反相HPLC法测定白花前胡根中有效成分Pd-Ia的含量

采用反相HPLC法测定白花前胡根中醚提取物的有效成分 [3′(S) 当归酰氧基 ,4′(S) 乙酰氧基 3′ ,4′ 双氢邪蒿内酯 ,Pd Ia]的含量。峰面积与Pd Ia含量在 0 .0 0 15 0 5～ 0 .15 0 5mg·ml-1范围内呈线性关系。回归方程为C(mg·ml-1) =5 .8× 10 -8A - 5 .0 2 5× 10 -4 。前胡样品中Pd Ia的含量为 0 .0 77%。

白花前胡有效成分Pd-Ia对急性肺损伤的作用及机制研究

目的探讨白花前胡甲素(dl-praeruptorin,Pd-Ia)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导急性肺损伤的作用及其机制。方法气管滴注LPS建立小鼠急性肺损伤模型,PdIa腹腔注射进行干预治疗,应用组织细胞染色及定量PCR、ELISA等方法评估Pd-Ia对急性肺损伤的作用。结果病理形态学显示,Pd-Ia治疗组炎性细胞浸润明显减轻,细胞染色也显示BALF中炎性细胞数量明显减少,定量PCR及ELISA结果显示,Pd-Ia治疗组抑制了肺组织中细胞因子IL-6、TNF-α、IL-1β、趋化因子MIP-1α、MIP-2的表达。结论 Pd-Ia治疗可以明显减轻肺部的炎症反应,从而改善肺损伤。

家兔肺动脉平滑肌细胞的延迟整流钾电流及白花前胡有效成分Pd-Ia对此电流的作用

建立用胰蛋白酶和胶原酶分离制备家兔肺动脉单离平滑肌细胞的方法并以膜片钳制技术观察了此细胞延迟整流钾电流的基本特性及中药白花前胡有效成分Ｐｄ－Ｉａ的作用。结果表明：①将细胞钳制在－４０ｍＶ，当指令电位大于－４０ｍＶ时，可以记录到具时间及电压依赖性的延迟整流钾电流；②Ｐｄ－Ｉａ１０－６ｍｏｌ／Ｌ在指令电位为＋８０ｍＶ时，可以使延迟整流钾电流由给药前的（１．８±０．５）ｎＡ增加至（２．３±０．６）ｎＡ，提示Ｐｄ－Ｉａ可能具有钾通道开放作用。

RP－HPLC法分析白花前胡中Pd－Ia和紫花前胡中Pd－C－I的含量

建立了ＲＰ－ＨＰＬＣ测定白花前胡根中３′（Ｒ）－ａｎｇｅｌｏｙｌｏｘｙ－４′（Ｒ）－ａｃｅｔｏｘｙ－３′，４′－ｄｉｈｙｄｒｏｓｅｓｅｌｉｎ（Ｐｄ－Ｉａ）和紫花前胡根中３′（Ｒ）－ｓｅｎｅｃｉｏｙｌｏｘｙ－４′（Ｓ）－ｈｙｄｒｏｘｙ－３′，４′－ｄｉｈｙｄｒｏｘａｎ－ｔｈｙｌｅｔｉｎ（Ｐｄ－Ｃ－Ｉ）含量的方法。色谱柱为ＯＤＳ，甲醇－水（７１２９ｖ／ｖ）为流动相，流速为０．４ｍｌ／ｍｉｎ，紫外检测波长３２０ｎｍ，线性范围分别为０．０２～０．０６μｇ和０．０１～０．０５μｇ，相关系数分别为ｒ＝０．９９９０和ｒ＝０．９９９６，平均回收率分别为９９．５３％和１００．９３％。本法结果准确，步骤简便，灵敏度高，分析速度快，重现性好，为常用中药前胡的质量检测提供了现代可靠手段。

中药白花前胡有效成分Pd－Ia的提取与分离

用甲醇提取白花前胡根茎，提取液经乙醚和水萃取，将其醚提部分经硅胶柱层析，用石油醚与丙酮梯度洗脱，可分离得到有效成分Ｐｄ－Ｉａ，并经理化常数和波谱数据鉴定。

大鼠急性心肌缺血-再灌注损伤时心肌超微结构的变化与白花前胡及前胡甲素的保护作用

目的研究大鼠急性心肌缺血 再灌注损伤时心肌超微结构的变化与白花前胡及前胡甲素的保护作用。方法利用大鼠在体心肌缺血再灌注模型 ,观察并对比研究了中药白花前胡 (PPD)及前胡甲素 (Pd Ia)对急性心肌缺血 再灌注损伤 (ischemiareperfusion ,IR)时心肌细胞结构的影响。结果白花前胡 (1 80mg·kg-1)和前胡甲素 (0 5mg·kg-1)能明显改善缺血再灌注所致的心肌光镜及电镜下细胞结构损伤。结论白花前胡和前胡甲素对大鼠急性心肌缺血 再灌注损伤时的心肌细胞有保护作用。

用2D NMR研究凯林内酯酰化物的相对构型

用2D NMR对钙离子拮抗活性成分Pd-Ia的结构进行了深入研究,确切归属了全部碳氢信号,纠正了文献中甲基信号归属的错误。并以此为参考,指定了这类化合物母核碳信号的归属,从而修正了文献中用角甲基碳化学位移值之差决定其C-3＇和C-4＇相对构型的有关内容,发现在顺式构型中,连接在C-2＇的两个角甲基碳化学位移差值大于或等于2ppm,而在反式构型中,这个差值小于或等于2ppm,且△(δC-3＇trans-δC-3＇cis)>1ppm。

HPLC法测定白花前胡中白花前胡丙素和紫花前胡中紫花前胡苷的含量

目的 :建立高效液相色谱法测定白花前胡根中白花前胡丙素 (dl-praeruptorinA ,Pd -Ia)和紫花前胡根中紫花前胡苷 (nodakenin ,NDK)含量的方法。方法 :色谱柱Shim -PackCLC -ODS ,Pd -Ia的流动相为甲醇 -水 (79∶2 1)和NDK的流动相为乙腈 -甲醇 -水 (2 0∶5∶75 ) ,流速为 1 0mL·min- 1 ,紫外检测波长分别为 32 3和 334nm。结果 :Pd -Ia及NDK的线性范围分别为 0 0 8～ 0 8μg和 0 0 1～ 0 10 μg ,相关系数均为 0 9999,平均回收率分别为 98 5 3%～ 99 2 7%和 97 6 0 %～99 87% ,RSD小于 2 %。结论 :方法准确 ,简便 ,快速 ,灵敏度高 ,对常用中药前胡的质量控制有较重要意义。

白花前胡甲素对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大及核转录因子c-Jun蛋白表达的影响

目的:探讨白花前胡甲素(Pd-Ia)对AngⅡ诱导的心肌细胞肥大及核转录因子c-Jun蛋白表达水平的影响。方法:体外原代培养乳鼠心肌细胞;免疫细胞化学检测核转录因子c-Jun蛋白表达情况;[3H]亮氨酸掺入法及[3H]胸腺嘧啶核苷掺入法检测细胞内蛋白、DNA合成。结果:AngⅡ(10-6 mol·L-1)刺激心肌细胞2 h后,细胞核内c-Jun蛋白表达显著增强,为对照组的2．8倍(P<0．01);24 h后,细胞内DNA、蛋白合成显著增加(P<0．05)。白花前胡甲素对此有显著抑制作用(P< 0．05)。结论:白花前胡甲素能够拮抗AngⅡ诱导的心肌细胞肥大,其机制可能与抑制AngⅡ诱导的心肌细胞c-Jun蛋白表达上调有关。

白花前胡甲素对Ang II诱导的核转录因子c-Jun蛋白表达的影响

目的:探讨白花前胡甲素(Pd-Ia)对Ang II诱导的核转录因子c-Jun蛋白表达水平的影响。方法:体外原代培养乳鼠心肌细胞;免疫细胞化学检测核转录因子c-Jun蛋白表达情况。结果:AngII(10-6mol/L)刺激心肌细胞2h后,细胞核内c-Jun蛋白表达显著增强,为对照组的2.8倍(P<0.01);白花前胡甲素对此有显著抑制作用(P<0.05)。结论:白花前胡甲素能够拮抗AngII诱导心肌细胞c-Jun蛋白表达上调。

白花前胡甲素对急性缺血再灌注大鼠心肌Fas蛋白表达及血清I-L6水平的影响

目的探讨白花前胡甲素 (Pd Ia)抗缺血再灌注损伤的机制 ,为寻找高效、低毒及安全的防治缺血再灌注损伤的药物提供理论基础。方法采用放射免疫分析测定血清白细胞介素 6(IL 6)水平 ,并用免疫组化联合计算机图像分析系统检测心肌中Fas蛋白表达。结果Pd Ia干预组IL 6水平及Fas蛋白表达指数分别由对照组的 (1 5 2 88± 1 5 2 5 )pg/mL及 (6 71± 1 47) %最大降至 (1 1 6 1 3± 1 0 45 )pg/mL及 (3 3 9± 0 92 ) % (P <0 0 1 ) ,其作用强度与硝苯地平相近。结论Pd Ia明显抑制缺血再灌注大鼠血清IL 6水平及心肌Fas蛋白表达 ,提示Pd Ia可能通过钙拮抗作用或钾通道开放作用抑制NF κB途径实现再灌注性损伤的防治。

基于NSCT和IA–AP聚类的直流电缆局放信号图特征提取

对直流交联聚乙烯(XLPE)电缆局放信号进行特征提取是故障诊断前的关键步骤。当特征提取在小波域进行时,存在提取的特征参数有限、识别准确率低的问题。因而提出了一种基于非下采样下轮廓波变换(NSCT)和免疫算法(IA)优化仿射传播(AP)聚类的直流XLPE电缆局放信号图特征提取方法。首先采用NSCT提取信号子带系数,并通过IA-AP聚类将全部系数进行分类,计算对应的信号熵和马氏距离等特征参数,最后通过不同的分解层数、聚类个数、训练样本对缺陷类型进行对比分析。实验结果表明:该方法能够应用于直流XLPE电缆局放信号的特征提取研究,相同分类器下,其识别率比小波变换法提高14%以上。该结论为直流XLPE电缆局放信号特征提取提供了新思路,有利于后续绝缘缺陷识别研究。

白花前胡甲素对心肌缺血再灌注大鼠血清IL-6水平的影响

目的 探讨白花前胡甲素 (Pd Ia)抗缺血再灌注损伤的机制 ,为寻找高效、低毒及安全的防治缺血再灌注损伤的药物提供理论基础。方法 采用放射免疫分析测定血清IL— 6水平 ,并通过常规HE染色比较中性粒细胞等炎性细胞的心肌浸润情况。结果 Pd Ia低、中、高三个剂量组IL— 6水平分别由对照组的 (15 2 88±15 2 5 ) pg/ml降至 (12 8 45± 18 37)pg/ml、 (119 6 6± 15 72 ) pg/ml和 (116 13± 10 45 )pg/ml (P <0 0 1) ,其作用强度与硝苯地平相近 (12 3 5 5± 18 6 2 )pg/ml。 结论 Pd Ia明显抑制缺血再灌注大鼠血清IL— 6水平 ,提示Pd

HPLC法测定白花前胡甲素在大鼠肝微粒体中的含量

目的:建立一种快速准确检测大鼠肝微粒体中白花前胡甲素(Pd-Ia)含量的方法。方法:以华蟾毒精为内标物,采用Hypersil-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以甲醇-水(75∶25)为流动相,流速1mL·min-1,检测波长321nm,柱温25℃,进样量20μL。结果:Pd-Ia浓度在1～100μg·mL-1范围内与峰面积呈现良好的线性关系(r=0.9989);日内精密度RSD≤2.9%;日间精密度RSD≤8.5%;平均加样回收率(n=9)为98.4%。结论:本文建立的方法操作简单,可用于Pd-Ia含量的测定。