三七总皂苷通过激活PPARα/Nrf2减轻内皮细胞屏障和功能损伤

目的研究三七总皂苷(PNS)对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的内皮细胞屏障和功能损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法使用OGD/R诱导bEnd.3细胞以建立缺血再灌注损伤模型,同时设立对照组(Control)、模型组(OGD/R)、PNS高剂量组(OGD/R+PNS 400μg/mL)、PPARα抑制剂组(OGD/R+PNS 400μg/mL+PPARαinhibitor)和Nrf2抑制剂组(OGD/R+PNS 400μg/mL+Nrf2 inhibitor)。采用CCK-8检测bEnd.3细胞活性损伤,LDH试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)表达,蛋白印迹法检测ZO-1、claudin-5、occludin表达;采用细胞划痕和细胞侵袭实验检测bEnd.3细胞侵袭和迁移的水平;借助小管形成实验检测bEnd.3细胞小管形成能力。结果PNS通过激活过氧化物酶体增殖物激活受体α/核因子E2相关因子2(PPARα/Nrf2)信号减轻OGD/R诱导的bEnd.3细胞活性损伤和内皮屏障损伤,抑制细胞迁移和侵袭能力,改善血管生成损伤。结论PNS通过激活PPARα/Nrf2信号减轻OGD/R诱导的内皮细胞屏障和功能损伤。

罗格列酮调控PPARγ/NLRP3介导的细胞焦亡减轻大鼠对比剂诱导的急性肾损伤

目的探讨罗格列酮(RSG)减轻大鼠对比剂诱导的急性肾损伤(CI-AKI)的作用机制。方法雄性SD大鼠随机分为对照组(Control组)、CI-AKI模型组(Model组)、RSG治疗组[RSG组,40 mg/(kg·d)]和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)抑制剂组(T0070907组,0.15 mg/mL),每组各6只。建立CI-AKI大鼠模型,给药3 d后收集各组大鼠的血清和肾脏组织。检测肾功能指标血清肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)水平;ELISA检测白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-18、活性氧(ROS)和一氧化氮(NO)含量;苏木精-伊红(H-E)染色观察肾组织病理学变化;免疫组织化学(IHC)染色检测PPARγ、NLRP3蛋白表达;TUNEL染色检测肾组织细胞焦亡指数;Western-blot检测肾组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)、消皮素D(GSDMD)、IL-1β和IL-18蛋白表达。结果与Control组比较,Model组大鼠的Scr、BUN、IL-1β、IL-18、ROS和NO含量均增加(P<0.05或P<0.01);肾组织出现明显的病理损伤,细胞焦亡指数、NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β和IL-18蛋白表达升高(P<0.01),PPARγ蛋白表达降低(P<0.01),差别均有统计学意义。与Model组比较,RSG组大鼠血清的Scr、BUN、IL-1β、IL-18、ROS和NO含量均降低,差别有统计学意义(P<0.05或P<0.01);肾组织病理损伤减轻,细胞焦亡指数、NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、IL-1β和IL-18蛋白表达降低,PPARγ蛋白表达升高,差别均有统计学意义(P<0.01)。与RSG组比较,T0070907可逆转RSG对CI-AKI大鼠上述指标的影响。结论RSG能够改善大鼠CI-AKI,促进PPARγ表达,抑制NLRP3炎症小体活化介导的细胞焦亡。

基于LbD模式的钨产业创新型人才培养模式研究

服务国家重大战略需求,解决企业的卡脖子问题,是当前高校人才培养的使命。LbD模式是实现创新型人才培养目标的一种具有革新意义的教学模式,注重将教育、研发以及区域创新三大领域利益相关主体进行充分结合的联合育人模式。本文基于LbD培养模式,提出将大学生创新训练项目融入到钨产业创新型人才培养的实践教学中,以服务区域发展为目标,将实践教学与项目研发融为一体,培养机电类学生的创新实践能力,提高教师的科研能力。基于LbD教学理念的人才培养模式,为地方本科高校培育应用型人才的质量提升提供了参照及借鉴,为服务区域发展提供了一种新渠道。

基于PPARγ/LXRα/ABCA1信号通路探讨芪黄疽愈方对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化形成的影响及其作用机制

目的 基于过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ/肝X受体(LXR)α/三磷酸腺甘结合盒转运体(ABC)A1信号通路探讨芪黄疽愈方影响对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)形成及其作用机制。方法 选取25只C57BL/6小鼠作为空白组给予普通饲料喂饲配合生理盐水灌胃,68只ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组(24只)、中药组(22只)、对照组(22只)给予高脂饲料喂饲配合对应药物灌胃,12 w后通过主动脉苏木素-伊红(HE)染色证实造模成功,通过小鼠状态了解小鼠一般状况;主动脉HE染色、油红O染色观察动脉硬化及脂质沉积情况;肝脏HE染色、油红O染色观察肝脏病理变化、红染脂滴情况,并通过Western印迹、聚合酶链反应(PCR)检测PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白表达情况。结果 空白组皮毛水润光泽,精神状态良好,活跃,饮食饮水正常;模型组精神萎靡,皮毛晦暗,倦怠懒动,饮食差,饮水正常;与模型组相比,中药组及对照组给药后各症状均有不同程度改善。各组主动脉HE、油红O染色显示,空白组主动脉切片未见AS斑块,主动脉大体标本未见明显红染脂质;与空白组相比,模型组主动脉切片可见斑块,大体标本可见明显红染脂质;与模型组相比,中药组及对照组动脉切片中AS斑块面积较小,大体标本中红染脂质面积较小。小鼠肝脏HE、油红O染色显示,空白组肝细胞结构正常,细胞核位于细胞中央,细胞沿中央静脉为中心向四周放射排列,未见脂肪变性;油红O未见红染脂质;与空白组比较,模型组肝细胞排列紊乱,胞内可见形态不同、大小不等、数量不一的脂滴空泡,油红O切片可见大量红染脂质。与模型组比较,对照组、中药组肝脏病变程度减轻,肝细胞结构大部分清晰可见,脂滴数量减少,油红O红染脂质明显减少。Western印迹检测肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白的表达;与空白组相比,模型组PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白表达均明显降低(P<0.05);与模型组相比,中药组均显著升高(P<0.05)。PCR检测肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1 mRNA的表达,与空白组相比,模型组PPARγ、LXRα、ABCA1 mRNA表达均明显降低(P<0.05);与模型组相比,中药组显著升高(P<0.05)。结论 芪黄疽愈方能够影响小鼠动脉硬化,升高肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白表达,调节肝脏脂质代谢,促进胆固醇逆转运,延缓AS进展。

鲤PPARγ基因序列特征及其与脂肪沉积的相关性

为探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptor,PPARγ)对鲤(Cyprinus carpio)脂肪沉积的调控机制,采用RACE和实时荧光定量PCR技术克隆体质量(215.20±8.21)g鲤的PPARγ基因,分析其组织表达特征。结果显示,PPARγ基因c DNA全长为3 077 bp,包括233 bp的5′非编码区、1 311bp的3′非编码区和编码510个氨基酸的开放阅读框。鲤PPARγ包括4个功能结构域,即A/B区,DNA结合区(DNA binding domain,DBD区),铰链区和配体结合区(ligand binding domain,LBD区)。鲤PPARγ与鲫(Carassius auratus)、斑马鱼(Danio rerio)的氨基酸序列相似性最高,分别为98.63%和87.28%。PPARγ基因在各组织均有表达,肝脏中相对表达量最高,脑次之,脾和心脏中最少。腹腔脂肪中PPARγ基因表达量多脂鲤显著高于少脂鲤(P<0.05),背部肌肉中PPARγ基因表达量多脂鲤极显著高于少脂鲤(P<0.01)。推测PPARγ具有促进脂肪沉积的作用,PPARγ基因可以作为鲤脂肪沉积候选基因用于分子选择。本研究为进一步解析鲤PPARγ基因调控脂肪沉积分子机制研究奠定了理论基础。

大豆LBD基因家族的鉴定与表达分析

转录因子是植物生长发育的重要调节因子。侧生器官边界域(LBD,Lateral organ boundaries domain)基因家族是一类植物特有的转录因子,参与植物生长、营养代谢和逆境胁迫响应的调控。本研究采用生物信息学方法,从基因组和转录组水平对大豆LBD基因家族进行了系统鉴定和表达模式分析。系统进化结果显示,大豆LBD基因家族的89个成员可分为2大类、7个亚族。理化性质分析显示,大豆LBD基因家族编码的氨基酸数量范围在50 aa~325 aa,分子量为8 164.16 Da~60 499.65 Da,等电点介于4.69 pl~9.15 pl,不稳定系数为43.46~83.94。Motifs和基因结构分析发现,LBD基因家族成员保守性较高。启动子顺式作用元件分析显示,LBD基因家族成员含有与植物光响应相关的29种顺式作用元件,与植物激素相关的11种元件,以及与非生物和生物胁迫响应相关的6种元件。转录组分析发现,大豆LBD基因在DN50品种的生长节间伸长区(EZ)、成熟区(MZ)和茎尖(ST)的表达模式存在差异。LBD家族成员主要在MZ和ST高表达,其中GmLBD5、GmLBD23、GmLBD38、GmLBD46、GmLBD49、GmLBD71、GmLBD75和GmLBD78在EZ、MZ和ST均高表达,是调控大豆株高的关键候选基因。同时,还发现一些基因在茎组织特异表达,例如GmLBD83在EZ表达量较高,而GmLBD15、 GmLBD59、 GmLBD61和GmLBD84只在MZ高表达,GmLBD14、 GmLBD18、 GmLBD21、 GmLBD27、GmLBD55、GmLBD66和GmLBD70只在ST高表达。研究结果为深入分析LBD基因调节大豆节间生长发育的分子机理提供了靶标基因。

白藜芦醇通过AMPK/PPARα/PGC1α影响酒精依赖致肝损伤机制研究

目的 观察白藜芦醇(Resveratrol, RES)对酒精依赖大鼠肝组织损伤以及AMP依赖的蛋白激酶(adenosine 5-monophosphate-activated protein, AMPK)/过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptorα,PPARα)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α(peroxisome proliferator activated receptor gamma coactivator 1 alpha, PGC1α)信号通路的影响,讨论RES治疗酒精依赖致肝损伤的修复机制,为临床应用RES提供科学依据。方法 将SPF级雄性大鼠采用随机数字表法设立空白对照组、酒精依赖模型组,采用双瓶自由饮建立20%的酒精依赖模型;酒精依赖模型组制备成功后随机分为酒精依赖模型组、RES高、中、低剂量治疗组,继续给与双瓶自由饮,RES按照100、50、25 mg/(kg·d)剂量灌胃14 d。建模期间检测大鼠体重、饮酒量和饮水量,RES治疗后蛋白免疫印迹法检测大鼠肝组织AMPK、磷酸化AMP依赖的蛋白激酶(phosphorylation-adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinas, p-AMPK)、PPARα和PGC1α蛋白表达。结果 蛋白免疫印迹法结果显示:与空白对照组比较,酒精依赖模型组p-AMPK(t=6.61,P<0.05)、PPARα(t=3.08,P<0.05)和PGC1α(t=7.09,P<0.05)表达水平显著下调;与酒精依赖模型组比较,RES高剂量治疗组p-AMPK(F=8.60,P<0.05)、PPARα(F=4.38,P<0.05)和PGC1α(F=11.33,P<0.05)显著上调。结论 结果显示RES可能通过调控AMPK/PPARα/PGC1α信号发挥保护作用。

中医药调控PPARγ防治骨质疏松症的研究进展

骨质疏松症是一种由于骨形成与骨吸收偶联失衡所引起的退行性疾病。过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferation⁃activated receptorsγ,PPARγ)通过调控Wnt/β⁃catenin、CEBPα、OPG/RANKL/RANK信号通路加快骨质疏松症的发生与发展。研究发现,中药可靶向PPARγ调控这些信号通路,促进成骨细胞形成,抑制破骨细胞的吸收作用,从而发挥抗骨质疏松症的作用。本文通过检索PubMed、中国知网、万方、维普等数据库,将近十年收录有关中药通过抑制PPARγ防治骨质疏松症的研究文献进行概括与总结,以期为中药治疗骨质疏松症的深入研究提供参考依据。

葱白提取物通过PPARγ/HO-1途径对动脉粥样硬化大鼠血脂异常和炎症反应的调节作用

目的探讨葱白提取物(FOB)通过调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)/血红素氧合酶1(HO-1)途径对动脉粥样硬化(AS)大鼠血脂异常和炎症反应的影响。方法40只SD大鼠随机分为对照组、模型组(AS组)、FOB组和FOB+GW9662组,每组10只。对照组大鼠给予正常饲料喂养,其余3组大鼠均建立AS模型。各组大鼠连续给药4周。采用苏木精-伊红(HE)染色与油红O染色观察主动脉病变和脂质沉积情况;采用全自动分析仪检测总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,并计算动脉粥样硬化指数(AI);采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法和Western blot法分别检测大鼠胸主动脉组织中PPARγ和HO-1的mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组相比,AS组大鼠胸主动脉管壁明显增厚,内膜下可见炎症细胞浸润和泡沫细胞堆积,脂质斑块形成;FOB组大鼠胸主动脉组织病理变化及脂质斑块较AS组明显改善;FOB+GW9662组大鼠胸主动脉组织病理变化及脂质斑块较FOB组明显加重。与对照组相比,AS组大鼠血清TC、TG、LDL-C、IL-6、IL-1β、TNF-α水平及AI均显著升高(P<0.05),HDL-C水平及胸主动脉组织中PPARγ和HO-1的mRNA、蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。与AS组相比,FOB组大鼠血清TC、TG、LDL-C、IL-6、IL-1β、TNF-α水平及AI均显著降低(P<0.05),HDL-C水平及胸主动脉组织中PPARγ和HO-1的mRNA、蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。与FOB组相比,FOB+GW9662组大鼠血清TC、TG、LDL-C、IL-6、IL-1β、TNF-α水平及AI均显著升高(P<0.05),HDL-C水平及胸主动脉组织中PPARγ和HO-1的mRNA、蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论FOB可能通过激活PPARγ/HO-1信号通路调节血脂异常和炎症反应,缓解大鼠AS进展。

卡格列净联合洛塞那肽对2型糖尿病胰岛素抵抗患者胰岛功能、YKL-40、PPARγ的影响

目的研究卡格列净联合洛塞那肽对2型糖尿病胰岛素抵抗患者疗效,及对胰岛功能、血清YKL-40、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的影响。方法选择2型糖尿病患者98例,随机均分为对照组(洛塞那肽治疗)和联合组(卡格列净联合洛塞那肽治疗),比较两组临床疗效、胰岛功能、血清YKL-40、PPARγ水平、血糖指标及不良反应发生率。结果联合组治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。两组不良反应总发生率比较差异无显著性(P>0.05)。与治疗前比较,两组治疗后胰岛素曲线下面积、胰岛β细胞功能指数、PPARγ升高,胰岛素抵抗指数、YKL-40、空腹血糖、2 h餐后血糖、糖化血红蛋白、体质指数降低;且联合组变化更为显著(P<0.05)。结论卡格列净联合洛塞那肽治疗可有效提高2型糖尿病胰岛素抵抗患者胰岛功能,并显著改善YKL-40、PPARγ水平。

PPARγ在神经系统发育及相关疾病中的研究进展

过氧化物酶体增殖物激活受体γ (peroxisome proliferator-activated receptor gamma, PPARγ)作为配体依赖型核内转录因子,是经典的脂代谢调控因子,参与机体脂肪生成、葡萄糖代谢、血管生成和炎症发生等多种生物过程。除了在脂肪酸代谢活跃部位高水平表达, PPARγ在神经系统也大量存在,近年来越来越多的研究开始关注PPARγ在神经系统中扮演的角色。本文综述了PPARγ在神经系统发育及相关疾病发生发展中的重要作用:PPARγ通过调控机体炎症反应因子参与神经系统炎症过程;在中枢神经系统或周围神经系统发生外因损伤时, PPARγ通过抑炎或促进再生表现出神经保护功能;在帕金森病、阿尔茨海默病等神经退行性疾病中,调控PPARγ的表达可以起到延缓病程或临床治疗的效果;在视网膜病变中, PPARγ可以通过保护视网膜神经节细胞起到缓解作用。这些总结工作可以为PPARγ在神经系统发育和相关疾病进程中的调控机制研究及配体类药物开发提供参考资料。

丹参LBD基因家族的特性鉴定与抗热性分析

利用生物信息学方法,对丹参LBD(later organ boundaries domain)家族成员(SmLBDs)进行了系统的筛选和鉴定,并分析了其在高温胁迫(37℃)下的表达模式。结果表明,丹参中共有52个SmLBDs,可分为groupⅠ、groupⅡ、groupⅢ、groupⅣ、groupⅤ、groupⅥ和groupⅦ共7组。52个SmLBDs编码蛋白的氨基酸残基数为103~298,相对分子质量为11.29~31.72 k Da,等电点分布于4.44~10.71,均为亲水性蛋白,且大多定位在细胞核中。此外,分析52个SmLBDs在高温胁迫(37℃)下的表达模式发现,7个基因的表达水平下降,37个基因的表达水平上升,尤其是SmLBD8、SmLBD40和SmLBD44的表达水平显著提高,表明这些基因可能与丹参的抗热性相关。

Pparγ调控鱼类脂质代谢作用机制的研究进展

在集约化养殖过程中,鱼类普遍存在肝脏和腹腔脂肪过度蓄积,易导致代谢紊乱、炎症,抗逆抗病能力降低,严重制约了渔业的可持续性发展。作为脂质传感器,过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)在脂肪代谢过程中起到了重要的枢纽作用。PPARs包含PPARα、PPARβ/δ和PPARγ三个亚型。其中PPARγ被认为是脂质代谢中极为关键的调控因子,在调节细胞分化、维持能量代谢稳态和炎症中也起到重要的作用。文章综述了Pparγ对鱼类脂质代谢、脂滴平衡、脂肪细胞分化的调控作用及其影响因素,以期为系统阐明Pparγ对鱼类脂代谢调控机制提供参考,为推动水产养殖业的绿色发展奠定基础。

miR-27b对心力衰竭大鼠心肌细胞自噬、心肌能量代谢及PPARα信号的作用机制

目的 研究miR-27b对心力衰竭大鼠心肌细胞自噬、心肌能量代谢及过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α信号的作用机制。方法 清洁级SD健康雄性大鼠40只,随机分为4组,每组10只,由于建模时意外死亡3只,因此健康组10只、模型组9只,miR-27b-NC组9只、miR-27b组9只,miR-27b-NC组及miR-27b组于腹主动脉分别注射5μl(20 nmol/L)拮抗剂阴性对照、5μl(20 nmol/L)miR-27b拮抗剂,其余大鼠注射等体积生理盐水,1次/d,共4 w。苏木素-伊红(HE)染色及Masson染色观察大鼠心肌组织病理形态及纤维化,实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-27b、磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)mRNA、PPARα mRNA指标水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测心肌细胞能量代谢指标,TUNEL检测心肌细胞凋亡,免疫印迹检测微管相关轻链蛋白(LC)3Ⅱ、LC3Ⅰ、自噬相关蛋白(Beclin)-1、组织蛋白酶(Cath)D表达。结果 HE染色:健康组心肌细胞形态正常,结构清晰;模型组与miR-27b-NC组心肌细胞水肿并有大量炎性细胞浸润,此外还产生大量的成纤维细胞;miR-27b组与模型组相比,成纤维细胞增生及炎性细胞浸润减少。Masson染色:胶原纤维呈现蓝紫色,心肌细胞及肌纤维呈现红色。健康组心肌组织结构正常,心腔附近有少量胶原纤维;模型组与miR-27b-NC组胶原纤维显著增加;与模型组相比,miR-27b组胶原纤维增生有所减少。上述结果均提示建模成功。与健康组相比,模型组与miR-27b-NC组N末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)、游离脂肪酸(FFA)、心肌细胞凋亡、LC3Ⅱ、Beclin-1、CathD、miR-27b水平显著升高,LC3Ⅰ、AMPK、PPARα水平显著降低(P<0.05),在经过抑制miR-27b后,NT-proBNP、FFA、心肌细胞凋亡、LC3Ⅱ、Beclin-1、CathD、miR-27b水平显著降低,LC3Ⅰ、AMPK、PPARα水平显著升高(P<0.05)。结论 沉默miR-27b表达后可抑制心力衰竭大鼠心肌细胞自噬,减少心肌细胞凋亡,同时通过调控AMPK/PPARα通路改善心肌能量代谢水平,从而起到心保护的作用。

大黄鱼PPAR基因家族特征及其在饥饿和温度胁迫中的功能分析

分析了大黄鱼PPAR基因家族的序列结构及其在饥饿和温度胁迫下的表达特征。结果显示,除PPARg同时具有PPARg_N和PPARg_N_superfamily这2种结构域外,大黄鱼PPAR基因家族在结构上基本一致。此外,PPAR基因家族基因存在组织特异性表达,在饥饿胁迫下,随着饥饿胁迫时间推移,PPAR基因家族的表达量皆呈增长趋势,其中,PPARg在肌肉中表达量最高,推测PPAR基因家族在大黄鱼脂质代谢中发挥了作用。在温度胁迫下,PPAR基因家族在肝脏中的表达都呈波动变化趋势,而PPARg的表达量则随着胁迫时间的延长而显著上升。该研究为了解PPAR基因家族在调节大黄鱼脂质代谢中的作用提供了基础资料。

半硫丸调控AMPK/PPARγ/GPAT3信号通路对甲减模型大鼠脂质代谢异常的保护作用

目的探讨半硫丸调控AMPK/PPARγ/GPAT_(3)信号通路,改善甲减模型大鼠脂质代谢异常的作用及其机制。方法60只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、优甲乐组、半硫丸低剂量组、半硫丸高剂量组、联合用药组,每组10只,除正常组外,其余各组大鼠灌胃给予10 mg/kg丙硫氧嘧啶4周制备甲减模型,造模成功后干预6周,ELISA法检测血清甲状腺功能及血脂水平,RT-qPCR法检测肾周脂肪组织PPARγ、GPAT_(3)mRNA表达,Western Blot法检测肾周脂肪组织TSHR、AMPK、PPARγ、GPAT_(3)蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠血清FT3、FT4降低(P<0.01),TSH、TG、TC、LDL-C水平升高(P<0.01),肾周脂肪组织PPARγ、GPAT_(3)mRNA表达以及TSHR、PPARγ、GPAT_(3)蛋白表达升高(P<0.01),p-AMPK蛋白表达降低(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠血清TC、LDL-C水平降低(P<0.01),优甲乐组和联合用药组TG水平降低(P<0.01),半硫丸各组肾周脂肪组织PPARγmRNA表达以及TSHR、PPARγ蛋白表达降低(P<0.01),p-AMPK蛋白表达升高(P<0.01),各给药组GPAT_(3)mRNA及蛋白表达降低(P<0.01)。结论半硫丸可能通过调控TSHR介导的AMPK/PPARγ/GPAT_(3)信号通路改善甲减导致的脂质紊乱,这种机制与优甲乐不同。

运动诱导的BDNF促进运动恢复期骨骼肌中PPARδ依赖性脂质代谢的重编程

运动后的恢复对于解决代谢紊乱和促进对运动响应的长期细胞重塑至关重要。在这里,研究人员报道了肌肉产生的脑源性神经营养因子(BDNF)引起骨骼肌运动后的恢复和代谢重编程。BDNF增加了运动后PPARδ(过氧化物酶体增殖物激活受体δ)编码基因的表达。PPARδ是一种转录因子,是脂质代谢的主要调节因子。运动后,肌肉特异性Bdnf敲除(MBKO)小鼠表现出PPARδ调节的代谢基因表达受损、肌内脂质含量降低、β氧化减少和线粒体动力学失调。

HMGCS2通过调节PPARγ参与溃疡性结肠炎的发生发展

目的:探讨3-羟基-3甲基戊二酰辅酶A合酶2 (HMGCS2)通过调节过氧化物酶体增殖物激活受体γ (PPARγ)对溃疡性结肠炎(UC)发生发展的影响。方法:免疫组织化学染色检测HMGCS2蛋白在正常和UC肠道组织的表达。体外培养Caco2和HT29细胞,构建HMGCS2敲低慢病毒载体,分别转染两株细胞后得到sh-NC组、sh-HMGCS2-1组、sh-HMGCS2-2组和sh-HMGCS2-3组。通过Western Blot检测各组细胞过氧化物酶体增殖体激活受体γ (PPARγ)、信号转导和转录激活因子1 (STAT1)、信号转导和转录激活因子3 (STAT3)的蛋白表达。实时荧光定量PCR检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素1β (IL-1β)、白细胞介素6 (IL-6) mRNA的表达。结果:与正常肠道组织相比,UC肠道组织中HMGCS2表达水平显著降低(P β、IL-6和TNF-α的mRNA表达水平明显升高(P γ蛋白表达水平降低(P P > 0.05)。结论:HMGCS2可能通过调控PPARγ减弱肠上皮细胞炎症反应,参与UC的发生发展。

核受体PPARγ-LBD在原核系统的最适表达及纯化

目的 探索诱导PPARγ LBD的最适表达条件 ,提高可溶性PPARγ LBD蛋白在大肠杆菌中的表达量 ,然后用Ni2 + NTA离子交换树脂对表达蛋白进行分离纯化。方法 PPARγ LBD在大肠杆菌BL2 1(DE3 )中进行诱导表达时 ,以不同IPTG浓度、不同温度 ( 3 7℃ ,3 0℃ ,2 0℃ ) ,确定可溶性PPARγ LBD蛋白表达的最适条件 ;然后用Ni2 + NTA离子交换树脂进行分离纯化 ,其产物进行SDS PAGE纯度分析和Westernblotting鉴定。结果 建立了重组蛋白PPARγ LBD的最适诱导条件 ,即 0 .5mmol LIPTG浓度 ,2 0℃诱导 14h其可溶性表达蛋白的量最高 ;纯化产物经SDS PAGE纯度分析大于 90 %以上 ;Westernblotting检测 ,纯化产物为PPARγ LBD目的蛋白 ,其分子质量约 3 4× 10 3。结论 重组蛋白PPARγ LBD在E .coli中进行了成功表达和纯化 ,并且降低温度可提高可溶性蛋白PPARγ LBD表达量达 5 0

人PPARγ-LBD cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达纯化

从正常中国人的面部脂肪组织分离总RNA,采用RT-PCR获得人的PPARγ-LBD cDNA,然后克隆至原核表达载体pET28a,构建高效原核表达质粒pET28a-PPARγ-LBD,序列分析表明正常中国人的PPARγ-LBD cDNA序列与Gene Bank报道的序列一致。把构建的pET28a-PPARγ-LBD质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG进行诱导表达,Western blot检测表达产物,在相对分子质量34kDa处有特异的蛋白表达条带,表达蛋白以可溶性和包涵体方式存在。在N末端融合6×His纯化标签的表达产物用Ni^(2+)-NTA离子交换树脂进行纯化,纯化蛋白进行SDS-PAGE纯度分析大于90％以上。因此,获得了正常中国人的PPARγ-LBD cDNA序列,并且在E.Coli中成功表达和纯化了PPARγ-LBD蛋白。