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肌苷酸合成酶系PURH基因对苏禽乌骨鸡胸肌肌苷酸含量的关联分析 被引量:6
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作者 张学余 束婧婷 +2 位作者 苏一军 李国辉 屠云洁 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期562-566,共5页
在分析氨基咪唑氨甲酰核苷酸转甲酰基酶/次黄嘌呤核苷酸环水解酶基因(fused IMP cyclohydrolasegene/phosohoribosylaminoimidazolecarboxamide formyltransferase PURH)对苏禽乌骨鸡鸡群体肌肉肌苷酸含量的遗传效应。采用PCR-SSCP方法... 在分析氨基咪唑氨甲酰核苷酸转甲酰基酶/次黄嘌呤核苷酸环水解酶基因(fused IMP cyclohydrolasegene/phosohoribosylaminoimidazolecarboxamide formyltransferase PURH)对苏禽乌骨鸡鸡群体肌肉肌苷酸含量的遗传效应。采用PCR-SSCP方法检测苏禽乌骨鸡PURH基因外显子9和外显子16多态性,分析多态位点不同基因型与90日龄胸肌肌苷酸(IMP)含量的关联,各种基因型与胸肌IMP含量的方差分析结果表明:PURH基因外显子16中多态位点T17446C与IMP含量显著相关,TT型个体胸肌IMP含量较CT型高出0.757 mg/g,TT型个体胸肌IMP含量较CC型高出1.083 mg/g,均达到极显著水平(P<0.01),CT型个体IMP含量也显著地高于CC型(P<0.05)。因此,可以利用该基因型对鸡的肉质风味性状进行标记辅助选择。 展开更多
关键词 肌苷酸 苏禽乌骨鸡 purh基因
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北京油鸡cDNA文库的构建及purH基因的表达 被引量:5
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作者 郭俣 刘长青 +4 位作者 陆涛峰 佟春玲 修晓娜 关伟军 马月辉 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期93-99,共7页
利用SMART技术构建了北京油鸡肝脏全长cDNA文库,构建的未扩增文库滴度为1.96×106pfu·mL-1,文库重组率为92.8%,插入片段长度为1.23kb,扩增文库滴度为1.64×1010pfu·mL-1。设计purH基因保守引物对该文库进行筛选,克隆... 利用SMART技术构建了北京油鸡肝脏全长cDNA文库,构建的未扩增文库滴度为1.96×106pfu·mL-1,文库重组率为92.8%,插入片段长度为1.23kb,扩增文库滴度为1.64×1010pfu·mL-1。设计purH基因保守引物对该文库进行筛选,克隆了北京油鸡purH基因(GenBank登录号:EU334506),将purH基因完整开放阅读框定向插入pEGFP-N3,构建带有GFP报告基因重组表达载体pEGFP-N3-purH,将其导入北京油鸡体外培养细胞中。转染后24、48和72h,pEGFP-N3-purH转染率为10.3%~53.2%,绿色荧光均匀分布于细胞质与细胞核中。随表达量的增加,绿色荧光在细胞核中聚集成团块状或颗粒状。结果表明,构建的北京油鸡肝脏组织cDNA文库符合建库要求。 展开更多
关键词 北京油鸡 SMARTcDNA文库 purh基因
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建立以lipA和purH为靶基因的RTQ-PCR方法对水稻白叶枯病菌侵染过程进行定量分析 被引量:7
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作者 孙蕾 吴茂森 何晨阳 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1660-1666,共7页
【目的】建立水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)的分子定量法,测定Xoo侵染水稻植株后不同时间的种群量及其变化【。方法】选用以lipA和purH为靶基因序列的引物P4和P5,用SYBR Green I实时定量PCR(RTQ-PCR)分析在水稻接... 【目的】建立水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)的分子定量法,测定Xoo侵染水稻植株后不同时间的种群量及其变化【。方法】选用以lipA和purH为靶基因序列的引物P4和P5,用SYBR Green I实时定量PCR(RTQ-PCR)分析在水稻接种植株内的病菌种群量。【结果】与细菌平板计数法相比,RTQ-PCR法定量结果基本相近或略高(≤10倍),变化趋势基本相似,用2对引物P4和P5进行RTQ-PCR定量无显著差异。接种3d的植株内己有菌量积累,但不显症;从接种5d开始,细菌明显增加,植株显症并逐渐加重;接种9~14d菌量增加到峰值,并进入稳定平台期,植株显症严重。病菌种群量与植株显症间的关系可能与细菌群体感应机制有关。【结论】用RTQ-PCR分子定量法可以直接对水稻植株内的Xoo进行动态定量研究;提出了水稻病害分子定量"病菌靶基因拷贝数-DNA总量-种群量-植物病症"的研究模式。 展开更多
关键词 水稻白叶枯病菌 lipA purh 实时定量PCR 病菌种群量
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基因atpA、purHD和ndh的过量表达对大肠杆菌DH5α生长的影响 被引量:2
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作者 张艳军 张晓云 +1 位作者 李志敏 叶勤 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1042-1047,共6页
【目的】理解大肠杆菌DH5α及其耐乙酸突变株DA19在基本培养基中生长和乙酸积累差异的机理。【方法】根据前期针对两个菌株蛋白质组和培养中物料及能量平衡的分析,通过PCR分别扩增大肠杆菌DH5α及DA19的atpIBEFHAGDC基因、purHD基因和与... 【目的】理解大肠杆菌DH5α及其耐乙酸突变株DA19在基本培养基中生长和乙酸积累差异的机理。【方法】根据前期针对两个菌株蛋白质组和培养中物料及能量平衡的分析,通过PCR分别扩增大肠杆菌DH5α及DA19的atpIBEFHAGDC基因、purHD基因和与NADH氧化代谢相关ndh基因及其各自的调节区,以及NADH脱氢酶Ⅰ基因(nuoA-N)的调节区。将atpA、purHD和ndh基因分别克隆到载体pTrc99a中,转化DH5α,研究基因过量表达对生长的影响。【结果】测序结果表明两个菌株的这些DNA序列与公布的大肠杆菌K-12的相应序列完全一致,在DH5α菌株中分别过量表达atpA、purHD或ndh基因可以在一定程度上改善菌体的生长。【结论】过量表达purHD或ndh基因比过量表达atpA基因的效果更好,但与DA19的生长相比仍然存在较大差距,反映了代谢全局调节的重要性。 展开更多
关键词 大肠杆菌 表达 ATPA purh ndh
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PurH基因在大蒲莲猪及其杂交后代肌肉中表达及其与肌苷酸含量关联分析 被引量:2
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作者 朱荣生 王怀中 +2 位作者 刘俊珍 呼红梅 《家畜生态学报》 北大核心 2020年第4期22-27,共6页
旨在研究PurH基因在大蒲莲及其杂交组合猪肌肉中的表达差异,并与肌苷酸含量进行相关性分析,为探讨肌苷酸代谢基因PurH与重要风味物质的关系奠定理论基础。选择95.0 kg体重大蒲莲猪(DPL)、长白×大蒲莲猪(LDPL)、杜洛克×长白... 旨在研究PurH基因在大蒲莲及其杂交组合猪肌肉中的表达差异,并与肌苷酸含量进行相关性分析,为探讨肌苷酸代谢基因PurH与重要风味物质的关系奠定理论基础。选择95.0 kg体重大蒲莲猪(DPL)、长白×大蒲莲猪(LDPL)、杜洛克×长白×大蒲莲猪(DLDPL)各8头,屠宰后取背最长肌,提取总RNA。应用荧光定量PCR(qPCR)对11个常用的候选内参基因和PurH基因表达量进行检测,同时利用高效液相色谱测定肌肉中肌苷酸含量。结果表明:(1)geNorm软件评价分析显示,YWHAZ和RPL4是肌肉中表达最稳定的内参基因,可利用其表达量的几何均值标准化PurH基因表达量;(2)肌肉中肌苷酸含量依次为DPL>LDPL>DLDPL,DPL分别比DLDPL和LDPL提高25.35%(P<0.05)和15.93%(P>0.05),DPL、LDPL肌肉中PurH基因表达量分别比DLDPL增加50.00%和25.00%(P<0.05),DPL肌肉中PurH基因表达量比LDPL增加20%(P>0.05);(3)DPL、LDPL、DLDPL背最长肌中肌苷酸含量与PurH基因表达量变化趋势一致。相关性分析发现,肌苷酸含量与PurH基因表达量显著正相关。研究揭示,肌肉中PurH基因mRNA表达量和肌苷酸含量依次为DPL>LDPL>DLDPL,而且PurH基因表达量与肌肉肌苷酸含量呈显著正相关,为培育富含肌苷酸的优质猪肉提供理论支撑。 展开更多
关键词 purh 基因表达 肌苷酸
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北京油鸡purH基因结构与表达特征研究 被引量:1
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作者 郭俣 刘长青 +4 位作者 陆涛峰 包阿东 刘帅 关伟军 马月辉 《激光生物学报》 CAS CSCD 2010年第3期339-346,共8页
提取北京油鸡8种组织的总RNA,利用RT-PCR检测purH基因mRNA的差异表达。将purH基因完整开放阅读框定向插入pEGFP-N3,构建带有GFP报告基因重组表达载体pEGFP-purH,利用脂质体介导法将其导入北京油鸡体外培养细胞中,进行G418药物筛选和克... 提取北京油鸡8种组织的总RNA,利用RT-PCR检测purH基因mRNA的差异表达。将purH基因完整开放阅读框定向插入pEGFP-N3,构建带有GFP报告基因重组表达载体pEGFP-purH,利用脂质体介导法将其导入北京油鸡体外培养细胞中,进行G418药物筛选和克隆化培养。结果表明:北京油鸡purH基因(GenBank登录号:EU334506)编码区为1782 bp,编码593 aa的多肽,转染后24 h、48 h和72 h,pEGFP-purH转染率在10.3%~53.2%之间,绿色荧光均匀分布于细胞质与细胞核中,随表达量的增加,绿色荧光在细胞核中聚集成团块状或颗粒状。经药物筛选和克隆化培养,获得表达pEGFp-purH融合蛋白的克隆细胞株,RT-PCR与Western blotting检测确认pEGFP-purH已整合到北京油鸡成纤维细胞基因组中,在优化的条件下,阳性细胞凋亡率、生长与增殖状况与对照组比较差异不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 北京油鸡 purh基因 荧光蛋白 成纤维细胞 基因表达
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武定鸡和大围山微型鸡肌苷酸含量与PURH基因表达差异研究 被引量:4
7
作者 闫世雄 赵净颖 +6 位作者 王秋婷 李涛 张全富 柳明正 李琦华 葛长荣 贾俊静 《中国家禽》 北大核心 2019年第12期47-50,共4页
肌苷酸(Inosinic acid,IMP)是影响畜禽肌肉鲜味的主要成分,对肉品质风味有重要影响。为探究IMP含量与次黄嘌呤核苷酸环水解酶(PURH)基因表达量的关系,试验以武定鸡和大围山微型鸡为研究对象,在相同饲养条件下,于90、120、150日龄进行屠... 肌苷酸(Inosinic acid,IMP)是影响畜禽肌肉鲜味的主要成分,对肉品质风味有重要影响。为探究IMP含量与次黄嘌呤核苷酸环水解酶(PURH)基因表达量的关系,试验以武定鸡和大围山微型鸡为研究对象,在相同饲养条件下,于90、120、150日龄进行屠宰(公母各半),分别测定肌肉组织中IMP含量以及PURH mRNA表达量,并进行相关性分析。结果显示:随着日龄的增长,武定鸡和大围山微型鸡肌肉中IMP含量显著上升(P<0.05),武定鸡肌肉中IMP含量显著高于大围山微型鸡(P<0.05);武定鸡和大围山微型鸡母鸡肌肉中IMP含量均高于公鸡,胸肌中IMP含量均高于腿肌;武定鸡和大围山微型鸡肌肉中不同日龄PURH mRNA表达水平存在显著差异(P<0.05),总体呈先升高后降低趋势,且PURH mRNA表达水平与IMP含量呈正相关。本试验结果表明:相同饲养条件下武定鸡肉品质优于大围山微型鸡,且PURH基因对肌苷酸的合成起关键作用。 展开更多
关键词 肉品质 肌苷酸 purh MRNA表达量 相关性分析 武定鸡 大围山微型鸡
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肌苷酸合成酶系3个基因对白耳鸡胸肌肌苷酸含量的遗传效应 被引量:1
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作者 张学余 束婧婷 +1 位作者 韩威 陈国宏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1440-1446,共7页
GPAT、AIRC和PURH基因作为肌苷酸合成过程中的酶系基因,它们对鸡肌肉肌苷酸含量均具有显著的效应。为了进一步验证这3个基因对肌苷酸含量的遗传效应,本研究以白耳鸡为试验材料,采用PCR-SSCP和测序相结合的方法,分析了这3个基因的单基因... GPAT、AIRC和PURH基因作为肌苷酸合成过程中的酶系基因,它们对鸡肌肉肌苷酸含量均具有显著的效应。为了进一步验证这3个基因对肌苷酸含量的遗传效应,本研究以白耳鸡为试验材料,采用PCR-SSCP和测序相结合的方法,分析了这3个基因的单基因以及合并基因型对鸡胸肌肌苷酸含量的影响。结果表明:GPAT、AIRC和PURH基因均对白耳鸡胸肌肌苷酸含量的差异产生影响,均与鸡肌肉IMP含量存在显著关联(P<0.05),这3个位点可作为影响鸡肌肉肌苷酸含量的分子标记;合并基因型的遗传效应要高于最优秀的单个基因型效应。因此,可以利用合并基因型对鸡的肉质风味性状进行标记辅助选择。 展开更多
关键词 GPAT基因 AIRC基因 purh基因 肌苷酸含量 合并基因型
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黄羽肉鸡不同生长时间肌苷酸含量及相关基因表达的对比 被引量:15
9
作者 叶伟庆 杜炳旺 +2 位作者 李东华 李乃宾 杨芬霞 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期65-70,共6页
以广东地方黄羽肉鸡麒麟鸡、怀乡鸡为研究对象,采用高效液相色谱法测定不同时间鸡肉肌苷酸(IMP)含量,利用实时荧光定量PCR法比较影响肌苷酸含量的GPAT和PURH基因在不同时间各组织中的表达水平,并研究2种基因在不同鸡中的表达量与肌苷酸... 以广东地方黄羽肉鸡麒麟鸡、怀乡鸡为研究对象,采用高效液相色谱法测定不同时间鸡肉肌苷酸(IMP)含量,利用实时荧光定量PCR法比较影响肌苷酸含量的GPAT和PURH基因在不同时间各组织中的表达水平,并研究2种基因在不同鸡中的表达量与肌苷酸含量的相关性。结果表明:怀乡鸡鸡肉中肌苷酸含量最高时为16周龄,麒麟鸡则为14周龄。GPAT、PURH基因在麒麟鸡各组织表达量随日龄增加均呈下降趋势,而怀乡鸡则呈先升后降的变化。麒麟鸡和怀乡鸡GPAT基因3个时间点中肝脏的表达量最高,而PURH基因3个时间点胸肌的表达量最高。GPAT在麒麟鸡和怀乡鸡肝脏的表达量与腿肌肌苷酸含量呈极显著负相关,PURH在怀乡鸡胸肌的表达量与胸肌肌苷酸含量呈显著负相关。 展开更多
关键词 黄羽肉鸡 肌苷酸 谷氨酰胺磷酸核糖焦磷酸酰胺转移酶(GPAT) 氨基咪唑氨甲酰核苷酸转甲酰基酶/ 次黄嘌呤氨基酸环水解酶(purh)
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Analysis of the Genetic Effects of Three Genes Involved in de novo Purine Biosynthesis on IMP Content in Baier Chickens
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作者 SHU Jing-ting ZHANG Xue-yu +1 位作者 HAN Wei CHEN Guo-hong 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第S1期1-6,共6页
GPAT,AIRC and purH genes are involved in the de novo purine biosynthesis,and they all had significant effects on muscle inosine monophosphate(IMP) content in chickens.This study was designed to investigate the effects... GPAT,AIRC and purH genes are involved in the de novo purine biosynthesis,and they all had significant effects on muscle inosine monophosphate(IMP) content in chickens.This study was designed to investigate the effects of GPAT,AIRC and purH genes on muscle IMP content in a relatively large population of Baier chickens;single genotype effects as well as the combined genotype effects were analyzed.The results further support that GPAT,AIRC and purH genes had effects on muscle IMP content;they might be candidate loci or linked to major genes affecting muscle IMP content.The combined genotypic effects were significantly higher than those of the single genotypes and were even larger when more gene loci were combined.We tentatively conclude that combined genotypes are superior to single genotypes as potential molecular markers for meat quality traits in chicken. 展开更多
关键词 GPAT gene AIRC gene purh gene inosine monophosphate content combined genotype Baier chicken
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酿酒酵母甘油-3-磷酸脱氢酶基因沉默表达 被引量:2
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作者 薛婷 原雪 +4 位作者 王斌 苏秋琼 何文锦 叶冰莹 陈由强 《福建师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期64-69,共6页
通过构建酿酒酵母沉默表达载体PURH-SGPD1,使GPD1基因在PGK强启动子、CYC1终止子在特定区域内进行干扰和表达.酿酒酵母SY01突变菌株与出发菌株Y01发酵实验结果相比,甘油脱氢酶酶比活比Y01下降了10.52%,甘油含量下降了13.2%;乙醇量提高了... 通过构建酿酒酵母沉默表达载体PURH-SGPD1,使GPD1基因在PGK强启动子、CYC1终止子在特定区域内进行干扰和表达.酿酒酵母SY01突变菌株与出发菌株Y01发酵实验结果相比,甘油脱氢酶酶比活比Y01下降了10.52%,甘油含量下降了13.2%;乙醇量提高了12.06%.结果表明通过反义干扰GPD1基因5'UTR序列,能有效干扰酵母工程菌株GPD1转录与表达,削弱甘油积累途径,促进乙醇代谢途径. 展开更多
关键词 酿酒酵母 甘油脱氢酶 purh-SGPD1 PCR
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宁乡猪不同杂交组合背最长肌肌苷酸含量与相关基因表达的关联性分析 被引量:3
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作者 陈晨 胡雄贵 +4 位作者 邓缘 刘莹莹 杨仕柳 陈斌 彭英林 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第14期47-50,共4页
为了探讨猪肌苷酸含量与相关基因表达的相关性,试验采用高效液相色谱法测定宁乡猪杂交组合杜×宁、巴×宁、巴×巴宁和巴宁×巴宁背最长肌肌苷酸含量,采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测背最长肌ADSL、GPAT和PURH基... 为了探讨猪肌苷酸含量与相关基因表达的相关性,试验采用高效液相色谱法测定宁乡猪杂交组合杜×宁、巴×宁、巴×巴宁和巴宁×巴宁背最长肌肌苷酸含量,采用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测背最长肌ADSL、GPAT和PURH基因的表达水平。结果表明:巴×宁猪肌苷酸含量显著高于巴×巴宁猪(P〈0.05);ADSL基因在巴×宁猪中的表达量极显著高于巴×巴宁猪(P〈0.01),GPAT和PURH基因在巴×宁猪中的表达量均显著高于巴×巴宁猪(P〈0.05);ADSL和GPAT基因表达量与肌苷酸含量均呈显著正相关(P〈0.05),PURH基因表达量与肌苷酸含量呈极显著正相关(P〈0.01)。说明ADSL、GPAT和PURH基因与肌苷酸沉积密切相关,可作为猪肉品质的选择依据。 展开更多
关键词 肌苷酸含量 ADSL GPAT purh 基因表达 相关性分析
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