目的研究常见肿瘤细胞与白细胞(WBC)中的脂代谢相关基因PRKAA2的表达差异,为PRKAA2用于循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的鉴定提供理论基础。方法根据THPA(The human protein atlas)数据库的RNA测序数据,分析WBC的PRKAA2基...目的研究常见肿瘤细胞与白细胞(WBC)中的脂代谢相关基因PRKAA2的表达差异,为PRKAA2用于循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的鉴定提供理论基础。方法根据THPA(The human protein atlas)数据库的RNA测序数据,分析WBC的PRKAA2基因表达丰度,应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)比较多种肿瘤细胞与WBC中PRKAA2基因的差异表达。采用原位锁式探针杂交技术在细胞原位可视化检测HepG2、U87、Hela、PC-3和健康人外周血WBC的分子表达。最后,掺入实验模拟临床真实样本验证PRKAA2用于鉴定肿瘤细胞的准确性。结果与健康人外周血WBC比较,HepG2、U87、Hela和PC-3的PRAKK2的表达显著上调,差异有统计学意义(均P<0.05)。原位锁式探针杂交实验结果显示HepG2、U87、Hela、PC-3(均为PRKAA2+)和WBC(PRKAA2-)的分子表达有显著区别。掺入实验表明,利用PRKAA2 mRNA荧光信号能准确识别肿瘤细胞。结论PRKAA2在HepG2、U87、Hela、PC-3肿瘤细胞系中的表达量显著高于WBC,且通过检测PRKAA2 mRNA的荧光信号可从大量的WBC背景细胞中准确识别肿瘤细胞。展开更多
文摘目的研究常见肿瘤细胞与白细胞(WBC)中的脂代谢相关基因PRKAA2的表达差异,为PRKAA2用于循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的鉴定提供理论基础。方法根据THPA(The human protein atlas)数据库的RNA测序数据,分析WBC的PRKAA2基因表达丰度,应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)比较多种肿瘤细胞与WBC中PRKAA2基因的差异表达。采用原位锁式探针杂交技术在细胞原位可视化检测HepG2、U87、Hela、PC-3和健康人外周血WBC的分子表达。最后,掺入实验模拟临床真实样本验证PRKAA2用于鉴定肿瘤细胞的准确性。结果与健康人外周血WBC比较,HepG2、U87、Hela和PC-3的PRAKK2的表达显著上调,差异有统计学意义(均P<0.05)。原位锁式探针杂交实验结果显示HepG2、U87、Hela、PC-3(均为PRKAA2+)和WBC(PRKAA2-)的分子表达有显著区别。掺入实验表明,利用PRKAA2 mRNA荧光信号能准确识别肿瘤细胞。结论PRKAA2在HepG2、U87、Hela、PC-3肿瘤细胞系中的表达量显著高于WBC,且通过检测PRKAA2 mRNA的荧光信号可从大量的WBC背景细胞中准确识别肿瘤细胞。