PEG/磷酸盐双水相体系萃取青霉TS67胞外活性蛋白的研究

[目的]研究用PEG/磷酸盐双水相体系萃取青霉TS67胞外活性蛋白,为活性蛋白的进一步提纯及工业化生产提供依据。[方法]以分配系数、下相分配率及抑菌圈直径为指标,分别研究了PEG的浓度、磷酸盐的浓度、氯化钠的浓度对青霉TS67胞外活性蛋白在PEG2000/磷酸盐和PEG 6000/磷酸盐双水相系统中分配特性的影响。[结果]在24%PEG 2000/12%磷酸盐的双水相体系中下相抑菌圈直径最大,达到2.50 cm,此时下相分配率为87.77%;在28%PEG 6000/12%磷酸盐双水相体系中,下相分配率最大,达到94.85%,此时下相抑菌圈直径为2.45 cm。[结论]PEG的浓度、磷酸盐的浓度对蛋白的分配特性有显著影响,氯化钠的浓度对其影响并不明显。从成本及结果来说,PEG 2000优于PEG 6000。

抗大豆尖孢镰刀菌新型固体生物农药的研制

以抑菌圈直径为指标,采用牛津杯法测定青霉TS67菌株的胞外代谢产物对大豆尖孢镰刀菌(Fusari-um oxysporum)的抑制活性,对该菌株的固体培养基成分及其配比进行优化,同时对pH、温度、含水量、接种量及最佳培养周期等生长条件进行测定.实验结果表明:青霉TS67菌株的最佳固体培养基配方为麸皮6g,黄豆粉3g,KH2PO40.3g,KCl 14.5mg,MgSO4.7H2O 14.5mg,FeSO4.7H2O 0.29mg,水29mL;将1.3mL 2×106 CFU/mL的青霉TS67菌株孢子悬液接种于40g最佳培养基上,pH6～7,28℃进行固体发酵培养96h,获得含有菌丝、孢子、代谢产物的固体培养物,该培养物的磷酸缓冲液浸提物能够有效抑制大豆尖孢镰刀菌的生长.