黄柏和酒黄柏中盐酸黄柏碱和盐酸小檗碱含量测定方法研究

目的:改进黄柏饮片中盐酸黄柏碱(C_(24)H_(32)O_(6)·HCl)和盐酸小檗碱(C_(20)H_(18)NO_(4)·HCl)的高效液相色谱含量测定方法。方法:《中国药典》2020版所载黄柏饮片含测需要两次样本预处理、检测,操作繁琐,系统误差大。本研究采用一次性预处理样本、双波长切换、流动相梯度洗脱等实现一次进样即可同时检测盐酸黄柏碱(C_(24)H_(32)O_(6)·HCl)和盐酸小檗碱(C_(20)H_(18)NO_(4)·HCl)的含量,并进行了方法学验证。结果:线性关系:盐酸小檗碱浓度(1.018~10.179μg,R^(2)=0.9996)和盐酸黄柏碱浓度(224.0~1119.8 ng,R^(2)=0.9991);精密度:盐酸小檗碱(RSD=0.37%),盐酸黄柏碱(RSD=0.49%);重复性:盐酸小檗碱(RSD=0.37%),盐酸黄柏碱(RSD=0.49%);平均回收率:盐酸小檗碱(101.77%,RSD=2.22%),盐酸黄柏碱(98.32%,RSD=2.46%)。结论用改进后的方法测定了15批次不同产地的黄柏饮片和15批次黄柏酒炙品(酒黄柏)中的盐酸黄柏碱和盐酸小檗碱,改进后的方法简单易行,重复性好,稳定性强,可很好的用于黄柏及其酒炙品(酒黄柏)饮片的质量控制。

黄柏及黄柏酒炙品的薄层色谱鉴别方法的研究与改进

目的:薄层色谱鉴别一直是中药材真伪快速鉴别的常用方法,具有操作简单,检测速度快,应用领域广泛的优点。采用《中国药典》2020版所载薄层色谱鉴别方法对黄柏饮片进行鉴别检测,发现药典方法重复性较差,操作相对繁琐,需要改进。方法:本研究从薄层色谱鉴别条件(提取溶剂、提取方法、展开系统、展距、点样量)、专属性和耐用性的角度对《中国药典》2020版所载黄柏薄层色谱条件进行研究与改进。结果:改进后的方法优选甲醇超声提取制备供试品样品溶液,点样量1~2μL,采用乙酸乙酯-甲醇-三氯甲烷-氨水-三乙胺(V_(乙酸乙酯)∶V_(甲醇)∶V_(三氯甲烷)∶V_(氨水)∶V_(三乙胺)=6∶2∶2∶1∶1)为展开系统,在365 nm下检视,供试品在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的亮黄色荧光斑点。结论:用改进后的方法对不同产地的关黄柏、黄柏饮片及酒黄柏饮片进行薄层色谱鉴别,发现小檗碱荧光点集中清晰、不漂移,方法操作简单易行,耐用性良好。改进后的方法还能进行黄柏和关黄柏的鉴别性检测。

基于大鼠物质、能量代谢研究炮制对黄柏药性的影响

目的:以药效学指标比较黄柏、酒黄柏和盐黄柏的药性变化,探索黄柏炮制机制。方法:通过比较黄柏及其炮制品对大鼠宏观体征(体质量、肛温)、物质代谢(乳酸LA、丙酮酸PA、甘油三酯TG)、能量代谢(Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶、LDH、SDH、肝糖原)、甲状腺功能轴(T3、T4、TSH、TRH)、环核苷酸水平(环磷酸腺苷c AMP、环磷酸鸟苷c GMP、c AMP/c GMP值)17种指标来考察黄柏炮制前后寒热药性的变化情况。结果:生黄柏(高、低剂量)和盐黄柏(高、低剂量)能不同程度的改变大鼠体质量、肛温、T3、T4、TSH、TRH、环核苷酸水平及物质与能量代谢指标;盐黄柏(高、低剂量)常较生黄柏(高、低剂量)作用更加显著,酒黄柏(高、低剂量)对这17种指标的改变作用大多不明显。结论:黄柏盐制后寒性增强,酒制后寒性减弱。

酒黄柏炮制工艺优选

目的建立酒黄柏炮制的最佳工艺。方法本研究以性状、盐酸小檗碱、盐酸黄柏碱、醇溶性浸出物和水分为评价指标,选定闷润时间、炒制温度、炒制时间3个影响因素,采用正交试验法,对黄柏酒炙加工炮制工艺的影响因素进行考察,对黄柏酒炙的加工炮制工艺进行优选。结果实验得出黄柏酒炙的最优工艺为:取净黄柏加黄酒15%,混匀,闷润3 h,投入到140℃的炒药机中,炒制约7 min,取出,晾凉。结论优化后的酒黄柏加工炮制工艺稳定性好、切实可行,能够为酒黄柏的产业化生产提供一定的技术支撑。

黄柏及其酒和盐炙品改善热证大鼠能量代谢及其机制的研究

目的探索黄柏、酒黄柏及盐黄柏对热证大鼠能量代谢的作用规律。方法黄柏及其酒和盐炙品水煎液9.519、1.058g/kg ig大鼠7 d,测定生制黄柏对2,4-二硝基苯酚所致热证大鼠肛温,以及血浆中三碘甲腺原氨酸(T3)、四碘甲腺原氨酸(T4)、促甲状腺激素(TSH)、促甲状腺激素释放激素(TRH)、肝组织中乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、肝糖原、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的含量。结果生黄柏、盐黄柏均可以降低热证大鼠肛温,而酒黄柏的作用不明显。生黄柏、盐黄柏可以有效降低热证大鼠的血浆中甲状腺功能轴(T3、T4、TSH、TRH)和肝组织中LDH、SDH、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶的含量,并能增加热证大鼠肝组织中糖原含量,而酒炙后对能量代谢指标含量作用减弱。结论生黄柏能够改善热证大鼠的能量代谢,且与甲状腺途径有关。盐炙后寒性增强,对热证大鼠的能量代谢有进一步的改善作用,而酒炙后,缓和黄柏的寒性,对能量代谢改善效果不显著。