、L-半胱氨酸、β-巯基乙醇、甘氨酸均能抑制该酶的活性,而1.0mmol/Lβ-巯基乙醇或抗坏血酸可完全抑制其活性;氯化铜、尿素对该酶均有激活作用,其中氯化铜的激活作用明显。结论:高温、偏碱性环境、β-巯基乙醇或抗坏血酸处理均可有效抑制菜豆豆荚PPO活性。

苹果过氧化物酶活性及同工酶分析

为了给苹果生产中选种、育种和栽培提供生化依据,利用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳技术对7种苹果的过氧化物酶同工酶进行分析,并采用愈创木酚法测定过氧化物酶活性。结果表明:不同品种苹果的过氧化物酶同工酶有一定差异,愈创木酚法测得的苹果过氧化物酶活性与过氧化物酶同工酶谱的表达活性基本一致;乔纳金和黄元帅POD同工酶谱型很相近,亲缘性相近;奶油富士、烟台富士、冰糖果和国光POD同工酶谱相近,遗传上接近。

菠菜种子超干贮藏后抗老化作用的生理特性

从发芽率、保护酶系活性、脱氢酶活性、丙二醛含量和种子蛋白等方面对菠菜种子超干贮藏效果进行了研究.结果表明,超干贮藏可以提高种子的抗老化劣变能力.菠菜种子含水量为3.3%～5.4%时,表现出较强的抗老化和劣变能力及较好的耐藏性.超干和老化处理后菠菜种子的SOD,POD,CAT和脱氢酶活性显著高于原始含水量种子,而丙二醛含量显著低于原始含水量种子.不同含水量菠菜种子的SDS-PAGE蛋白质谱带无显著差异.

低温处理对三种作物幼苗生长及组织内POD、ATP_（ase）同工酶的影响

为了研究三种作物中ＰＯＤ、ＡＴＰａｓｅ同工酶的变化与低温忍耐的关系，我们将三种作物幼苗在０—４℃低温下处理１周，然后检查三种作物根系中的ＰＯＤ、ＡＴＰａｓｅ同工酶，结果发现，低温处理下的三种作物根系中的ＰＯＤ同工酶谱带减少，该同工酶的变化与作物的耐低温能力存在一定的相关性。

鬼针草属六种植物的同工酶电泳实验研究

目的:建立鬼针草6个品种过氧化物酶同工酶(POD)电泳指纹图谱,探讨鬼针草种内变异规律。方法:聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果:鬼针草6个品种过氧化物酶同工酶PAGE指纹图谱差异显著。结论:聚丙烯酰胺凝胶同工酶电泳图谱可用于鉴别鬼针草6个种质。

低温下钙对‘Page’橘柚愈伤组织抗寒相关生理指标的影响

研究了低温下外源不同Ca2+浓度对‘Page’橘柚愈伤组织一些抗寒相关的生理生化指标的影响.结果表明,以5mmolL-1的低浓度Ca2+处理比缺钙处理显著降低了低温下‘Page’橘柚愈伤组织细胞膜的伤害率和膜脂过氧化产物MDA的积累,显著提高了可溶性蛋白质的含量以及SOD和POD的活性,因而增强了‘Page’橘柚愈伤组织的抗寒性.但以15mmolL-1的高浓度Ca2+处理时,表现出一定的“毒害”作用,反而降低了抗寒性.以上结果表明,一定浓度范围内的外源Ca2+与‘Page’橘柚抗寒性的提高程度密切相关.

椰甲截脉姬小蜂室内外种群过氧化物酶和酯酶同工酶的比较

采用不连续垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),对椰甲截脉姬小蜂的室内和野外种群的过氧化物酶(POD)和酯酶(EST)同工酶分别进行了分析.结果表明:椰甲截脉姬小蜂室内和野外两个种群的POD同工酶和EST同工酶谱带均存在差异,酶带颜色也深浅不同.野外种群与室内种群相比,POD同工酶多一条迁移率为0.038的酶带,EST同工酶多一条迁移率为0.58的酶带.说明椰甲截脉姬小蜂室内种群与野外种群存在较明显的差异.

野生大豆与栽培大豆的同工酶分析

本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,分析了黄河三角洲野生大豆与栽培大豆的过氧化物酶(POD)和酯酶(EST)同工酶谱。结果表明,二者过氧化物同工酶谱在数目、分布上存在比较明显的差异,酯酶同工酶也存在区别,过氧化物酶同工酶谱可以作为野生大豆和栽培大豆进化和类型鉴定的参考依据。POD相似系数为0.667,EST相似系数为0.714,说明二者亲缘关系较近。