A new protoberberine alkaloid from Corydalis yanhusuo W.T.Wang

A new protoberberine alkaloid, named 5,6-dihydro- 10-hydroxy-2,3,9-trimethoxy- 13-methyldibenzo[α,g]quinoliziniurn （1） was isolated from the 60% ethanol extract of the tubers of Corydalis yanhusuo W. T. Wang, together with a new natural product, 13methylpalmatrubine （2）. Their structures were established by spectroscopic methods. 2009 Xin Sheng Yao. Published by Elsevier B.V. on behalf of Chinese Chemical Society. All fights reserved.

导数FTIR结合统计学法应用于中药延胡索质量控制的研究

提出了用单次反射傅里叶变换红外光谱法直接测定延胡索及其伪品的新方法。采用OMNI采样器直接测定法测定了样品的红外光谱,并经过二阶导数光谱转换后进行峰位一致率检验。结果发现延胡索表皮以内部分和外表皮的二阶导数红外光谱峰位基本无差别,而且不同产地的道地药材具有较好的相关性。表皮以内部分于2050～650cm-1区域在4cm-1波长区域单位范围内进行统计学处理,结果延胡索与其伪品的差异性极其显著。可以采用二阶导数FTIR结合统计学法直接、快速、准确地对延胡索与其伪品的表皮以内部分进行区别鉴定。

紫金龙氯仿-甲醇组分对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症的抑制作用

目的探讨紫金龙氯仿-甲醇组分对脂多糖诱导RAW264. 7细胞炎症的抑制作用。方法脂多糖刺激RAW264. 7细胞建立体外炎症模型后,加入不同质量浓度(50、100、200、400 mg/L)紫金龙氯仿-甲醇组分,ELISA法或比色法检测白介素-6 (IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)含有量,Western blot法测定诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、环氧化酶-2 (COX-2)蛋白表达,以及核转录因子κ转抑制蛋白α(IκBα)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38)、c-Jun氨基端激酶(JNK)、细胞外调节蛋白激酶1/2(Erk1/2)磷酸化水平。结果紫金龙氯仿-甲醇组分可显著抑制TNF-α、IL-6、IL-1β、NO、PGE2释放(P <0. 05,P <0. 01),下调i NOS、COX-2蛋白水平(P <0. 01),降低p38、JNK、Erk1/2、IκBα磷酸化水平(P <0. 05,P <0. 01)。结论紫金龙氯仿-甲醇组分可有效抑制脂多糖诱导RAW264. 7细胞炎症,其机制可能与抑制NF-κB、MAPKs信号通路激活、减少炎症因子释放有关。

黄草乌及其混淆品ITS序列的分析鉴别

目的:比较黄草乌及其混淆品滇南草乌ITS序列的差别。方法:分别提取黄草乌及滇南草乌总DNA,进行PCR扩增、扩增产物直接测序,利用DNAStar、ClustalX1.81及MEGA4.0软件进行序列分析。结果:通过对黄草乌及其混淆品的ITS数据矩阵,得到ITS1产生229个一致位点、19个变异位点和13个信息位点;5.8S产生162个一致位点、2个变异位点和1个信息位点;ITS2产生217个一致位点、3个变异位点和1个信息位点。除了5.8S没有碱基的转换和颠换,ITS1存在2个碱基转换和1个颠换,ITS2只存在1个颠换。黄草乌2个居群和滇南草乌3个居群的ITS测序结果经数据矩阵分析后,发现二者ITS2区间第596个碱基处为鉴定二者的稳定的信息位点,黄草乌2个居群的所有样品在此位点的碱基为(C),而滇南草乌3个居群的所有样品在此位点的碱基为(A)。结论:黄草乌与其混淆品滇南草乌的核rDNA的ITS序列存在碱基的差异,有特定的变异位点,且位点变异表现出ITS1大于ITS2,因此,能在分子水平上将二者分开。

Developing a Novel Single-Marker-Based Method for the Quantitative Evaluation of the Multiple Active Components in Corydalis yanhusuo W. T. Wang

Objective: This study was designed to develop a method for detecting differences in the chemical composition of Corydalis yanhusuo W. T. Wang using high-performance liquid chromatography with a diode array detector technology. Materials and Methods: We established a novel quantitative evaluation method for identifying multiple components in natural extracts using a single-marker method quantitative analysis of multi-components by single marker(QAMS). This method was then validated using eight alkaloid phytochemical markers designed to evaluate C. yanhusuo quality. Results: Our evaluations revealed good linearity(R^(2) ≥ 0.9991) within the range of tested concentrations for all eight alkaloids, with recovery ranging from 95.5% to 101.5%. The evaluations also returned stability results that fell within the acceptable range. Cluster analysis and Heatmap analyses were applied to classify and evaluate alkaloids across 21 different production areas. These results revealed a significant difference in the component profiles between samples from different origins. Conclusions: Thus, these data suggest that in the absence of a material reference, QAMS may help facilitate the stable production of C. yanhusuo. In addition, our data suggest that this method may have value as a promising alternative to common quality evaluations for controlling C. yanhusuo composition.

广西苦苣苔科稀有珍贵植物——弥勒苣苔

首次报道广西苦苣苔科植物一新记录属:弥勒苣苔属。该属接近金盏苣苔属,但不同在于弥勒苣苔属花冠上唇4浅裂,下唇不分裂,2对雄蕊分别着生于花冠中部及其上方,雌蕊具一个柱头。弥勒苣苔属为中国特有的单型属,仅弥勒苣苔一种,分布于云南东南部和广西西部。该种在广西首次记录,凭证标本存放于广西植物标本馆(IBK)。

延胡索化学成分、药理作用及质量控制研究进展

紫堇属植物在世界范围是良好的止痛药,延胡索即是其中典型的代表。延胡索行气止痛,作为一种重要的中药在中国的应用历史已超过数百年。综述了延胡索的化学成分、药理作用以及质量控制的研究进展,以利于对延胡索的进一步研究。

延胡索的化学成分

目的分离并鉴定延胡索的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、氧化铝柱色谱和重结晶等多种分离方法对延胡索的体积分数为85%的乙醇溶液提取物进行分离,并通过NMR、ESI-MS和TLC等多种方法对分离得到的化学成分进行结构鉴定。结果分离得到13个化合物,分别鉴定为四氢紫堇萨明(tetrahydrocorysamine,1)、四氢黄连碱(tetrahydrocoptisine,2)、紫堇碱(corydaline,3)、四氢巴马亭(tetrahydropal matine,4)、去氢紫堇碱(dehydrocorydaline,5)、oxoglaucine(6)、降氧化北美黄连次碱(noroxyhydrastinine,7)、四氢小檗碱(tetrahydroberberine,8)、山嵛酸(behenic acid,9)、β谷甾醇(βsitosterol,10)、胡萝卜苷(daucosterol,11)、香草酸(vanillic acid,12)、对羟基苯甲酸(phy-droxybenzoic acid,13)。结论其中化合物9、12、13为首次从该属植物中分离得到,化合物6、7、10、11为首次从该植物中分离得到。

RP-HPLC法测定显齿蛇葡萄中杨梅素的含量

目的 测定显齿蛇葡萄中杨梅素的含量。方法 采用 RP- HPL C法测定 ,色谱柱为 Nova- Pak C1 8不锈钢柱 ,检测波长为 2 5 4nm,用甲醇 -水 =40∶ 6 0为流动相。结果 方法的变异系数为 2 .76 3% ,平均回收率为 97.4% ,最低检测量为 15 ng。湖南显齿蛇葡萄植物中不同部位的杨梅素含量为 1.5 7%～ 2 .17%。结论 方法简单、快速、精确 。

三苞唇柱苣苔离体培养体系的建立

以三苞唇柱苣苔(Chirita tribracteata W.T.Wang)的幼嫩叶片为外植体,开展外植体消毒灭菌、叶片愈伤组织的诱导及分化、继代增殖培养、生根培养以及植株玻璃化的研究。结果表明:叶片的灭菌方法可采用乙醇浸泡10 s结合升汞浸泡12~16 s;叶片的最佳愈伤组织诱导、分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;继代增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1~0.5 mg/L或者MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1~0.5 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.1~0.3 mg/L,生根率为100.00%;培养基中不添加6-BA或添加低浓度的6-BA或者添加适量活性炭均可减轻植株的玻璃化。

延胡索HPLC指纹图谱研究及9种生物碱含量测定

目的:分别建立延胡索药材及醋延胡索饮片的HPLC指纹图谱,同时对其中9种生物碱成分进行含量测定。方法:以通过三乙胺调节pH值至6.1的乙腈-0.1%磷酸溶液作为流动相,选择ECOSIL 120-5-C18AQ色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm)进行梯度洗脱。结果:延胡索药材和醋延胡索饮片各10批分别所得的指纹图谱,相似度值均>0.94,确定共有峰均有15个。原阿片碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、脱氢紫堇碱、海罂粟碱、延胡索乙素、四氢小檗碱、延胡索甲素、脱氢海罂粟碱9种生物碱在相应范围内与其峰面积均呈良好线性关系(r≥0.9999);其平均加样回收率(n=6)分别为99.0%、101.5%、99.0%、102.2%、98.7%、100.3%、101.8%、99.4%、99.8%,RSD≤2.5%。结论:该方法具有较高的灵敏度,良好的重复性,可为延胡索药材和醋延胡索饮片的质量评价和全面控制提供参考依据。

差示分光光度法测定广西瑶族藤茶中黄酮类成分的含量

目的 建立藤茶中黄酮类成分的含量测定方法 ,以控制其质量。方法 采用差示分光光度法 ,以双氢杨梅素皮素为指标 ,采用差示分光光度法 ,测定波长为 (318± 1) nm。结果 对照品浓度在 4 .5 76～ 2 2 .88μg/ m L 范围内 ,吸光度与浓度呈良好的线性关系 (r=0 .9998) ,回归方程为 A=2 9.5 6 C+0 .0 0 5 5 ,平均回收率为 10 0 .8% ,RSD为 1.9% (n=5 )。结论 本法操作简单、结果准确、重现性好 。

条叶唇柱苣苔组织培养研究

以条叶唇柱苣苔(Chirita ophiopogoides D Fang et W T Wang)的幼嫩叶片、种子为外植体,以MS为基本培养基,建立了条叶唇柱苣苔的组织培养和再生体系。试验结果表明:条叶唇柱苣苔叶片诱导不定芽的最佳培养基为MS+2,4-D0.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L,丛生芽分化的最佳培养基为MS+KT 1.0 mg/L+IAA 3.0 mg/L+NAA 0.5mg/L;MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.5 mg/L的培养基最适合继代,MS+IBA 2.0 mg/L+AC 0.5 mg/L培养基的生根效果最好,平均根长为4.67 cm,生根率达100%。

响应面法优化延胡索生物碱乙醇提取工艺研究

为了提高中药延胡索的利用率,采用响应面法优化其生物碱的提取工艺。考察了不同反应条件对延胡索生物碱得率以及生物碱纯度的影响。在单因素试验基础上,以生物碱得率为指标,通过响应面法对提取工艺条件进行优化。得到的优化条件为:提取时间116 min,提取温度49℃,乙醇体积分数80%,乙醇用量10 mL/g(以延胡索计)。在此条件下提取3次,生物碱得率为0.598%,其纯度为17.38%。

响应曲面法优化延胡索中延胡索乙素的提取工艺

目的以延胡索乙素为指标成分对中药延胡索的提取工艺进行优化,以利于工业化生产。方法采用响应曲面法对提取工艺进行优化,通过考察乙醇体积分数、提取时间、溶媒用量及其交互作用对中药延胡索中延胡索乙素提取率的影响。模拟得出了延胡索乙素的提取回归方程,确定了延胡索乙素的最佳提取条件。结果优化得到的最佳工艺参数:乙醇体积分数为87.16%,提取时间为105.13 min,液料比为1∶7.13。在该工艺条件下,提取物中延胡索乙素的含量质量分数为0.183%。结论该提取工艺对延胡索提取物中的延胡索乙素提取优化效果显著,方法稳定、可行。

桂林唇柱苣苔传粉生物学及生殖配置研究

对桂林唇柱苣苔在不同生境下(YZ居群,半野生,林下裸露岩石上;DB居群,洞穴岩石上)的生殖生态学进行了比较研究。结果表明:(1)桂林唇柱苣苔的花期为2月下旬至4月中旬,受环境因素的影响,单花期在DB居群(16～24d)明显长于YZ居群(10～17d);(2)两个居群的P/O比差异显著,花粉量比胚珠量有更明显的变化,这可能与其生境有关;(3)桂林唇柱苣苔属于兼性异交系统,不存在无融合生殖现象;(4)传粉和种子后熟阶段均存在限制,致使各种处理的结实率均处在较低的水平(<45%);(5)白颊尤垫蜂与小蜂类(DB居群)或蜜蜂(YZ居群)为桂林唇柱苣苔较为稳定的传粉者;(6)桂林唇柱苣苔植株个体越大,花期繁殖投入就越高,繁殖分配越低;(7)与DB居群相比,YZ居群可利用资源较为丰富、植株生物量较大,因此其花期投入繁殖也较高,而DB居群将更多的资源分配给营养器官,从而提高了对资源获取能力。

濒危植物秦岭石蝴蝶的生态学特性及濒危原因分析

通过野外调查和随机取样法, 对仅产于陕西勉县的中国特有濒危植物秦岭石蝴蝶（ Petrocosmea qinlingensis W. T. Wang）群落的维管植物组成、 垂直结构和分布区类型及其种群特征和土壤化学性质进行了调查和分析;在此 基础上, 初步探讨了该种类的濒危原因.调查结果显示：秦岭石蝴蝶为喜阴植物, 仅分布于山体海拔约640 m 的区 域, 种群面积仅约42 m^2; 土壤为黄棕壤, 呈中性（ pH 6. 5 0 ）, 土壤中有机质含量较高, 全氮、 全磷和全钾含量较低, 有效铁、 有效镁、 有效钠和有效钙含量则较高;秦岭石蝴蝶种群中个体数量约1 0 0 0株, 多生长于覆有土壤或苔藓的岩 石上, 也有部分成年个体生长在裸露且瘠薄的岩石上.秦岭石蝴蝶群落中共有维管植物2 8种, 隶属于2 3科 2 8属; 其中, 蕨类植物3 科4 属4 种, 裸子植物1科 1 属 1 种, 被子植物1 9科2 3属2 3种, 优势科和优势属不明显.秦岭石蝴蝶群落垂直结构明显, 可分为乔木层、 灌木层和草本层, 其中, 乔木层优势种为杜仲（ Eucommia ulmoides Oliver）, 灌木层优势种为华西小石积（Osteomeles schwerinae Schneid.）, 草本层优势种为裂叶荨麻（ Urtica lobatfolia S. S. Ying）.该群落维管植物科的分布型以热带分布型科为主, 其中泛热带分布型科占明显优势;属的分布型以温带分布型属为主, 其中北温带分布型属占优势; 中国特有分布的科和属均很少;总体上看, 该群落具有暖温带向亚热带 过渡的特点.在秦岭石蝴蝶种群的不同样方中, 成年个体和幼苗数量均有一定差异, 成年个体占14.6% - 3 7 . 5 %, 幼苗占61.3% -80.0%, 幼苗数量明显高于成年个体;各样方的单株叶片数为7 - 9 ,冠幅为6.0 -7.2 cm, 大多数样 方的单株结实量小于4,表明在同一个种群的不同生境中秦岭石蝴蝶的分布和生长状况有明显差异.根据调查结果, 推测种群规模较小、 分布范围狭窄以及人为干扰可能是造成秦岭石蝴蝶濒危的主要原因, 而人为干扰是其中的重要原因.

中药延胡索化学成分研究

本文采用多种分离层析手段,从中药延胡索(Corydalis yanhusuoW.T.Wang)干燥块茎的乙醇提取物中分离化合物.经波谱分析,及与标准品或文献数据对照的方法,分离并鉴定了6个化合物:延胡索甲素(d-Corydaline)、延胡索乙素(Tetrahydropalmatine)、Pontevedrine、四氢黄连碱(Tetrahydroberberine)、去氢紫堇碱(Dehydrocorydaline)、原普托品(Protopine).研究表明生物碱是中药延胡索的主要成分,其中Pontevedrine为首次从该药材中分离得到的生物碱.

藤茶的生药学研究

藤茶是湖南省江华瑶族自治县瑶族人民作为保健茶饮用的草药，系葡萄科植物显齿蛇葡萄 Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓ ｇｒｏｓｓｅｄｅｎｔａｔａ（Ｈａｎｄ．－Ｍａｚｚ．） Ｗ．Ｔ．Ｗａｎｇ。我们的研究证明，藤茶主要含 ３、３、４、５、５＇、７－六羟基－２，３－双氢黄酮醇，即双氢杨梅树皮素（ｄｉｈｙｄｒｏｍｙｒｉｃｅｔｉｎ）。双氢杨梅树皮素具有显著的扩张血管和钙拮抗作用。本文报道藤茶的形态和组织粉末显微特征，为藤茶的生药鉴定和利用提供参考依据。

药用唇柱苣苔叶片分化及植株再生研究

目的:建立濒危药用植物药用唇柱苣苔叶片分化及植株再生体系。方法:以药用唇柱苣苔(Chirita medica D.Fangex W.T.Wang)叶片为外植体,灭菌后接种到附加不同激素配比的培养基中培养,筛选各阶段合适的培养基。结果:不定芽诱导的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,pH=6.0,诱导率为100%;最佳继代增殖培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,pH 6.0,增殖系数为12.6/30 d;最适合的生根培养基为1/2 MS+0.2 mg/L NAA,pH=6.0,生根率高达100%,移栽成活率为95.0%。结论:本繁殖体系可在短时间内提供大量种苗,并为种质资源的保护和可持续利用提供技术指导。