肿瘤光化学诊治新药癌光啉(PsD-007)的研究

一种新的卟啉类肿瘤光化学诊治剂癌光啉(PsD-007)从血卟啉光敏剂PsD-001经柱层析分离而得到。它对NADPH在D_2O中光氧化作用的敏化效应高于HpD。其对体外培养人癌细胞系的光灭活作用和对三种动物移植瘤的光化疗效果均略优于光敏素Ⅱ。

光敏剂BCPD-17和PSD007对小鼠骨肉瘤的光动力作用

目的:观察630及670nm激光激发不同剂量的光敏剂BCPD-17和PSD-007对小鼠皮下移植骨肉瘤的光动力效应,并对两者进行比较,为筛选光动力疗法(PDT)治疗骨肉瘤的新药提供实验数据。方法:C3H小鼠60只,左侧腰骶部接种LM-8小鼠骨肉瘤细胞,待皮下瘤块直径约6～8mm时,随机分成空白对照组及PDT治疗组。治疗组分为PSD-007组(5mg.kg-1,用波长630nm激光照射)和BCPD-17组;BCPD-17组分设5和10mg.kg-12个剂量组,分别用波长630nm或670nm激光照射。小鼠尾静脉注射光敏剂后6h垂直瘤区行激光照射,功率密度200mW.cm-2、能量密度240J.cm-2、照射时间20min、光斑1.0cm。照射7d后测量肿瘤大小,取瘤体称重计算肿瘤抑制率,并行病理检查。结果:病理组织学观察,对照组小鼠骨肉瘤细胞大而深染,核异型明显;PDT治疗组肿瘤细胞出现坏死,细胞内空泡变性,核固缩,BCPD-17组更明显。PDT治疗组小鼠骨肉瘤的肿瘤质量及体积均明显减少,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。在670nm激光照射后,BCPD-17各组的肿瘤抑制率均高于PSD-007组,组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:光敏剂BCPD-17和PSD-007对小鼠LM-8骨肉瘤细胞有明确的抑制作用,光敏剂BCPD-17光动力效果更显著。

癌光啉(PSD-007)——激光照射体外净化白血病细胞的实验研究

研究用铜蒸汽激光照射癌光啉（ＰＳＤ－００７）介导的光敏作用，对白血病细胞系（ＨＬ－６０）的杀伤敏感性表明：白血病细胞对光敏作用敏感，在ＰＳＤ－００７１０μｇ·ｍｌ－１，激光照射２Ｊ·ｃｍ－２的处理条件下，ＨＬ－６０被抑制９８％，而正常骨髓细胞存活４０±８％。将正常骨髓单个核细胞与ＨＬ－６０细胞按１００∶１比例混合后，ＨＬ－６０细胞仍能被选择性杀伤。电镜下见光敏作用后的ＨＬ－６０细胞生物膜结构明显受损。结果提示：ＰＳＤ－００７——激光照射能选择性杀伤白血病细胞。

Studies on Preclinical Toxicology of a New Tumor Photolocalizing and Photochemotherapeutic Agent, Photocarcinorin(PsD-007)

Photocarcinorin was prepared in our Lab and its composition was differentfrom that of any other hematoporphyrin photosensitizers by TLC and HPLC analyses.The 95% fiducial limits of iv LD in mice were 176-236 mg·kg-1.The iv MLD indogs was 171 mg·kg-1.The acute and subacutc toxic tests in 37 dogs showed that theintoxicated manifestations were characterized by a complex syndrome always seen inporphyrias.The biological,laboratory and histopathologic findings revealed that theliver,kidney and erythroeytic series were the target organs.The damages were dose-related and reversible within 2 wk.he phototoxicity was determined in mice with UV ra-diation and compared with that of HpD.The extent of its phototoxic reactions waslower than that of HpD’s.

新光敏剂PSD-007注射液含量测定方法的研究

本文采用紫外分光光度法测定新光敏剂 PSD-007注射液的含量,并对其测定条件进行了考察。测得其吸收系数(E^(1%)_(1cm)396±1nm)为2476(n=54,CV%=1.4)。本法专属性强,重现性好(变异系数为0.19%)。

癌光啉对人骨肉瘤MG-63细胞的光动力杀伤效应

目的探讨癌光啉(PSD-007)在体外对人骨肉瘤MG-63细胞的光动力杀伤效应。方法不同浓度(0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0μg/mL)的PSD-007与细胞孵育4 h后,以不同能量(1.5、3.0、6.0、12.0 J/cm2)激光照射,采用溴化四氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞的光密度(D)值及存活率;不同浓度(1.0、2.0、4.0μg/mL)的PSD-007与细胞孵育4 h后,以6.0 J/cm2能量的可见光照射,于光学显微镜下观察光动力治疗后细胞形态的变化,应用膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙啶(PI)双染色流式细胞仪分析细胞死亡形式。结果当PSD-007浓度为2.0μg/mL、光照能量为6.0 J/cm2时,细胞在光动力治疗处理后的存活率明显降低,为52.94%。光动力治疗处理后的细胞逐渐变圆,体积变小,核质比增大,折光性减弱,贴壁能力下降,细胞间隙增大,直到细胞漂浮死亡。流式细胞仪分析结果显示,光动力治疗后死亡细胞主要为坏死或晚期的凋亡细胞。结论在体外,PSD-007对人骨肉瘤MG-63细胞具有光动力杀伤效应。

癌光啉在兔体内的药代动力学及生物利用度

目的研究癌光啉在兔体内的药代动力学及生物利用度特点,为药物进一步研究提供依据。方法兔腹腔注射或静脉注射10 mg.kg-1癌光啉,于给药后的10 min、30 min、1h、2 h、4 h、8 h、24 h、48 h、72 h耳缘静脉采血,以全波长酶标仪荧光法测定兔血浆中癌光啉浓度,用3P97处理血药浓度-时间数据,分析房室模型,得到最佳房室模型和药代动力学参数。结果家兔腹腔注射癌光啉10 mg.kg-1的时量曲线符合一室开放模型,静脉注射时的时量曲线符合三室模型,但其消除快于ip。主要药代动力学参数:ip给药组,T12Ke=11.6 h,Cmax=2.312 mg.L-1,AUC=43.177 mg.L-1.h,CL=0.232 L.kg-1.h-1,V/F(c)=3.888 L.kg-1;iv给药组,Vc=0.75 L.kg-1,T12α=2.824 h,T 12β=40.632 h,AUC=65.161 mg.L-1.h,CL(s)=0.153 L.kg-1.h-1。腹腔给药后绝对生物利用度是66.2%。结论癌光啉在兔体内吸收快、起效快、消除快,无蓄积现象,给药方式不同,药代动力学特点不同。

癌光啉对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的光动力杀伤效应及其机制研究

目的:探讨癌光啉(PSD-007)在体外对于乳腺癌细胞株MDA-MB-231光动力杀伤效应,并分析其分子机制。方法:MTT法检测不同浓度PSD-007(0、2、4、6、8、10μg/mL)作用于MDA-MB-231细胞株后对其增殖的影响;光学显微镜下观察光动力治疗后细胞形态的变化,荧光显微镜分析PSD-007作用后细胞的死亡形式。应用RT-PCR和Western blotting技术分析其分子机制。结果:当PSD007浓度为10μg/mL、光照能量为9.0 J/cm2时,对乳腺癌细胞的光动力杀伤效应最大,抑制率为97.01%。光动力治疗处理后的细胞逐渐变圆,体积变小,核质比增大,折光性减弱,贴壁能力下降,细胞间隙增大,直到细胞漂浮死亡。荧光显微镜分析结果显示,光动力治疗后死亡细胞主要为坏死或晚期的凋亡细胞。RT-PCR和Western blot结果显示相比对照组,实验组Caspase3、Caspase8、P65亚基和P53表达水平明显上调,而Bcl-2和Bcl-x表达无明显改变。结论:PSD-007在体外通过调控Caspase蛋白酶、P53、NF-KB通路对人乳腺癌MDA-MB-231细胞具有光动力杀伤效应,可能成为未来乳腺癌治疗的一个新方式。

癌光啉体外净化骨髓中残留白血病变后行自体骨髓移植治疗白血病

目的 :为减少白血病患者自体骨髓移植后白血病复发率和提高长期无病存活率。方法 :采用缓解期急性非淋巴细胞白血病患者的骨髓细胞在体外经处理后用癌光啉 (浓度为 10 μg/ ml)加光照净化 ,待患者完成预处理后回输给自身。结果 :10例急性髓细胞白血病患者接受了本净化方法后移植治疗。净化后输入有核细胞中位数1.3 0 ( 0 .7～ 2 .4 5 )× 10 8/ kg,CD3 4+ 细胞中位数 2 .3 9( 0 .74～ 4 .0 6)× 10 6/ kg,CFU- GM中位数 1.4 4( 0 .3 2～4 .65 )× 10 4/ kg。 10例中 9例造血功能重建 ,WBC升到 >1.0× 10 9/ L中位数时间 2 0 ( 15～ 4 3 ) d,>2 .0×10 9/ L 中位数时间 3 0 ( 2 1～ 5 5 ) d,BPC>5 0× 10 9/ L 中位数时间 4 6( 2 5～ 62 ) d。经中位 2 6个 ( 2 0～ 64 )月随访 ,有 6例仍无病存活 ;3例复发 ,其中 2例复发后失去随访 ;1例嗜碱细胞性白血病经化疗再次取得缓解 ,至今 CR2后又无复发存活 14个月 ;1例死于与移植相关并发症。结论 :初步结果表明 。

光敏剂癌光啉对小鼠骨肉瘤LM-8细胞体外光动力作用的实验研究

目的观察光敏剂癌光啉(PSD-007)对小鼠骨肉瘤LM-8细胞的体外光动力效应。方法将不同浓度的光敏剂PSD-007(0.5、1.0、2.0、4.0、8.0μg/mL)与小鼠骨肉瘤细胞株LM-8共同孵育4 h,再以630 nm波长的激光为光源,采用不同激光能量照射LM-8细胞(激光波长为630 nm,光照能量分别为1.5、3.0、6.0、9.0 J/cm2),与空白对照组(不加光敏剂且不接受激光照射)、暗毒性组(加光敏剂但不接受激光照射)、激光组(不加光敏剂但接受激光照射)比较,24 h后采用溴化四氮唑蓝(MTT)法测定其光密度值(D540)值,计算抑制率,并于光学显微镜下观察光动力疗法(PDT)后24 h细胞形态的变化。结果单独照光或光敏剂孵育均无杀伤效应,光敏剂浓度及激光能量是影响杀伤效应的重要因素。PSD-007浓度为4.0μg/mL、光照能量为6.0 J/cm2时,对LM-8细胞有明显的光动力杀伤效果,抑制率为73.8%。光学显微镜下可见细胞形态发生明显的变化,呈坏死或凋亡样改变。结论在体外,PSD-007对小鼠骨肉瘤LM-8细胞具有明显的光动力杀伤作用。PDT是很有前景的治疗骨肉瘤的新方法。

新肿瘤光化学诊治剂(PsD-007)的化学组成的研究

采用反相高效液相色谱法测定了新肿瘤光化学诊治剂(PsD-007)的化学组成,通过与确认品的对照测定,进一步阐明了 PsD-007是由 HP、MHD、AHD、HVD、DMD、MVD 和 Pp 等7种不同卟啉所组成,从而使 PsD-007成为第一种具有确定的化学组成、各成分化学结构和肿瘤光生物活性成分的肿廇光化学诊治剂。

PSD-007对宫颈癌Hela细胞光动力杀伤效应的剂量学研究

目的 探讨癌光啉（PSD-007）对人宫颈癌Hela细胞体外光动力杀伤效应及主要影响因素.方法 不同质量浓度（0、3.125、6.25、12.5、25、50、100 μg/ml）的PSD-007与Hela细胞共同孵育2h后,予以不同能量（0、0.6、1.2、2.4、4.8、9.6 J/cm2）635 nm波长的激光照射,以相同剂量光照和光敏剂剂量的人乳腺癌细胞系MCF-7光动力杀伤作用做对比,通过噻唑蓝（MTT）比色法测定细胞的光密度（OD）值及存活率;质量浓度为12.5 μg/ml的PSD-007与细胞共同孵育2h后,以不同能量（1.2、2.4、4.8 J/cm2）的激光照射,流式细胞术（FCM）分析细胞周期及凋亡率.结果 与空白对照组相比,单纯光敏剂PSD-007在＞25 μg/ml质量浓度下影响Hela细胞存活率,光动力疗法（PDT）对Hela细胞有更明显的杀伤效应,并且随着光敏剂质量浓度增加和光照能量密度增大,对细胞的杀伤效果逐渐增强.当光敏剂质量浓度＞12.5 μg/ml,光照能量＞4.8 J/cm2时,各组间细胞存活率的差异无统计学意义（P＞0.05）.FCM分析发现,PDT于G0/G1期阻断Hela细胞生长,凋亡诱导作用呈时间依赖性.结论 光敏剂PSD-007自身对体外人宫颈癌细胞系Hela细胞具有生长抑制作用,PSD-007介导的光动力杀伤效应更为显著,较人乳腺癌-7（MCF-7）细胞的PSD-007光动力作用有更低的使用剂量和光照剂量.

PSD007-PDT对鼠肝癌细胞MM45T-Li抗增殖效应的实验研究

探讨血卟啉甲醚介导的光动力疗法(PSD007-PDT)对鼠肝癌细胞MM45T-Li的抗增殖效应。实验分为细胞组、对照组(单纯PSD007)及PDT组。利用荧光显微镜观察不同浓度PSD007在细胞中的吸收;多功能酶标仪定量分析细胞内PSD007在不同时间点的荧光强度;以PSD007为光敏剂,630 nm激光为光源的PDT作用于细胞,MTT法检测PDT对细胞增殖活性的影响。结果显示PSD007与细胞孵育3 h后均匀分布细胞内,PSD007在细胞内的荧光值随孵育时间、药物浓度增加而增强,4 h趋于饱和。在功率密度一定的情况下,细胞的存活率随能量密度的增加而降低。与对照组相比,功率密度为1.8、2.7、4.5、9.J/cm^2时细胞存活率明显降低,具有统计学意义。PSD007介导的PDT对鼠肝癌细胞MM45T-Li有明显的杀伤作用,与激光能量密度成一定的依赖性。

PSD-007光动力对人子宫颈癌Hela细胞体外杀伤效应研究

目的探讨不同剂量癌光啉(PSD-007)及不同激光照射能量对人宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响。方法通过采用不同质量浓度的PSD-007、不同激光照射能量介导的光动力作用于Hela细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞的光密度(OD)值,计算细胞存活率;6.25μg/ml的PSD-007作用于Hela细胞,以不同能量的激光照射,DAPI染色观察细胞凋亡形态学改变。结果与空白对照组相比,PDT对Hela细胞有明显的杀伤效应,并呈现出剂量依赖性。当光敏剂PSD-007浓度>12.5μg/ml,光照能量>4.8J/cm2,PDT治疗组间细胞存活率差异无统计学意义。细胞形态学观察到不同光照能量处理细胞后,MCF-7细胞呈现典型的凋亡形态特征。结论 PSD-007对体外人宫颈癌细胞系Hela细胞具有光动力杀伤效应。特定光源下,光敏剂质量浓度及光照能量密度是影响PSD-007效应的主要因素。

癌光啉放射增敏治疗食管癌的远期疗效观察

目的 应用光敏剂作为放射增敏剂探索其放射增敏作用。方法 应用血卟啉衍生物癌光啉 (PSD 0 0 7)配合放射治疗对 194例食管癌做前瞻性随机分组研究 ,放射增敏组及单纯放射组各97例。 2个组均采用60 Co或直线加速器常规照射 ,放射增敏组剂量为 6 5～ 73Gy ,单纯放射组为 6 5～75Gy。随访率为 97.4%。 结果 中位生存期放射增敏组为 2 6 .7个月 ,单纯放射组为 14.9个月 (P<0 .0 5 )。 1,3,5年生存率放射增敏组分别为 75 .3% ,38.1%及 2 0 .6 % ,单纯放射组分别为 5 4.6 % ,2 5 .8%及 10 .3% (P <0 .0 5 )。结论 癌光啉配合放射治疗食管癌可提高疗效 。

光动力疗法对人乳腺癌MCF-7细胞增殖凋亡的影响

目的 研究光动力疗法（PDT）对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响和诱导凋亡的作用.方法 癌光啉（PSD-007）与细胞共同孵育2h后,以不同能量635 nm激光照射,通过噻唑蓝（MTT）比色法测定PDT后不同时间（0.5、1、3、6、12、24h）细胞的光密度（0D）值及存活率.DAPI染色观察PDT后不同时间细胞凋亡中细胞核形态学的改变.Annexin-V/PI双染法结合流式细胞术分析细胞凋亡率的变化.结果 PDT对MCF-7细胞的增殖有抑制作用,且随着PDT光照能量的提高而增强,PDT作用后细胞存活率随时间延长而逐渐降低.细胞形态学观察结果表明,MCF-7细胞呈典型的凋亡形态特征.Annexin-V/PI双染也证实PDT可以诱导细胞凋亡,且凋亡率随PDT作用后时间的延长而升高.结论 PDT能显著抑制MCF-7细胞增殖,诱导细胞凋亡,且其诱导肿瘤细胞的凋亡是一渐进性的过程,具有光照剂量和时间效应关系.

荧光光谱法测定癌光啉在BN大鼠体内的药代动力学

目的 研究荧光光谱法检测癌光啉在BN大鼠体内的药代动力学.方法 BN大鼠尾静脉注射5 mg/kg体质量的癌光啉,于给药后的10 min、30 min、1h、2h、4h、8h、24 h、48 h和72 h眼眶后静脉丛取血,以荧光光谱仪测定大鼠血浆中癌光啉浓度,用DNS2.0处理血药浓度-时间数据,分析房室模型,得到最佳房室模型和药代动力学参数.结果 BN大鼠静脉注射的时量曲线符合三室模型.主要药代动力学参数：t1/2a=0.096 h,t1/2β=1.299 h,t1/2=19.387 h,V1=0.259 L/kg,A UC=15.263 mg/（L·h）.结论 荧光光谱法检测光敏剂血药浓度操作简单,耗时短,灵敏度和特异性高.癌光啉在BN大鼠体内吸收快,起效快,无蓄积现象.