Cry2Aa2和PamPAP双价表达载体的构建及其对辣椒的遗传转化

为了获得既抗虫又抗病毒病,又对人体和环境安全的转基因辣椒(Capsicum annuum L.)材料,将启动子CaMV35S、终止子Nos-ter及缺失无毒型商陆抗病毒蛋白基因PamPAP一起插入到植物表达载体pCAMBIA1301-Cry2Aa2-PMI的多克隆位点上,构建双价表达载体,采用农杆菌介导法将其转入辣椒中,并用PMI/甘露糖筛选体系对转化植株筛选。经PCR扩增和Southern杂交检测,结果表明Cry2Aa2和PamPAP已经整合到辣椒基因组中。进一步经RT-PCR分析,证实Cry2Aa2和PamPAP在T0代转基因辣椒植株中共表达。经抗虫性、抗病毒病表型鉴定:T0代转基因辣椒植株对黄瓜花叶病毒(CMV)和斜纹夜蛾幼虫的抗性均显著高于非转基因植株。