微RNA-133b通过靶向转胶蛋白-2调控非小细胞肺癌增殖及侵袭转移能力的机制研究

目的探究微RNA-133b(microRNA-133b,miR-133b)通过靶向转胶蛋白-2(transgelin-2,TAGLN2)调控非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)增殖及侵袭转移能力的机制。方法收集2021年1月至2022年12月于新疆医科大学附属肿瘤医院经手术切除的86例NSCLC患者的肿瘤样本与对应癌旁组织。对筛选的A549和NCI-H460细胞进行多组慢病毒转染实验,以研究不同基因表达[阴性对照组(转染miRNA阴性对照模拟物)、miR-133b模拟物组(转染miR-133b模拟物)、Scrambled组(转染miRNA阴性对照模拟物+pcDNA3.1空质粒)、沉默TAGLN2组(转染TAGLN2短发夹RNA)、TAGLN2组(转染TAGLN2)、miR-133b模拟物+TAGLN2组(转染miR-133b模拟物+TAGLN2)]对细胞的影响。采用实时定量反转录聚合酶链反应检测组织、细胞系miR-133b、TAGLN2表达水平,采用免疫组织化学检测组织TAGLN2表达水平,分析miR-133b表达水平与临床病理特征的关系。利用Starbase数据库进行预测,分析miR-133b与TAGLN2之间潜在的结合位点,验证miR-133b与TAGLN2的靶向作用关系。通过细胞计数(cell counting kit-8,CCK-8)试剂盒、克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验观察miR-133b、TAGLN2对A549、NCI-H460细胞增殖、迁移、侵袭的影响。蛋白质印记法检测TAGLN2和上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)相关信号通路蛋白表达。结果miR-133b在NSCLC中呈低表达(P<0.05),TAGLN2呈高表达(P<0.05)。miR-133b表达与TAGLN2水平负相关(r=-0.2195,P=0.0423),靶向调控TAGLN2表达。与阴性对照组相比,miR-133b模拟物组A549和NCI-H460细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力均显著降低(均P<0.05)。与Scramble组相比,沉默TAGLN2组A549和NCI-H460细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力、TAGLN2、磷酸化胰岛素样生长因子1受体(phospho-insulin-like growth factor 1 receptor,p-IGF1R)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(phospho-phosphoinositide 3-kinase,p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(phospho-protein kinase B,p-AKT)、锌指转录因子Snail 1表达水平均显著下降(均P<0.05),E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平均显著升高(均P<0.05);TAGLN2组A549和NCI-H460细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力、TAGLN2、p-IGF1R、p-PI3K、p-AKT、Snail 1表达水平均显著升高(均P<0.05),E-cadherin表达水平均显著降低(均P<0.05);与TAGLN2组相比,miR-133b模拟物+TAGLN2组A549和NCI-H460细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力、TAGLN2、p-IGF1R、p-PI3K、p-AKT、Snail 1表达水平均显著降低(均P<0.05),E-cadherin表达水平均显著升高(P<0.05)。结论miR-133b通过靶向TAGLN2调控IGF1R/PI3K/AKT信号通路相关分子表达影响EMT过程,进而影响NSCLC增殖、侵袭及转移能力。

双参通脉颗粒抑制ERK1/2-NF-κB信号通路改善急性心肌梗死模型大鼠心肌损伤作用机制研究

目的探讨双参通脉颗粒(GSG)是否通过抑制细胞外活化蛋白激酶1/2-核因子-κB(ERK1/2-NF-κB)信号通路改善急性心肌梗死(AMI)模型大鼠的心肌损伤。方法将60只SD大鼠分为假手术组(A组,等量生理盐水),模型组(B组,等量生理盐水),阿托伐他汀组(C组,8 mg/kg),GSG低、中、高剂量组(D1组、D2组、D3组,5,10,15 g/kg),各10只。除A组外,其余各组大鼠通过左冠状动脉前降支结扎建造AMI模型,造模成功后24 h灌胃相应药物。检测各组大鼠的心功能;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清炎性因子,按试剂盒操作检测生化指标;分别采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法、苏木精-伊红(HE)染色法、原位末端标记(TUNEL)法检测心肌梗死、病理损伤及细胞凋亡情况;采用免疫印迹(Western blot)法检测细胞凋亡与通路相关蛋白表达情况。结果与B组比较,D1组、D2组、D3组大鼠左心室收缩压(LVSP)、平均动脉压(MAP)、左心室内压上升最大速率(+dp/dt_(max))、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表达水平均显著升高(P<0.05),左心室内压下降最大速率(-dp/dt_(max))、左心室舒张末压(LVEDP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌梗死程度、心肌细胞凋亡率、胱天蛋白酶-3(caspase-3)、B淋巴细胞瘤2相关X蛋白(Bax)、p-ERK1、p-ERK2、NF-κB p65表达水平均显著降低(P<0.05)。结论GSG可能通过抑制ERK1/2-NF-κB信号通路改善AMI模型大鼠的心肌损伤。

Ropeginterferonα-2b治疗骨髓增殖性肿瘤的研究进展

Ropeginterferonα-2b是新上市的一种长效聚乙二醇脯氨酸α干扰素,是第一种专门批准用于治疗真性红细胞增多症的干扰素,临床试验和经验发现其可以诱导骨髓增殖性肿瘤患者血液学缓解,控制疾病相关症状,降低JAK2V617F基因突变负荷。与聚乙二醇干扰素α和羟基脲相比,其药物不良反应发生率和严重程度较低,且给药间隔时间更长,部分低危真性红细胞增多症和骨髓纤维化患者也能从中获益。本文就Ropeginterferonα-2b在骨髓增殖性肿瘤中的最新研究进展作一综述。

绒毛组织Bcl-2、Bax、LC3、P62与稽留流产患者解脲支原体感染的关系

目的研究绒毛组织B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、P62对稽留流产患者解脲支原体感染的预测价值。方法本研究为队列研究。选取2022年1月至2023年6月榆林市第一医院收治的稽留流产患者156例作为稽留流产组,并选取同期在本院进行人工流产的患者170例作为人工流产组。人工流产组年龄、孕次、产次、既往流产次数、妊娠时间分别为(28.61±5.30)岁、(1.54±0.48)次、(0.97±0.24)次、(0.87±0.25)次、(53.72±4.49)d,稽留流产组分别为(29.18±5.57)岁、(1.49±0.43)次、(0.95±0.26)次、(0.91±0.32)次、(54.55±4.20)d。比较两组解脲支原体感染率及绒毛组织Bcl-2、Bax、LC3、P62表达情况。稽留流产患者根据是否发生解脲支原体感染再分为阴性组(96例)、阳性组(60例),比较两组绒毛组织Bcl-2、Bax、LC3、P62表达情况,采用受试者操作特征曲线(ROC)分析绒毛组织Bcl-2、Bax、LC3、P62表达对稽留流产患者解脲支原体感染的预测价值。采用独立样本t检验、χ^(2)检验进行统计学分析。结果稽留流产组解脲支原体阳性率高于人工流产组[38.46%(60/156)比12.94%(22/170)](P<0.05)。稽留流产组绒毛组织Bcl-2、P62表达水平低于人工流产组,Bax、LC3表达水平高于人工流产组(均P<0.05)。阳性组绒毛组织Bcl-2、P62表达水平低于阴性组,Bax、LC3表达水平高于阴性组(均P<0.05)。绒毛组织Bcl-2、Bax、LC3、P62联合预测稽留流产患者解脲支原体感染的曲线下面积(AUC)为0.852,高于四者单独检测(均P<0.05)。结论与人工流产患者相比,稽留流产患者解脲支原体感染发生率较高,且两组绒毛组织Bcl-2、Bax、LC3、P62表达存在明显差异。解脲支原体感染可引起绒毛组织Bcl-2、Bax、LC3、P62表达差异,且四者联合提高对稽留流产患者解脲支原体感染的预测价值。

低水平慢性乙型肝炎患者应用恩替卡韦与聚乙二醇干扰素α-2b联合治疗的效果研究

目的评估恩替卡韦与聚乙二醇干扰素α-2b联合应用于治疗慢性乙型肝炎病毒(HBV)载量较低患者的治疗效果。方法选取2021年4月至2022年12月在茂名市人民医院感染科门诊就诊的124例低水平乙型肝炎患者,根据治疗方法分为两组,对照组(83例)接受恩替卡韦治疗,干预组(41例)采用恩替卡韦联合皮下注射聚乙二醇干扰素α-2b的方法进行治疗。比较两组干预后的血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、HBsAg、HBeAg水平以及甲胎蛋白(AFP)含量。同时,比较HBV-DNA载量低于15 U/ml、HBeAg血清学转换以及ALT水平恢复正常患者在两组中的分布差异。结果治疗后,两组ALT、HBeAb、HBeAb、AFP和HBV-DNA<15 U/ml的例数比较无差异(P>0.05);干预组HbsAg和HbeAg水平均低于对照组(P<0.05);干预组HbsAb、HBeAg血清学转换率和ALT复常率均高于对照组(P<0.05)。治疗后,干预组HBsAg水平中位数为19.07 kU/L,低于治疗前的91.85 kU/L(P<0.05);干预组HBsAb水平中位数为0.98 kU/L,高于治疗前的0.37 kU/L(P<0.05)。但ALT、HBeAg、HBeAb、AFP及HBV-DNA低于15 U/ml的例数在联合治疗前后比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论恩替卡韦联合聚乙二醇干扰素α-2b治疗可降低低水平慢性乙型肝炎患者HbsAg和HbeAg水平,相较于单独使用恩替卡韦治疗效果更优。

基于PERK-eIF2α-NF-κB信号通路研究苁蓉散治疗阿尔茨海默病的作用机制

目的基于PERK-eIF2α-NF-κB信号通路研究苁蓉散治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的作用机制。方法将60只SD大鼠分为正常组,模型组、苁蓉散组(4.62、9.24、18.48 g·kg-1)和安理申组,每组10只。除正常组外其余大鼠组予双侧海马注射Aβ1-42建立AD模型。灌胃结束后进行水迷宫行为学检测学习记忆能力;尼氏染色观察神经元及尼氏小体变化;免疫荧光检测NF-κB核转移情况;透射电镜观察大鼠海马区内质网形态;酶免疫测定Aβ1-42及炎症因子含量;Western blot检测PERK、eIF2α、NF-κB的蛋白表达水平。结果水迷宫结果显示,苁蓉散能提高AD大鼠的逃避潜伏期时间、增加穿越求生平台次数、延长目标象限停留时间(P<0.05或P<0.01);尼氏染色结果显示,苁蓉散各剂量组神经元细胞排列较整齐,胞核存在,尼氏小体较为丰富;免疫荧光表明,苁蓉散可降低AD大鼠脑内NF-κB入核表达(P<0.05或P<0.01);透射电镜结果显示,苁蓉散各剂量组内质网形态整齐、未见明显扩张,结构正常;ELISA结果表明,苁蓉散可降低AD海马中的Aβ1-42,IL-1,TNF-α的含量;Western blot结果显示,苁蓉散各剂量组p-PERK/PERK,p-eIF2α/eIF2α,p-NF-κB p65/NF-κB p65的蛋白比值明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论苁蓉散可通过抑制PERK-eIF2α-NF-κB信号通路的活化,缓解神经元细胞ERS状态下免疫炎症反应,以改善AD大鼠的认知功能。

5-HT通过5-HT2BR促进巨核细胞生长和抗巨核细胞凋亡

目的:探讨5-羟色胺(5-HT)对巨核细胞Meg-01增殖、凋亡以及巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)的影响及其可能的机制。方法:反相高效液相色谱-电化学检测法检测Meg-01细胞对5-HT的摄取和5-HT在Meg-01细胞中的代谢。免疫荧光染色检测骨髓巨核细胞5-羟色胺2B型受体(5-HT2BR)的表达。将5-HT和/或5-HT2BR抑制剂Ketanserin加入到Meg-01细胞中培养48 h,应用MTT检测法和台盼蓝染色法检测细胞的增殖及细胞活率。Meg-01细胞中加入5-HT和/或Ketanserin孵育72 h,应用流式细胞术检测细胞的早期凋亡情况和凋亡蛋白酶caspase-3的活性。采用CFU-MK培养探究5-HT对巨核细胞分化的影响。结果:Meg-01细胞可以摄取5-HT,并将摄取的5-HT分解成5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA)。免疫荧光染色表明骨髓巨核细胞表面有5-HT2BR的表达。5-HT对Meg-01细胞的增殖有促进作用,呈剂量依赖性(r=0.82),5-HT浓度为200 nmol/L时,对Meg-01细胞的促增殖作用最明显(P<0.001)。台盼蓝染色结果也提示200 nmol/L的5-HT对Meg-01细胞的存活率影响最明显(P<0.05)。在5-HT单独存在时,可明显促进Meg-01细胞的增殖(P<0.001),加入Ketanserin后,此作用减弱。5-HT可以明显降低Meg-01细胞的早期凋亡率(P<0.001)和caspase-3的活性(P<0.05),加入Ketanserin之后,Meg-01细胞的早期凋亡率明显增加(P<0.001),caspase-3的活性也有所增加。CFU-MK形成结果表明,5-HT可促进骨髓细胞CFU-MK的形成,且呈剂量依赖性(r=0.89);而在5-HT的基础上加入Ketanserin,5-HT对CFU-MK形成的促进作用减弱(P<0.01)。结论:巨核细胞内有可能存在代谢分解5-HT的单胺氧化酶,将5-HT分解为5-HIAA。5-HT有可能通过5-HT2BR促进巨核细胞的的增殖和分化。此外,在5-HT作用下还可以降低巨核细胞的凋亡,其抗凋亡作用可能是通过5-HT2BR和caspase-3通路介导的。

恩替卡韦联合聚乙二醇干扰素α-2b治疗乙型肝炎肝硬化的效果及安全性观察

目的探讨恩替卡韦联合聚乙二醇干扰素α-2b治疗乙型肝炎肝硬化的效果,并分析其安全性。方法选取2019年1月至2023年10月贵阳市公共卫生救治中心收治的80例乙型肝炎肝硬化患者,按照随机数字表法分为对照组和观察组,各40例。给予对照组患者恩替卡韦治疗,观察组患者加用聚乙二醇干扰素α-2b。比较两组患者肝功能、肝纤维化指标[层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、透明质酸(HA)]、炎症因子[白细胞介素(IL)-4、干扰素-α(INF-α)、IL-17]水平和不良反应发生情况。结果治疗后,两组患者谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平均降低,且观察组均更低(均P<0.05)。治疗后,两组患者肝纤维化指标水平均降低,且观察组均更低(均P<0.05)。治疗后,两组患者炎症因子水平均改善,且观察组均更优(均P<0.05)。两组患者不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论乙型肝炎肝硬化患者接受恩替卡韦联合聚乙二醇干扰素α-2b治疗的效果显著,不仅能有效优化肝功能,减缓肝纤维化,并减轻炎症反应,且安全性良好。

血清NO、TXB2、ET-1水平与慢性心力衰竭患者NYHA心功能分级、心功能指标的关系及对其预后的预测价值

目的 分析血清一氧化氮(NO)、血栓素B2(TXB2)、内皮素-1(ET-1)水平与慢性心力衰竭(CHF)患者美国纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级、心功能指标的关系及对其预后的预测价值。方法 选取2020年8月至2022年8月在该院住院的108例CHF患者作为研究对象,根据NYHA心功能分级标准将患者分为NYHAⅡ级组、NYHAⅢ级组和NYHAⅣ级组。随访1年,根据随访期间患者是否发生严重心律失常、心肌梗死、死亡等不良事件将患者分为预后不良组和预后良好组。采用Pearson相关分析预后不良组CHF患者血清NO、TXB2、ET-1水平与心功能指标的相关性。采用Spearman相关分析CHF患者血清NO、TXB2、ET-1水平与NYHA心功能分级的相关性。采用多因素Logistic回归分析CHF患者预后不良的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清NO、TXB2、ET-1单独及联合检测对CHF患者预后不良的预测价值。结果 NYHAⅡ级组、Ⅲ级组、Ⅳ级组分别有28、41、39例患者。NYHAⅣ级组CHF患者血清NO水平低于NYHAⅡ级组、NYHAⅢ级组,血清TXB2、ET-1水平高于NYHAⅡ级组、NYHAⅢ级组,且NYHAⅢ级组血清NO水平低于NYHAⅡ级组,血清TXB2、ET-1水平高于NYHAⅡ级组,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访期间发生14例严重心律失常、18例心肌梗死、7例死亡。预后不良组和预后良好组分别有39、69例患者。预后不良组左心室舒张末内径(LVEDD)及血清TXB2、ET-1水平均高于预后良好组,左心室射血分数(LVEF)及血清NO水平均低于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,CHF患者血清NO水平与NYHA心功能分级呈负相关(P<0.05),血清TXB2、ET-1水平与NYHA心功能分级呈正相关(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,预后不良组CHF患者LVEF与血清NO水平呈正相关(P<0.05),与血清TXB2、ET-1水平呈负相关(P<0.05)。预后不良组CHF患者LVEDD与血清NO水平呈负相关,与血清TXB2、ET-1水平呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,NO>51.02μmol/L是CHF患者预后不良的保护因素(P<0.05),TXB2>130.94 ng/L、ET-1>57.43 ng/L是CHF患者预后不良的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清NO、TXB2、ET-1单独及3项指标联合预测CHF患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.858、0.841、0.816、0.963。3项指标联合预测的AUC高于NO、TXB2、ET-1单独预测的AUC(Z=2.579、2.638、3.312,P<0.05)。结论 血清NO、TXB2、ET-1水平与CHF患者NYHA心功能分级、心功能指标有关,可有效预测CHF患者预后不良。

重组人干扰素α-2b联合孟鲁司特钠治疗小儿毛细支气管炎的效果分析

目的探讨在治疗小儿毛细支气管炎中采用重组人干扰素α-2b与孟鲁司特钠的效果。方法选取2021年4月至2024年7月江南大学附属医院收治的80例小儿毛细支气管炎患儿,按照随机数字表法分为对照组和观察组,各40例。对照组患儿接受对症治疗与孟鲁司特钠治疗,观察组患儿加用重组人干扰素α-2b治疗。比较两组患儿临床疗效、症状、体征缓解时间、潮气肺功能指标[达峰时间比(TPTEF/TE)、达峰容积比(VPEF/VE)、潮气量(VT)和呼吸频率(RR)]水平、血清炎症因子[白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(INF-γ)]水平和不良反应发生情况。结果观察组患儿整体疗效更优,总有效率更高(均P<0.05)。观察组患儿各症状、体征缓解时间均更短(均P<0.05)。两组患儿治疗后潮气肺功能指标均改善,且观察组均更优(均P<0.05)。两组患儿治疗后各炎症因子水平均改善,且观察组改善均更优(均P<0.05)。观察组患儿不良反应总发生率更低(P<0.05)。结论在小儿毛细支气管炎的治疗中采用重组人干扰素α-2b联合孟鲁司特钠,不仅可缩短症状缓解时间,改善潮气肺功能指标,还可减轻炎症反应,减少药物不良反应。

下调HMGB2表达对肝癌LM3细胞上皮-间质转化的抑制作用及其AKT/mTOR信号通路机制

目的:探讨下调肝癌细胞中高迁移率族框蛋白2 (HMGB2)表达对肝癌细胞生物学行为及上皮-间质转化(EMT)进程的影响,并阐明其作用机制。方法:对数生长期的人肝癌LM3细胞分为阴性对照组和HMGB2 RNA干扰组(HMGB2 siRNA组),分别以Lipofectamin 2000为载体转染无关序列的RNA寡核苷酸(RNA oligo)和敲除HMGB2序列的RNA oligo。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测2组细胞中HMGB2 mRNA和蛋白表达水平,分别采用细胞划痕实验和Transwell小室实验检测2组细胞的迁移和侵袭能力,采用Western blotting法检测2组细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、 N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路相关蛋白表达水平。结果:与阴性对照组比较,HMGB2 siRNA组细胞中HMGB2 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),HMGB2 siRNA组细胞划痕愈合率明显降低(P<0.01),侵袭细胞数明显减少(P<0.01),细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01),N-cadherin、Vimentin、mTOR、AKT和磷酸化AKT (p-AKT)蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:下调HMGB2的表达可降低肝癌LM3细胞迁移和侵袭能力并抑制EMT,其作用机制可能与参与调节AKT/mTOR通路相关蛋白表达有关。

PCNA、Bcl-2及EGFR在喉癌组织中的表达及与临床病理特征、生存的关系

目的探讨增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)及表皮生长因子受体(EGFR)在喉癌组织中的表达及与临床病理特征、生存的关系。方法选取2017年3月—2020年1月在苏州大学附属第一医院因喉癌行手术治疗的92例患者的喉癌组织及对应癌旁组织标本。检测癌组织与癌旁组织PCNA mRNA、Bcl-2mRNA、EGFR mRNA相对表达量,多元线性回归分析其癌组织表达与临床病理特征的关系。随访3年,采用Kaplain-Maier曲线分析不同PCNA、Bcl-2、EGFR表达水平患者生存情况差异。结果癌组织PCNA mRNA、Bcl-2 mRNA、EGFR mRNA相对表达量高于癌旁组织(P<0.05)。不同年龄、肿瘤部位患者PCNA mRNA、Bcl-2 mRNA、EGFR mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);低分化,临床分期Ⅲ、Ⅳ期及淋巴结转移患者PCNA mRNA、Bcl-2 mRNA、EGFR mRNA相对表达量分别高于中、高分化,临床分期Ⅰ、Ⅱ期,无淋巴结转移患者(P<0.05)。多元线性回归分析结果显示,肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移是喉癌组织PCNA mRNA、Bcl-2 mRNA、EGFR mRNA表达的影响因素。Kaplain-Maier曲线分析结果显示,PCNA mRNA高表达患者3年无进展生存率、总生存率分别为59.57%和70.21%,低于低表达患者的80.00%和88.89%(P<0.05);Bcl-2 mRNA高表达患者3年无进展生存率、总生存率分别为60.78%和70.59%,低于低表达患者的80.49%和90.24%(P<0.05);EGFR mRNA高表达患者3年无进展生存率、总生存率分别为59.09%和70.45%,低于低表达患者的79.17%、87.50%(P<0.05)。结论喉癌组织PCNA、Bcl-2、EGFR呈高表达,且其高表达状态与肿瘤分期高、分化程度低、淋巴结转移有关,PCNA、Bcl-2、EGFR表达水平可在一定程度上反映患者预后。

乳腺癌患者病理特征与Bcl-2、CXCL13、PAX8表达情况的关系分析

目的分析乳腺癌患者病理特征与B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、趋化因子配体13(CXCL13)、配对盒基因8抗体(PAX8)表达情况的关系。方法收集2021年1月至2023年1月该院收治的160例乳腺癌患者临床资料。采用免疫组化法对其癌组织与癌旁组织Bcl-2、CXCL13、PAX8表达情况进行检测,并分析3项指标与患者病理特征的关系。结果与癌旁组织比较,癌组织Bcl-2、CXCL13、PAX8阳性率更高,差异有统计学意义(P<0.05)。与雌激素受体(ER)阴性、肿瘤最大径≥3 cm、孕激素受体(PR)阴性患者比较,ER阳性、肿瘤最大径<3 cm、PR阳性患者中Bcl-2高表达占比更高,差异有统计学意义(P<0.05);与无淋巴结转移、Ⅰ~Ⅱ期患者比较,淋巴结转移、Ⅲ~Ⅳ期患者中CXCL13高表达占比更高,差异有统计学意义(P<0.05);与Ⅰ~Ⅱ期、高/中分化、无淋巴结转移患者比较,Ⅲ~Ⅳ期、低分化、有淋巴结转移患者中PAX8高表达占比更高,差异有统计学意义(P<0.05)。ER、PR表达情况与Bcl-2表达情况呈正相关(P<0.05),肿瘤最大径与Bcl-2表达情况呈负相关(P<0.05);临床分期、淋巴结转移情况与CXCL13、PAX8表达情况呈正相关(P<0.05);分化程度与PAX8表达情况呈负相关(P<0.05)。结论乳腺癌患者Bcl-2、CXCL13、PAX8表达情况对疾病的发生和发展具有明显影响,有望成为评估乳腺癌患者病情严重程度的标志物。

IL-17A在食管腺癌中的表达及其对NF-κB/COX-2信号轴的调控作用

目的探讨白细胞介素17A(IL-17A)在食管腺癌中的表达情况及其通过核转录因子κB(NF-κB)信号通路对环氧合酶-2(COX-2)的调控作用及机制。方法收集10例食管腺癌组织、癌旁组织和血清,同时收集10例做胃镜检查的健康体检者的食管上皮组织和血清,免疫组化法检测组织中IL-17A和COX-2蛋白的表达,real time-PCR法检测癌组织和癌旁组织中IL-17A mRNA和Th17细胞的特异性转录因子维甲酸相关孤儿核受体c(RORc)mRNA的表达,ELISA法检测食管腺癌患者和健康对照者血清中IL-17A的含量。选取对数生长期的人食管腺癌OE19细胞,分为对照组、IL-17A(100 ng/mL)组和IL-17A(100 ng/mL)+PDTC(100μmol/L,NF-κB信号通路抑制剂吡咯烷二硫代甲酸铵)组,Western blot法检测OE19细胞中p50、p65、p-IκB-α和COX-2蛋白的表达水平。结果食管腺癌组织中IL-17A阳性染色细胞数高于癌旁组织;相较于癌旁组织,食管腺癌组织中IL-17A和RORc mRNA水平增多(P<0.05)。与健康对照者相比,食管腺癌患者血清中IL-17A的含量明显升高(P<0.05)。与正常食管上皮组织比较,食管腺癌组织中COX-2蛋白阳性染色面积更大更深。与对照组相比,IL-17A组OE19细胞中p-IκB-α和COX-2蛋白的表达量明显增加(P<0.05);与IL-17A组相比较,IL-17A+PDTC组细胞中p-IκB-α和COX-2蛋白的表达量明显降低(P<0.05)。结论IL-17A表达在食管腺癌患者组织和血清中均增加。在食管腺癌OE19细胞中,IL-17A可能通过激活NF-κB信号通路上调COX-2的表达量。

胃癌患者EB病毒感染情况及其对癌组织p53、Bcl-2表达的影响

目的探究胃癌患者人类疱疹(EB)病毒感染情况及其对癌组织p53、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达的影响。方法选取新乡市中心医院2019年8月至2023年1月收治的76例胃癌患者,采用原位杂交法检测患者癌组织及癌旁组织EB病毒编码小分子RNA表达,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测患者癌组织及癌旁组织p53、Bcl-2 mRNA表达,分析EB病毒感染与胃癌临床病理特征及癌组织p53、Bcl-2表达的关系。结果76例胃癌患者癌组织标本中EB病毒阳性率为27.63%(21/76),邻近癌旁组织标本中EB病毒阳性率为4.29%(3/76),胃癌患者癌组织EB病毒阳性率高于癌旁组织(P<0.05);与EB病毒阴性的胃癌患者比,EB病毒阳性患者中病灶位于近端胃、组织浸至浆膜层、有淋巴结转移的占比较多(P<0.05);胃癌患者癌组织p53及Bcl-2 mRNA表达均高于癌旁组织(P<0.05);EB病毒感染胃癌患者癌组织p53及Bcl-2 mRNA表达均高于未感染胃癌患者(P<0.05)。结论EB病毒感染与胃癌患者近端胃病变、组织浸至浆膜层及有淋巴结转移有关,EB病毒可能通过驱动宿主p53基因甲基化来上调p53表达,与Bcl-2协同促进癌细胞生长,这些可能为临床提供胃癌诊疗评估因子及免疫治疗新靶点。

单核细胞Toll样受体和核因子-κB水平与2型糖尿病患者自主神经病变的相关性

目的探讨单核细胞中Toll样受体(TLR)、核因子-κB(NF-κB)表达水平与2型糖尿病(T2DM)患者自主神经病变的相关性。方法选择2021年4月至2022年12月濮阳市人民医院收治的112例T2DM患者为观察组,另选择同期在本院进行体检的50例健康志愿者为对照组。采用反转录聚合酶链反应检测2组受试者血浆单核细胞中TLR2、TLR4、NF-κB表达水平。根据是否并发有自主神经病变将观察组患者分为自主神经病变组(n=46)和无自主神经病变组(n=66),比较2组患者的临床资料,将差异有统计学意义的指标进一步行多因素logistic回归来分析T2DM患者发生自主神经病变的危险因素;采用Spearman相关分析TLR2、TLR4、NF-κB表达水平与T2DM患者发生自主神经病变的相关性。结果观察组患者单核细胞中TLR2、TLR4、NF-κB水平显著高于对照组(P<0.05)。单因素分析结果显示,自主神经病变组与无自主神经病变组患者的年龄、单核细胞/高密度脂蛋白比值(MHR)及胱抑素C、TLR2、TLR4、NF-κB水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,MHR、TLR2、TLR4、NF-κB是T2DM患者发生自主神经病变的危险因素(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,TLR2、TLR4、NF-κB水平与T2DM患者发生自主神经病变呈正相关(r=0.825、0.822、0.819,P<0.05)。结论TLR2、TLR4、NF-κB在T2DM患者中表达上调,TLR2、TLR4、NF-κB表达水平与T2DM患者自主神经病变有关。

血清Ang-2和HMGB1水平与脓毒症患者病情及预后相关性的研究

目的 探究血清血管生成素-2(Ang-2)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平与脓毒症患者病情及28天预后的相关性。方法 回顾性分析41例脓毒症患者资料,根据患者28天的预后情况分为存活组和死亡组;根据患者病情严重程度将2组患者分别分为脓毒症组和脓毒性休克组。记录所有入组患者的一般资料并进行第1天、第3天、第5天及第7天的APACHEⅡ评分,测定Ang-2和HMGB1水平。结果 存活组与死亡组患者的一般资料比较差异无统计学意义。死亡组脓毒症休克患者占比及入科APACHEⅡ评分为(85.71%)和(29.29±5.99)分,均明显高于存活组(51.84%)和(24.96±5.84)分。2组患者血清Ang-2和HMGB1水平比较差异无统计学意义。第7天的HMGB1水平与脓毒症患者预后显著相关,而第1天、第3天、第5天的HMGB1水平及上述各时间点的Ang-2水平与患者预后均无相关性。各时间点血清Ang-2水平的算术平均值与APACHEⅡ评分的算术平均值呈正相关,HMGB1水平与APACHEⅡ评分并无相关性。联合第7天的APACHEⅡ评分、Ang-2和HMGB1水平的曲线下面积最大为0.78,灵敏度为92.9%,特异度为59.3%。联合第7天的Ang-2和HMGB1水平预测预后不良的曲线下面积为0.71,灵敏度为92.9%,特异度为55.6%。结论 脓毒症患者第1天、第3天、第5天及第7天的平均血清Ang-2水平与病情严重程度呈正相关;联合脓毒症患者第7天的血清Ang-2和HMGB1水平对其预后进行评估灵敏度最高,明显高于单独某项指标的评估价值。

吴茱萸碱通过调节核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1/核因子-κB信号通路对白细胞介素1β诱导的软骨细胞炎性损伤的影响

目的观察吴茱萸碱(Evo)对白细胞介素1β(IL-1β)诱导的软骨细胞炎性损伤的影响及对核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)/核因子κB(NF-κB)信号通路的调节作用。方法将人软骨细胞HCCs分为对照组、模型组、Evo低剂量组、Evo高剂量组、Evo高+ML385组,对照组用DMEM培养基培养,其他组用加入50 ng/mL的IL-1β培养基培养,同时Evo低、高剂量组再加浓度分别为10、30μmol/L的Evo处理,Evo高+ML385组先用2μmol/L的Nrf2抑制剂ML385处理30 min,再用30μmol/L的Evo处理。CCK-8检测细胞增殖活力;流式细胞术检测HCCs细胞凋亡;酶联免疫吸附法检测HCCs细胞上清液中IL-6、IL-18、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测HCCs细胞中炎症介质环氧合酶2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA水平;Western blot法检测HCCs中Nrf2/HO-1/NF-κB通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,模型组凋亡率、IL-6、IL-18、TNF-α、MDA水平,COX-2、iNOS mRNA表达水平,以及磷酸化NF-κB抑制蛋白α(p-IκB-α)、细胞质Nrf2、细胞核p65 NF-κB蛋白水平均升高(P<0.05),细胞存活率、SOD活性及HO-1、IκB-α、细胞核Nrf2、细胞质p65 NF-κB蛋白水平均降低(P<0.05)。与模型组相比,Evo低、高剂量组细胞凋亡率、IL-6、IL-18、TNF-α、MDA水平,COX-2、iNOS mRNA表达水平,p-IκB-α、细胞质Nrf2、细胞核p65 NF-κB蛋白水平均降低(P<0.05),细胞存活率、SOD活性及HO-1、IκB-α、细胞核Nrf2、细胞质p65 NF-κB蛋白水平均升高(P<0.05),且Evo高剂量组以上指标与Evo低剂量组组间比较差异也均有统计学意义(P<0.05)。与Evo高剂量组相比,Evo高+ML385组中Nrf2的抑制剂ML385消除了Evo高剂量对上述指标的影响。结论Evo可能通过激活Nrf2和HO-1的表达,抑制下游转录因子NF-κB的表达,改善IL-1β诱导的软骨细胞炎性损伤。

miR-10b介导NKG2D调节脑胶质瘤细胞免疫效应的实验研究

目的:观察微小核糖核酸-10b(miR-10b)对脑胶质瘤细胞免疫效应的调节作用并探讨其作用机制。方法:取人脑胶质瘤细胞U251进行培养和传代,获得处于对数生长期的细胞。按照1.0×105个/ml浓度制备细胞悬液,并设置对照组、过表达组、低表达组、空白组,每组6个复孔。对照组、过表达组、低表达组分别采用脂质体转染法转染阴性对照、miR-10b模拟物、miR-10b抑制剂,空白组予以等量无菌生理盐水。分离和培养1例健康志愿者外周血自然杀伤(NK)细胞。MTT法检测不同效靶比时NK细胞的杀伤活性;流式细胞仪检测各组NK细胞表面NK细胞激活受体(NKG2D)表达,并检测各组人脑胶质瘤细胞U251表面主要组织相容性复合物Ⅰ链相关基因A(MICA)、UL16结合蛋白2(ULBP2)、UL16结合蛋白3(ULBP3)表达。结果:对照组、过表达组、低表达组转染效率分别为(93.55±2.05)%、(95.67±3.14)%、(94.18±3.26)%;与对照组和空白组相比,过表达组miR-10b表达升高,低表达组miR-10b表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05),且对照组和空白组miR-10b表达差异无统计学意义(P>0.05);与对照组和空白组相比,过表达组NK细胞不同效靶比杀伤活性均降低、NKG2D表达降低,低表达组NK细胞不同效靶比杀伤活性均增高、NKG2D表达增高,差异均有统计学意义(P<0.05),各组NK细胞杀伤活性均随效靶比增加而增高,差异均有统计学意义(P<0.05),且对照组与空白组相比,相同效靶比NK细胞杀伤活性、NKG2D表达差异均无统计学意义(P>0.05);与对照组和空白组相比,过表达组人脑胶质瘤细胞U251表面MICA、ULBP2、ULBP3表达均降低,低表达组人脑胶质瘤细胞U251表面MICA、ULBP2、ULBP3表达均增高,差异均有统计学意义(P<0.05),且对照组与空白组人脑胶质瘤细胞U251表面MICA、ULBP2、ULBP3表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:抑制miR-10b表达能够增加NK细胞表面NKG2D和人脑胶质瘤细胞U251表面MICA、ULBP2、ULBP3表达,增强NK细胞对人脑胶质瘤细胞U251的杀伤活性。

重组人干扰素α-2b凝胶联合匹多莫德治疗宫颈低级别鳞状上皮内病变的临床研究

目的评估重组人干扰素α-2b凝胶联合匹多莫德治疗宫颈低级别鳞状上皮内病变(LSIL/CIN1)的临床疗效。方法选取2020年1月—2024年1月聊城市第二人民医院收治的88例LSIL/CIN1患者。按随机数字表法分为对照组和PID组,各44例。对照组给予重组人干扰素α-2b凝胶治疗,PID组在对照组基础上给予匹多莫德治疗。比较两组患者的临床疗效,治疗前后的阴道微生态情况、免疫功能、灌洗液炎症水平及不良反应发生率。结果PID组的治疗总有效率高于对照组(P<0.05)。PID组的阴道微生态恢复率高于对照组(P<0.05),PID组阴道分泌物pH值、Nugent评分均低于对照组(P<0.05)。PID组治疗前后CD4^(+)、CD8^(+)、Treg、Th17的差值均高于对照组(P<0.05)。PID组治疗前后IFN-γ、IL-10和TNF-α的差值均高于对照组(P<0.05)。两组患者的不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论重组人干扰素α-2b凝胶联合匹多莫德治疗LSIL/CIN1患者,能有效改善患者免疫水平,减少炎症反应,且安全性好,适合在临床上广泛应用。