三七皂甙单体Rg1对失血性休克大鼠肠上皮细胞线粒体功能影响的研究

目的观察三七皂甙单体Rg1对失血性休克大鼠肠上皮细胞线粒体细胞色素氧化酶(COX)活性及膜电位的影响。方法健康Wistar大鼠24只,随机等分为4组:正常对照组(N)、失血性休克5小时组(HS)、单纯复苏对照组(RE)、复苏加Rg1治疗组(Rg),每组6只。采用荧光分光光度法检测线粒体膜电位;采用紫外分光光度法检测COX活性。结果失血性休克5小时大鼠肠上皮细胞线粒体摄取Rhoda-mine123减少,即膜电位水平显著降低(P<0.01),单纯复苏组膜电位有轻微提高,复苏加Rg1治疗组线粒体膜电位明显提高,恢复到正常组水平。失血性休克5小时大鼠肠上皮细胞线粒体COX活性显著降低,单纯复苏后其活性仍然较低。复苏加Rg1治疗组COX活性较休克组比较有明显升高,并显著高于单纯复苏组。结论复苏加Rg1可显著提高失血性休克大鼠肠上皮细胞线粒体COX活性及线粒体膜电位。Rg1提高COX活性可能和提高该酶的产量和质量有关。

三七总皂苷中人参皂苷Rg1对完整皮肤透皮吸收研究

目的研究三七总皂苷中人参皂苷Rg1体外完整大鼠和豚鼠皮肤的透过性。方法采用Franz扩散池进行体外透皮实验,选择完整大鼠腹皮和完整豚鼠腹皮为渗透屏障,以HPLC法测定人参皂苷Rg1的透过量。结果三七总皂苷中的人参皂苷Rg1可以透过大鼠腹皮,前12 h其累计透过量与给药时间呈线性关系,24 h总透过率为53.73%;人参皂苷Rg1对豚鼠皮穿透力极弱,接受液中未能测出。结论三七总皂苷中的人参皂苷Rg1对大鼠皮肤透过性较好,但对豚鼠皮肤的透过性则不佳。

三七总皂苷巴布剂中透皮促进剂的优选

目的以黏附性和人参皂苷Rg1的透皮速率为指标优选三七总皂苷巴布剂的透皮促进剂。方法采用多功能贴膏剂测力仪测定巴布剂的初黏力和剥离强度,采用Franz扩散池和大鼠腹部皮肤进行体外透皮扩散实验以测定透皮速率。结果在保持巴布剂初黏力和剥离强度不变的前提下,三七总皂苷巴布剂能够承载更高质量分数的固体透皮促进剂,但以液体促进剂促透效果好。不同透皮促进剂对人参皂苷Rg1的促透能力按大小顺序排列为2%氮酮>1%油酸>3%薄荷脑>2%桉油>3%冰片,其中2%氮酮可增加透皮速率达7.9倍。结论三七总皂苷巴布剂透皮促进剂选择氮酮为首。

三七及其主要皂苷组分在心血管疾病中的作用研究进展

血瘀是心血管疾病发生的主要病理因素。三七为活血化瘀代表药之一,其活性部位三七总皂苷的有效成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd及三七皂苷R1等对心血管疾病均有较好干预作用,为近年研究热点。本文综述三七及其主要皂苷组分在心血管疾病领域的研究进展,为临床防治、药物研发提供思路。

三七总皂苷及两种单体皂苷对三七幼苗的化感作用研究

研究了不同质量浓度的三七总皂苷、人参皂苷Rg1和三七皂苷R1对三七幼苗的化感作用。结果表明,三七幼苗的苗高、主根长、可溶性蛋白质含量、可溶性糖含量、CAT活性在不同质量浓度三七总皂苷、人参皂苷Rg1、三七皂苷R1处理后均有所降低。其中,三七总皂苷、人参皂苷Rg1可使幼苗的苗高和主根长显著降低;三七总皂苷质量浓度为0.01,0.10,1.00 mg·L^(-1)时,幼苗的可溶性蛋白质含量分别显著低于对照28.83%,17.07%,23.21%。三七总皂苷还可降低幼苗的POD和SOD活性,而人参皂苷Rg1、三七皂苷R1处理会增加幼苗的SOD活性。综合表明,皂苷类物质对三七幼苗均有一定的化感抑制作用,三七总皂苷的化感抑制作用强于两种单体皂苷。

三七皂苷对小麦幼苗的化感作用

研究了三七皂苷对小麦幼苗苗高、主根长等生长指标以及过氧化物酶(POD)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、可溶性糖含量和可溶性蛋白质含量等生理指标的影响。结果表明,在0.01～100.00 mg·L^(-1)的质量浓度范围内,三七皂苷R1处理后,小麦幼苗的苗高、主根长、POD和SOD活性、可溶性糖含量、可溶性蛋白质含量均有所降低,苗高在质量浓度为0.10 mg·L^(-1)、主根长在质量浓度为100.00 mg·L^(-1)、SOD活性在质量浓度为0.01,0.10 mg·L^(-1)、可溶性糖含量在质量浓度为1.00 mg·L^(-1)、可溶性蛋白质含量在质量浓度0.01,0.10,10.00,50.00,100.00 mg·L^(-1)处理时达到显著水平;人参皂苷Rg1处理后,小麦幼苗的苗高和POD活性有所增加,SOD活性及可溶性糖、可溶性蛋白质含量有所降低,主根长和CAT活性呈现低促高抑的趋势;三七总皂苷处理后,小麦幼苗的苗高、POD和CAT活性及可溶性糖含量有所增加,主根长、SOD活性及可溶性蛋白质含量有所降低,但均未达到显著水平。三七皂苷R1和人参皂苷Rg1对小麦幼苗生长具有一定的抑制作用,但其化感指数相对较小。

三七茎基总皂苷的回流提取工艺研究

[目的]确定三七茎基总皂苷含量测定方法,优化其回流提取工艺。[方法]采用香草醛-高氯酸法测定三七茎基总皂苷含量的方法,并以总皂苷含量为指标,优选回流法提取三七茎基总皂苷的工艺条件。[结果]在0.008 3～0.049 6 mg/ml浓度范围内,人参皂苷Rg1浓度与吸光度的线性关系良好(R=0.999 4),平均回收率为99.3%(n=4),RSD为3.4%。最佳提取工艺条件为:料液比1∶10(g/ml)、乙醇浓度60%,浸泡时间12 h,提取3次,每次2 h。[结论]该含量测定方法简便、准确、重现性好;提取工艺经济、合理,值得进一步推广。

高效液相色谱梯度洗脱法同时测定三七总皂苷中人参皂苷Rb_1、人参皂苷Rg_1和三七皂苷R_1含量

目的 采用高效液相色谱梯度洗脱法测定三七总皂苷中人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1和三七皂苷R1的含量。方法 色谱柱为C18柱（250 mm×4.6 mm,3.5μm）,流动相为乙腈-水、梯度洗脱,检测波长为203nm,流速1.0 mL/min,柱温为室温。结果 人参皂苷Rg1进样量线性范围是6.0~18μg（r=0.996 7）,平均回收率为98.79%,RSD=0.33%（n=6）;人参皂苷Rb1进样量线性范围是6.0~18μg（r=0.996 4）,平均回收率为98.64%,RSD=0.46%（n=6）;三七皂苷R1进样量线性范围是1.6~4.8μg（r=0.997 1）,平均回收率为98.84%,RSD=0.56%（n=6）。结论 该方法准确、灵敏度高,可用于三七总皂苷的质量控制。

2种单体皂苷及三七总皂苷对白菜幼苗生长生理的影响

研究了三七皂苷R_1、人参皂苷Rg1和三七总皂苷对白菜幼苗苗高、主根长等生长性状以及过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性,可溶性糖、可溶性蛋白质含量等生理特性的影响。结果表明,与对照(蒸馏水)相比,0. 01～100. 00 mg/L三七皂苷R_1和人参皂苷Rg1处理均不同程度地降低了白菜幼苗的苗高、主根长和POD、SOD活性,其中,10. 00、100. 00mg/L三七皂苷R_1处理组和0. 01、50. 00 mg/L人参皂苷Rg1处理组白菜幼苗的主根长降低达显著水平,白菜幼苗CAT活性升高,可溶性糖含量和可溶性蛋白质含量增加;三七总皂苷处理能增加白菜幼苗的SOD、CAT活性和可溶性蛋白质含量,降低其主根长、POD活性,而苗高、可溶性糖含量呈现低促高抑的趋势,其中,0. 01、10. 00、50. 00、100. 00 mg/L处理组白菜幼苗POD活性分别比对照显著下降35. 57%、37. 90%、45. 35%、35. 42%。三七皂苷R_1、人参皂苷Rg1及三七总皂苷对白菜幼苗均具有一定的化感抑制作用,但在质量浓度0. 01～100. 00 mg/L的范围内,白菜可以作为三七的轮作作物。

反相高效液相色谱法测定三七散中三种皂苷的含量

目的:建立三七散中三种皂苷含量的反相高效液相色谱测定法。方法:以Hypersil-C18(i.d.4.6×250mm,5μm)为色谱柱,0.02%磷酸-乙腈为流动相,梯度洗脱反相测定三七散中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1三种皂苷的含量,检测波长为203nm。结果:R1、Rg1、Rb1三种皂苷的加样回收率分别为88.68%、91.66%、82.21%;线性范围分别为0.245～6.118、0.823～20.511、0.393～9.892。结论:本方法简便可行,结果可靠,可用于三七散的质量控制。

抵挡汤早期干预对2型糖尿病大鼠肿瘤坏死因子-α与血管细胞黏附分子-1表达的影响

目的观察抵挡汤早期干预对2型糖尿病大鼠血管病变中大血管的保护作用,探讨其机制。方法采用高脂饲料喂养及链脲佐菌素诱导方法制成大鼠糖尿病模型,抵挡汤早期干预组、抵挡汤中期干预组和抵挡汤晚期干预组分别于实验成模前4周、成模和成模后4周给予抵挡汤灌胃,辛伐他汀组和罗格列酮组大鼠于成模时分别给予辛伐他汀和罗格列酮灌胃,至实验24周时结束。酶联免疫吸附法检测大鼠血清血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平,实时荧光定量PCR法检测主动脉肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达。结果与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清VCAM-1水平明显升高(P<0.05),主动脉TNF-αmRNA表达明显升高(P<0.05);与模型对照组比较,抵挡汤早期干预组和辛伐他汀组大鼠血清VCAM-1水平明显降低(P<0.05),并且抵挡汤早期干预组、抵挡汤中期干预组和罗格列酮组大鼠主动脉TNF-αmRNA的表达明显降低(P<0.05)。结论抵挡汤早期干预能抑制大鼠主动脉TNF-αmRNA表达升高,抑制大血管病变的炎性损伤,延缓糖尿病大血管病变的发展,发挥其保护大血管的作用。

HPLC法测定血塞通分散片中三七皂苷R_1及人参皂苷Rg_1、Rb_1的含量

目的建立血塞通分散片中三种皂苷含量的高效液相色谱法。方法C18柱（4．6×150mm，5μm）；己腈-水0～20min（20：180→36：164），20-27min（36：164→20：180），流速为lmL·min^-1二元线性梯度洗脱，检测波长为203nm。结果R1、Rg1、Rb1三种皂苷的加样回收率分别为98．66％、99．14％、98．40％；线性范围分别为0．764～3．82μg、3．072～15．36μg、2．402-12．01μg。结论本方法简便可行，结果可靠，可用于血塞通分散片的质量控制。

RP-HPLC法测定三七接骨丸中人参皂苷Rg_1的含量

目的:建立三七接骨丸中人参皂苷Rg1的含量测定方法。方法:采用RP-HPLC法,色谱柱为Diamonsic C18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0 mL.min-1,柱温为30℃,检测波长为205 nm。结果:人参皂苷Rg1进样量在0.802-4.01μg时线性关系良好r,=0.9999;平均加样回收率为98.05%(RSD%=1.60%)。结论:本方法简便、准确、专属性强,可用于本品的质量控制。

三七总皂苷传递体的处方优化研究

目的:优化三七总皂苷(PNS)传递体的处方。方法:用薄膜分散法制备PNS传递体。以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的包封率为指标,考察脱氧胆酸钠用量、胆固醇用量、水化液相对离子强度与p H值各因素的影响,进而采用均匀设计试验优化PNS传递体的处方,并对优化处方制备的PNS传递体进行初步质量评价。结果:薄膜分散法制备PNS传递体的最优处方为:蛋黄磷脂0.45 g,胆固醇0.05 g,维生素E 0.01 g,脱氧胆酸钠0.119 g,PNS0.1 g,水化液为p H 4.75柠檬酸-磷酸缓冲液(0.1 mol/L柠檬酸溶液与0.2 mol/L磷酸氢二钠溶液按合适比例混合,对应离子强度为合适)10 m L。经优化处方制备的PNS传递体平均粒径为(121.8±3.9)nm,PDI值为0.136±0.007,Zeta电位为(-8.24±0.63)m V,人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的包封率分别为88.0%、98.7%。结论:单因素试验结合均匀设计试验可用于优化PNS传递体的处方。

RP-HPLC梯度洗脱测定脑得生分散片中人参皂苷Rb_1、Rg_1和三七皂苷R_1的含量

目的建立RP-HPLC同时测定人参皂苷Rb1、Rg1和三七皂苷R1的含量。方法Thermo HYPERSIL ODS柱，乙腈-水梯度洗脱（0-12min，乙腈19％；12-50min，乙腈19％→40％），流速：1．0ml·min^-1；检测波长：203nm。结果进样量分别在0．75-15．0μg、0．75—15．0μg、0．15-3．0μg范围内线性关系良好：平均加样回收率分别为99．30％、99．41％、98.82％，RSD分别为0．73％、0．68％、0．77％。结论本方法简单易行，定量准确，重复性好，可用于脑得生分散片的含量测定。

薄层扫描法同时测定三七细粉中皂苷含量

目的:建立同时测定三七细粉中人参皂苷Rb1、三七皂苷R1和人参皂苷Rg1含量的方法。方法:采用双波长薄层扫描法,吸附剂为硅胶G,展开剂为三氯甲烷-甲醇-水(13∶7∶2)10℃以下放置12 h的下层液,显色剂为10%硫酸乙醇溶液,110℃加热显色,测定波长510 nm,参比波长700 nm。结果:三种皂苷分别在0.504~5.04、0.501~5.01、0.492~4.92μg范围呈良好的线性关系;平均回收率分别为96.40%、96.97%、98.97%,RSD分别为1.40%、0.98%、1.70%(n=6)。结论:该方法操作简便、快速、高效、准确。

肿痛巴布剂渗滤液体外透过实验研究

目的:研究肿痛巴布剂渗滤液体外透皮情况,为改进制剂处方及工艺、开发新型制剂提供实验依据。方法:采用改良Franz扩散池法进行体外透皮扩散实验,对皮肤种类、接收液种类进行定性筛选、并采用累积渗透曲线对肿痛巴布剂渗滤液体外透皮效果进行定量考察。结果:通过薄层色谱法定性分析,药物在选用雄性小鼠皮肤、30%乙醇接收液时透皮效果最佳。肿痛巴布剂渗滤液透皮速率(J)为40.63μg/cm2.h0.5,24h累积透过量为173.075mg/cm2。药物体外透皮符合Higuchi方程,规律可控。结论:该方法准确、稳定,适用于肿痛巴布剂的体外透皮试验研究。

人参皂苷Rg1与Rb1在心肌缺血复合肿瘤病理环境下的作用研究

目的:观察三七总皂苷主要成分人参皂苷Rg1和Rb1在心肌缺血复合肿瘤病理环境下的作用,并通过研究血管新生探索其可能的作用机制。方法:采用小鼠经皮下移植LLCs肿瘤细胞及腹腔注射异丙肾上腺素的方法制备肿瘤复合心肌缺血动物模型,再随机分为模型组、人参皂苷Rg1组、人参皂苷Rb1组;另设正常对照组。Rg1组和Rb1组分别予腹腔注射Rg1、Rb1(50 mg/kg);正常组与模型组给予等体积生理盐水。连续干预15 d后,比较各组小鼠的肿瘤生长情况、心肌组织病理形态学变化及通过免疫组织化学的方法检测心肌和肿瘤组织中CD34、vWF的蛋白表达。结果:人参皂苷Rg1及Rb1治疗组小鼠移植肿瘤生长显著受到抑制,其平均瘤重显著低于模型组(P<0.05);两组心肌组织缺血损伤显著改善,胶原含量明显减少(P<0.05,P<0.01);同时心肌组织中CD34和vWF蛋白表达量显著升高,而肿瘤组织中CD34和vWF蛋白表达量显著降低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:三七总皂苷主要活性成分人参皂苷Rg1和Rb1在心肌缺血复合肿瘤病理环境下显著抑制LLCs肿瘤生长,并显著改善心肌缺血损伤,其双向作用的机制可能与对血管生成双向调节作用有关。

三七不同炮制品中皂苷类成分的含量比较

目的:建立一种RP-HPLC同时测定三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Re含量的分析方法,并比较不同炮制品中这4种成分含量的异同。方法:采用高效液相色谱法。色谱条件:色谱柱:Ultimate XB-C18(250mm×4.6 mm,5μm);柱温:25℃;流动相:乙腈-水梯度洗脱;检测波长:203nm。.结果:蒸三七中三七皂苷R1的平均含量为0.806%、Rg1为3.18%、Re为1.00%、Rb1为0.998%,高于相应生三七和油炸三七中相应的成分;其中,生三七中上述成分的含量分别为0.747%、3.24%、0.961%、0.977%,油炸三七中分别为0.765%、2.84%、0.860%、0.847%。结论:三七不同炮制品中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Re的含量存在差异;炮制对三七皂苷类成分的含量有影响。

三七中总皂苷含量测定的对照品筛选

目的:考察选用不同皂苷类对照品为指标对样品中三七总皂苷含量测定的影响。方法:以人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1、三七总皂苷为对照品,香草醛-高氯酸显色,采用紫外分光光度法测定三七中三七总皂苷的含量。结果:以不同对照品为指标测定三七总皂苷含量时,结果存在明显差异。结论:紫外分光光度法测定三七及其制剂中总皂苷含量时,可用三七总皂苷作对照品,为含有三七的制剂含量测定提供较为可靠的实验数据。