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双分子荧光互补技术(BiFC)分析玉米SSⅠ与PPDK1之间的蛋白互作
被引量:
5
1
作者
崔喜艳
张继晓
+3 位作者
窦瑶
孙小杰
尹悦佳
刘相国
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2013年第7期49-53,59,共6页
【目的】分析玉米胚乳可溶性淀粉合成酶(SSⅠ)与质体型糖酵解途径关键催化酶丙酮酸磷酸双激酶(PPDK1)的蛋白互作关系,揭示可能发生互作的亚细胞位置。【方法】采用酶切连接的方法构建326-CYCHA-ss1和326-CYNEE-ppdk1双分子荧光互补表达...
【目的】分析玉米胚乳可溶性淀粉合成酶(SSⅠ)与质体型糖酵解途径关键催化酶丙酮酸磷酸双激酶(PPDK1)的蛋白互作关系,揭示可能发生互作的亚细胞位置。【方法】采用酶切连接的方法构建326-CYCHA-ss1和326-CYNEE-ppdk1双分子荧光互补表达载体,转化农杆菌EHA105,瞬时浸染烟草叶片组织,激光共聚焦显微镜下观察SSⅠ和PPDK1相互作用产生的荧光信号。【结果】双酶切试验鉴定表明,326-CYCHA-ss1和326-CYNEE-ppdk1重组载体构建正确;PCR结果证实,植物表达载体成功转化到农杆菌EHA105中;双分子荧光互补试验中,可观测到SSⅠ和PP-DK1相互结合而产生的黄色荧光信号。【结论】证实SSⅠ和PPDK1能够在植物活体细胞内发生真实的蛋白互作。
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关键词
SSⅠ
ppdk1
双分子荧光互补技术(BiFC)
瞬时转化
蛋白质互作
下载PDF
职称材料
玉米质体型AGPase小亚基和糖酵解关键酶PPDK1互作关系的研究
2
作者
崔喜艳
王阔
+4 位作者
张继晓
鹿丹
范贝
尹悦佳
刘相国
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2014年第7期47-52,60,共7页
【目的】利用双分子荧光互补(BiFC)技术,在烟草叶肉细胞中分析玉米ADP-葡萄糖焦磷酸化酶质体型小亚基(AGPase-bt2)与丙酮酸磷酸双激酶(PPDK1)之间的相互作用。【方法】构建326-CYCHA-AGPase-bt2和326-CYNEE-PPDK1双分子荧光表达载体,转...
【目的】利用双分子荧光互补(BiFC)技术,在烟草叶肉细胞中分析玉米ADP-葡萄糖焦磷酸化酶质体型小亚基(AGPase-bt2)与丙酮酸磷酸双激酶(PPDK1)之间的相互作用。【方法】构建326-CYCHA-AGPase-bt2和326-CYNEE-PPDK1双分子荧光表达载体,转化农杆菌EHA105,瞬时浸染烟草叶肉细胞,激光共聚焦显微镜下观察AGPase-bt2和PPDK1的相互作用。【结果】双酶切试验表明,326-CYCHA-AGPase-bt2、326-CYNEE-PPDK1载体构建正确;PCR结果证实,植物表达载体成功转化到农杆菌EHA105中;浸染烟草叶片后,AGPase-bt2和PPDK1在叶肉细胞中高效表达,出现BiFC荧光信号。【结论】AGPase-bt2和PPDK1在植物细胞内存在真实互作关系。
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关键词
AGPase-bt2
ppdk1
双分子荧光互补技术
蛋白质互作
下载PDF
职称材料
题名
双分子荧光互补技术(BiFC)分析玉米SSⅠ与PPDK1之间的蛋白互作
被引量:
5
1
作者
崔喜艳
张继晓
窦瑶
孙小杰
尹悦佳
刘相国
机构
吉林农业大学生命科学学院
吉林省农业科学院农业生物技术研究所
吉林大学生命科学学院
出处
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2013年第7期49-53,59,共6页
基金
国家自然科学基金项目(31170731
31200611)
+1 种基金
上海市科学技术委员会资助项目(10DZ2271800)
吉林省博士后科研项目[吉人社办字(2009)第100号]
文摘
【目的】分析玉米胚乳可溶性淀粉合成酶(SSⅠ)与质体型糖酵解途径关键催化酶丙酮酸磷酸双激酶(PPDK1)的蛋白互作关系,揭示可能发生互作的亚细胞位置。【方法】采用酶切连接的方法构建326-CYCHA-ss1和326-CYNEE-ppdk1双分子荧光互补表达载体,转化农杆菌EHA105,瞬时浸染烟草叶片组织,激光共聚焦显微镜下观察SSⅠ和PPDK1相互作用产生的荧光信号。【结果】双酶切试验鉴定表明,326-CYCHA-ss1和326-CYNEE-ppdk1重组载体构建正确;PCR结果证实,植物表达载体成功转化到农杆菌EHA105中;双分子荧光互补试验中,可观测到SSⅠ和PP-DK1相互结合而产生的黄色荧光信号。【结论】证实SSⅠ和PPDK1能够在植物活体细胞内发生真实的蛋白互作。
关键词
SSⅠ
ppdk1
双分子荧光互补技术(BiFC)
瞬时转化
蛋白质互作
Keywords
SSⅠ
ppdk1
bimolecular fluorescence complementation
transient transformation
protein and protein interaction
分类号
Q753 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
玉米质体型AGPase小亚基和糖酵解关键酶PPDK1互作关系的研究
2
作者
崔喜艳
王阔
张继晓
鹿丹
范贝
尹悦佳
刘相国
机构
吉林农业大学生命科学学院
吉林省农业科学院农业生物技术研究所
出处
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2014年第7期47-52,60,共7页
基金
国家自然科学基金项目(31170731
31200611)
+1 种基金
吉林省科技厅重点科技攻关项目(20130206012NY)
上海市科学技术委员会项目(10DZ2271800)
文摘
【目的】利用双分子荧光互补(BiFC)技术,在烟草叶肉细胞中分析玉米ADP-葡萄糖焦磷酸化酶质体型小亚基(AGPase-bt2)与丙酮酸磷酸双激酶(PPDK1)之间的相互作用。【方法】构建326-CYCHA-AGPase-bt2和326-CYNEE-PPDK1双分子荧光表达载体,转化农杆菌EHA105,瞬时浸染烟草叶肉细胞,激光共聚焦显微镜下观察AGPase-bt2和PPDK1的相互作用。【结果】双酶切试验表明,326-CYCHA-AGPase-bt2、326-CYNEE-PPDK1载体构建正确;PCR结果证实,植物表达载体成功转化到农杆菌EHA105中;浸染烟草叶片后,AGPase-bt2和PPDK1在叶肉细胞中高效表达,出现BiFC荧光信号。【结论】AGPase-bt2和PPDK1在植物细胞内存在真实互作关系。
关键词
AGPase-bt2
ppdk1
双分子荧光互补技术
蛋白质互作
Keywords
ADP glucose pyrophosphorylase
phosphate dikinase
bimolecular fluorescence complementation
protein interaction
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
双分子荧光互补技术(BiFC)分析玉米SSⅠ与PPDK1之间的蛋白互作
崔喜艳
张继晓
窦瑶
孙小杰
尹悦佳
刘相国
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2013
5
下载PDF
职称材料
2
玉米质体型AGPase小亚基和糖酵解关键酶PPDK1互作关系的研究
崔喜艳
王阔
张继晓
鹿丹
范贝
尹悦佳
刘相国
《西北农林科技大学学报(自然科学版)》
CSCD
北大核心
2014
0
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职称材料
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