青研系列大白菜杂交种及亲本指纹图谱构建和杂种纯度鉴定

利用SSR分子标记技术构建了青研系列7份大白菜杂交种及其11个亲本的DNA指纹图谱,筛选出5对具有较高多态性的SSR核心引物,核心引物组合扩增,可以鉴别亲本及其杂交种的真伪。利用其中一对共显性SSR标记P3鉴定青研早9号、青研桔15和青研春白一号三个杂交种的纯度。对比苗期性状调查结果表明,SSR分子标记用于杂交种纯度鉴定结果是可靠的。本试验为大白菜杂交种纯度鉴定提供了可靠的方法,对亲本保护及杂交种推广具有重要意义。

大白菜AB-81高频再生系统的建立及gusA基因瞬时表达的研究

以大白菜自交系AB 81的子叶和真叶切块为外植体 ,建立了高频不定芽离体再生系统。在MS附加TDZ 0 .2mg/L ,NAA 2 .0mg/L ,AgNO310mg/L和ABA 0 .2 5mg/L的再生培养基上 ,子叶和真叶的不定芽再生频率分别达到 93.3%和 90 .0 % ,每块外植体的不定芽数达 3～ 6个 ,最多达 2 1个。以EHA10 5/pMOG4 10为载体转化侵染大白菜AB 81的子叶 ,获得较高gusA基因瞬时表达频率的条件为 :子叶预培养 2～ 3d ;侵染的工程菌液的浓度OD 0 .3～ 0 .5;侵染时间 2～ 10min ;共培养时间 2～

大白菜黑斑病室内苗期抗性鉴定方法的研究

为了选育大白菜(Brassica campestris L.ssp pekinensis(Lour.)Olsson)抗黑斑病(Alternaria brassicae)新品种和种质创新,在室内利用6个品种的大白菜研究了接种物浓度、苗龄和温度对大白菜黑斑病发病的影响,结果表明,在(25±1)℃光照培养室内,选择浓度为1.0×104个孢子/mL或1.0×105个孢子/mL的黑斑病病菌孢子悬浮液喷雾接种于苗龄为3～4片真叶的大白菜幼苗,保湿24～48 h,10 d后进行病情调查,可对大白菜种质资源抗黑斑病的抗性进行正确评价。

大白菜软腐菌种群组成及优势菌致病型的研究

对黑龙江省成熟大白菜〔Brassica pekinensis(Lour.)Rupr.〕生产田采集的软腐病菌进行分离、纯化,并根据形态学特征分析了大白菜软腐病菌的种群组成。结果表明,引起黑龙江省秋季大白菜软腐病的主要致病菌是胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜软腐亚种〔Erwinia carotovora(Jones)Bergey et al.subsp.carotovora〕(Ecc);利用20个Ecc菌株的混合菌对来源于不同生态型及不同地区的大白菜品种进行接种,筛选出5个鉴别寄主,以此将20个Ecc菌株划分为5个致病力类型,其中V型为优势致病菌,其分布广且致病力强。

大白菜分子连锁图谱的构建与分析

构建大白菜分子连锁图谱,旨在为紫色等性状的QTL定位奠定基础。以紫菜薹(B.compestris L.var.purpurea Bailey)和结球白菜(B.campestris L.ssp.Pekinensis(Lour.)Olsson)杂交的F2群体为试材,基于231个多态性标记,利用JoinMap3.0软件,得到包含163个标记、11个连锁群和4个片段的大白菜分子连锁图谱,其中包括117个RSAP标记、38个SRAP标记、5个SSR标记和3个RAPD标记。图谱覆盖基因组长度为821.3cM,标记间平均图距为5.04cM。连锁群上23.31%的标记表现偏分离,偏分离标记在连锁群上聚集出现。基于与紫色性状连锁的RAPD标记,推断LG4与大白菜1号染色体对应。该图谱可有效的用于紫色等性状的QTL定位分析。

铜处理对大白菜芝麻状斑点病发生及总酚含量的影响

选择感病品系03B9与抗病品系C24为试材,在水培条件下,研究不同铜浓度处理对大白菜芝麻状斑点病发生、总酚含量及多酚氧化酶活性的影响。结果表明:随着铜处理浓度的升高,两品系芝麻状斑点病的斑点数明显增加,03B9芝麻状斑点病发生程度明显高于C24。铜处理期间C24总酚含量、PPO活性较03B9平均高出25.6%和77.0%。试验结果初步表明,水培条件下铜胁迫促进了大白菜芝麻状斑点病的发生,铜浓度与芝麻状斑点病发生程度有关,同时影响了叶柄总酚含量及PPO活性。

大白菜BrAOP2基因的遗传多样性及其与硫甙含量的相关性分析

以大白菜品种Chiifu为试验材料,采用RT-PCR技术,克隆了3个硫甙合成关键基因BrAOP2基因的cDNA序列(BrAOP2.1、BrAOP2.2、BrAOP2.3)。通过氨基酸同源性比对分析,BrAOP2.1与BrAOP2.2的同源性为78%,BrAOP2.1与BrAOP2.3的同源性为74%,BrAOP2.2与BrAOP2.3的同源性为81%。通过32份大白菜重测序数据分析了3个BrAOP2基因CDS序列的遗传多样性,并对其与硫甙含量的相关性进行了分析。结果表明:在32份大白菜中共检测到7种硫甙,其中4-戊烯基硫甙(GBN)含量和2-羟基-3-丁烯基硫甙(PRO)含量较高,分别占总硫甙含量的23.99%和23.16%。在BrAOP2.1基因编码区检测到5个变异位点,在BrAOP2.2基因编码区检测到7个变异位点,在BrAOP2.3基因编码区仅检测到1个变异位点。其中BrAOP2.1基因的A1051G变异位点与PRO含量极显著相关,BrAOP2.2基因的A560G、C753T、A790G和T927C变异位点与PRO含量显著相关,BrAOP2.2基因的G825A位点与4-羟基-3-吲哚基甲基硫甙(4OH)含量显著相关。

玻里马胞质大白菜雄性不育系CMS3411-7温度敏感特性的研究

采用光照培养箱恒温、变温和田间自然变温 ,研究大白菜玻里马胞质雄性不育系CMS 3411 7温度敏感的特性。结果表明 :在 3～ 15℃内CMS 3411 7均有育性转换 ,其中昼 /夜温度 8/ 4～ 14 / 10℃ (即日平均温度 6～ 12℃ )是有效转换的温度范围。在恒温 6℃条件下 ,经过 3～ 5d处理时CMS 3411 7的育性转换值 (不育级别 )可达到 2级 ,该温度下随着处理时间延长 (3～ 9d)不育性转换程度逐渐加重。在 9℃恒温下处理 6d较处理 3d和处理 9d时的转换程度都大。在 14 / 10℃下转换程度与处理时间无关。在 17/ 13℃下处理时间延长反而抑制不育性转换。虽然不同处理下CMS 3411 7不育性转换开始和转换结束的时间差异较大 ,但显著转换发生的时间一般稳定在温度处理后 10～ 2 7d ,表现相对集中。就育性转换的启动来看 ,经过 3d处理后 8/ 4～ 17/ 13℃下均发生了育性转换 ,说明

大白菜SRAP反应体系的建立与优化

以大白菜基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从Mg2+、Taq酶、dNTPs、引物、模板5种因素4个水平对大白菜SRAP(Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)反应体系进行优化,建立了适合于大白菜的SRAP-PCR优化反应体系,该体系为25μL:Mg2+浓度为3.0 mmol/L,dNTPs为0.2mmol/L,Taq酶1.5 U,引物为0.2μmol/L,模板DNA73.2 ng。PCR反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5个循环;94℃变性1 min,50℃复性1 min,72℃延伸1 min,35个循环,72℃延伸10 min。

大白菜与紫甘蓝种间杂种的获得与鉴定

以不同类型的大白菜与紫甘蓝为材料,运用蕾期授粉结合胚挽救技术获得大白菜与紫甘蓝的种间杂种,并对其进行细胞学鉴定。结果表明,大白菜与紫甘蓝杂交,获得了57株F1代幼苗;对根尖染色体数量进行观察和杂种花粉特性调查发现,其中47株具有预期的染色体数目,2n=19,鉴定为真杂种,其花粉败育;另有6株具有38条染色体,鉴定为种间异源双二倍体,应该是发生了染色体自然加倍,其花粉可育。可育的杂种F1代与大白菜回交,获得了大白菜—紫甘蓝BC1代材料。田间观测结果显示,杂种F1代植株综合性状均介于双亲之间,BC1代植株包球明显,综合性状偏向母本大白菜。

抗病大白菜新品种‘天正秋白一号’

‘天正秋白一号’是以‘安阳二包头’经多代自交选择育成的优良自交不亲和系安 10 4 3为父本 ,以‘福山二包头’通过抗性转育、筛选的自交不亲和系新福 10 4 2为母本配制成的大白菜一代杂种。该品种生长期 80d ,中晚熟 ;球叶叠抱 ,叶球矮桩倒锥形 ;叶色淡绿 ,白帮 ,净菜率 75 % ,单球质量 5 .1kg ;高抗病毒病、兼抗霜霉病和软腐病。

秋冬季大白菜田节肢动物群落物种及功能团的时间生态位

采用Levins(1968)生态位宽度(Bi转化为Bi′)和Hurlbert(1978)生态位重叠(Lij)指标,对湖北荆州秋冬季大白菜(Brassicacampestris L. ssp. pekinensis(Lour)Olsson.)田节肢动物群落物种和功能团的时间生态位进行了分析,结果表明:害虫中优势害虫菜缢管蚜[Lipaphis erysimi(Kaltenbach)]的Bi′居中,为0.6389,甜菜夜蛾(Laphygmaexigua Hubner)、大猿叶虫(Colaphellus bowringiiBaly)与菜缢管蚜的Lij大于1;天敌中优势天敌八斑球腹蛛(Theridionoctomaculatum Boes.etStr.)和草间小黑蛛[Erigonidiumgraminicolum(Sundevall)]的Bi′较小,分别为0.7170和0.6645,三突花蛛(Misumenops tricuspidatus Fabrici-us)与八斑球腹蛛、青翅蚁形隐翅虫(Paederus fuscipes Curtis)与草间小黑蛛的Lij大于1;八斑球腹蛛、草间小黑蛛以及青翅蚁形隐翅虫与菜缢管蚜的Lij大于1。害虫功能团中蚜虫类的Bi′居中,天敌中功能团中蜘蛛类Bi′最大。蚜虫类与蝽类、潜叶蝇类、直翅类及叶蝉类的Lij大于1,蜘蛛类与瓢虫类及隐翅甲的Lij均大于1。蜘蛛类、瓢虫类、隐翅甲与蚜虫类的Lij均大于1。

大白菜萌动种子春化过程中生理生化指标的变化

研究了不同冬性大白菜[Brassica campestris L. ssp. pekinensis(Lour.)Olsson]萌动种子在2℃低温处理过程中,其硝酸还原酶(Nitric acid reductase,NR)活性、可溶性蛋白质含量及过氧化物酶(Peroxide enzyme,POD)同工酶、细胞色素氧化酶(Cytochrome oxidase,COD)同工酶和β-酯酶(Beta-esterase isozyme,β-EST)同工酶的电泳图谱变化。结果表明,萌动种子NR活性与大白菜的耐抽薹性密切相关,即随着耐抽薹性减弱NR活性降低,极耐抽薹品种萌动种子的NR活性是易抽薹品种的3～4倍,萌动种子中NR活性的高低在一定程度上可反映大白菜的耐抽薹特性。在春化过程中,极耐抽薹品种的萌动种子NR活性表现为先快速下降,然后维持一段低活性水平;易抽薹品种萌动种子的NR活性表现与之相反,先是快速升高,到春化处理的15d达最大值,然后快速下降。不同大白菜品种萌动种子可溶性蛋白质含量的变化趋势基本一致,表现为"上升-下降-上升"的倒"S"型变化;大白菜萌动种子在完成春化的时候陆续有Rf为0.788的特异蛋白出现。不同大白菜品种萌动种子的POD、COD和β-EST同工酶酶谱基本相同;春化20d以后,所有品种Rf为0.632的β-EST同工酶带从大白菜中消失,而POD和COD同工酶活性有所增加,且各材料均陆续出现自己特有的POD和COD同工酶带。

大白菜的组织培养研究

研究了不同外植体、激素组合、苗龄、AgNO3 、ABA等因素对耐热大白菜不定芽诱导率的影响。结果表明 :6日龄的子叶是最适外植体 ;在含有BA 1.5mg/L +NAA 0 .5mg/L的MS培养基上 ,添加AgNO3 4mg/L和ABA 0 .

外源2,4-表油菜素内酯(EBR)对弱光胁迫下黄心菜生长和碳水化合物代谢的影响

[目的]探讨叶面喷施2,4-表油菜素内酯(EBR)对弱光胁迫下黄心菜生长及碳水化合物代谢的影响,为设施黄心菜抗逆优质高效栽培提供参考依据。[方法]以塑料大棚内砻糠灰基质栽培的弱光敏感型黄心菜品种淮南F1为2试验材料,测定分析弱光[190.0~260.0 μmol/(m^2·s)]胁迫下喷施EBR后黄心菜的生长指标、光合参数、内源激素含量和碳水化合物代谢指标等。[结果]弱光胁迫可显著降低黄心菜植株的株高、根长、叶面积、根体积及鲜重和干重(P<0.05,下同),而叶面喷施EBR可有效缓解弱光胁迫对其生长的抑制作用。喷施EBR后,弱光胁迫黄心菜叶片的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)和蒸腾速率(Tr)分别显著增加47.4%、121.0%和77.3%,吲哚-3-乙酸(IAA)、玉米核苷(ZR)和赤霉素(GA3)含量分别显著提高16.1%、13.6%和11.4%,蔗糖磷酸合成酶(SPS)和蔗糖合酶(SS)活性显著提高,酸性转化酶(AI)活性显著降低,可溶性总糖和蔗糖含量显著降低。[结论]叶面喷施EBR能调控弱光下黄心菜叶片内源激素的变化和碳水化合物代谢,有效缓解弱光胁迫对黄心菜生长的抑制作用,促进植株生长及增强植株抗性。

营养液中添加低浓度氯化钠对大白菜生长的影响

为了研究营养液中添加低浓度氯化钠对大白菜生长的影响,该试验设置0~20mmol·L^(-1) 5个浓度梯度的NaCl作浸种处理,对大白菜种子发芽率、发芽指数、活力指数及生长指标进行测定;设置0~25mmol·L^(-1) 6个浓度梯度的NaCl营养液进行处理,对大白菜的生长指标和品质指标进行测定。结果表明:在种子萌发试验中,10mmol·L^(-1)的NaCl处理较好,大白菜种子发芽率、根长、茎长、总鲜质量分别比CK提高了3.58%、23.64%、13.88%、33.48%;在营养液栽培试验中,10mmol·L^(-1)的NaCl处理大白菜幼苗生长效果较好,其根长增加量、茎长增加量、鲜质量增加量分别比CK提高了53.96、39.87、97.39个百分点。抗坏血酸和可溶性糖含量随NaCl浓度的增加而呈先上升后下降的趋势,其中10mmol·L^(-1)处理抗坏血酸和可溶性糖含量最高,分别比CK提高了22.24%和46.44%。纤维素含量在6.25~6.80mg·g-1,随NaCl浓度增加差异不显著。NaCl浓度5mmol·L^(-1)处理的大白菜可溶性蛋白质含量最高。5~10mmol·L^(-1) NaCl溶液浸种不影响大白菜种子发芽及幼苗生长;在营养液栽培中加入5~15mmol·L^(-1) NaCl不影响大白菜幼苗的生长及大白菜的品质。

低温处理对黄心菜种子春化的影响

以3个在生产上表现优良的黄心菜品种为试材,将萌动种子置于4℃低温处理6、12、18、24 d,研究了种子春化处理对黄心菜植株抽薹开花的影响,以期为黄心菜种子繁育、单倍体育种等提供参考依据。结果表明:低温春化处理后,3个黄心菜品种的抽薹、现蕾、初花期、盛花期均显著提前,处理时间超过18 d以后,尽管植株抽薹开花更早,但植株及花薹表现更瘦弱;处理时间与各个表型性状均显著相关,处理时间与叶片数、叶片宽、叶柄长、株幅呈极显著负相关,与叶片长、叶柄宽、薹粗呈显著负相关,与株高、薹长呈极显著正相关。综合分析表明,处理6、12 d抽薹开花时间较晚,而处理24 d虽开花较早,但植株及花薹表现瘦弱,不利于花粉或种子培育,处理18 d植株抽薹开花时间显著提前且综合性状较好。

不同黄心菜品种的抗寒生理比较研究

选取7个黄心菜品种,测定不同黄心菜品种的丙二醛(MDA)、脯氨酸(Pro)、过氧化物酶(POD)、超氧物岐化酶(SOD)以及蔗糖的含量,比较不同品种间的抗逆机理及差异显著性。结果表明:(1)淮南黄心菜F1、徽乌一号、雪地金花、甲天下F1的各项抗逆生理指标相对较强,即抗逆性相对较强,适于信阳及周边地区栽培;(2)不同黄心菜品种之间的抗寒机理不同,在利用其抗逆生理指标进行品种改良时,应选择与抗逆有关的生理指标进行综合评定,以选育各项抗逆生理指标均较强的品种。

大白菜中硫代葡萄糖苷的鉴定及含量分析

以129份大白菜[Brassca campestris L.ssp.pekinensis(Lour.)Olsson]DH系为材料,采用HPLC法,对不同季节生长的大白菜叶片中硫苷的组分和含量进行了研究。在129份材料中均检测到8种硫苷成分,包含3种脂肪族硫苷,4种吲哚族硫苷和1种芳香族硫苷。主成分分析表明脂肪族硫苷3-丁烯基硫苷(NAP)、4-戊烯基硫苷(GBN)和2-羟基-3-丁烯基硫苷(PRO)是大白菜硫苷的主要组分,占总硫苷含量的60%。筛选出了6份高硫苷含量的材料。联合方差分析结果表明,脂肪族硫苷NAP、GBN和PRO在不同品种间差异极显著;某些吲哚族硫苷受环境影响较大,在不同的季节间差异显著;芳香族硫苷2-苯乙基硫苷(NAS)的含量在季节和季节×品种间差异显著。不同硫苷间的积累存在相互影响,NAP与GBN、NAP和GBN与总硫苷在两个年份中均呈极显著正相关。

大白菜与诸葛菜属间杂交及GISH鉴定

以不同类型的大白菜与诸葛菜进行属间正反杂交,运用蕾期重复授粉及胚挽救技术,在大白菜为母本的组合中获得了31株幼苗,GISH鉴定表明有16株具有预期的染色体数,2n=22,为真杂种;在诸葛菜为母本的组合中没有得到杂种植株。田间调查显示,杂种一代植株综合性状介于双亲之间,同时花粉败育。