肉牛PRKAG3基因多态性及其与胴体和肉质性状的关联分析

本研究以晋南牛、鲁西牛、西门塔尔、安格斯、海福特、利木赞和夏洛莱7个品种共267头肉牛为试验材料,采用PCR-RFLP技术检测PRKAG3基因多态性,找到了PRKAG3基因DNA序列中的2个突变位点T2643C和T2885C(DQ082736),同属第4内含子。2个基因多态性位点与肉牛胴体和肉质共9个性状的关联分析表明:PRKAG3基因T2885C变异位点的3个基因型间嫩度性状差异显著(P<0.05),CC基因型最小二乘均值显著低于CD和DD基因型最小二乘均值。本研究结果可为肉牛肉质性状标记辅助选择提供依据。

营养水平对PRKAG3基因表达量及对肉质影响的研究

挑选70 kg左右的DLY猪12头,随机分为2组,分别饲喂高、低2种水平的日粮,高营养水平为DE 13.81MJ/kg、CP 14%,低营养水平为DE 12.55 MJ/kg、CP 11%。体重达到100 kg左右时屠宰,测定胴体性状、肉质性状和PRKAG3基因表达量。以探讨营养水平对PRKAG3基因表达量及肉质的影响。结果表明:低营养水平有促进PRKAG3基因表达的趋势(P>0.05);高营养水平有提高屠宰率、瘦肉量、瘦肉率、眼肌面积、L值、a值和b值的趋势(P>0.05),但滴水损失显著低于低营养水平(P<0.05);营养水平对PRKAG3基因表达量有一定的影响。猪PRKAG3基因表达量与瘦肉率、眼肌面积、a值、b值和滴水损失呈正相关,但相关性均不显著(P>0.05);与pH2呈显著负相关(P<0.05)。这表明营养水平对PRKAG3基因表达量有一定的影响,进而可影响肉质。

PRKAG3基因在不同品种猪不同生长阶段骨骼肌中的表达差异及其表达量与肉质的关系

本试验中旨在比较PRKAG3基因在不同品种猪不同生长阶段骨骼肌中的表达差异,并探讨PRKAG3基因与肉质的关系。挑选15 kg左右的汉普夏阉公猪17头和长撒阉公猪16头,饲喂相同饲粮,当体重分别达到20和50 kg时,2个品种的猪分别屠宰5头,体重达到100 kg时分别屠宰7和6头。各生长阶段屠宰后均测定骨骼肌pH、肌糖原含量以及PRKAG3基因表达量,且在100 kg阶段屠宰后同时测定肉质性状。结果表明:1)在不同生长阶段长撒猪骨骼肌中PRKAG3基因的表达量均高于汉普夏猪,特别是在100 kg阶段,长撒猪骨骼肌中PRKAG3基因的表达量是汉普夏猪的6.81倍(P<0.05)。长撒猪与汉普夏猪骨骼肌中PRKAG3基因的表达量均随体重的增加而增加,但汉普夏猪不同生长阶段PRKAG3基因的表达量差异不显著(P>0.05),而长撒猪PRKAG3基因的表达量在100 kg阶段时显著高于20和50 kg阶段时(P<0.05)。2)汉普夏猪和长撒猪的肉质存在差异。汉普夏猪的滴水损失和失水率显著高于长撒猪(P<0.05),而熟肉率、黄度(b)值极显著低于长撒猪(P<0.01),剪切力和pH2(屠宰后24 h的pH)显著低于长撒猪(P<0.05)。与长撒猪相比,汉普夏猪具有较高的肌糖原含量(P>0.05)。3)猪骨骼肌中PRKAG3基因的表达量与肉质的相关性存在品种效应。汉普夏猪骨骼肌中PRKAG3基因表达量与滴水损失呈正相关,与熟肉率呈负相关,与pH2呈显著负相关(P<0.05)。长撒猪骨骼肌中PRKAG3基因表达量与滴水损失和失水率呈正相关,与pH2呈负相关。上述结果表明,猪骨骼肌中PRKAG3基因具有品种和生长阶段表达差异;猪骨骼肌中PRKAG3基因的表达量与肉质性状相关,特别是与pH2,二者呈显著负相关。

延边黄牛PRKAG3基因第10外显子单核苷酸多态性及其与肉质性状的相关分析

采用PCR-SSCP方法对120头延边黄牛PRKAG3基因的多态性进行检测,结果发现第10外显子存在C4738T突变,产生3种基因型。不同基因型与肉质性状均值差异显著性检验结果发现,基因型CT与a2*4、b2*4、油酸存在一定的负相关(P<0.05);与嫩度、谷氨酸、精氨酸、丙氨酸、缬氨酸和脯氨酸有一定的正相关(P<0.05);基因型CC与天冬氨酸存在一定的正相关(P<0.05)。

绵羊PRKAG3基因SNPs与肉质性状的相关性分析

为从分子水平研究甘肃境内典型养殖模式下甘肃高山细毛羊、小尾寒羊、藏羊、蒙古羊和滩羊5个绵羊品种的PRKAG3基因多态性与屠宰性能和肉品质的相关性,探讨以PRKAG3为候选基因,提高绵羊屠宰性能和肉品质的可能性。采用PCR-SSCP技术对5个绵羊品种的PRKAG3基因外显子4,5和内含子4多态性进行检测,并就PRKAG3基因多态性与9月龄屠宰性能和肉品质进行相关性分析。结果表明,在PRKAG3基因2 689 bp处发生了A>G的突变,位于第4内含子第23 bp处,表现出3种基因型,AA、AB和BB。纯合度(Ho)分别为0.67,0.69,0.76,0.69,0.59,杂合度(He)分别为0.333 3,0.306 1,0.244 9,0.307 7,0.408 2,有效等位基因(Ne)分别为1.62,1.66,1.69,1.48,1.79,多态信息含量(PIC)分别为0.31,0.32,0.33,0.27,0.34。除藏羊外其他4个绵羊品种均处于Hardy-Weinberg平衡状态。关联分析表明,5个绵羊品种PRKAG3基因此变异位点的3个基因型间失水率性状差异显著(P<0.05);BB基因型个体的胴体重显著高于AA型(P<0.05),滩羊为极显著(P<0.01),BB基因型个体的眼肌面积显著大于AA型(P<0.05)(藏羊除外)。因此说明PRKAG3基因可作为候选基因用于绵羊产肉性能和肉品质的分子标记辅助选择。

大围山微型鸡和艾维茵肉鸡肌糖原含量及PRKAG3基因表达相关性研究

肌糖原含量是影响肉质的一个重要因素,而PRKAG3基因在糖原合成和代谢过程中起着重要的作用。为研究鸡PRKAG3基因表达量与肌糖原含量的相关性,研究以大围山微型鸡为研究对象,以艾维茵肉鸡作对照,检测肌肉组织中PRKAG3 mRNA表达量和肌糖原含量。结果显示:大围山微型鸡胸肌和腿肌中PRKAG3 mRNA表达量和肌糖原含量均高于艾维茵肉鸡,且PRKAG3 mRNA表达量与肌糖原含量呈正相关。结果表明,鸡肌肉中PRKAG3基因对糖原的积累具有促进作用,且大围山微型鸡和艾维茵肉鸡肌肉中肌糖原含量的差异可能是由于遗传基础不同导致。因此,PRKAG3基因可能是一个重要的影响肉品质的候选基因。

饲粮中添加二甲双胍对猪PRKAG3基因表达量及肉质的影响

旨在研究二甲双胍(Metformin)对PRKAG3基因表达量以及对猪生长性能及肉质的影响。挑选80kg左右的杜洛克×长白×大约克三元杂交(DLY)阉公猪10头,随机分为对照组和试验组。试验组日粮中添加400mg·kg-1体质量的Metformin,对照组日粮除不含Metformin外,其它日粮成分与试验组相同。2周试验结束后所有猪只全部屠宰,测定生长性能、AMPK活性、PRKAG3基因表达量、AMPKγ3蛋白表达量、胴体品质和肉质性状。结果表明:1)日粮中添加400mg·kg-1体质量的Metformin后,试验组AMPK活性、PRKAG3基因mRNA含量和AMPKγ3蛋白表达量分别比对照组提高了13.92%、4.39倍和35.53%(P<0.05)。2)试验组采食量和平均日增体质量分别比对照组下降13.80%(P<0.05)和13.14%,而料肉比则比对照组提高6.77%。3)试验组胴体长显著低于对照组(P<0.05),屠宰率、背膘厚、眼肌面积和瘦肉率均低于对照组,但差异均不显著(P>0.05)。4)试验组pH2、滴水损失、a值低于对照组(P>0.05);pH1、剪切力和熟肉率高于对照组(P>0.05);L值和b值则极显著高于对照组(P<0.01)。结果提示,Metformin可激活PRKAG3基因表达,进而可能影响猪生长性能和肉质。

PRKAG3基因在骨骼肌中的营养代谢调节作用及其对肉质的影响

PRKAG3是近年来确定的一个影响猪肉pH、肉色以及系水力的主效基因,其突变R200Q与过量肌糖原含量有关,被认为是汉普夏猪发生RN-突变的根本原因。AMPK-γ3复合物在糖酵解骨骼肌中对糖和脂肪的代谢有着独特的调节作用。本文系统综述了PRKAG3基因在骨骼肌中营养代谢调节作用和对肉质的影响及其基因表达的调控,为从分子水平深入开展肉质的研究提供参考。

PRKAG3在猪组织器官中的表达差异及与胴体品质关系研究

PRKAG3是编码一磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)γ3亚基的基因,是近年来确定的一个影响猪肉pH值、肉色以及系水力的主效基因,其突变R200Q与过量肌糖原含量有关,被认为是汉普夏猪发生RN-突变的根本原因。本研究以-βactin作为内参,用半定量RT-PCR方法测定雅南猪和杜×长×大三元杂交猪(DLY猪)PRKAG3基因在心脏、肝脏、肾和骨骼肌中表达差异,并测定猪胴体品质。结果表明,PRKAG3主要在骨骼肌中表达,在心脏中有少量表达,而在肝脏和肾中未见表达,在不同品种的骨骼肌中,雅南猪PRKAG3基因的相对表达量高于DLY猪(P=0.078)。相关分析结果表明:骨骼肌中PRKAG3基因的表达量与屠宰率、眼肌面积和背膘厚关系不大,而与肌内脂肪含量成正相关(r=0.832)。

用商品猪群定位RYR1、PIT1和PRKAG3

利用一个由汉普夏、皮特兰猪等5品种杂交商品群建立了参考家系,采用微卫星标记构建连锁图谱的方法对分别位于6、13、15号染色体的3个基因RYR1、PIT1、PRKAG3进行了定位.结果表明RYR1位于6号染色体的S0087和Sw316之间,PIT1位于13号染色体的Sw225和Sw1056之间,PRKAG3位于15号染色体的Sw946和Sw906之间,与已发表的结果基本一致.为下一步分析这3个基因对经济性状的影响奠定了基础.

甜菜碱对育肥猪生长性能和PRKAG3基因相对表达量的影响

为了研究甜菜碱对育肥猪生长性能和PRKAG3基因表达量的影响,试验采用单因子试验设计,选用80 kg左右的健康杜长大三元杂交猪60头,随机分成4组,每组3个重复,每个重复5头猪,在日粮中添加甜菜碱0,500,1 000,1 500 mg/kg,试验期为41 d,试验结束后随机选择(每组随机选择3头)12头猪进行屠宰测定。结果表明:与对照组相比,日粮中添加甜菜碱对育肥猪的日增重、日采食量、料重比均有明显影响,可以不同程度地提高日增重和采食量,降低料重比,其中以添加1 500 mg/kg甜菜碱(4组)的效果最为明显;日粮中添加甜菜碱可以不同程度地提高育肥猪PRKAG3基因的表达量,其中以1 500 mg/kg甜菜碱(4组)的效果最为明显。说明甜菜碱可以提供甲基供体,节约蛋氨酸和胆碱,从而提高育肥猪的生长性能。

5个山羊品种PRKAG3基因5’调控区和外显子13杂合度分析

以3个中国地方山羊品种和2个引入山羊品种为研究对象,采用PCR-RFLP方法检测山羊PRKAG3基因5’调控区和外显子13的多态性。结果在5个山羊品种PRKAG3基因的5’调控区发现C-525A和C-225T多态位点,在外显子13发现T90C和C102T多态位点,分别存在一对等位基因。5个山羊品种在C-525A、C-225T和C102T位点均为低度多态,但在T90C位点存在中度多态(0.25<PIC<0.5),其中波尔山羊的杂合度最高(0.375 0),湘东黑山羊最低(0.236 6)。4个联合位点变异分析显示,安徽白山羊(0.220 8)和波尔山羊(0.208 5)在各位点上的平均杂合度要比其它山羊高,而马头山羊、湘东黑山羊和萨能奶山羊的平均杂合度为0.12～0.14。根据品种之间的基因多样度可以将5个山羊品种分成3类:波尔山羊、萨能奶山羊和中国地方山羊。

猪RN基因的研究

RN基因是影响猪肉质性状的一个主效基因,已被定位在猪的15号染色体上(15q25),包含显性的不利等位基因(RN)为影响猪肉的工艺产量和隐性正常的等位基因(rn)。最近发现的与肌肉过量糖原含量相关的PRKAG3基因的非保守替换(R200Q),被认为是引起酸肉的主要原因。