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miR-136通过抑制PPP2R2A表达调控胃癌细胞SGC7901凋亡 被引量:2
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作者 邢亚楠 邓鹏 徐惠绵 《临床与病理杂志》 2015年第12期2108-2111,共4页
目的:检测miR-136对胃癌细胞SGC7901增殖和凋亡的影响及其机制。方法:分别利用MTT实验和Annex in V-PI实验检测转染miR-136 inhibitor的胃癌细胞SGC7901增殖和凋亡。利用western blot和双荧光素酶报告基因技术检测miR-136的靶基因。结果... 目的:检测miR-136对胃癌细胞SGC7901增殖和凋亡的影响及其机制。方法:分别利用MTT实验和Annex in V-PI实验检测转染miR-136 inhibitor的胃癌细胞SGC7901增殖和凋亡。利用western blot和双荧光素酶报告基因技术检测miR-136的靶基因。结果:抑制miR-136表达可以明显抑制SGC7901细胞增殖和诱导其凋亡。miR-136能够与PPP2R2A mRNA 3'-UTR区结合。结论:抑制miR-136表达能够促进PPP2R2A蛋白表达,进而引起胃癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 SGC7901细胞 miR-136 ppp2r2a 增殖 凋亡
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miR-122-5p靶向PPP2R2A在婴儿胆道闭锁中的作用机制研究 被引量:1
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作者 赵成基 李斌德 +4 位作者 李刚 王文赟 马仲福 曾永娟 胡继科 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第16期1998-2002,共5页
目的:探究miR-122-5p在婴儿胆道闭锁(BA)中的作用及其机制。方法:RT-qPCR检测miR-122-5p在BA患儿及胆总管囊肿(CC)患儿血清中的表达,及miR-122-5p和PPP2R2A mRNA在LX-2细胞中的表达。CCK-8检测不同组别中LX-2细胞的增殖活性。Western b... 目的:探究miR-122-5p在婴儿胆道闭锁(BA)中的作用及其机制。方法:RT-qPCR检测miR-122-5p在BA患儿及胆总管囊肿(CC)患儿血清中的表达,及miR-122-5p和PPP2R2A mRNA在LX-2细胞中的表达。CCK-8检测不同组别中LX-2细胞的增殖活性。Western blot检测p-AKT、AKT、PPP2R2A及Ki67蛋白在LX-2细胞内的表达。通过生物信息学网站预测miR-122-5p的下游靶基因,并通过双荧光素酶报告基因实验验证其靶向关系。结果:miR-122-5p在BA患儿血清中的表达水平显著升高。抑制miR-122-5p的表达显著抑制LX-2细胞的增殖、细胞内AKT的激活并促进LX-2细胞的凋亡,过表达PPP2R2A对LX-2细胞生物学行为的影响与前述一致。双荧光素酶报告基因实验证实PPP2R2A是miR-122-5p的下游靶基因。同时过表达LX-2细胞内miR-122-5p及PPP2R2A的表达水平对LX-2细胞的生物学行为无显著影响。结论:miR-122-5p在BA患儿血清中过表达,并通过体外实验证实miR-122-5p靶向PPP2R2A影响AKT信号通路的激活调控肝纤维化的进程。 展开更多
关键词 MiR-122-5p ppp2r2a 胆道闭锁 AKT信号通路 肝纤维化
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hsa-miR-136和PPP2R2A在骨巨细胞瘤组织中的表达及其意义
3
作者 王宁 朴成哲 《现代肿瘤医学》 CAS 2015年第5期672-675,共4页
目的:检测hsa-miR-136和PPP2R2A在骨巨细胞瘤组织中含量,并预测二者的作用位点。方法:采用Real-time PCR方法检测hsa-miR-136和Western-blot方法检测PPP2R2A在骨巨细胞瘤组织和瘤旁组织含量。利用miRNA靶基因预测软件Target Scan,对hsa-... 目的:检测hsa-miR-136和PPP2R2A在骨巨细胞瘤组织中含量,并预测二者的作用位点。方法:采用Real-time PCR方法检测hsa-miR-136和Western-blot方法检测PPP2R2A在骨巨细胞瘤组织和瘤旁组织含量。利用miRNA靶基因预测软件Target Scan,对hsa-miR-136的靶基因进行预测,Bibi Serv软件分析hsa-miR-136与靶基因结合的自由能。结果:hsa-miR-136在骨巨细胞瘤组织中的含量明显高于瘤旁组织(P<0.05)。PPP2R2A在骨巨细胞瘤组织中的含量明显低于瘤旁组织(P<0.05)。hsa-miR-136和PPP2R2A与骨巨细胞瘤患者的病理特征没有明显相关性。Kaplan-Meier生存曲线分析显示hsa-miR-136和PPP2R2A与骨巨细胞瘤患者生存时间具有显著相关性(P<0.05)。结论:hsa-miR-136和PPP2R2A在骨巨细胞瘤组织中表达异常,提示hsa-miR-136和PPP2R2A可能与骨巨细胞瘤的发生、发展有密切关系。 展开更多
关键词 骨巨细胞瘤 HSA - MIR - 136 ppp2r2a 预后 病理特征
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PPP2R2A在乳腺癌细胞中结合GFPT2并导致其去磷酸化 被引量:1
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作者 李笑荣 张进 马端 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期956-963,共8页
PPP2R2A是PP2A磷酸酶的调控亚基之一,以往的研究报道显示,PPP2R2A可促进肿瘤细胞生存和生长。本研究通过串联亲和纯化联合HPLC-Chip-ESI/MS/MS筛选PPP2R2A的相互作用蛋白质,分析结果显示,L-谷氨酰胺-D-果糖-6-磷酸转氨酶1(Glutamine-fru... PPP2R2A是PP2A磷酸酶的调控亚基之一,以往的研究报道显示,PPP2R2A可促进肿瘤细胞生存和生长。本研究通过串联亲和纯化联合HPLC-Chip-ESI/MS/MS筛选PPP2R2A的相互作用蛋白质,分析结果显示,L-谷氨酰胺-D-果糖-6-磷酸转氨酶1(Glutamine-fructose-6-phosphate transaminase 1,GFPT1)和L-谷氨酰胺-D-果糖-6-磷酸转氨酶2(Glutamine-fructose-6-phosphate transaminase 2,GFPT2)是PPP2R2A可能的结合蛋白。通过免疫荧光共定位、GST Pull-down和免疫共沉淀等方法,进一步确认了PPP2R2A和GFPT1及GFPT2的相互结合。通过shRNA下调PPP2R2A后,GFPT2的磷酸化水平显著增加,但GFPT1的磷酸化水平改变不明显。GFPT2是O-GlcNAC糖基化修饰通路中的一个限速酶,在乳腺癌细胞MDA-MB-231中下调PPP2R2A后,蛋白质O-GlcNAC糖基化修饰水平增加。这些结果表明,PPP2R2A可直接结合GFPT2,并导致其去磷酸化,进而影响细胞内O-GlcNAC糖基化修饰。 展开更多
关键词 ppp2r2a L-谷氨酰胺-D-果糖-6-磷酸转氨酶1 L-谷氨酰胺-D-果糖-6-磷酸转氨酶2 O-GlcNAC糖基化
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PPP2R2A在非小细胞肺癌组织的表达及其临床意义 被引量:2
5
作者 申思宁 刘奇 +2 位作者 马晓超 王总飞 刘士磊 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第3期547-549,共3页
目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)中PPP2R2A的表达,探讨NSCLC的临床病理学特性与其表达之间的关系。方法应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测37例NSCLC肿瘤组织,及其相应的癌旁组织中PPP2R2A的表达,并分析其与临床病理特征之间的关系... 目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)中PPP2R2A的表达,探讨NSCLC的临床病理学特性与其表达之间的关系。方法应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测37例NSCLC肿瘤组织,及其相应的癌旁组织中PPP2R2A的表达,并分析其与临床病理特征之间的关系。结果RT-PCR检测显示PPP2R2A的相对表达量在NSCLC组织、癌旁正常组织分别为1.15±0.38、3.78±1.77差异有统计学意义(P<0.01);PPP2R2A的低表达与患者的临床病理学特征如年龄、性别、TNM分期及有无淋巴结转移无明显相关(P>0.05),但是和肿瘤的病理类型、分化程度显著相关(P<0.05)。结论PPP2R2A在非小细胞肺癌中的低表达,有助于判断非小细胞肺癌的生物学特性。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 ppp2r2a
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利用CRISPR/Cas9构建敲除小鼠模型研究PPP2R3A基因对心脏功能的影响
6
作者 李洁 崔晓花 +2 位作者 梁媛 李小凤 宋贵波 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期1657-1661,共5页
目的 应用CRISPR/Cas9技术构建蛋白磷酸2调节亚基B″家族α亚型(PPP2R3A)基因敲除小鼠,从分子水平及组织水平上研究PPP2R3A缺失对心脏的影响。方法 将Cas9 mRNA和两个靶向PPP2R3A第3外显子翻译起始密码子附近区域的单导向RNA微注射到C57... 目的 应用CRISPR/Cas9技术构建蛋白磷酸2调节亚基B″家族α亚型(PPP2R3A)基因敲除小鼠,从分子水平及组织水平上研究PPP2R3A缺失对心脏的影响。方法 将Cas9 mRNA和两个靶向PPP2R3A第3外显子翻译起始密码子附近区域的单导向RNA微注射到C57BL/6小鼠受精卵中。小鼠出生后取其基因组DNA进行聚合酶链反应(PCR)和测序以鉴定基因型,鉴定后,基因PPP2R3A缺失型小鼠为KO组,野生型C57BL/6小鼠为WT组(雄性3只,雌性2只)。小鼠心脏组织经甲醛固定并制成切片后分别进行苏木素-伊红(HE)染色和免疫组织化学染色。提取小鼠心脏组织总RNA和蛋白,应用荧光定量PCR和Western印迹验证基因敲除小鼠的有效性和检测互作蛋白表达。结果 获得F1代PPP2R3A杂合小鼠,PCR和测序结果表明突变小鼠的基因型存在113 bp的缺失突变。与WT组相比,KO组心脏组织中PPP2R3A mRNA和蛋白表达量明显下降(均P<0.05),参与心脏发育的G蛋白信号转导调控因子(RGS)19表达量明显升高(P<0.05)。PPP2R3A蛋白表达受损引起了心脏组织病理学变化。结论 PPP2R3A在体内可能通过与RGS19蛋白互作来参与心脏的发育并对心脏功能产生影响。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 蛋白磷酸2调节亚基B″家族α亚型(PPP2R3A) G蛋白信号转导调控因子(RGS)19 基因敲除小鼠
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维吾尔族、汉族正常人群SCAl2亚型基因三核苷酸重复次数分析
7
作者 李海涛 马建华 +1 位作者 雷晶 张小宁 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期166-169,共4页
目的对新疆地区维吾尔族、汉族正常人群脊髓小脑性共济失调12型(SCA12)PPP2R2B基因进行研究。方法应用聚合酶链反应、琼脂糖凝胶电泳、直接测序等技术对维吾尔族、汉族健康者各90例进行PPP2R2B基因CAG三核苷酸重复次数进行分析。结果 9... 目的对新疆地区维吾尔族、汉族正常人群脊髓小脑性共济失调12型(SCA12)PPP2R2B基因进行研究。方法应用聚合酶链反应、琼脂糖凝胶电泳、直接测序等技术对维吾尔族、汉族健康者各90例进行PPP2R2B基因CAG三核苷酸重复次数进行分析。结果 90例维吾尔族健康者PPP2R2B基因的CAG频率的分布:共有13种PPP2R2B等位基因,CAG重复次数范围为6~19次,平均重复次数为(10.84±3.18)次,10次重复最常见,90例汉族健康者PPP2R2B的CAG频率的分布:共有12种PPP2R2B等位基因,CAG重复次数范围为6~18次,平均重复次数为(11.32±2.26)次,10次重复也是最常见,没有发现明显异常的等位基因。通过进行统计学方法检验,P>0.05,维吾尔族与汉族正常人群在PPP2R2B基因上差异无统计学意义。结论新疆地区维吾尔族、汉族正常人群SCA12亚型PPP2R2B基因在CAG三核苷酸重复次数范围、基因特点上无明显差别。 展开更多
关键词 脊髓小脑性共济失调12型(SCA12)PPP2R2B基因 三核苷酸重复
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HBV Infection Promotes the Occurrence and Development of Hepatocellular Carcinoma through Impairing the Inhibitory Effect of PPP2R5A on MAPK/AKT/WNT Signaling Pathway
8
作者 Xuejing Lin Ziming Mao +4 位作者 Qin Zhang Lei Chen Haihua Qian Chunying Liu Changqing Su 《Engineering(科研)》 2021年第4期197-214,共18页
Reversible phosphorylation and dephosphorylation play important roles in cell function and cell signal transduction. PPP2R5A (protein phosphatase 2 regulatory subunit B’ alpha) is responsible for specifically regulat... Reversible phosphorylation and dephosphorylation play important roles in cell function and cell signal transduction. PPP2R5A (protein phosphatase 2 regulatory subunit B’ alpha) is responsible for specifically regulating the catalytic function, substrate specificity and intracellular localization of the tumor suppressor phosphatase PP2A (serine/threonine protein phosphatase 2A). Therefore, the abnormal expression and function of PPP2R5A may be related to canceration. The aim of this study was to reveal its role in the occurrence and development of hepatocellular carcinoma (HCC). It is hoped that the results of this study can provide guidance for the prevention and treatment of HCC. The results showed that PPP2R5A inhibited the proliferation and metastasis of HCC cells, and acted as a tumor suppressor in HCC cells, but it had no significant effect on cell cycle. Further research found that PPP2R5A exerted tumor suppressor efficacy by inhibiting the MAPK/AKT/WNT signaling pathway. Combined with analysis of clinical tissue samples and TCGA database, it was found that the expression of PPP2R5A in tumor tissues of Chinese HCC patients was down-regulated and significantly correlated with the progression-free survival (PFS) of HCC patients. On the contrary, PPP2R5A showed an up-regulation trend in HCC cases in TCGA database although its effect on PFS was the same with that in Chinese HCC patients. Hepatitis B virus (HBV) infection is the main pathogenic factor of HCC in China. It was found that HBV infection reduced the content of PPP2R5A in cells. It was concluded that HBV inhibited the initiation of the protective mechanism mediated by PPP2R5A, making the occurrence and progress of HCC more “unimpeded”. This conclusion will further reveal the role of PPP2R5A in HBV-induced and HBV-unrelated HCC, therefore, providing clues for the prevention and treatment of the two types of HCC, respectively. 展开更多
关键词 Hepatitis B Virus (HBV) Hepatocellular Carcinoma (HCC) Protein Phosphatase 2 Regulatory Subunit B’ Alpha (PPP2R5A) Serine/Threonine Protein Phosphatase 2A (PP2A) Tumor Suppressor
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染料木黄酮对青春期前雄性大鼠生殖系统影响的机制研究 被引量:1
9
作者 汤晓月 蔡秋莹 +3 位作者 李育林 吕凡 单靖焱 李云 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期7-12,共6页
目的研究染料木黄酮(genistein,GEN)对青春期前雄性大鼠生殖系统影响的机制。方法选用30只初断乳(21日龄)SPF级雄性SD大鼠,随机分为对照组(Con组)、GEN低剂量组(G1组)、GEN高剂量组(G2组),每组10只。根据大鼠体质量,分别以5 mL/kg玉米油... 目的研究染料木黄酮(genistein,GEN)对青春期前雄性大鼠生殖系统影响的机制。方法选用30只初断乳(21日龄)SPF级雄性SD大鼠,随机分为对照组(Con组)、GEN低剂量组(G1组)、GEN高剂量组(G2组),每组10只。根据大鼠体质量,分别以5 mL/kg玉米油、150 mg/kg和300 mg/kg用玉米油溶解的GEN灌胃6周,隔天称取体质量1次。6周后处死大鼠,解剖睾丸、附睾、前列腺组织,计算脏器系数;观察睾丸组织病理结构变化;计数精子数量并计算精子畸形率;放射免疫法检测血清中睾酮和雌二醇的质量浓度;免疫荧光技术检测睾丸组织中蛋白磷酸酶2调节亚基2C(PPP2R2C)蛋白的表达定位;分别采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测大鼠睾丸组织中PPP2R2C和细胞周期依赖性蛋白激酶(CDK2)的mRNA和蛋白表达水平;免疫共沉淀法检测睾丸组织中蛋白磷酸酶2A(PP2A)活性。结果各组大鼠体质量、精子数量、血清雌二醇、PP2A酶活性差异均无统计学意义(P>0.05);G2组睾丸组织的病理结构紊乱;G1和G2组的精子畸形率高于Con组(P<0.05);G2组的血清睾酮质量浓度低于Con组(P<0.05);G2组PPP2R2C和CDK2的mRNA水平高于Con组(P<0.05),但蛋白水平低于Con组(P<0.05);PPP2R2C蛋白在各组睾丸组织中均有表达。结论青春期前长期暴露高剂量(300 mg/kg)GEN会对雄性大鼠成年后的生殖功能造成不良影响。由于在PP2A酶活性没有改变的情况下,磷酸化CDK2(p-CDK2)蛋白的表达量出现下降,PPP2R2C-PP2A-CDK2磷酸化路径可否影响大鼠的生殖系统仍需进一步研究。 展开更多
关键词 染料木黄酮 生殖系统 PPP2R2C CDK2 PP2A
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