三七表型性状与皂苷类成分含量的相关性分析

目的:在“辨状论质”理论指导下,基于偏相关性分析,揭示三七药材的表型性状和皂苷类成分含量的相关性规律。方法:2021年10—12月,采收新鲜的3年生三七地下部分共30批。采用色差仪、电子鼻、电子舌测定三七药材的表型性状(生物量、色、气、味、质地);采用高效液相色谱法(HPLC)测定皂苷类成分(三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd、总皂苷)含量;通过相关性分析探寻三七性状与成分含量间的相关性规律。结果:不同产地三七的表型性状和皂苷类成分含量均存在一定差异。整体看来,在一定范围内,三七表型性状与皂苷类成分含量间存在显著相关性,且主根长度越长、颜色偏灰绿色有光泽、味道越综合、苦味越小、质地较为粉性的三七,其三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rd、5个皂苷含量之和、三七总皂苷含量较高,人参皂苷Rb1含量较低。此外,对于三七“气”的特性,在17、53 min处的值越高,22 min处的值越低,三七的皂苷类成分含量越高。结论:三七的表型性状与皂苷类成分含量间存在显著相关性,且传统认为的体大、灰绿色有光泽者为佳得到了体现,研究结果为基于“辨状论质”理论的快速判别三七质量提供了参考。

水肥耦合对土壤碳氮储量、理化性质及三七产量和皂苷含量的影响

【目的】探究不同水肥耦合条件对土壤碳氮储量、理化性质及三七产量和皂苷含量的影响,为三七水肥调控及土壤碳氮固定潜力研究提供理论依据。【方法】2019—2021年在云南省泸西县三七种植基地进行试验,选取3年生三七为研究对象,设3个灌水水平[W1(5 mm)、W2(10 mm)和W3(15 mm)]和4个按生育期(根增期—苗期—花期—果期)配比的施肥水平[F1(360-360-360-360 kg/ha)、F2(288-360-432-360 kg/ha)、F3(216-432-432-360 kg/ha)和F4(144-576-288-432 kg/ha)],以不进行灌溉施肥为对照(CK)。测定各生育期不同处理的土壤碳氮储量及理化性质,并于2021年11月采集新鲜三七植株测定其产量和皂苷含量,采用主成分降维分析方法探讨土壤碳氮储量与各因子的关系。【结果】相同水肥耦合条件下土壤碳氮储量随土层深度增加而减少,随生育期推进基本呈先增后减的变化规律,其中以花期最高,最大值分别为82.07 t/ha(W1F4处理)和4.41 t/ha(W2F3处理),土壤有机碳储量积累关键期在苗期—花期,全氮储量积累关键期在根增期—苗期。各土壤养分含量以W2F3和W3F4处理较高,降低根增期施肥比例并增加苗期施肥比例能提高土壤养分含量。土壤碳氮储量变化主要依赖于全磷、全钾、速效钾、速效磷、硝态氮及铵态氮含量,碳氮储量增加能提高三七产量及三七皂苷R1含量。主成分降维分析结果表明,全磷、全钾、铵态氮及硝态氮含量对碳氮储量具有显著正向影响(P<0.05)。【结论】土壤碳氮储量与养分含量变化具有趋同性,其中以W2F3和W3F4处理有利于土壤碳氮累积与养分增加,适当增加苗期施肥比例有助于增加土壤碳氮储量并提高三七产量。

三七植株的性状差异及其对三七产量和质量影响的调查研究

目的 了解三七的性状差异对三七产量和质量的影响 ,确定三七的选育对象。方法 对三七茎杆的绿色和紫色 ,三七块根断面的绿色和紫色的田间调查和小区试验 ,找出了它们的自然分布规律及对三七产量、株高的影响 ,同时通过分析测定 ,寻找紫色块根三七与绿色块根三七在折干率、总皂苷含量和淀粉含量之间存在的差异。结果 绿茎三七的产量、株高、最大单株重和平均单株重均优于紫茎三七 ,但存苗率低于紫茎三七。绿三七的折干率高于紫三七 ,而紫三七的总皂苷含量比绿三七高 48.5 2 % ,淀粉含量则是绿三七比紫三七高 38.0 7%。结论 三七的品种选育应以绿茎紫块根三七为对象较好。

三七及其混淆品蛋白多肽高效毛细管电泳法鉴别

目的 :对三七及其混淆品进行蛋白多肽电泳鉴别。方法 :采用高效毛细管电泳法对三七及其混淆品蛋白多肽进行分析。结果 :三七及其混淆品蛋白多肽高效毛细管电泳谱图有明显的差异。结论 :高效毛细管电泳可作为中药三七的生药鉴别方法。

三七及其混淆品的HPLC指纹图谱鉴定

目的 建立三七及其混淆品的指纹图谱鉴定方法。方法 采用 HPL C方法 ,测定三七、人参、西洋参、姜状三七、三七不同部位及其 2种混淆品的指纹图谱。结果 三七与人参、西洋参、姜状三七及其 2种混淆品的指纹图谱有明显区别 ,三七不同部位也有差异。结论 HPL C皂苷指纹图谱鉴别三七及其混淆品具有重复性好、特征性强、方法简便等特点 。

三七GAP栽培的环境质量评价

目的 对三七 GAP种植基地的环境质量进行评价 ,为制定三七 SOP和建立三七 GAP种植基地建设提供科学依据。方法 采用文献方法对三七 GAP种植基地规划区进行水资源、土壤环境和大气环境进行分析评价。结果 三七 GAP种植基地规划区大气环境质量达 GB30 95 - 82 (大气环境质量标准 )一级标准 ,水资源达 GB5 0 84-85 (农田灌溉水质标准 )的一类标准 ,土壤环境达 GB15 6 18- 1995 (土壤环境质量标准 )二级标准。结论 三七GAP种植区环境质量良好 ,符合绿色药材栽培的环境质量要求。

HPLC-ELSD及紫外分光光度法测定三七中皂苷的含量

采用反相高效液相色谱蒸发激光散射检测器测定三七中人参皂苷 Rg1 的含量。色谱柱为 CL C- ODS (6 .0mm× 15 0 m m) ,流动相为乙腈 -水 (30∶ 70 ) ,蒸发激光散射检测器。定量方法简单 ,准确。回收率为 10 0 .5 0 % ,RSD为 1.82 %。并用紫外分光光度法测定了三七中总皂苷的含量 ,结果和 HPL C法基本一致 ,说明该方法定量准确 ,回收率为 10 1.5 0 % ,RSD为 1.44 %。结论认为两方法均可以控制三七的质量。

中药三七根核糖体18S rRNA基因的序列分析

目的 研究中药三七根核糖体 18S r RNA基因的序列特征。方法 根据模式植物拟南芥的 18S r RNA的基因序列设计引物 ,对三七根的 18S r RNA 基因序列进行基因克隆、测序 ,并与模式植物拟南芥 Arabidopsis thaliana以及人参属植物喜马拉雅人参 Panax pseudoginseng Wall subsp.himalaicus var.angustifolius的相应序列进行比较。结果 通过对产于广西靖西的三七 Panax pseudoginseng Wall.var.notoginseng (Bukill) Hoo etTseng根的 18S r RNA基因进行克隆测序 ,获得了三七根的 18S r RNA基因的部分序列特征。结论 利用已完成全基因组序列测定的模式植物拟南芥的分子生物学信息来研究中药植物基源的基因组序列 ,将有助于加快中药植物基源的分子生物学研究进程。

道地中药材广西田七栽培及产地加工技术规范

以《中药材生产质量管理规范》(中药材GAP)为指导原则,对广西田七道地中药材栽培及产地加工的术语和定义、道地产区生态环境、选地整地、搭棚、育苗、移栽、田间管理、采收、产地加工、包装、贮存进行了规定,为提高广西田七产量和质量提供技术保障。

棚内小型人力三七精量播种机的设计

设计了一种新型棚内小型人力三七精量播种机,该机器主要由传动装置、排种装置、机架等组成。工作时,小轮可以升起一定高度,保证机架平衡;运输时,小轮轴可以自由旋下,保证与大轮在同一水平面上;播种时,大轮经二级传动带动排种器旋转,大轮转一圈,排种盘转12圈,共完成播种48粒,株距5 cm。该机器按照行距4 cm在机架并排安装精量播种单体15个,单次可以完成播种15行,大大地提高了播种效率,降低了农民劳动强度。

三七及其栽培土壤中几种重金属元素含量的测定

目的 通过对 3年生三七块根及其根际栽培土壤样品中 3种主要的重金属元素含量进行检测 ,了解三七和土壤中重金属元素残留量的存在情况 ,为三七 GAP栽培提供依据。方法 在三七的主产区选择了 4 8个点 ,每点分别采集三年生三七块根及其根际栽培土壤样品 ,进行砷、铅、汞 3种主要的重金属元素残留量的检测分析。结果 三七及其栽培土壤中 3种重金属元素残留量大多符合标准规定 ,只有少数高于规定标准。结论 三七主产区的土壤环境质量均符合 GAP对栽培土壤的要求。

主要人参皂甙的分布和比例及人参产品的质量控制

采用反相高效液相色谱法，对１５０多种西洋参、人参及三七的根、叶及其产品进行了分析。以８种主要的人参皂甙Ｒｇ，Ｒｅ，Ｒｆ，Ｒｂ１，Ｒｃ，Ｒｂ２，Ｒｇ２和Ｒｄ作为对照品，来评价人参及其产品的质量，这８种人参皂甙的分布及其比例在对人参及其商品的定性、定量分析方面具有显著的意义。本文首次提出了单体皂甙的含量比率这一有价值的数据在人参品种及不同用药部位鉴定方面的有效性。

GC-MS法检测湘产扣子七、白三七挥发性成分含量研究

目的:比较扣子七、白三七中挥发油的化学成分含量。方法:分别采用水蒸气蒸馏法提取扣子七、白三七的挥发性成分,均采用GC-MS联用仪测定提取物,以峰面积归一化法测定各成分的相对含量。结果:从扣子七提取物中鉴定39种组分,占总峰面积的96.35%;从白三七提取物中鉴定41种组分,占总峰面积的97.17%。结论:两种药材共有成分在5%以上的有4种,分别为斯巴醇、棕榈酸、棕榈酸乙酯和亚油酸乙酯,该方法为扣子七和白三七的综合开发提供了参考依据。

秦巴山区中草药钮子七中微量元素的测定

用ICP-AES测定了秦巴山区独有的中草药钮子七中的2种常量营养性元素(钙、镁)和5种微量元素(铜、铬、铁、锌、锰)含量。钙4790.66μg.g-1、镁55.32μg.g-1、铜18.44μg.g-1、铬2.1μg.g-1、铁264.50μg.g-1、锌56.71μg.g-1、锰17.83μg.g-1,回收率均在96.2%—100.5%之间,结果表明,此方法简便、可靠,具有良好的精确度和准确性。并初步讨论了中草药钮子七中有益元素与治疗疾病的关系,并与中药材汉三七中微量元素含量相比较,二者微量元素含量略有差异。

五加科植物叶绿体基因组结构与进化分析

目的获取五加科叶绿体基因组的结构特征以及进化关系。方法以已测序完成的10个属的20种五加科植物叶绿体基因组为研究对象,系统比较基因组间的差异,分析4个IR边界扩张与收缩情况,并以近缘物种当归为外类群,使用MEGA 4.0构建系统进化树,分析物种间的亲缘关系。结果 20种五加科植物的叶绿体基因组大小差异较小,最大差仅1 909bp。各物种均出现基因替换现象,由cem A基因替换ycf10基因,且数量存在一定差异,主要由t RNA引起。通过比较发现,五加科物种的4个IR边界比较保守,仅野三七、三七和穗序鹅掌柴的边界基因进入IR区的长度与其他物种的差异较大。以当归为外类构建的系统进化树,各节点的支持率较高,清晰地反映了各物种间的亲缘关系。结论叶绿体基因组涵盖的信息量大,可以用于分析关系较近与进化较快物种的系统发生问题。

土家族药物扣子七中三萜皂苷成分及抗肿瘤活性研究

目的研究土家族药物扣子七Panax japonicus var. major中三萜皂苷类成分,对其抑制肿瘤细胞增殖活性进行筛选,并初步探讨化合物结构与活性的关系。方法应用多种色谱方法对土家族药物扣子七正丁醇部位进行分离,所分离化合物运用核磁共振方法进行结构鉴定,应用MTT法测定分离化合物对体外培养人肿瘤细胞增殖的影响。结果从扣子七根茎正丁醇部位分离得到14个三萜皂苷,分别鉴定为竹节参皂苷IVa甲酯(1)、竹节参皂苷Ⅳa丁酯(2)、竹节参皂苷Ⅳ(3)、竹节参皂苷Ⅳa(4)、28-去糖竹节参皂苷Ⅳa(5)、齐墩果酸-3-O-β-D-(6′-甲酯)-吡喃葡萄糖醛酸苷(6)、(24R)-珠子参苷R1(7)、(24R)-拟人参皂苷F11(8)、(20S)-三七皂苷R2(9)、(20S)-人参皂苷Rg2(10)、人参皂苷Rg1(11)、人参皂苷Re(12)、人参皂苷Rd(13)、竹节参皂苷V甲酯(14)。活性研究结果显示,化合物5和6对胃癌BGC-823细胞、结肠癌HCT-116细胞、宫颈癌HeLa细胞及肝癌Hep G2细胞均显示了较强的活性,呈良好的剂量依赖关系,其中化合物5对BGC-823、HCT-116细胞的IC50分别为9.94、14.17μmol/L,化合物6对肝癌HepG2细胞的抑制作用最强(IC50=12.70μmol/L)。结论首次从扣子七中分离得到化合物6并报道了其光谱数据;其部分化学成分显示出抗肿瘤活性,其抗肿瘤活性与齐墩果烷型皂苷密切相关,且活性强弱可能与C-28取代基有关联,相关抗肿瘤机制值得进一步研究。

三七中花色苷合成结构基因的克隆及表达分析

目的克隆三七Panax notoginseng的花色苷合成结构基因(anthocyanin biosynthesis structural genes,ABSG),研究ABSG的表达模式及其与相关表型的关联性。方法利用RT-PCR技术克隆三七ABSG,进行生物信息学和表达模式分析;使用pH示差法分析三七紫根的花色苷含量,并通过qRT-PCR技术进行相关结构基因的关联性研究。结果克隆获得6类共8个三七ABSG,其开放阅读框(open reading frame,ORF)长度在600~1500 bp,均含有花色苷生物合成相关的保守结构域。进化树分析显示,8个基因被分为5个分支,且与其他物种有较高的同源性。顺式作用元件分析表明,三七ABSG启动子序列中含有多种元件,其中光响应和转录因子类元件的数量最多。表达模式显示,8个基因主要分为在花发育前期阶段(花蕾期)高丰度表达基因和在根部高量表达基因。此外,对三七紫根的分析发现,相比于普通型黄白根,其花色苷含量提高约3倍,PnF3’H1基因和PnUFGT基因表达显著增强,表明它们可能是参与紫根三七中花色苷形成的关键结构基因。结论克隆获得8个三七ABSG,为该类基因的功能机制研究和三七种质创新利用奠定基础。