甘肃永登国外芍药引种适应性评价

在甘肃省永登县开展芍药直接引种(T1)和引种3年后再分株栽培(T2)对比试验,揭示两种栽培方式下芍药生长的差异性,探讨国外芍药品种在国内的适宜性。通过分析原产地和引种地气候因子,测定物候期、农艺性状、个体质量及含量,在大田管理条件下,甘肃永登气候适宜引进国外芍药,T1和T2栽培方式下国外芍药品种均能生长开花,花色纯正,花型饱满,茎秆直立粗壮,叶片浓郁。与T2栽培方式比较,T1栽培方式下芍药生长表现更优,成活率提高4.26%(P<0.05),成花率提高8.34%(P<0.01),单根鲜重、根粗、根长、侧根数和芽数分别增加了0.31 kg(P<0.05)、3.27 mm(P<0.05)、7.00 cm(P<0.05)和5个(P<0.01),根部主要成分芍药苷含量提高48.68%(P<0.01)。以上表明,直接引种更有利于芍药在甘肃永登地区的生长,具有更高的市场前景和经济价值。

HPLC⁃DAD法同时测定当归祛风合剂中6种成分

目的建立HPLC-DAD法同时测定当归祛风合剂中阿魏酸、毛蕊花糖苷、芍药苷、白鲜碱、升麻素苷、甘草苷的含量。方法该药物50%甲醇提取液的分析采用Ultimate C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相0.1%磷酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长230、236、240、280、334 nm。结果6种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.9994),平均加样回收率95.56%~105.29%,RSD 2.77%~3.92%。结论该方法准确可靠,可为当归祛风合剂质量控制、临床应用提供参考。

HPLC-“内标”多控法测定四逆散中芍药苷、柚皮苷、橙皮苷、甘草酸和新橙皮苷

目的以四逆散为研究载体,建立"内标"多控法中药复方质量评价模式,并对该评价模式进行方法学考察。方法选取芍药苷作为四逆散中各成分的参照"内标",在不同的波长下测定各成分相对于内标成分的校正因子,利用校正因子和芍药苷对四逆散中柚皮苷、橙皮苷、甘草酸和新橙皮苷进行测定。结果芍药苷0.2812-1.6870μg(r=0.9996)、柚皮苷0.5700-3.4200μg(r=0.9994)、橙皮苷0.0502-0.3012μg(r=0.9999)、新橙皮苷0.523-3.1380μg(r=0.9999)、甘草酸铵0.3310-1.9860μg(r=0.9998)与峰面积呈良好线性关系。结论建立四逆散中柚皮苷、橙皮苷、甘草酸和新橙皮苷相对于芍药苷的校正因子。比较外标法与"内标"多控法测定的结果,表明"内标"多控法对中药复方多成分质量控制是可行的、实用的。

HPLC测定补肾活血颗粒中芍药苷,阿魏酸,淫羊藿苷的含量

目的:建立HPLC法测定补肾活血颗粒(淫羊藿、当归、白芍等)中芍药苷,阿魏酸,淫羊藿苷的含量方法。方法:采用二极管阵列检测器,色谱柱为Alltima C18(5μm,250 mm×4.6 mm),流动相为甲醇-0.1%磷酸,梯度洗脱,同时测定制剂中阿魏酸,芍药苷,淫羊藿苷的含量,检测波长分别为230 nm,320 nm,270 nm。结果:补肾活血颗粒中的芍药苷,阿魏酸,淫羊藿苷的平均回收率为96.7%,97.5%,99.6%,RSD为1.37%,3.13%,0.96%;在选择的HPLC条件下,芍药苷在0.159～3.970μg,阿魏酸在0.048～1.200μg,淫羊藿苷0.207～5.175μg范围呈良好的线性关系。结论:方法简便,可靠,可作为该制剂质量控制方法。

HPLC法测定当归芍药散中芍药苷的含量

目的：建立测定当归芍药散中芍药苷含量的方法,以期为控制该制剂的质量提供参考。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Symmetry C_（18）,流动相为乙腈-水（含0.1%磷酸）（14∶86,V/V）,流速为1.0 ml/min,检测波长为230 nm,柱温为20℃,进样量为20μl。结果：芍药苷检测质量浓度线性范围为10-80μg/ml（r=0.999 3）;精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈2%;加样回收率为98.3%-104.9%（RSD=2.0%,n=9）。结论：该方法简便、准确、专属性强,可用于测定当归芍药散中芍药苷的含量。

HPLC法测定活血胶囊中芍药苷、苦杏仁苷、川芎嗪和阿魏酸

目的建立HPLC测定活血胶囊(赤芍、桃仁、川芎、当归等)中芍药苷、苦杏仁苷、川芎嗪及阿魏酸的方法。方法 Agilent HC-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%甲酸水(25∶75)(v∶v);体积流量:0.8 mL/min;检测波长:芍药苷、苦杏仁苷230 nm;川芎嗪、阿魏酸315 nm。结果芍药苷、苦杏仁苷、川芎嗪及阿魏酸分别在0.033～3.3μg、0.025～2.5μg、0.019～1.875μg和0.023～2.25μg范围内线性关系良好(R=0.999 9),平均回收率分别为98.9%、99.4%、98.5%和98.3%。结论该方法准确、可靠,可行性及重复性良好,可作为活血胶囊的质量控制方法。

四物汤及其有效成分对大鼠肝脏主要药物代谢酶的影响

目的研究四物汤及其有效成分对大鼠肝脏P450酶的影响,从药物代谢酶角度为四物汤的配伍规律提供实验依据。方法大鼠口服灌胃四物汤10 g·kg-1·d-1及其有效成分果糖0.334 g·kg-1·d-1,阿魏酸0.002 g·kg-1·d-1,川芎嗪0.011 g·kg-1·d-1,芍药苷0.022 g·kg-1·d-1,连续给药1周后处死,用生理盐水灌流肝脏,制备肝微粒体,采用混合探针与肝微粒体体外孵育法考察四物汤及其有效成分对大鼠肝脏细胞色素P450酶的影响。利用实时定量聚合酶链式反应(Q-PCR)检测四物汤及其有效成分对大鼠肝脏P450 mRNA表达的影响,利用Western blot法检测四物汤及其有效成分对大鼠肝脏CYP2B1蛋白表达的影响。结果肝微粒体孵育结果显示,果糖对CYP1A2、CYP2B6、CYP2C9、CYP2D6酶活性具有抑制作用,阿魏酸对CYP2C9、CYP2B6酶活性具有抑制作用,川芎嗪对CYP1A2、CYP2C9、CYP2B6的酶活性具有抑制作用,芍药苷对CYP2D6、CYP2B6酶活性具有抑制作用。阿魏酸、果糖、芍药苷组对CYP2B1mRNA的表达具有抑制作用,与酶活性水平一致。4种单体成分对CYP2B1蛋白表达具有抑制作用。结论阿魏酸、果糖、芍药苷组在CYP450酶活性、mRNA基因转录水平及蛋白表达水平对CYP2B1均有抑制作用。

茵陈四苓颗粒质量标准研究

目的建立茵陈四苓颗粒（赤芍、栀子、茵陈、大黄等）的质量标准。方法采用薄层色谱法对茵陈四苓颗粒中茵陈和大黄进行定性鉴别；采用HPLC法测定茵陈四苓颗粒中芍药苷、栀子苷、大黄素和大黄酚的量。结果薄层色谱斑点清晰、分离效果较好、且阴性无干扰。芍药苷在0．458-3．66μg范围内呈良好的线性关系（r=0．9998），平均回收率为97．75％，RSD为1．13％；栀子苷在0．65～5．2μg范围内呈良好的线性关系（r=0．9998），平均回收率为98．27％，RSD为1．08％；大黄素在0．0015-0．015I,xg范围内呈良好的线性关系（r=0．9999），平均回收率为98．04％，RSD为0．68％；大黄酚在0．0028～0．028μg范围内呈良好的线性关系（r=0．9998），平均回收率为98．83％，RSD为1．38％。结论该方法准确可靠、专属性强、重复性好，可以作为控制茵陈四苓颗粒质量的有效方法。

HPLC同时测定六味地黄浓缩丸中4种主要成分的含量

目的:建立一种同时测定六味地黄浓缩丸中丹皮酚、芍药苷、马钱苷、没食子酸4种活性成分含量的方法。方法:应用高效液相法进行测定活性成分的含量,色谱柱为Alltima C18柱(250 mm×4.6 mm);流动相为乙腈-0.1%甲酸梯度洗脱;流速为0.5 mL/min;检测波长为242 nm;进样量5μL;柱温为30℃。结果:丹皮酚、芍药苷、马钱苷、没食子酸线性范围分别为0.199～3.98μg(r=0.999 8)、0.073～1.172μg(r=0.999 5)、0.145～2.316μg(r=0.999 5)、0.103～1.648μg(r=0.999 4);平均加样回收率分别为99.35%(RSD=1.22%)、98.16%(RSD=1.57%)、97.30%(RSD=1.77%)、98.96%(RSD=1.16%)。结论:本法方便、稳定、可靠,可用于六味地黄浓缩丸的质量控制。

芍药苷对辐射内皮细胞起保护作用的机制

目的观察芍药苷对辐射损伤内皮细胞保护作用的分子机制。方法 10Gy^(60)Coγ照射前1h给予内皮细胞芍药苷,采用逆转录聚合酶链反应、免疫组化以及免疫印迹等方法检测细胞间黏附分子1、血管细胞黏附分子1的表达。结果人脐静脉内皮细胞经10Gy^(60)Coγ照射后与正常组细胞相比,活性氧,丙二醛水平明显上升,谷胱甘肽,超氧化物歧化酶水平明显降低,黏附分子mRNA与蛋白的表达明显升高;随着芍药苷给药浓度的变化,加药组细胞中活性氧,丙二醛水平逐渐降低,谷胱甘肽,超氧化物歧化酶水平逐渐升高;免疫组化的结果显示芍药苷可降低辐射引起的黏附分子的表达,逆转录聚合酶链式反应检测显示芍药苷可降低辐射引起的黏附分子的mRNA的表达,Westernblot检测显示芍药苷可降低辐射引起的黏附分子的蛋白表达水平。分子信号通路的研究表明,芍药苷通过影响JNK通路进一步抑制激活物蛋白1与目的基因的结合。结论芍药苷通过抑制JNK细胞核激酶-激活物蛋白通路进而抑制黏附分子表达,这可能是芍药苷对辐射损伤内皮细胞保护作用的分子机制。

芍药甘草汤配伍意义的药动学研究

目的:通过检测给予芍药、甘草单方或合剂芍药甘草汤后,动物血浆中芍药苷、甘草次酸的药动学参数,探索芍药甘草汤配伍的合理性。方法:将芍药、甘草及芍药甘草汤制成水煎液,分别灌胃给予SD大鼠,采用HPLC/MS/MS法测定大鼠血浆中芍药苷、甘草次酸的血药浓度,并计算主要药动学参数。结果:与单方相比,给予芍药甘草汤后大鼠血浆中甘草次酸的达峰时间提前,峰浓度增加;芍药苷达峰浓度提高、相对生物利用度增加;两成分均出现半衰期缩短现象。结论:臣药甘草促进了君药芍药中芍药苷的吸收,提高了它的体内浓度与含量,这可能是复方芍药甘草汤解痉、镇痛、镇静等功效强劲有力的体内药动学依据。君药芍药提前助燃了臣药甘草中甘草次酸在体内出现的时间和数量,这也可能是复方芍药甘草汤抗溃疡、解痉、抗炎等功效迅速高效的体内药动学依据。本实验从药动学角度证明了芍药甘草汤配伍的合理性。

大孔树脂纯化赤芍提取物的工艺考察

[目的]考察赤芍提取物的大孔树脂纯化工艺。[方法]以芍药苷为指标,进行了树脂型号的选择,考察了上样量、洗脱溶剂的浓度及用量、树脂重复使用次数、再生后吸附力的恢复等。[结果]选择D101大孔树脂,上样量为树脂体积:生药=1:1g(v/w),洗脱溶剂4倍量为70%乙醇。[结论]工艺经济简单实用,可以应用于纯化赤芍提取物。

HPLC-PDA测定银屑灵流膏中5种成分含量

目的:建立银屑灵流膏(当归、赤芍、川芎等)中绿原酸、芍药苷、异秦皮啶、阿魏酸和落新妇苷5种成分含量的测定方法,控制产品质量。方法:采用HPLC-PDA法,色谱柱为Kromasil100-5C18,流动相为甲醇-0.1%冰醋酸,梯度洗脱,梯度为0～10min(10∶90～30∶70),10～40min(30∶70～40∶60);流速为1.0mL/min;检测波长绿原酸、异秦皮啶、阿魏酸为320nm,落新妇苷为289nm,芍药苷为230nm。结果:上述条件下5种成分分离良好,绿原酸在2.66～31.86μg/mL(r=0.9999),芍药苷在34.95～419.37μg/mL(r=0.9999);异秦皮啶在0.96～11.55μg/mL(r=0.9999);阿魏酸在0.82～9.84μg/mL(r=0.9999);落新妇苷在6.58～78.92μg/mL(r=0.9999)范围内线性关系良好,5种成分的加样回收率在96.6%～103.7%之间;RSD小于3.83%。结论:该方法方便、准确、灵敏度高,可作为银屑灵流膏中绿原酸、芍药苷、异秦皮啶、阿魏酸和落新妇苷5种成分的质量控制方法。

HPLC测定大柴胡颗粒中芍药苷的含量

目的建立大柴胡颗粒中芍药苷的高效液相含量测定方法。方法 C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:乙腈:0.1%冰醋酸梯度洗脱;流速:0.8mL/min,柱温:30℃,检测波长:230nm。结果芍药苷在160～502ng(r=0.9999)之间呈良好的线性关系,平均加样回收率为97.55%,RSD为2.03%。结论该方法简便、准确、专属性强,可以作为大柴胡颗粒中芍药苷含量测定方法。

HPLC-DAD同时测定通达颗粒中4种活性成分的含量

目的:建立同时测定通达颗粒(白芍、红花、黄芩等)中羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸和黄芩苷4种化学成分含量的高效液相色谱法。方法:采用Alltech Apollo C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);以甲醇(A)和质量分数为0.2%的磷酸水溶液(B)作流动相,梯度洗脱;柱温:30℃;流速:1.0mL/min;检测波长:230nm,315nm。结果:羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸和黄芩苷的线性范围分别为5.20～104mg/L(r=0.9991),25.6～512mg/L(r=0.9996),7.72～154.4mg/L(r=0.9995)和32.5～650mg/L(r=0.9995),平均加样回收率(n=9)分别为101.1%、99.6%、98.9%和101.9%,RSD分别为2.3%,1.8%,2.6%和1.3%。结论:所建立的方法准确、快速,可用于通达颗粒的质量控制。

清香片的喷雾干燥工艺研究

目的:对清香片(地黄、麦冬、白芍等)浸膏的喷雾干燥工艺进行优化。方法:以干粉得率和吸湿百分率为指标,优选了加入浸膏的辅料;采用正交设计法,以复方中的芍药苷的转移率和干粉得率作指标,确定了工艺参数:浸膏相对密度、进风温度和浸膏进料速度。结果:最佳工艺经过验证,其工艺参数为:浸膏中加入的辅料为6%的β-环糊精(β-CD),进风温度为190°C,浸膏进料速度为10 mL/m in,浸膏相对密度为1.12 g/mL。结论:该工艺合理,产品稳定性好,为工业化生产提供了实验依据。

HPLC法测定麻仁润肠丸中芍药苷的含量

目的:建立HPLC法测定麻仁润肠丸中芍药苷的含量。方法:色谱柱:Agilent Zorbax SB-C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水(25:75);流速:1.0 ml·min^(-1);检测波长:230 mm;柱温:室温;进样量:10μl。结果:芍药苷进样量在0.012～0.232 g范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为100.35%,RSD为1.47%(n=6)。结论:本方法操作快速、结果准确,可用于麻仁润肠丸中芍药苷的含量测定。

饱和流出式固相萃取法测定逍遥丸中芍药苷的含量

目的 采用饱和流出式固相萃取（SPE-HPLC）法制备逍遥丸供试品溶液，用高效液相色谱法测定其中芍药苷的含量。方法 ZorbaxSB-C18柱（4．6mm×250mm，5μm），以乙腈-水（20：80）为流动相，流速为1ml／min。检测波长为230nm。结果 芍药苷的测定在0．1232～1．232μg范围内线性关系良好，r=0．9999，平均回收率为99．16％，RSD为1．6％。结论 该方法简便快速、灵敏度高、有效除去药物基质保护色谱柱，可用于逍遥丸中芍药苷的含量测定。

桂枝汤类方化学成分含量研究

目的:建立HPLC法同时测定桂枝汤(桂枝、白芍、生姜、甘草和大枣)类方中原儿茶酸、香豆素、桂皮酸、桂皮醛、芍药苷和甘草酸含量的方法,并探索配伍对各成分含量的影响。方法:用SUPELCO Discovery C18柱,0.05%磷酸-乙腈为流动相,梯度洗脱;流速:1.0mL/min;柱温:30℃;检测波长为230nm和254nm;测定桂枝汤、桂枝加桂汤和桂枝加芍药汤中原儿茶酸、香豆素、桂皮酸、桂皮醛、芍药苷和甘草酸的含量,不同配伍之间的差异采用SPSS软件进行方差分析。结果:建立了同时测定原儿茶酸、香豆素、桂皮酸、桂皮醛、芍药苷和甘草酸含量的高效液相色谱法和相应的回归方程,与单味桂枝相比,三个类方中原儿茶酸含量增加、桂皮酸含量减少,桂枝汤和桂枝加桂汤中香豆素含量增加;与单味芍药相比,三个类方中芍药苷含量减少;与单味甘草相比,三个类方中甘草酸含量增加。结论:本方法专属、重复性好,可用于桂枝汤类方中原儿茶酸、香豆素、桂皮酸、桂皮醛、芍药苷和甘草酸的含量测定。不同配伍对各成分含量有影响,其影响非常复杂。

四物汤中四种成分的含量测定研究

目的建立四物汤中没食子酸、5-羟甲基糠醛、芍药苷、阿魏酸的含量测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱为ZorbaxSB-Aq;流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液(梯度洗脱);没食子酸、芍药苷的检测波长为230nm,5-羟甲基糠醛的检测波长为280nm,阿魏酸的检测波长为316nm;流速为1mL·min-1;柱温为40℃。结果没食子酸、5-羟甲基糠醛、芍药苷、阿魏酸的线性范围分别为0.0247～0.4944μg(r=0.9992)、0.01996～0.7984μg(r=0.9999)、0.1181～2.362μg(r=0.9997)、0.1262～0.5048μg(r=0.9996),加样回收率分别为100.22%(RSD=2.06%)、99.83%(RSD=2.70%)、101.37%(RSD=1.59%)、99.89%(RSD=2.29%)。结论四物汤中没食子酸与芍药苷来自白芍,5-羟甲基糠醛来自熟地黄与川芎,阿魏酸来自当归与川芎,为四物汤物质基础的研究提供了一定的参考。