目的探讨蛋白酶体亚基-B7(PSMB7)基因多态性、载脂蛋白E(ApoE)基因多态性和阿尔茨海默病(AD)的相关性。方法 376例日本AD患者(324例迟发型和52例早发型AD)和378例非痴呆对照组中,用TaqMan-PCR法检测PSMB7基因rs7871785(+561G/A)、rs3780...目的探讨蛋白酶体亚基-B7(PSMB7)基因多态性、载脂蛋白E(ApoE)基因多态性和阿尔茨海默病(AD)的相关性。方法 376例日本AD患者(324例迟发型和52例早发型AD)和378例非痴呆对照组中,用TaqMan-PCR法检测PSMB7基因rs7871785(+561G/A)、rs3780199(+26651C/T)及APOE基因的单核苷酸多态性,并分析与AD的相关性。结果 PSMB7基因rs7871785 A/A纯合子频率在早发型AD中明显高于对照组(0.75 vs 0.60,P=0.037),而rs3780199 C/C纯合子频率在AD中明显高于对照组(0.23 vs 0.15,P=0.009)。在非APOE-ε4携带者中,AD患者rs3780199 C/C纯合子频率明显高于对照组(0.23 vs 0.16,P=0.005)。结论 PSMB7基因rs7871785多态位点A/A纯合子与早发型AD存在相关性,而rs3780199C/C纯合子独立于APOE-ε4基因与迟发型AD存在相关性。展开更多
目的初步探讨蛋白酶体亚基PSMB8(proteasome subunit beta 8)对人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/Svneo)凋亡及自噬的影响。方法将HTR-8细胞分为转染组和对照组,采用瞬时转染的方法分别将PSMB8 siRNA-1、PSMB8 siRNA-2转入转染组中,将NC siRNA...目的初步探讨蛋白酶体亚基PSMB8(proteasome subunit beta 8)对人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/Svneo)凋亡及自噬的影响。方法将HTR-8细胞分为转染组和对照组,采用瞬时转染的方法分别将PSMB8 siRNA-1、PSMB8 siRNA-2转入转染组中,将NC siRNA转入对照组中。转染48h后用qRT-PCR进行干涉效率验证,CCK-8检测细胞增殖情况,TUNEL和流式细胞术分析细胞凋亡情况,免疫荧光染色检测细胞内caspase-3(cleaved)和LC3蛋白的表达,qRT-PCR检测细胞中自噬相关基因mRNA表达水平。结果qRT-PCR结果显示,PSMB8 siRNA-1组干扰效果较好。与对照组比较,PSMB8 siRNA-1组细胞增殖能力减弱,HTR-8细胞中TUNEL(15.05±2.62 vs 33.40±2.44,P=0.000)和caspase-3(cleaved)(21.70±5.87 vs 53.29±10.29,P<0.01)阳性率增加。流式结果显示,与对照组比较,PSMB8 siRNA-1组存活细胞比例减少(89.10±0.78 vs 77.00±1.68,P=0.000),早期凋亡和晚期凋亡细胞比例增加(9.09±0.65 vs 10.71±0.61,P<0.05),坏死细胞比例也增加(2.49±0.73 vs 12.49±2.02,P<0.01)。与对照组比较,PSMB8 siRNA-1组LC3蛋白阳性细胞率增加(19.02±3.78 vs 31.90±4.87,P<0.05),各自噬相关基因mRNA相对表达水平均上调。结论在HTR-8细胞中沉默PSMB8基因表达可以诱导细胞凋亡并且激活自噬。展开更多
文摘目的探讨蛋白酶体亚基-B7(PSMB7)基因多态性、载脂蛋白E(ApoE)基因多态性和阿尔茨海默病(AD)的相关性。方法 376例日本AD患者(324例迟发型和52例早发型AD)和378例非痴呆对照组中,用TaqMan-PCR法检测PSMB7基因rs7871785(+561G/A)、rs3780199(+26651C/T)及APOE基因的单核苷酸多态性,并分析与AD的相关性。结果 PSMB7基因rs7871785 A/A纯合子频率在早发型AD中明显高于对照组(0.75 vs 0.60,P=0.037),而rs3780199 C/C纯合子频率在AD中明显高于对照组(0.23 vs 0.15,P=0.009)。在非APOE-ε4携带者中,AD患者rs3780199 C/C纯合子频率明显高于对照组(0.23 vs 0.16,P=0.005)。结论 PSMB7基因rs7871785多态位点A/A纯合子与早发型AD存在相关性,而rs3780199C/C纯合子独立于APOE-ε4基因与迟发型AD存在相关性。
文摘目的初步探讨蛋白酶体亚基PSMB8(proteasome subunit beta 8)对人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/Svneo)凋亡及自噬的影响。方法将HTR-8细胞分为转染组和对照组,采用瞬时转染的方法分别将PSMB8 siRNA-1、PSMB8 siRNA-2转入转染组中,将NC siRNA转入对照组中。转染48h后用qRT-PCR进行干涉效率验证,CCK-8检测细胞增殖情况,TUNEL和流式细胞术分析细胞凋亡情况,免疫荧光染色检测细胞内caspase-3(cleaved)和LC3蛋白的表达,qRT-PCR检测细胞中自噬相关基因mRNA表达水平。结果qRT-PCR结果显示,PSMB8 siRNA-1组干扰效果较好。与对照组比较,PSMB8 siRNA-1组细胞增殖能力减弱,HTR-8细胞中TUNEL(15.05±2.62 vs 33.40±2.44,P=0.000)和caspase-3(cleaved)(21.70±5.87 vs 53.29±10.29,P<0.01)阳性率增加。流式结果显示,与对照组比较,PSMB8 siRNA-1组存活细胞比例减少(89.10±0.78 vs 77.00±1.68,P=0.000),早期凋亡和晚期凋亡细胞比例增加(9.09±0.65 vs 10.71±0.61,P<0.05),坏死细胞比例也增加(2.49±0.73 vs 12.49±2.02,P<0.01)。与对照组比较,PSMB8 siRNA-1组LC3蛋白阳性细胞率增加(19.02±3.78 vs 31.90±4.87,P<0.05),各自噬相关基因mRNA相对表达水平均上调。结论在HTR-8细胞中沉默PSMB8基因表达可以诱导细胞凋亡并且激活自噬。