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Antibody Levels and Infection Status of Pertussis in the Population under Pertussis Resurgence in Guangxi in 2018:A Cross-Sectional Survey
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作者 Liang Liang Qiuyun Deng +6 位作者 Lili Deng Jinghang Wei Shiyi Chen Yizhi Wei Yuyan Ma Yue Qin Wei Liu 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2024年第6期628-638,共11页
Objective Pertussis cases have increased markedly since 2018 in Guangxi.The aim of this study was to evaluate antibody levels and the infection status of pertussis in the resident population.Method A total of 10,215 s... Objective Pertussis cases have increased markedly since 2018 in Guangxi.The aim of this study was to evaluate antibody levels and the infection status of pertussis in the resident population.Method A total of 10,215 serum samples from residents were collected from August-November 2018 and tested for anti-pertussis IgG and toxin IgG using the enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).Results Of the collected samples,1,833(17.94%)tested positive for anti-pertussis IgG,with the median concentration of 16.06 IU/mL.Antibody level<10 IU/mL accounted for more than 60%in children under 4 years of age,but declined with age,whereas the percentages of the other three levels(10-40,40-50,and≥50 IU/mL)increased almost with age(P<0.001).Moreover,7,924 samples were selected for anti-pertussis toxin IgG,of which 653(8.24%)tested positive(≥40 IU/mL)with the median concentration of 5.89 IU/mL,and 204 participants(2.56%)had recent pertussis infection(≥100 IU/mL).Among the different age groups,the highest rates of positivity and recent infection were observed at 11-20 years of age,the lowest positivity rate at 5 years of age,and the lowest recent infection rate at 4 years of age(P<0.001,P=0.005,respectively).Conclusion The survey results showed that all age groups in Guangxi lacked immunity against pertussis,which was one of the main factors contributing to the resurgence of pertussis in 2018.In addition,the prevalence of pertussis is relatively high in Guangxi,and its incidence is seriously underestimated,especially in adolescents and adults. 展开更多
关键词 pertussis resurgence Anti-pertussis IgG Anti-pertussis toxin IgG Antibody level Infection status
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Pertussis toxin modulation of sodium channels in the central neurons of cyhalothrin-resistant and cyhalothrinsusceptible cotton bollworm, Helicoverpa armigera
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作者 QIANG ZHAO DE-LING KONG +3 位作者 BING-JUN HE YAN-QIANG LIU XIAN-LIN FAN AN-XI LIU 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2007年第2期107-115,共9页
Pertussis toxin (FIX) inhibits the activation of the α-subunit of the inhibitory heterotrimeric G-proteins (Cαi/o) and modulates voltage-gated sodium channels, which may be one of the primary targets of pyrethro... Pertussis toxin (FIX) inhibits the activation of the α-subunit of the inhibitory heterotrimeric G-proteins (Cαi/o) and modulates voltage-gated sodium channels, which may be one of the primary targets of pyrethroids. To investigate the potential mechanisms of agricultural pests resistance to pyrethroid insecticides, we examined the modulations by PTX on sodium channels in the central neurons of the 3rd-4th instar larvae of cyhalothrin-resistant (Cy-R) and cyhaiothrin-susceptible (Cy-S) Helicoverpa armigera by the whole-cell patch-clamp technique. The isolated neurons were cultured for 12-16 h in an improved L15 insect culture medium with or without PTX (400 ng/mL). The results showed that both the Cy-R and Cy-S sodium channels exhibited fast kinetics and tetrodotoxin (TTX) sensitivity. The Cy-R sodium channels exhibited not only altered gating properties, including a 8.88-mV right shift in voltage-dependent activation (V0.5act) and a 6.54-mV right shift in voltage-dependent inactivation (V0.5inact), but also a reduced peak in sodium channel density (Ⅰdensity) (55.2% of that in Cy-S neurons). Cy-R sodium channels also showed low excitability, as evidenced by right shift of activation potential (Ⅴacti) by 5-10 mV and peak potential (Ⅴpcak) by 20 mV. FIX exerted significant effects on Cy-S sodium channels, reducing sodium channel density by 70.04%, right shifting V0.5act by 14.41 mV and V0.5inact by 9. 38 mV. It did not cause any significant changes of the parameters mentioned above in the Cy-R sodium channels. The activation time (Tpeak) from latency to peak at peak voltage and the fast inactivation time constant (τinact) in both Cy-S and Cy-R neurons were not affected. The results suggest that cotton bollworm resistant to pyrethroid insecticides involves not only mutations and allosteric alterations of voltage-gated sodium channels, but also might implicate perturbation of PTX-sensitive Gαi/o-COupled signaling Wansduction pathways. 展开更多
关键词 CYHALOTHRIN G proteins Helicoverpa armigera insecticide resistant NEURON pertussis toxin sodium channels whole-cell patch-clamp technique
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SDF-1/CXCR4在骨髓增生异常综合征患者中的生物学作用 被引量:1
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作者 杨瑞 浦杰 +7 位作者 郭娟 许峰 张征 赵佑山 张曦 顾树程 常春康 李晓 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第6期1432-1437,共6页
本研究主要探讨骨髓增生异常综合征(MDS)及白血病患者中基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在细胞凋亡、迁移和黏附中的作用及相关的信号转导。选取37例初发MDS患者〔低危组(IPSS≤1.0)22例,高危组(IPSS≥1.5)15例〕、10例初发白血病患者及14例... 本研究主要探讨骨髓增生异常综合征(MDS)及白血病患者中基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在细胞凋亡、迁移和黏附中的作用及相关的信号转导。选取37例初发MDS患者〔低危组(IPSS≤1.0)22例,高危组(IPSS≥1.5)15例〕、10例初发白血病患者及14例良性贫血患者(作为对照组),通过流式细胞术检测骨髓CD34+细胞表面CXCR4的表达水平及CD34+细胞的凋亡情况。选取4例低危MDS患者和5例高危MDS患者,通过微孔细胞迁移实验检测SDF-1对细胞的趋化作用。通过CCK-8法检测SDF-1对细胞之间黏附能力的影响。结果表明,低危MDS组骨髓内CD34+细胞的凋亡率明显高于高危MDS组(21.33%vs 7.27%,p<0.001),同样低危MDS组骨髓内CD34+细胞的凋亡率明显高于白血病组(21.33%vs 7.53%,p<0.001),未发现CD34+细胞的凋亡率与患者年龄性别有相关性。SDF-1能够促进高表达CXCR4患者的细胞黏附于基质细胞并能诱导该细胞的迁移,诱导细胞形态发生极化,上述作用可以被G蛋白抑制剂pertussis toxin、PI3K抑制剂wortmannin及CXCR4拮抗剂AMD3100明显抑制;而对低表达CXCR4的患者细胞则无上述抑制作用。结论:SDF-1/CXCR4通过PI3K信号通路提高细胞的迁移及黏附能力,发挥抗凋亡作用,上述作用可以被PI3K途径抑制剂和G蛋白抑制剂所阻断。 展开更多
关键词 SDF-1/CXCR4 骨髓增生异常综合征 AMD3100 pertussis toxin WORTMANNIN
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抗百日咳毒素单克隆抗体的纯化及应用研究 被引量:13
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作者 徐颖华 张庶民 +1 位作者 侯启明 雷殿良 《药品评价》 CAS 2005年第2期113-116,共4页
目的纯化抗百日咳毒素(PT)的单克隆抗体(M cAb),并建立特异、准确的PT定量检测方法。方法采用辛酸-硫酸铵沉淀法和A蛋白亲和层析法纯化杂交瘤细胞腹水,并经阻断抑制试验筛选识别不同表位的M cAb,用于建立定量检测PT的ELISA方法。结果经S... 目的纯化抗百日咳毒素(PT)的单克隆抗体(M cAb),并建立特异、准确的PT定量检测方法。方法采用辛酸-硫酸铵沉淀法和A蛋白亲和层析法纯化杂交瘤细胞腹水,并经阻断抑制试验筛选识别不同表位的M cAb,用于建立定量检测PT的ELISA方法。结果经SDS-PAGE分析,纯化M cAb的纯度均在90%以上,选择二株识别不同抗原位点M cAbs,应用于检测PT的双抗夹心ELISA方法,灵敏度为2.14μg/L,批内变异系数5.85%,批间变异系数9.27%,平均回收率为108.12%,应用该法测定了国内几大生产厂家送检的无细胞百日咳疫苗原液中PT含量。结论获得了纯度高的抗PT M cAb,建立了一种特异、准确的定量检测PT的ELISA方法,并用于无细胞百日咳疫苗原液中PT含量的检测,为无细胞百日咳疫苗的质量控制提供了有力的手段。 展开更多
关键词 单克隆抗体 纯化 SDS-PAGE分析 百日咳疫苗原液 百日咳毒素(PT) 夹心ELISA方法 无细胞百日咳疫苗 定量检测方法 辛酸-硫酸铵 变异系数 杂交瘤细胞 亲和层析法 McAbs 平均回收率 抑制试验 抗原位点 生产厂家 质量控制 A蛋白
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百日咳毒素S1亚单位的表达及其免疫原性研究 被引量:6
5
作者 乔瑞洁 杨晓明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2003年第4期205-207,224,共4页
目的 研究百日咳毒素S1(Pertussis toxin s1 subunit)亚单位在大肠杆菌中的表达及其免疫学特性。方法 采用PCR法从百日咳杆菌染色体中获得S1亚单位的结构基因并克隆到质粒pCR2.1-TOPO中,转化宿主菌DH5α和TOPO10。用抗S1的单抗1B7检测... 目的 研究百日咳毒素S1(Pertussis toxin s1 subunit)亚单位在大肠杆菌中的表达及其免疫学特性。方法 采用PCR法从百日咳杆菌染色体中获得S1亚单位的结构基因并克隆到质粒pCR2.1-TOPO中,转化宿主菌DH5α和TOPO10。用抗S1的单抗1B7检测表达产物。用粗制的重组S1(rS1)免疫小鼠,做主动免疫保护实验。rS1免疫家兔,检测rS1的免疫原性。并以家兔免疫血清在小鼠进行被动免疫保护实验。结果 rS1可在大肠杆菌中稳定高效表达,表达量分别占细胞总蛋白量的14%(DH5α)和24.2%(TOPO10)。rS1能被1B7识别,在小鼠主动免疫实验中,保护率可达56.3%。家兔免疫血清ELISA效价为1:32 000。抗rS1血清对小鼠被动的免疫保护率为100%。结论 rS1具有良好免疫原性,为百日咳基因工程疫苗或亚单位疫苗研制及百日咳免疫机理研究提供了依据。 展开更多
关键词 百日咳毒素 S1亚单位 表达 免疫原性 百日咳扦茵 被动保护
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内皮素对培养心肌细胞内游离钙浓度的作用 被引量:5
6
作者 王庭槐 吴滨 +1 位作者 朱小南 潘敬运 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期391-396,共6页
实验用培养新生SD 大鼠心室肌细胞, 以Fura2/AM 荧光指示剂负载检测心肌细胞内游离钙浓度([Ca2 + ]i) 的变化, 探讨内皮素1(ET1) 对[Ca2 + ]i 的作用及其机制。结果显示:ET1 引起心肌细... 实验用培养新生SD 大鼠心室肌细胞, 以Fura2/AM 荧光指示剂负载检测心肌细胞内游离钙浓度([Ca2 + ]i) 的变化, 探讨内皮素1(ET1) 对[Ca2 + ]i 的作用及其机制。结果显示:ET1 引起心肌细胞[Ca2 + ]i 升高有两个时相, 瞬时相和持续相。ET1 诱导的瞬时相[Ca2 + ]i 升高呈浓度依赖性, 预先用ETA 特异性受体阻断剂BQ123 处理, 可阻断ET1 引起的[Ca2 + ]i 升高,提示上述作用是通过ETA 受体介导的; 除去胞外Ca2 + 后,ET1 仅引起瞬时相的[Ca2 + ]i 升高,持续相消失;PKC 的激活剂PMA预处理, 能明显减弱ET1 诱导的瞬时相[Ca2 + ]i 的升高。氨氯吡咪和硝苯吡啶不能阻断ET1 诱发的[Ca2 + ]i变化; 用百日咳毒素(PTX) 预处理细胞24 h ,ET1仍可诱导瞬时相的[Ca2 + ]i升高, 但持续相消失。以上结果表明: 瞬时相[Ca2 + ]i 升高可能与百日咳毒素不敏感的G蛋白有关, 持续相主要由胞外Ca2 + 内流引起的, 并与PTX 敏感G蛋白有关。蛋白激酶C 在该效应中起重要作用,Na+ /H+ 交换在ET1 引起的[Ca2 + ]i ? 展开更多
关键词 内皮素-1 心肌细胞
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1-磷酸鞘氨醇对豚鼠心室肌细胞钙电流的影响 被引量:3
7
作者 葛敬岩 赵春燕 +3 位作者 张文杰 赵明 孙亚芹 钟国赣 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期52-54,共3页
目的 :研究 1-磷酸鞘氨醇 (S1P)对心室肌细胞膜钙离子通道的作用及机制。方法 :L angendorff离体心脏逆向灌流法分离豚鼠心室肌细胞 ,随机选取心室肌细胞分为正常对照组和 S1P0 .1、 1.0和 10 .0 μmol· L- 1 剂量组以及百日咳毒素... 目的 :研究 1-磷酸鞘氨醇 (S1P)对心室肌细胞膜钙离子通道的作用及机制。方法 :L angendorff离体心脏逆向灌流法分离豚鼠心室肌细胞 ,随机选取心室肌细胞分为正常对照组和 S1P0 .1、 1.0和 10 .0 μmol· L- 1 剂量组以及百日咳毒素 (PTX) 0 .1m g· L- 1 +S1P1.0 μm ol· L- 1 组。采用全细胞膜片钳技术分别记录各组心室肌细胞 Ca2 + 电流。结果 :1.0 μmol· L- 1 的 S1P使豚鼠心室肌细胞 Ca2 + 电流从给药前的 (0 .2 5 6± 0 .0 30 ) m V增加到(0 .36 7± 0 .0 90 ) m V (P<0 .0 5 ) ,10 .0 μm ol· L- 1 的 S1P使 Ca2 + 电流从给药前的 (0 .2 4 2± 0 .0 30 ) m V增加到(0 .36 4± 0 .0 6 0 ) m V (P<0 .0 1) ,而加入 G-蛋白耦联受体阻断剂 PTX后 ,S1P对 Ca2 + 通道电流的作用与给药前比较差异无显著性。结论 :S1P通过与 G-蛋白耦联的细胞膜受体介导促进豚鼠心室肌细胞 Ca2 + 通道的开放 ,并具有一定的剂量依赖性。 展开更多
关键词 1-磷酸鞘氨醇 膜片钳术/方法 心室肌细胞 钙通道 百日咳毒素类
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百日咳毒素的等电点测定及层析分离 被引量:2
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作者 刘国安 杨晓明 +1 位作者 葛瑞昌 何长民 《西北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2004年第4期68-70,共3页
百日咳毒素是百日咳杆菌(Bordetellapertussis)产生的一种主要毒力因子,也是百日咳菌苗的主要成分之一.用等电聚焦法测得其等电点为pH6 8.将百日咳杆菌液体培养液在等电点盐析后,通过DEAE-Sephadex-A50阴离子交换剂进一步分离纯化了百... 百日咳毒素是百日咳杆菌(Bordetellapertussis)产生的一种主要毒力因子,也是百日咳菌苗的主要成分之一.用等电聚焦法测得其等电点为pH6 8.将百日咳杆菌液体培养液在等电点盐析后,通过DEAE-Sephadex-A50阴离子交换剂进一步分离纯化了百日咳毒素.ELISA测定其比活力表明,3批样品的提纯倍数分别为1 47,1 37和1 36. 展开更多
关键词 百日咳毒素 等电点 DEAE-Sephadex-A50
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百日咳毒素减轻实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型炎症反应的机制研究 被引量:4
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作者 王进昆 高锋 +3 位作者 谢姝姮 陈雪菲 王崇谦 汤志伟 《国际神经病学神经外科学杂志》 北大核心 2016年第2期112-118,共7页
目的探讨百日咳毒素(PTx)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型的作用及机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、EAE组和PTx治疗组,每组12只。EAE组和PTx治疗组用MOG 35-55诱导EAE模型。PTx组于建模后第7天给予腹腔注射1000 ng... 目的探讨百日咳毒素(PTx)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠模型的作用及机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、EAE组和PTx治疗组,每组12只。EAE组和PTx治疗组用MOG 35-55诱导EAE模型。PTx组于建模后第7天给予腹腔注射1000 ng的PTx。随后观察两组临床症状,组织学染色评价炎症反应和脱髓鞘改变,并观察VEGF和血管新生现象,并用Western blot检测脊髓VEGF和Collagen IV的整体水平。在体外,用PTx刺激原代培养的神经元,评价PTx对在体外对神经元VEGF表达的影响。结果 PTx能减轻EAE模型的炎症反应和脱髓鞘改变,在大脑PTx将炎症评分从(3.4±0.55)分降至(1.2+0.45)分,P<0.01;脱髓鞘评分从(3.6+0.55)分降至(1.4+0.55)分,P<0.01。在脊髓PTx将炎症评分从(3.6+0.55)分降至(1.0+0.71)分,P<0.01;脱髓鞘评分从(4.2+0.84)分降至(1.4+0.55)分,P<0.01。Western blot检测显示,与正常对照组比较,EAE组VEGF下降49.0%(P<0.01),Collagen IV下降36.0%(P<0.01);PTx治疗后,与EAE组比较,VEGF上升59.5%(P<0.01),Collagen IV上升45.0%(P<0.01)。体外实验显示,PTx治疗24 h后VEGF在神经元上的表达增加,与正常对照相比,100 ng/ml组上调34.6%(P<0.01),400 ng/ml组上调76.9%(P<0.01)。结论 PTx可上调神经元内源VEGF的表达和血管新生现象,继而在EAE模型中起保护作用。 展开更多
关键词 百日咳毒素 多发性硬化 血管内皮生长因子 神经元 血管新生 小鼠
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无细胞百日咳疫苗生产用培养基的改进和培养条件优化 被引量:2
10
作者 梁疆莉 姬秋彦 +6 位作者 罗娜 姬光 高娜 马艳 史荔 孙明波 衡燮 《贵州医科大学学报》 CAS 2018年第10期1232-1236,共5页
目的:改进无细胞百日咳疫苗生产用培养基并优化培养条件。方法:用不同浓度溶血(0. 1%)赫氏琼脂及酸水解酪蛋白制备百日咳活性炭培养基,选择最优培养条件;使用百日咳活性炭培养基成功复苏菌种后,优化传代代次和培养时间,评价百日咳活性... 目的:改进无细胞百日咳疫苗生产用培养基并优化培养条件。方法:用不同浓度溶血(0. 1%)赫氏琼脂及酸水解酪蛋白制备百日咳活性炭培养基,选择最优培养条件;使用百日咳活性炭培养基成功复苏菌种后,优化传代代次和培养时间,评价百日咳活性炭培养基替代羊血包姜氏培养基的可行性;用酸水解酪蛋白代替自制50%酸水解酪蛋白制备改良SS液体培养基,并用ELISA、SDS-PAGE电泳和CHO细胞簇集等方法评价对菌种的培养效果。结果:溶血(0. 1%)赫氏琼脂的加入量为33. 2g/L、酸水解酪蛋白加入量为8g/L时,菌苔生长最快;百日咳活性炭培养基培养第1代72 h、第2代48 h、第3代48 h、第4代24 h和第1代72 h、第2代36 h、第3代24 h的血凝(HA)和UV600均较高,这两组细菌生长状态较好;酸水解酪蛋白制备的百日咳活性炭培养基在优化条件后复苏菌种生长良好,和羊血包姜氏培养基没有明显差异; 8g/L酸水解酪蛋白制备的改良SS液体培养基所得菌量优于50%酸水解酪蛋白制备培养基(P=0. 001),改良SS液体培养基培养所得百日咳毒素纯度、产量和CHO细胞簇集活性均较好。结论:使用酸水解酪蛋白的百日咳活性炭培养基和改良SS液体培养基所得的百日咳杆菌纯度、产量、活性均较高,适用于无细胞百日咳组分疫苗的生产。 展开更多
关键词 博德特菌 百日咳 百日咳毒素 培养基 仓鼠卵巢细胞 酶联免疫吸附测定
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MK-801和Nimodipine对感染性脑水肿的影响 被引量:1
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作者 陈立华 杨于嘉 +4 位作者 袁贤瑞 刘运生 曹美鸿 陈翔 陶永光 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期116-118,共3页
目的和方法:观察百日咳菌液诱导的感染性脑水肿不同时间大鼠脑含水量和伊文思兰(EB)含量的变化,以及MK-801预处理和尼莫地平(nimodipine)对感染性脑水肿脑含水量和EB含量的影响。结果:感染性脑水肿在注菌后... 目的和方法:观察百日咳菌液诱导的感染性脑水肿不同时间大鼠脑含水量和伊文思兰(EB)含量的变化,以及MK-801预处理和尼莫地平(nimodipine)对感染性脑水肿脑含水量和EB含量的影响。结果:感染性脑水肿在注菌后30min,脑含水量和EB含量已明显升高,应用MK-801预处理或nimodipine治疗后,脑组织含水量和EB含量显著降低。 展开更多
关键词 百日咳毒素类 脑水肿 尼莫地平 MK-801
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百日咳毒素单克隆抗体的制备及其ELISA定量检测方法的建立 被引量:3
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作者 詹骞 刘志飞 +4 位作者 彭祥兵 宁浩然 陈雯 张爱华 杨晓明 《微生物学免疫学进展》 2013年第2期19-23,共5页
目的制备百日咳毒素(Pertussis toxin,PT)的单克隆抗体,并建立双抗体夹心ELISA用于检测PT的含量。方法采用杂交瘤技术制备PT的单抗,并对其进行鉴定;优化ELISA系统反应条件,建立PT双抗体夹心ELISA定量检测方法,并对其进行精密性及准确性... 目的制备百日咳毒素(Pertussis toxin,PT)的单克隆抗体,并建立双抗体夹心ELISA用于检测PT的含量。方法采用杂交瘤技术制备PT的单抗,并对其进行鉴定;优化ELISA系统反应条件,建立PT双抗体夹心ELISA定量检测方法,并对其进行精密性及准确性验证;应用建立的方法检测武汉生物制品研究所有限责任公司(简称武汉公司)73批无细胞百日咳疫苗生产中间样品中的PT含量。结果获得4株稳定的抗PT杂交瘤细胞株,抗体亚型均为IgG2a,抗体腹水ELISA效价达1∶106以上,均能与PT发生特异反应,而与百日咳丝状血凝素、白喉和破伤风类毒素未发生交叉反应;建立的双抗体夹心ELISA的线性检测范围在2.50~80.00 ng/mL之间,酶标板内和板间变异系数均小于10%;PT的高、中、低浓度的回收率分别为97.41%、106.60%和89.98%;73批无细胞百日咳疫苗生产中间样品中的PT质量浓度在50.00~150.00 ng/mL之间波动,说明中间产物的批间一致性及稳定性趋势良好。结论已成功制备了抗PT的单抗,并建立了精密性和准确性均较好的定量检测PT的双抗体夹心ELISA,可用于无细胞百日咳疫苗生产中PT的定量检测。 展开更多
关键词 百日咳毒素 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验
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百日咳患儿血清PT-IgG水平相关因素分析 被引量:2
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作者 甘川 吴小英 许红梅 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期263-267,共5页
目的探讨影响百日咳患儿血清百日咳毒素抗体(PT-IgG)水平的相关因素。方法回顾性分析2018年4月1日至2019年7月31日住院治疗的百日咳患儿的临床资料。分析不同病程、百日咳疫苗接种剂次、发病年龄、疾病严重程度对于百日咳患儿PT-IgG水... 目的探讨影响百日咳患儿血清百日咳毒素抗体(PT-IgG)水平的相关因素。方法回顾性分析2018年4月1日至2019年7月31日住院治疗的百日咳患儿的临床资料。分析不同病程、百日咳疫苗接种剂次、发病年龄、疾病严重程度对于百日咳患儿PT-IgG水平的影响。结果共纳入638例患儿,其中未接种组313例,男177例、女136例,中位年龄78.0(52.0~125.0)天;接种组325例,男163例、女162例,中位年龄232.0(144.0~483.0)天。未接种组患儿不同采样时病程(≤14 d、15~21d、>21 d)组间不同PT-IgG水平分布差异有统计学意义(P<0.01);病程>21 d组PT-IgG≥80 IU/mL的比例较高。接种组患儿不同采样时病程组间不同PT-IgG水平分布差异有统计学意义(P<0.01);病程15~21d组和>21 d组PT-IgG≥80 IU/mL的比例较高。不同疫苗接种剂次组之间PT-IgG水平的差异有统计学意义(P<0.01);随着疫苗接种剂次增加,PT-IgG水平逐渐增高。未接种组中,无论重症组还是普通组,不同采样时病程之间PT-IgG水平的差异均有统计学意义(P<0.05)。接种组中,普通组不同采样时病程之间PT-IgG水平的差异有统计学意义(P<0.05)。结论我国百日咳鲍特菌急性感染期患儿PT-IgG不高,59.9%低于20 IU/mL;PT-IgG水平受到疫苗接种剂次及采样时病程的影响。 展开更多
关键词 百日咳 疫苗 抗百日咳杆菌毒素抗体IgG
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百日咳毒素S1亚单位突变体在大肠杆菌中的表达及纯化 被引量:1
14
作者 张晓丽 邹全明 +1 位作者 章金勇 张卫军 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期264-266,270,共4页
目的克隆百日咳毒素S1亚单位,获得其突变体(S1/9K-129G,rS1),构建原核表达系统,并鉴定融合蛋白的特异性。方法采用PCR和重叠延伸扩增得到突变体,将其与pMD18-T连接,转化至大肠杆菌DH5α,筛选得到阳性重组克隆载体pMD18-T-rS1,经双酶切得... 目的克隆百日咳毒素S1亚单位,获得其突变体(S1/9K-129G,rS1),构建原核表达系统,并鉴定融合蛋白的特异性。方法采用PCR和重叠延伸扩增得到突变体,将其与pMD18-T连接,转化至大肠杆菌DH5α,筛选得到阳性重组克隆载体pMD18-T-rS1,经双酶切得到rS1活性结构域编码片段。将其插入pQE-30载体中,转化大肠杆菌M15株,经IPTG诱导表达。表达产物经镍离子柱纯化,并进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果PCR及重叠延伸获得了约700bp的目的基因片段,并获得阳性重组表达载体克隆,表达产物为相对分子质量27000左右的蛋白,Western blot检测能与兔抗百日咳毒素多价抗血清发生反应。结论成功表达并纯化了百日咳毒素S1亚单位突变体,为研制百日咳疫苗候补抗原的相关分子免疫学研究奠定了基础。 展开更多
关键词 百日咳毒素 S1亚单位 突变体 原核表达
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百日咳毒素对棉铃虫神经细胞电压门控钠、钙通道的调节作用 被引量:3
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作者 李杰 贺秉军 刘安西 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期26-30,共5页
用膜片钳技术研究了百日咳毒素对离体培养的棉铃虫幼虫中枢神经细胞电压门控钠、钙通道的影响。结果表明,对照组细胞钠通道在-50^-40mV激活,在-20mV左右电流达到最大值,在记录的20min内,电流-电压关系曲线(I-V)和电流幅值未有明显变化;... 用膜片钳技术研究了百日咳毒素对离体培养的棉铃虫幼虫中枢神经细胞电压门控钠、钙通道的影响。结果表明,对照组细胞钠通道在-50^-40mV激活,在-20mV左右电流达到最大值,在记录的20min内,电流-电压关系曲线(I-V)和电流幅值未有明显变化;细胞与百日咳毒素预孵后,钠通道在-40mV左右激活,电流在0mV左右达到最大值,在记录过程中,激活电压和峰值电压继续向正方向移动约10mV,电流持续下降。对照组钙通道在-40^-30mV激活,在0mV左右电流达峰值;经百日咳毒素处理后,I-V曲线向负电位方向移动约10mV,在记录过程中,I-V曲线继续向负电位方向移动,电流的衰减(rundown)现象比对照组严重,此外,百日咳毒素处理引起钙电流达到峰值的时间显著延长。结果提示,百日咳毒素敏感的G蛋白(Gi)可能通过直接途径或间接途径调节棉铃虫神经细胞钠、钙通道的电压敏感性和开放几率以及钙通道由备用态向激活态转化的速度。同时,经百日咳毒素处理后钠通道的I-V曲线与抗性棉铃虫I-V曲线非常相似,可能暗示Gi蛋白在棉铃虫抗药性形成中发挥作用。 展开更多
关键词 棉铃虫 Na通道 Ca2通道 Gi蛋白 百日咳毒素 全细胞膜片钳
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κ-阿片肽受体激活抑制内皮素-1诱导的心肌细胞肥大与细胞外信号调节激酶通路有关 被引量:1
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作者 邢玲 冀建伟 +3 位作者 李桃英 赵继玲 李志业 杨育红 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期842-847,共6页
目的讨论κ-阿片肽受体(kappa-opioid receptor,κ-OR)激活后通过细胞外信号调节激酶通路对内皮素-1(vascular endothelin-1,ET-1)诱导的心肌细胞肥大的抑制作用。方法体外原代培养大鼠乳鼠心肌细胞,ET-110 nmol·L^(-1)诱导心肌细... 目的讨论κ-阿片肽受体(kappa-opioid receptor,κ-OR)激活后通过细胞外信号调节激酶通路对内皮素-1(vascular endothelin-1,ET-1)诱导的心肌细胞肥大的抑制作用。方法体外原代培养大鼠乳鼠心肌细胞,ET-110 nmol·L^(-1)诱导心肌细胞肥大,观察κ-OR激动剂(U50488H)1μmol·L^(-1)对心肌细胞的作用,并探讨细胞外信号调节激酶1/2特异性抑制剂(U0126)1μmol·L^(-1)、蛋白激酶C(PKC)抑制剂Ro-31-8220(50 nmol·L^(-1))、百日咳毒素(pertussis toxin,PTX)5 mg·L^(-1)、κ-OR拮抗剂nor-binaltorphimine(NOR-BNI,1μmol·L^(-1))存在时,κ-OR的激活对心肌细胞肥大的影响及相关机制。心肌细胞的体积应用消化分离法及计算机图像分析系统测定;心肌细胞的心钠素(atrial natriuretic peptide,ANP)的mRNA相对表达利用RT-PCR法测定;心肌细胞ERK1/2的相对表达水平应用Western blot法测定;心肌细胞的形态变化利用相差显微镜观察。结果ET-1可以使心肌细胞体积增大,ANPmRNA表达增多,ERK1/2表达增多;与ET-1(10 nmol·L^(-1))组相比,U50488H(1μmol·L–1)可明显使ET-1诱导的心肌细胞体积变小,ANPmRNA表达减少,ERK1/2表达减少,U0126(1μmol·L^(-1))、Ro-31-8220(50 nmol·L^(-1))与其抑制程度相似,三者差异无显著性;当用U0126(1μmol·L^(-1))、Ro-31-8220(50 nmol·L^(-1))预处理时U50488H(1μmol·L^(-1))的抑制现象部分消失,但当用PTX(5 mg·L^(-1))、NOR-BNI(1μmol·L^(-1))(κ-OR受体拮抗剂)预处理时U50488H(1μmol·L^(-1))的抑制现象基本消失。结论κ-OR激动剂U50488H能抑制内皮素-1诱导的大鼠心肌细胞肥大,其作用机制主要与其能抑制胞外信号调节激酶通路的上游元件PKC的激活有关。 展开更多
关键词 心肌肥厚 Κ-阿片受体 内皮素-1 百日咳毒素 细胞外信号调节激酶
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G蛋白βγ亚基介导的磷脂酶A_2激活与β-AR失敏的关系 被引量:1
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作者 肖雪媛 葛学铭 +1 位作者 安明榜 吕宝璋 《北京师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期830-834,共5页
研究异丙基肾上腺素 (ISO)所致的体外培养大鼠肺 β 肾上腺素受体 ( β AR)失敏的机理 ,首先观察了不同浓度和不同作用时间的ISO对大鼠肺 β AR失敏的影响 ,可见ISO所致 β AR失敏呈良好的量 效和时 效关系 ;ISO对磷脂酶A2 (PLA2 )激... 研究异丙基肾上腺素 (ISO)所致的体外培养大鼠肺 β 肾上腺素受体 ( β AR)失敏的机理 ,首先观察了不同浓度和不同作用时间的ISO对大鼠肺 β AR失敏的影响 ,可见ISO所致 β AR失敏呈良好的量 效和时 效关系 ;ISO对磷脂酶A2 (PLA2 )激活也呈时间和剂量依赖性 ,且PLA2 激活比 β AR失敏所需的ISO剂量低 .上述现象可分别被PLA2 特异性抑制剂对溴乙酰酚 (PBA)、地塞米松 (Dex)、Gi蛋白灭活剂百日咳毒素 (PTX)、抗Giα血清和抗Gβγ血清所抑制 ;而 5′ O 3 硫代三磷酸鸟甘 (GTP γ S)则能加重ISO所致β AR失敏和PLA2 激活 .以上结果提示 :体外培养的大鼠肺 β AR在激动剂长时期作用下 ,受体发生的失敏与G蛋白介导的PLA2 激活有关 ,此时β AR的信号转导途径由原来腺苷酸环化酶正偶联转变为G蛋白 βγ亚基介导的PLA2 展开更多
关键词 Β-肾上腺素能受体 磷脂酶A 对溴乙酰酚 失酶机理
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重组百日咳毒素S1亚单位的纯化及免疫原性 被引量:2
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作者 杨晓明 乔瑞洁 《微生物学免疫学进展》 2003年第4期24-27,共4页
将重组百日咳毒素S1亚单位基因的质粒在DH5α和TOP10两株大肠杆菌中进行表达 ,并对表达产物进行了初步纯化。粗制的rS1免疫家兔所得血清 ,用HP—PT及 1B7—PT包被的ELISA测定效价 ,并做被动免疫保护试验。抗PT的抗体滴度为 1∶32 0 0 0... 将重组百日咳毒素S1亚单位基因的质粒在DH5α和TOP10两株大肠杆菌中进行表达 ,并对表达产物进行了初步纯化。粗制的rS1免疫家兔所得血清 ,用HP—PT及 1B7—PT包被的ELISA测定效价 ,并做被动免疫保护试验。抗PT的抗体滴度为 1∶32 0 0 0。该抗rSl血清在小鼠被动免疫保护试验中 ,对百日咳杆菌 1832 3毒株进行脑腔攻击的被动免疫保护作用达到 10 0 %。证明rS1亚单位具有良好的抗原性和免疫原性 ,并与天然S1具有相同的抗原表位。 展开更多
关键词 百日咳杆菌 百日咳毒素S1亚单位 免疫保护 纯化 基因重组 大肠杆菌
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百日咳杆菌毒素S_1亚单位与谷胱甘肽S-转移酶融合基因在大肠杆菌中表达及其一步纯化 被引量:2
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作者 郑波 程继忠 +3 位作者 皇甫永穆 海涛 戴五星 王建平 《同济医科大学学报》 CSCD 1999年第1期17-20,共4页
研究了百日咳杆菌毒素S1亚单位与谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白(GST-S1)在大肠杆菌(E.coli)中的表达,并一步纯化了重组GST-S1。首先用聚合酶链反应(PCR)扩增出长度为560bp的编码百日咳毒素S1亚单位... 研究了百日咳杆菌毒素S1亚单位与谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白(GST-S1)在大肠杆菌(E.coli)中的表达,并一步纯化了重组GST-S1。首先用聚合酶链反应(PCR)扩增出长度为560bp的编码百日咳毒素S1亚单位的DNA片段。该片段比原编码S1蛋白的DNA片段在其3′端缺失了138个碱基,将其按正确的阅读框克隆入质粒pGEX中GST基因的3′端,构成GST-S1融合基因表达载体pGEX-S1。经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达和十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),可见所表达的GST-S1融合蛋白存在于细菌上清,为可溶性蛋白。分子量为49ku处有明显的蛋白表达带。用谷胱甘肽(GSH)亲和层析系统,一步纯化出GST-S1融合蛋白。最后经凝血酶的消化,得到23ku的重组百日咳杆菌毒素S1亚单位蛋白。 展开更多
关键词 百日咳杆菌毒素 S1亚单位 基因表达 疫苗
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Gi蛋白βγ亚单位在氨甲酰胆碱所致CCL137细胞磷脂酰A_2激活中的作用 被引量:2
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作者 吕宝璋 田英 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期47-51,共5页
为研究氨甲酰胆碱(CCh)所致CCL137细胞中毒蕈碱型乙酰胆碱受体(mAChR)失敏时磷脂酶A2(PLA2)激活的机理,应用百日咳杆菌毒素(PTX),抗-βγ血清和纯化的Giβγ,分别观察了它们对PLA2活性的影响... 为研究氨甲酰胆碱(CCh)所致CCL137细胞中毒蕈碱型乙酰胆碱受体(mAChR)失敏时磷脂酶A2(PLA2)激活的机理,应用百日咳杆菌毒素(PTX),抗-βγ血清和纯化的Giβγ,分别观察了它们对PLA2活性的影响.当在培养液中加入PTX或抗-βγ血清时,可见CCh不再能引起CCL137细胞中mAChR失敏和PLA2激活.反之,加入Giβγ或GTP-γ-S则使PLA2激活,且呈剂量依赖关系,前者尤为明显.结果表明,Giβγ在CCh所致CCL137细胞的PLA2激活中起重要作用. 展开更多
关键词 Gi蛋白 βγ亚基 氨甲酰胆碱 磷脂酰A2 受体
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