PCR检测Pf60.1基因诊断恶性疟实验方法研究

为探讨通过 PCR技术检测 Pf60 .1基因来诊断恶性疟的可行性 ,采用 PCR技术检测了 4年前采集贮存的 2 0例疑似疟疾病人的血样。阳性对照为恶性疟原虫 FCC1 /HN培养株 ;阴性对照为食蟹猴疟原虫、间日疟原虫及非疟区的正常供血员血样。结果为 FCC1 /HN株、1 2例镜检定为恶性疟和 2例混合感染的血样扩增出长度为 3 1 3 bp～ 3 2 0 bp的特定 Pf60 .1基因片段 ;而阴性对照均未产生 DNA带型。此结果说明检测Pf60 k D中的 Pf60 .1基因片段的方法稳定性好 ,特异性强和敏感性高 ,是恶性疟诊断的理想方法之一。

输入性恶性疟原虫Pf60.1基因多态性初步研究

采用PCR方法扩增武汉市2010-2013年经镜检和巢式PCR确诊的101份国外输入性恶性疟病例血样的Pf60.1基因,研究Pf60.1基因多态性。PCR结果显示,共92份血样扩增出3类基因片段,其中52份扩增出313 bp片段,占56.5%;34份扩增出340 bp片段,占37.0%;6份扩增出313 bp和340 bp混合型片段,占6.5%。83份自非洲地区输入病例血样中,46份扩增出313 bp片段,占55.4%,31份扩增出340 bp片段,占37.1%,6份扩增出混合型片段,占7.2%;9份自东南亚地区输入病例血样中,6份扩增出313bp片段,3份扩增出340bp片段。提示输入性恶性疟Pf60.1基因以313 bp基因型较多,并且可能存在多克隆感染情况。