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Detection and Identification of Potato Soft Rot <i>Pectobacterium carotovorum</i>Subspecies <i>carotovorum</i>by PCR Analysis of 16S rDNA in Jordan 被引量:1
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作者 Ibtihal Abu-Obeid Hamed Khlaif Nida Salem 《Agricultural Sciences》 2018年第5期546-556,共11页
Various bacterial species are known to be agents causing soft rot of potatoes. The results of this study showed that potato soft rot is widely spread in different potato planting areas in Jordan. A survey was conducte... Various bacterial species are known to be agents causing soft rot of potatoes. The results of this study showed that potato soft rot is widely spread in different potato planting areas in Jordan. A survey was conducted through the years 2013-2015 to detect potato soft rot disease in Jordan, two hundred and four rotted potato samples were collected from different potato growing areas through different potato growing seasons. One hundred and thirty one bacterial isolates were isolated, purified on selective media and identified as Pectobacterium carotovorum subspecies carotovorum (Pcc) by different biochemical and physiological tests. Furthermore, 131 Pcc Jordanian (Jo) isolates were identified by PCR analysis of total DNA extracted from isolates that were biochemically identified as Pcc using universal primer Fd1/Rd1. Cloning and sequencing of representative PCR products, amplifying the 16S rDNA region were done. Phylogenetic analysis of the Pcc Jo-isolates revealed other than 90% similarity with different reference Pcc strains available at the GenBank. Different rot causal agents also were detected by PCR amplification and further sequences. The sequencing data revealed similarities to Pseudomonas fluorescence, Enterobacteriaceae genera such as Enterobacter spp., Serratia spp. and Klebsiella spp., in addition to Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum. This study indicated that using molecular techniques such as amplification of 16S rDNA region is a sensitive and specific method for detecting Pcc as potato soft rot causal agent. So far this is the first study where Pcc has been identified by using PCR and sequencing approaches in Jordan. 展开更多
关键词 pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc) Soft Rot of POTATO PCR Sequencing DETECTION
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Jasmonic acid and ethylene signaling pathways participate in the defense response of Chinese cabbage to Pectobacterium carotovorum infection 被引量:3
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作者 CHEN Chang-long YUAN Fang +2 位作者 LI Xiao-ying MA Rong-cai XIE Hua 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2021年第5期1314-1326,共13页
Chinese cabbage(Brassica rapa subsp.pekinensis)suffers from soft rot disease caused by Pectobacterium carotovorum(Pc).To uncover the mechanisms underlying the defense response of Chinese cabbage to Pc,we constructed a... Chinese cabbage(Brassica rapa subsp.pekinensis)suffers from soft rot disease caused by Pectobacterium carotovorum(Pc).To uncover the mechanisms underlying the defense response of Chinese cabbage to Pc,we constructed a suppression subtractive hybridization(SSH)library from Pc-infected cabbage and obtained 1919 non-redundant expressed sequence tags(ESTs),which were used for cDNA microarray.We detected 800 differentially expressed genes(DEGs)in cabbage at different time points post-Pc inoculation,which were further confirmed by quantitative real-time PCR.One quarter of these DEGs were involved in the biotic stress pathways visualized by MapMan.Among them,8,8,1,3,and 2 DEGs were related to jasmonic acid(JA),ethylene(ET),JA+ET,auxin,and abscisic acid(ABA)signaling pathways,respectively,while no DEG was detected for salicylic acid(SA)signaling.Assessment of phytohormone production in the Pc-infected leaves showed that JA and ET production was increased,while SA production was decreased.Treatment with JA,methyl jasmonate(MeJA),the ET precursor 1-aminocyclopropane-1-carboxylate(ACC),or combinations thereof,reduced the disease severity,and the JA and JA+ACC treatments were superior and performed equally well.Our findings suggest that JA and ET may act synergistically against Pc infection in Chinese cabbage,and JA-mediated signaling might be the most significant. 展开更多
关键词 Brassica rapa pectobacterium carotovorum gene expression defense response hormone signaling
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一株芹菜(Apium graveolens L.)软腐病菌Pectobacterium carotovorum subsp. odoriferum的特征 被引量:8
3
作者 王茜 张宝海 +2 位作者 赵亮 马荣才 谢华 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期418-424,共7页
从北京通州地区芹菜软腐病样中分离获得的菌株QC01在实验室条件下能浸软芹菜叶柄组织,并能引起温室种植的芹菜软腐症状的产生。经病原菌表型特征分析,确定该菌株为有鞭毛的革兰氏阴性果胶杆菌Pectobacterium。QC01与参试的P.carotovorum... 从北京通州地区芹菜软腐病样中分离获得的菌株QC01在实验室条件下能浸软芹菜叶柄组织,并能引起温室种植的芹菜软腐症状的产生。经病原菌表型特征分析,确定该菌株为有鞭毛的革兰氏阴性果胶杆菌Pectobacterium。QC01与参试的P.carotovorum subsp.odoriferum(Pco)菌株T5和CC1均具备在37℃以及在含有7%Na Cl培养基中生长的能力;能分解柠檬酸盐和液化明胶;除常见碳源外,QC01还能降解α-甲基葡糖苷、麦芽糖、山梨醇、阿拉伯糖和阿拉伯半乳聚糖。基于16S rRNA基因完整序列系统发育关系表明,QC01与其他Pco菌株聚集成明显的Pco类群。QC01和CC1 type II与已报道的Pco菌株JKI 582 type II和NB 1892的16S rRNA基因完整序列相似性为100%。这是首次在中国发现Pectobacterium carotovorum subsp.odoriferum引发芹菜软腐病。 展开更多
关键词 芹菜 软腐病 软腐果胶杆菌
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Bacteriophages Isolated in China for the Control of Pectobacterium carotovorum Causing Potato Soft Rot in Kenya 被引量:4
4
作者 Peter Muturi Junping Yu +3 位作者 Alice Nyambura Maina Samuel Kariuki Frantis B.Mwaura Hongping Wei 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2019年第3期287-294,共8页
Soft rot is an economically significant disease in potato and one of the major threats to sustainable potato production.This study aimed at isolating lytic bacteriophages and evaluating methods for and the efficacy of... Soft rot is an economically significant disease in potato and one of the major threats to sustainable potato production.This study aimed at isolating lytic bacteriophages and evaluating methods for and the efficacy of applying phages to control potato soft rot caused by Pectobacterium carotovorum.Eleven bacteriophages isolated from soil and water samples collected in Wuhan,China,were used to infect P.carotovorum host strains isolated from potato tubers showing soft rot symptoms in Nakuru county,Kenya.The efficacy of the phages in controlling soft rot disease was evaluated by applying individual phage strains or a phage cocktail on potato slices and tubers at different time points before or after inoculation with a P.carotovorum strain.The phages could lyse 20 strains of P.carotovorum,but not Pseudomonas fluorescens control strains.Among the 11 phages,Pectobacterium phage Wc5r,interestingly showed cross-activity against Pectobacterium atrosepticum and two phage-resistant P.carotovorum strains.Potato slice assays showed that the phage concentration and timing of application are crucial factors for effective soft rot control.Phage cocktail applied at a concentration of 1×10^9 plaque-forming units per milliliter before or within an hour after bacterial inoculation on potato slices,resulted in>90%reduction of soft rot symptoms.This study provides a basis for the development and application of phages to reduce the impact of potato soft rot disease. 展开更多
关键词 pectobacterium carotovorum POTATO soft ROT BACTERIOPHAGES PHAGE resistance
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白菜软腐病病原菌鉴定及地衣芽孢杆菌XW02对其的抑制作用
5
作者 程凯凯 王秀艳 +2 位作者 郭周倩 邢明振 张云鸽 《河北农业科学》 2024年第4期49-53,58,共6页
软腐病是白菜的三大主要病害之一,严重影响白菜产量和品质。利用微生物防治白菜软腐病具有绿色环保且不产生耐药性的优势,是农业健康发展的必然趋势。采用组织分离法,从大田白菜软腐病病株中分离、纯化出病原菌;利用大白菜致病性试验,... 软腐病是白菜的三大主要病害之一,严重影响白菜产量和品质。利用微生物防治白菜软腐病具有绿色环保且不产生耐药性的优势,是农业健康发展的必然趋势。采用组织分离法,从大田白菜软腐病病株中分离、纯化出病原菌;利用大白菜致病性试验,对白菜软腐病的致病菌株进行筛选;利用分子生物学方法对致病菌株的16S rDNA扩增并测序,通过BLAST和GenBank比对,采用邻接法构建系统发育树确定其分类地位。结果显示,白菜软腐病的致病菌株为H3,属于胡萝卜软腐果胶杆菌(Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum)。通过双层培养法从10株地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)中筛选出对H3菌株抑制效果最好的菌株XW02,抑菌圈直径达到49.33 mm。对XW02菌株进行抑菌谱试验和盆栽防效试验,抑菌谱试验结果显示,XW02菌株对黄瓜角斑病菌、辣椒疮痂病菌、大白菜黑腐病菌和柑橘溃疡病菌均有一定的抑制作用,其中对黄瓜角斑病菌的抑菌作用最大,对辣椒疮痂病菌的抑菌作用最小;盆栽防效试验结果显示,XW02菌株对白菜软腐病具有很好的防治效果,防效为60.20%,较对照药剂春雷霉素的防效高6.12百分点。地衣芽孢杆菌XW02具有很好的生防潜力,为白菜软腐病的生物防治提供了新资源。 展开更多
关键词 白菜软腐病 胡萝卜软腐果胶杆菌 地衣芽孢杆菌 抑菌率
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高压脉冲电场对果胶杆菌的杀菌效果及其致死动力学研究 被引量:3
6
作者 张元元 赵欢欢 +3 位作者 李国锋 郝浩然 张映曈 李鹏霞 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第1期162-171,共10页
为明确高压脉冲电场(High plused electric fields,HPEF)对果胶杆菌的最优杀菌参数并对其潜在机制进行初步探索,本研究首先通过测定高压脉冲电场不同处理条件下果胶杆菌的存活率,明确影响杀菌效果的主要因素;然后研究不同电场强度和脉... 为明确高压脉冲电场(High plused electric fields,HPEF)对果胶杆菌的最优杀菌参数并对其潜在机制进行初步探索,本研究首先通过测定高压脉冲电场不同处理条件下果胶杆菌的存活率,明确影响杀菌效果的主要因素;然后研究不同电场强度和脉冲占空比对果胶杆菌生长曲线、细胞膜脂肪酸含量变化、细胞膜渗透率以及核酸和蛋白质泄漏量的影响,以及果胶杆菌在不同生长期对高压脉冲电场敏感度的差异。结果表明:电场强度和脉冲占空比是影响高压脉冲电场杀灭果胶杆菌的主要因素。当电场强度为28 kV/cm,脉冲占空比为36.5%时,抑菌作用最强,果胶杆菌活菌对数减少值达1.60;在高压脉冲电场作用下,果胶杆菌延滞期延长,生长受到抑制,同时细胞膜结构被破坏,渗透性增大,胞内核酸和蛋白质发生严重泄漏。此外,不同生长期的果胶杆菌对高压脉冲电场敏感度不同,其中对数生长期最为敏感。最后,建立了果胶杆菌活菌对数减少值lnS与电场强度和脉冲占空比的动力学方程(y=-0.1067x+0.1166和y=-0.0895x+0.3249)。该方程符合一级动力学模型,较好地反映了高压脉冲电场处理后果胶杆菌生长的关系,为选择合适的处理条件提供了理论依据。本研究确定了高压脉冲电场杀灭果胶杆菌的最佳参数,为进一步实现高压脉冲电场杀菌保鲜在采后和鲜切行业的产业化应用奠定了基础。 展开更多
关键词 高压脉冲电场 电场强度 脉冲占空比 果胶杆菌
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两种半夏根部致病菌的比较研究 被引量:1
7
作者 韩静 黄铭蕾 +4 位作者 钱旭 金磊磊 舒福兴 贾启 陈集双 《生物加工过程》 CAS 2023年第2期220-228,共9页
2018年春夏,贵州省遵义市发生三叶半夏(Pinellia ternata)根部病害,叶柄以上部位倒伏,且连片快速发生。为明确其病原菌,对自然发病的半夏病株进行了病原菌的分离,并对获得的主要病原菌进行形态学观察、16S rDNA序列鉴定和致病性测定。... 2018年春夏,贵州省遵义市发生三叶半夏(Pinellia ternata)根部病害,叶柄以上部位倒伏,且连片快速发生。为明确其病原菌,对自然发病的半夏病株进行了病原菌的分离,并对获得的主要病原菌进行形态学观察、16S rDNA序列鉴定和致病性测定。结果表明,当地发生的半夏病害主要由2种病原菌引起:(1)胡萝卜果胶杆菌(Pectobacterium carotovorum)引起半夏叶柄以上部位水渍状快速软烂倒伏,伴随发臭;(2)铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)引起半夏叶柄基部折断,植株干枯黄化,连片倒伏,但单株发病进程相对较慢。这是首次有关铜绿假单胞菌引起半夏根部病害的报道,建议将其引起的病害称之为“半夏黄化猝倒病”。在人工接种条件下,铜绿假单胞菌YD-01寄主范围较窄,但能侵染番茄果实;而胡萝卜果胶杆菌RD-02可以侵染莴苣、青椒、茄子、土豆、番茄和梨等果实,并产生明显软腐症状。利用BioF型间歇浸没植物生物反应器建立植物-微生物共培养模型,结合盆栽试验分析2种病原菌导致的病情指数和病程指标变化,进一步确定了其差异。本研究结果为半夏根部病害防控提供了新的直接依据。 展开更多
关键词 半夏病害 胡萝卜果胶杆菌 铜绿假单胞菌 软腐病 黄化猝倒病
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广东炭步芋头软腐病病原菌的分离鉴定与生物防治 被引量:1
8
作者 罗燕羽 黄绍力 +3 位作者 刘绍钦 魏利国 刘伟光 张木清 《热带农业科学》 2023年第10期58-65,共8页
为明确为害广东炭步槟榔香芋软腐病的病原菌种类,研究配套生物防治技术,为其防治提供参考。采用组织研磨法进行病原菌分离,基于科赫氏法则进行致病性测定,根据形态学观察、16S rDNA序列与系统进化树分析及生物学特性测定明确致病菌种类... 为明确为害广东炭步槟榔香芋软腐病的病原菌种类,研究配套生物防治技术,为其防治提供参考。采用组织研磨法进行病原菌分离,基于科赫氏法则进行致病性测定,根据形态学观察、16S rDNA序列与系统进化树分析及生物学特性测定明确致病菌种类,并将芋脱毒种苗与微生物菌剂及生物炭相结合进行芋软腐病的防治研究。结果表明,经组织研磨法分离到3株分离物,柯赫氏法则验证和菌落形态特征、16S rDNA序列与系统进化树的分析结果表明,菌株T2202为广东炭步芋头软腐病致病菌,属胡萝卜软腐果胶杆菌;菌株S1905和S1910属假单胞菌,可导致芋头内部空洞、干燥发黑。胡萝卜软腐果胶杆菌菌株T2202最佳生长的pH皆为7.0,可在5.0%的NaCl培养液和37℃下生长,氧化酶反应和吲哚反应呈阳性,明胶液化呈阴性,可发酵葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、甘露醇、乳糖产酸,可产H2S。使用脱毒种苗进行栽培,在栽培基质中适量添加生物炭,并在定植前就开始施用微生物菌剂,定植后再定期施用,对芋软腐病可以起到很好的防治作用。 展开更多
关键词 槟榔芋 软腐病 胡萝卜软腐果胶杆菌 假单胞菌
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Identification of the Pathogen of Wufeng Maryland Tobacco Hollow Stalk
9
作者 Zhang Shuguang Zhang Min +2 位作者 Sun Hongxu Liu Shenggao Wen Guanghong 《Plant Diseases and Pests》 CAS 2014年第1期21-22,共2页
The morphological characteristics, pathogenicity and biological characteristics of the pathogen isolated from Maryland tobacco in Wufeng County of Hubei Province were studied in the laboratory. After cultivation on LB... The morphological characteristics, pathogenicity and biological characteristics of the pathogen isolated from Maryland tobacco in Wufeng County of Hubei Province were studied in the laboratory. After cultivation on LB medium at 28℃ for48 h, the colonies were light yellow, circular or amorphous, translucent, with smooth and slightly concaved surface and neat edge. Observation under electron microscope showed that the isolates was red-shaped, decapsulated and gram-nega- tive in the size of (0.5 - 1.0) μm × (2.2 -3.0) μm, with 2 -8 flagella. After cultivation on CVP medium at 28 ℃ for 48 h, the colonies were sunken like a cup. The pathogen was able to grow in 5% NaCl medium at 37 ℃, and produced acid through glucose fermentation; it was facuhative anaerobic, and could use citrates, but could not produce indole. It was preliminarily confirmed that the pathogen causing Wufeng Maryland tobacco hollow stalk was Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum. 展开更多
关键词 Wufeng Maryland tobacco TOBACCO Hollow stalk Identification of pathogen pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum
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广东冬种马铃薯软腐病发生与病原菌鉴定 被引量:2
10
作者 黄宁 沈会芳 +4 位作者 张景欣 蒲小明 林壁润 王忠文 曾东强 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第20期58-59,F0002,共3页
马铃薯软腐病是影响马铃薯生产安全的重要病害之一,分析广东省马铃薯细菌性软腐病的发生及其症状,通过分离病原菌,采用生物化学和分子生物学的方法对该致病菌进行鉴定,确定该致病菌为肠杆菌科的Pectobacterium carotovorum subsp.Caroto... 马铃薯软腐病是影响马铃薯生产安全的重要病害之一,分析广东省马铃薯细菌性软腐病的发生及其症状,通过分离病原菌,采用生物化学和分子生物学的方法对该致病菌进行鉴定,确定该致病菌为肠杆菌科的Pectobacterium carotovorum subsp.Carotovorum。 展开更多
关键词 马铃薯 软腐病 pectobacterium carotovorum subsp carotovorum
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滇重楼茎秆软腐病病原鉴定 被引量:7
11
作者 马维思 杨斌 +5 位作者 严世武 王馨 董志渊 李林玉 张新华 杨丽英 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第7期1582-1587,共6页
【目的】明确滇重楼茎秆软腐病的病原,以期为该病的防治提供依据。【方法】通过田间调查采样,初步掌握滇重楼茎秆软腐病的发生规律,通过稀释分离、柯赫氏法则验证获得病原菌,基于形态特征和16S r DNA、gyr B、rpo B基因序列特征对病原... 【目的】明确滇重楼茎秆软腐病的病原,以期为该病的防治提供依据。【方法】通过田间调查采样,初步掌握滇重楼茎秆软腐病的发生规律,通过稀释分离、柯赫氏法则验证获得病原菌,基于形态特征和16S r DNA、gyr B、rpo B基因序列特征对病原菌进行鉴定。【结果】从发病植株上分离出1株细菌,经柯赫氏法则验证为滇重楼茎秆软腐病病原菌,基于形态和分子生物学特征将其鉴定为胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum。【结论】胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种P.carotovorum subsp.carotovorum是滇重楼茎秆软腐病的病原菌。 展开更多
关键词 滇重楼 茎秆软腐病 病原鉴定 胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种
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ClO2对马铃薯块茎软腐病菌的控制效果及作用机理 被引量:3
12
作者 田世龙 李梅 +4 位作者 程建新 李守强 葛霞 田甲春 张辉元 《保鲜与加工》 CAS 北大核心 2020年第3期1-6,共6页
以马铃薯块茎软腐病原菌Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum(Pcc)为研究对象,探究离体条件下二氧化氯(ClO2)对其控制效果及作用机理,采用扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)对其进行室内生物测定,观察菌体形态和菌体超微结构,并... 以马铃薯块茎软腐病原菌Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum(Pcc)为研究对象,探究离体条件下二氧化氯(ClO2)对其控制效果及作用机理,采用扫描电镜(SEM)和透射电镜(TEM)对其进行室内生物测定,观察菌体形态和菌体超微结构,并通过马铃薯体内接种Pcc对马铃薯块茎软腐病进行防治效果评价。结果表明,离体条件下,Pcc对ClO2具有较好的敏感性,其毒力回归式为y=4.4868+7.6827x,EC50和EC90分别为0.2524μg·mL^-1和0.4872μg·mL^-1,ClO2处理对马铃薯软腐病原菌Pcc的生长具有显著的抑制作用,且抑制效果存在浓度效应,0.52μg·mL^-1 ClO2对Pcc的相对抑制率最高;扫描和透射电镜观察发现,ClO2处理后Pcc菌体形态发生异常,个别菌体胞壁皱褶、破裂,内容物渗出,细胞壁与细胞膜出现分离,且鞭毛消失,生长受到抑制。体内试验表明,ClO2处理可显著降低马铃薯薯块的发病率和病斑扩展速度,其中以低温条件下80μg·kg^-1效果最佳。综上所述,ClO2对Pcc具有良好的抑菌特性,该研究可为ClO2在马铃薯采后病害防治中的安全高效应用提供科学的理论依据。 展开更多
关键词 马铃薯块茎 软腐病 二氧化氯 P.carotovorum subsp.carotovorum 控制效果 作用机理
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胡萝卜软腐果胶杆菌clpP基因的功能研究 被引量:1
13
作者 李婷 蒋欢 +4 位作者 杨钟灵 邓亚岷 杜硕 刘凤权 范加勤 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期58-64,共7页
为探索clpP基因对胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum,P.c.c)生物学特性及致病性等方面的影响,采用同源重组法构建clpP基因缺失突变体ΔclpP和互补菌株ΔclpP(clpP),测定突变体及互补菌株的运... 为探索clpP基因对胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum,P.c.c)生物学特性及致病性等方面的影响,采用同源重组法构建clpP基因缺失突变体ΔclpP和互补菌株ΔclpP(clpP),测定突变体及互补菌株的运动性、生物膜、抗氧化压力,以及在不同培养基和不同温度下的生长能力、部分致病因子活性及致病性等表型,并采用RT-PCR分析了果胶酸裂解酶(Pel)、纤维素酶(Cel)、蛋白酶(Prt)和坏死诱导蛋白(necrosis-inducing protein,Nip)等相关致病因子的编码基因转录水平变化。结果表明:ΔclpP的运动性无变化,生物膜形成、高温和营养饥渴耐受力及抗氧化压力等均下降;果胶酶、纤维素酶与蛋白酶活性有不同程度降低,酶活性检测平板上水解圈的直径分别比野生株下降19.35%、34.38%和35.00%;ΔclpP的致病性显著下降,离体接种‘黄花马蹄莲’叶片和大白菜叶柄,病斑面积分别比野生株的减小99.00%和99.60%;在4个毒力因子中,qRT-PCR显示:ΔclpP果胶酸裂解酶与纤维素酶mRNA相对表达量为野生菌株的40.00%左右。由此可见,clpP基因对胡萝卜软腐果胶杆菌的生长和致病性具有多方面的决定作用。 展开更多
关键词 胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种 CLPP 生物学特性 致病性
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与黄花马蹄莲互作过程中胡萝卜软腐果胶杆菌的差异表达蛋白分析 被引量:3
14
作者 杨钟灵 钱国良 +3 位作者 蒋欢 胡白石 刘凤权 范加勤 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期63-66,共4页
通过病原菌胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种与黄花马蹄莲组织的离体互作,运用双向电泳技术、质谱技术及Im-ageMaster 2D platinum 5.0(GE)软件对互作过程中蛋白质差异表达进行分析。结果表明:70个蛋白点在互作中存在表达差异,占蛋白点总数... 通过病原菌胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种与黄花马蹄莲组织的离体互作,运用双向电泳技术、质谱技术及Im-ageMaster 2D platinum 5.0(GE)软件对互作过程中蛋白质差异表达进行分析。结果表明:70个蛋白点在互作中存在表达差异,占蛋白点总数的18.13%。通过质谱分析发现:2个特异表达蛋白分子伴侣DnaK和1-脱氧木酮糖-5-磷酸合酶(DXS)均为代谢类蛋白;3个显著上调表达蛋白中ATP合酶α亚基和半胱氨酸合酶为代谢类蛋白,而β-内酰胺酶为抗生素类蛋白。 展开更多
关键词 胡萝卜软腐果胶杆菌 黄花马蹄莲 离体互作 蛋白质组分析
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白花马蹄莲诱导胡萝卜软腐果胶杆菌ubiG基因的克隆与功能分析 被引量:2
15
作者 刘怀阿 苏建坤 +3 位作者 刘琴 李婷 杨钟灵 蒋欢 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第6期1304-1312,共9页
利用含有无启动子的Km抗性基因的转座子mariner对胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterterium carotovorum subsp.carotovorum,Pcc)菌株PccS1进行转座诱变,建立突变体文库,以白花马蹄莲组织提取液为诱导物,诱导突变菌株,鉴定突变... 利用含有无启动子的Km抗性基因的转座子mariner对胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterterium carotovorum subsp.carotovorum,Pcc)菌株PccS1进行转座诱变,建立突变体文库,以白花马蹄莲组织提取液为诱导物,诱导突变菌株,鉴定突变、并验证。筛选获得1株受白花马蹄莲组织提取液诱导的突变株PM5,经亚克隆鉴定,转座子插入位点为辅酶Q氧甲基转移合成酶ubiG基因(Ubiquinone biosynthesis O-methyltransferase)。利用同源重组获得该基因的缺失突变体△ubiG。与野生型相比,△ubiG对不同寄主的致病性均减弱(黄花马蹄莲和白花马蹄莲上的病斑面积减半,大白菜的病斑面积仅为1/5);突变菌株菌体沉降速率明显加快,生物膜产量降低约50%,无胞外蛋白酶产生。此外,△ubiG对链霉素和新霉素抗性分别比野生型增强了2.0倍和26.5倍,突变菌株的相关功能经互补可以部分恢复。以上结果说明,ubiG基因可被白花马蹄莲诱导并参与胡萝卜软腐杆菌的致病作用。 展开更多
关键词 胡萝卜软腐果胶杆菌 mariner转座子 诱导表达 基因敲除 功能分析
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半夏块茎腐烂病原细菌拮抗菌的分离与鉴定 被引量:2
16
作者 张洁 胡琨敏 +3 位作者 李玉权 任建国 任春丽 刘红美 《贵州农业科学》 CAS 2015年第9期150-152,156,共4页
为促进贵州半夏发展绿色种植,采用平板稀释法和平板对峙培养法从贵州省不同地区采集的土壤样品中筛选对半夏块茎腐烂病病原菌具有较强拮抗效果的生防菌株,结合形态学观察、生理生化检测和16SrRNA序列分析对其进行鉴定。结果表明:采集土... 为促进贵州半夏发展绿色种植,采用平板稀释法和平板对峙培养法从贵州省不同地区采集的土壤样品中筛选对半夏块茎腐烂病病原菌具有较强拮抗效果的生防菌株,结合形态学观察、生理生化检测和16SrRNA序列分析对其进行鉴定。结果表明:采集土样中共分离得到270株细菌,从中筛选到1株有较强拮抗活性的细菌HM9-1,其对块茎腐烂病病原菌胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜软腐亚种的抑菌圈直径达2.4cm。经鉴定,该菌株为巨大芽孢杆菌。 展开更多
关键词 半夏 胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜软腐亚种 拮抗细菌 巨大芽孢杆菌
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福鼎槟榔芋软腐病病原菌的分离和鉴定 被引量:5
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作者 董晓菲 林镇金 +3 位作者 刘盛荣 吴小蝶 季红 叶祖云 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2022年第2期171-176,共6页
从福建省福鼎市田间患软腐病的槟榔芋球茎分离到菌株141108,经Koch′s法则验证及形态观察和分子测序对其进行鉴定,并测定了其药物敏感性和生物学特性.结果发现:菌株141108为福鼎槟榔芋软腐病的病原菌,其与胡萝卜软腐果胶杆菌(Pectobacte... 从福建省福鼎市田间患软腐病的槟榔芋球茎分离到菌株141108,经Koch′s法则验证及形态观察和分子测序对其进行鉴定,并测定了其药物敏感性和生物学特性.结果发现:菌株141108为福鼎槟榔芋软腐病的病原菌,其与胡萝卜软腐果胶杆菌(Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum)相似度达99%;菌落为圆形、光滑湿润、乳白色、有臭味,革兰氏阴性杆状,有鞭毛,兼性好氧.该菌对四环素、氯霉素等10种抗生素高度敏感.在pH为5.0~10.0时均能生长,最适pH为7.0;在温度为4~45℃时均能生长,最适温度为28℃. 展开更多
关键词 槟榔芋 软腐病 胡萝卜软腐果胶杆菌 生物学特性
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西葫芦细菌性茎基软腐病病原的分离与鉴定 被引量:3
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作者 董海龙 王建明 《山西农业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第5期11-15,共5页
[目的]为分离鉴定山西温室蔬菜西葫芦根茎部软腐病害。[方法]对分离物进行致病性测定、形态学观察、生理生化特性测定及16SrDNA系列分析。[结果]结果表明,40个菌株经人工接种后,CY39导致西葫芦茎基部软腐,经柯赫氏法则验证为致病病原。... [目的]为分离鉴定山西温室蔬菜西葫芦根茎部软腐病害。[方法]对分离物进行致病性测定、形态学观察、生理生化特性测定及16SrDNA系列分析。[结果]结果表明,40个菌株经人工接种后,CY39导致西葫芦茎基部软腐,经柯赫氏法则验证为致病病原。在电镜下菌体呈短杆状,两端钝圆,具鞭毛,革兰氏阴性。CY39菌株通过测序和序列比对分析,其与胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜软腐亚种(Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum)AB680280报告的序列相似度为100%。[结论]西葫芦茎基软腐病原菌应归属于胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜软腐亚种。 展开更多
关键词 西葫芦 茎基软腐病 胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种
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上海地区黄瓜茎基腐病的病原鉴定 被引量:3
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作者 曾蓉 高萍 +4 位作者 丁国强 宋志伟 高士刚 徐丽慧 戴富明 《上海农业学报》 2021年第3期42-46,共5页
2020年5月,在上海市浦东新区和青浦区设施栽培黄瓜上发现一种能导致黄瓜茎基部腐烂并伴有茎秆流胶、最终整株死亡症状的病害。经病菌分离、致病性测定及分子生物学鉴定表明:病原菌分离物在NA培养基上菌落呈圆形,灰白色,有很浓烈的臭味,... 2020年5月,在上海市浦东新区和青浦区设施栽培黄瓜上发现一种能导致黄瓜茎基部腐烂并伴有茎秆流胶、最终整株死亡症状的病害。经病菌分离、致病性测定及分子生物学鉴定表明:病原菌分离物在NA培养基上菌落呈圆形,灰白色,有很浓烈的臭味,无荧光反应,革兰氏染色呈阴性;经BLASTn比对,其16S rRNA序列和RNA聚合酶β基因(rpoB)序列与胡萝卜软腐果胶杆菌巴西亚种的相似性分别为99.86%和97.14%;基于16S rRNA序列构建系统发育进化树,发现其在系统发育树上与胡萝卜软腐果胶杆菌巴西亚种的类群聚在一族;又经特异性引物鉴定,确定该分离物为胡萝卜软腐果胶杆菌巴西亚种(Pectobacterium carotovorum subsp.brasiliense)。 展开更多
关键词 黄瓜 细菌性病害 病原鉴定 胡萝卜软腐果胶杆菌
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胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种mreB基因的功能分析 被引量:2
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作者 邓亚岷 杜硕 +3 位作者 王欢 杨钟灵 刘凤权 范加勤 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期45-52,共8页
为了阐明细菌杆状决定蛋白mreB基因对胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum,Pcc)生物学特性及致病性的影响,采用同源重组的方法成功构建了该基因的缺失突变株、互补菌株及过表达菌株,并进行了相... 为了阐明细菌杆状决定蛋白mreB基因对胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum,Pcc)生物学特性及致病性的影响,采用同源重组的方法成功构建了该基因的缺失突变株、互补菌株及过表达菌株,并进行了相关表型测定。结果表明:与野生型菌株PccS1相比,缺失突变株ΔmreB菌体形态由杆状变为球形;对黄花马蹄莲和大白菜的致病性显著下降;生长能力也受到一定限制;尽管分泌胞外纤维素酶的能力、抗氧化压力和菌体沉降速率无明显变化,但蛋白酶活性、果胶酶活性、生物膜形成能力、游动性及产生碳青霉烯抗生素的能力均有不同程度的下降。互补菌株的表型得到了部分或全部恢复。qRT-PCR结果也显示:ΔmreB中几种相关致病因子的相对表达量均下调。表明:mreB与胡萝卜软腐果胶杆菌的菌体形态、生长能力和致病能力密切相关。这是首次报道mreB与植物病原菌的致病性相关。 展开更多
关键词 胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种 mreB基因 细胞形态 致病性
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