芪风固表颗粒对肺炎克雷伯菌感染的预防和抑制作用研究

目的:研究芪风固表颗粒对肺炎克雷伯菌(Kp)感染小鼠的预防和抑制作用。方法:BALB/C小鼠,预防给予芪风固表颗粒高(2.6 g/kg)、中(1.3 g/kg)、低(0.65 g/kg)剂量40 d后,乙醚麻醉小鼠,滴鼻感染5×10^(8)CFU/mL的Kp50μL1次,感染24 h后处死小鼠。HE染色观察给药后小鼠肺组织结构病理改变;肺泡灌洗观察不同组小鼠肺泡灌洗液内白细胞数;小鼠肺组织细菌浓度测定观察各组肺组织中细菌浓度;免疫组织化学法观察Pannexin1/P2RX7在肺组织中的表达位置;蛋白免疫印迹法检测肺组织Pannexin1/P2RX7/Caspase-11蛋白表达变化;Real-Time PCR法观察肺组织Pannexin1/P2RX7/Caspase-11 mRNA表达变化。结果:与模型组比较,HE染色结果显示,芪风固表组的肺组织病理结构有所改善,仅出现少量充血以及少量炎细胞浸润,肺组织损伤程度降低;给药组小鼠肺泡灌洗液中白细胞数降低(P<0.05,P<0.01);小鼠肺组织细菌浓度测定结果显示,芪风固表颗粒高、中剂量组较模型组细菌浓度数明显减少(P<0.05);免疫组化结果发现,芪风固表各剂量组Pannexin1、P2RX7蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);蛋白印迹结果显示,芪风固表高剂量组Pannexin1、P2RX7、Caspase-11和中剂量组P2RX7的表达降低(P<0.05);Real-Time PCR结果显示,芪风固表高剂量组及中剂量组Pannexin1、P2RX7、Caspase-11 mRNA表达降低(P<0.05)。结论:芪风固表颗粒可以对肺炎克雷伯菌感染引起的肺部炎性改变及损伤有明显的改善作用,机制可能与抑制Caspase-11细胞焦亡通路信号有关。

麝香酮对急性脑缺血大鼠缝隙联结蛋白Pannexin1表达的影响

目的:探讨麝香酮对急性脑缺血大鼠缝隙联结蛋白Pannexin1表达的影响。方法:将SD大鼠分为假手术组、缺血模型组和麝香酮药物组,分别采用神经功能缺损评分、TTC染色和HE染色评估脑损害程度,Western blot检测脑组织Pannexin1蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分下降并出现明显梗塞,麝香酮药物组神经功能评分下降,梗塞减轻,HE染色示海马区缺血减轻。缺血组Pannexin1蛋白表达升高,麝香酮药物组可下调表达。结论:麝香酮减轻急性脑缺血损伤可能与下调脑缺血后Pannexin1蛋白表达有关。

缝隙连接蛋白pannexin1在神经病理性疼痛大鼠脊髓背角的表达变化

目的观察缝隙连接蛋白pannexin1(PX1)在坐骨神经分支选择结扎模型大鼠脊髓背角上的表达变化。方法健康SD雄性大鼠50只,分为对照组(WT组,n=10)、假手术组(sham组,n=10)和坐骨神经分支选择性损伤组(SNI组,n=30)。SNI组20只大鼠于术后3、5、7、14d(n=5),WT、sham组于术后14d(n=5)取脊髓腰段用Western blot法检测PX1表达变化,另20只大鼠于术后7d取脊髓腰段进行免疫组化染色,检测脊髓背角内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达水平。SNI组中10只于建模前进行鞘内置管,术后7d分别向鞘内注射生理盐水20μL(SNI+NS组)或甘珀酸(CBX)20μL(SNI+CBX组),再进行免疫组化染色。结果 SNI组脊髓背角内PX1表达增多,并随时间增强,明显高于WT、sham组(P<0.05);7d后SNI组脊髓背角内GFAP表达较WT、sham组明显增强(P<0.05);SNI+CBX组GFAP表达较SNI+NS组明显下调(P<0.05)。WT、sham组脊髓背角的PX1蛋白和GFAP表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论缝隙连接蛋白PX1可能参与了星形胶质细胞的激活,提示其在因外周神经损伤引起的神经病理性痛中起重要作用。

Pannexin1特异性阻断剂丙磺舒对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用

目的探讨丙磺舒特异性阻断泛连接蛋白1（Pannexin1）通道对大鼠心肌缺血再灌损伤的作用。方法免疫组化法确定Pannexin1在大鼠心脏中的表达情况，采用大鼠离体及在体心脏缺血再灌注模型，测定血流动力学指标及离体实验灌注各时间点冠脉流出液和在体实验动物血清中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）含量。实验结束后采用TTC染色测定在体心肌细胞中的梗死面积。结果在心脏组织水平上，Pannexin1主要于心室肌表达。与对照组比较，Pannexin1的阻断剂丙磺舒明显改善左心室发展压，减少在体心肌梗死面积，同时降低心肌细胞LDH的释放。结论Pannexin1在心室肌上表达并在心肌缺血再灌注中起作用，特异性阻断Pannexin1减轻缺血再灌注引起的心肌损伤，起到心肌保护作用。