异硫氰酸苯酯柱前衍生-高效液相(PITC-HPLC)法测定红枣中γ-氨基丁酸

采用异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生,建立了红枣中γ-氨基丁酸(GABA)含量的HPLC测定方法,以0.1 mol/L乙酸钠水溶液(pH值6.5,含0.5%三乙胺)和甲醇为流动相进行梯度洗脱,进样量10μL,流速0.7 mL/min,柱温30℃,GABA在0.775~50.000μg/mL内具有良好的线性关系(R^(2)>0.999),检测限(LOD)为0.1467μg/mL,定量限(QOD)为0.4891μg/mL,加样回收率为88.45%~98.13%,在4℃下放置7 d的相对标准偏差RSD仅为4.78%,该方法方便快捷、准确性高、稳定性好,且能够批量分析红枣GABA。不同红枣品种中GABA含量差异显著(p<0.05),其中骏枣的GABA含量最高327.37μg/g DW,酸枣最低为102.22μg/g DW。

REACTION OF α-(1H-1,2,4-TRIAZOL-1-YL)ACETOPHENONE WITH PHENYL ISOTHIOCYANATE

Reaction of α-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)acetophenone with phenyl isothiocyanate in the presence of a base and subse- quent alkylation leads to the ketene S,N-acetal(2),(4),(7), (8);thiazolidone(3),thiazolidine(5)and 1,3-thiazine(6),

PITC柱前衍生-高效液相色谱法测大米肽中的16种氨基酸含量

为了建立一种以高效液相色谱检测大米肽中氨基酸含量的方法,以异硫氰酸苯酯(Phenyl isothiocyanate,PITC)为柱前衍生剂,实现大米肽中16种氨基酸(天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、丝氨酸(Ser)、甘氨酸(Gly)、组氨酸(His)、精氨酸(Arg)、苏氨酸(Thr)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)、酪氨酸(Tyr)、缬氨酸(Val)、蛋氨酸(Met)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、苯丙氨酸(Phe)、赖氨酸(Lys))能同时、快速、有效地分析检测。采用Athena AAA色谱柱为分析柱,以甲醇:乙腈:水=20:60:20和50 mmol/L乙酸钠(pH6.5)为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,柱温35℃,紫外检测器波长为254 nm。结果表明,16种氨基酸在0.125~2.5μmol/m L范围内具有良好的线性关系,14种氨基酸线性关系的决定系数R2≥0.9999,另外2种氨基酸的决定系数R^(2)分别为0.9998和0.9994,检出限为0.003%~0.018%,定量限为0.010%~0.059%,加标回收率在82.21%~103.59%,RSD均小于5%。该方法使得大米肽中16种氨基酸很好地分离,其中含量最高的氨基酸是谷氨酸(Glu),含量范围为13.11%±0.39%~21.38%±0.48%,含量最低的氨基酸是组氨酸(His)或蛋氨酸(Met),含量范围为1.59%±0.05%~2.27%±0.03%或1.26%±0.05%~2.32%±0.06%,其准确度和精密度佳,灵敏度和回收率高,适用于大米肽的氨基酸含量分析。

白牛肝菌、白松露、松茸中多糖和氨基酸含量对比

以白牛肝菌、白松露、松茸烘干片为研究对象,分别采用苯酚-硫酸法和异硫氰酸苯酯衍生化法对其多糖、氨基酸的含量及氨基酸种类进行了测定和对比分析。结果表明白牛肝菌、白松露、松茸烘干片中多糖含量分别为质量分数3.739%、2.739%、4.378%,总氨基酸质量比含量分别为124.83、88.76、33.29 mg/g。三者均含有赖氨酸(Lys)等17种游离氨基酸,但同一种氨基酸在三者中的含量差异较大。提示3种不同品种的珍稀食用菌中多糖和氨基酸含量具有一定的差异,但总体而言其多糖含量均较高,且氨基酸种类齐全、含量丰富。

不同产地及加热方式文冠果仁中的氨基酸成分分析

目的 分析不同产地的文冠果仁氨基酸成分及加热方式对氨基酸的影响。方法 采用ZORBAX Eclipse Plus C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),样品以异硫氰酸苯酯进行柱前衍生化,以乙腈-甲醇-水(3∶1∶1)为流动相A,0.1 mol·L^(-1)的醋酸钠溶液(p H 6.5)-乙腈(93∶7)为流动相B,柱温35℃,检测波长254 nm。结果 17种氨基酸在1.806~225.200μg·m L^(-1)与峰面积呈良好的线性关系,各产地必需氨基酸、药用氨基酸、苦味氨基酸和儿童必需氨基酸占总氨基酸的含量分别为14.40%~18.99%、64.06%~73.79%、14.82%~17.09%、23.53%~29.30%,北方地区的文冠果仁氨基酸含量、必需氨基酸含量和药用氨基酸含量均比较高,文冠果仁经过加热处理后各类氨基酸均有所提高。结论 不同产地文冠果仁的氨基酸在含量和营养价值上具有差异,北方地区的文冠果仁氨基酸营养和药用价值较高,文冠果仁经过一定的加热后食用营养价值和药用价值得到提高。

PITC柱前衍生HPLC测定复方氨基酸注射液中18种氨基酸的含量

目的：建立柱前衍生高效液相色谱法同时测定复方氨基酸注射液（18AA）中18种氨基酸含量的方法。方法：样品采用异硫氰酸苯酯（PITC）柱前衍生，以Unitary-C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）为色谱柱，检测波长为254 nm，醋酸钠缓冲盐及乙腈、甲醇和水的混合体系为流动相，梯度洗脱。结果：优化了衍生试剂用量、衍生时间、缓冲盐浓度以及pH值和柱温等影响因素，最终在40 min内实现了18种氨基酸的分离，在9~1021μg·mL-1浓度范围内线性关系良好，且相关系数大于0.9977，平均回收率为92.6%~110.7%，相对标准偏差（RSD）为0.01%~5.68%。其定量限（LOQ，S/N=10）为0.02~13.41μg·mL-1。结论：该方法操作简便、灵敏度高、准确度和精密度好，可用于复方氨基酸注射液中氨基酸的含量测定。

Synthesis and Crystal Structure of N-phenylthiocyano-phenyl-thioformamide bis(η_5-methylcyclopentadienyl)(tetrahydrofuran)Samarium(Ⅲ)

The insertion reaction of phenyl isothiocyanate into the Ln S bond was studied. Phenyl isothiocyanate reacted with [(CH 3C 5H 4) 2Sm(SPh)(THF)] 2 to give the title complex, (CH 3C 5H 4) 2Sm[SC(SPh)NPh](THF), in good yield, which was characterized by elemental analyses, IR, 1H NMR and X ray structural determination. The crystal structure analysis of complex shows that samarium atom is coordinated by two CH 3C 5H 4 groups, one O atom of THF, and N and S atoms from the SC(SPh)NPh ligand to form a distorted trigonal bipyramidal geometry.

Synthesis and Crystal Structure of Methyl 2-(Diphenylamino)-4-phenyl-1,3-thiazole-5-carboxylate

The title compound, methyl 2-（diphenylamino）-4-phenyl-1,3-thiazole-5-carboxylate, was synthesized and studied by single-crystal X-ray diffraction method. The structure of the product was confirmed by IR, 1H- and 13C-NMR spectroscopy and elemental analysis. These experimental studies were supported by quantum mechanical calculations. The structure was solved in monoclinic, space group P21/c with a = 9.573（3）, b = 19.533（7）, c = 9.876（3）, β = 92.35（4）°, V = 1845.2（10）3, T = 85（2） K, Z = 4, R = 0.040 and wR = 0.089 for 6424 observed reflections with I2σ（I）.

不同品种6种松针中氨基酸含量测定及营养价值评价

研究不同地区6种松针的氨基酸含量,并对其营养价值进行评价,探讨基于氨基酸组成差异导致的品种与地区差异的分类分析。采用凯氏定氮法及异硫腈酸苯酯(PITC)柱前衍生结合高效液相色谱法测定松针中蛋白质以及氨基酸含量,通过氨基酸比值(RAA)、化学评分(CS)、氨基酸比值系数(RC)分析松针中必需氨基酸(EAA)的含量,采用氨基酸比值系数(SRC)、必需氨基酸指数(EAAI)、营养指数(NI)和生物价(BV)等指标对不同品种松针营养价值进行综合评价,并采用主成分分析对其进行分类分析。不同品种松针其蛋白质含量在57.68~172.31 mg/g之间,从中共检测出16种氨基酸,总氨基酸含量在45.88~129.67 mg/g之间,必需氨基酸占总氨基酸的百分比为37.60%~46.16%,药用氨基酸含量丰富,占总氨基酸的59%~66%,EAAI结果显示6种松针氨基酸综合评分均大于0.86,为良好蛋白质来源,主成分分析共得到两个主成分,累积方差贡献率为89.976%,可将两个地区6种松针划分为3类。松针中蛋白质与氨基酸含量丰富,是优良的植物蛋白源,营养价值高,具有较高的开发利用价值。

柱前衍生-高效液相色谱法测定脑蛋白水解物中多肽含量

建立柱前衍生-高效液相色谱法测定脑蛋白水解物中多肽含量的方法。多肽含量为总氨基酸含量与游离氨基酸含量之差。总氨基酸测定水解条件为6 mol/L盐酸溶液于110℃水解20 h。氨基酸测定条件为采用异硫氰酸苯酯作为衍生剂,色谱柱为Agilent Eclipse AAA柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),柱温为40℃,梯度洗脱。16种氨基酸在质量浓度为1~200μg/mL的范围内与色谱峰面积线性关系良好,线性相关系数均大于0.99。16种氨基酸的定量限均小于1μg/mL,精密度和重复性结果均不大于5%,各个技术参数的考察结果均满足检测要求。建立的方法科学可行,适用于脑蛋白水解物多肽含量的控制。

柱前衍生化结合高效液相色谱法测定反式-1,2-环己二胺中顺式异构体

在室温下采用异硫氰酸苯酯对无紫外吸收的trans-1,2-环己二胺进行柱前衍生化后,采用高效液相色谱法测定其中的cis-1,2-环己二胺的含量,使用色谱柱型号为VP-ODS(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长设置为254 nm,流动相为乙腈和水的混合溶液,体积比为62∶38,流速为1 mL/min。结果表明trans-1,2-环己二胺和cis-1,2-环己二胺能够得到有效的基线分离,cis-1,2-环己二胺浓度在0.04~0.80 g/L的浓度范围内线性关系良好(r=0.9997),RSD为3.28%(n=6),平均回收率为99.75%。该方法干扰少,具有专属性强、灵敏度高、快速、简便易操作及定量结果准确等优点,可进一步应用于类似结构物质的分析检测。

柱前衍生化HPLC法同时测定阿胶中4种主要氨基酸的含量

目的:建立阿胶中羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸4种氨基酸的含量测定方法。方法:样品以6 mol·L^(-1)盐酸于150℃水解1 h,以异硫氰酸苯酯(PITC)为衍生化试剂衍生后进行HPLC分析,采用Phenomenex C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温为43℃;流动相A为0.1 mol·L^(-1)醋酸钠-乙腈(93:7),流动相B为乙腈-水(4:1),梯度洗脱,流速:1.0 mL·min^(-1);检测波长为254 nm。结果:羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸的线性范围分别为0.016～0.239 μg(r=0.9999),0.032～0.483μg(r=0.9998),0.013～0.188μg(r=0.9998),0.018～0.271μg(r=0.9999);加样回收率(n=6)分别为96.20%(RSD=1.3%),98.46%(RSD=1.2%),99.28%(RSD=0.9%),98.65%(RSD=1.7%)。结论:该方法准确、可靠,具有良好的重复性和稳定性,可用于阿胶中羟脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸的检测。

常用炮制方法对巴戟天中游离氨基酸成分的影响

目的:建立氨基酸柱前衍生反向色谱测定法,分析比较巴戟天不同炮制品中氨基酸的差异,为其质控体系提供依据。方法:以水为溶剂,超声法提取巴戟天中的氨基酸,以异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生,检测波长254nm,Sinergi 4u fusion-RP色谱柱(Phenomenex,250mm×4.6mm,4μm),柱温35℃,测定氨基酸的含量。结果:4～5年生巴戟天生品中含有14种游离氨基酸,酒蒸氨基酸总量较生品增加约14.8%,盐蒸和甘草制氨基酸总量基本不变,盐炒氨基酸总量减少约12.4%,酒炒氨基酸总量减少约43.9%。结论:本法操作简便、灵敏度高,结果准确、可靠。巴戟天生品酒蒸后游离氨基酸总量显著增加,盐蒸和甘草制者基本不变,盐炒和酒炒者均显著降低,提示不同炮制方法对巴戟天游离氨基酸含量影响有显著差异,其机制值得深入研究。

柱前衍生化HPLC法测定不同基原珍珠粉及贝壳粉中7种氨基酸的含量

目的：建立柱前衍生化HPLC检测不同基原珍珠粉及贝壳粉中7种主要氨基酸的方法。方法：以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,采用C18色谱柱,流动相A：0.1mol/L醋酸钠溶液（用醋酸调pH值至6.5）,流动相B：乙腈,梯度洗脱,检测波长254nm。结果：氨基酸衍生溶液在24h内保持稳定,7种氨基酸线性相关系数均大于0.9995,加样回收率在93.16%~103.31%之间。结论：本方法分离效果好,精密度和重复性良好,可用于珍珠粉及贝壳粉中7种水解氨基酸含量的测定。

氟代苯基二苯乙炔基异硫氰酸酯的合成与液晶性质研究

通过偶联法合成了6种氟代苯基二苯乙炔基异硫氰酸酯液晶化合物。这些液晶均具有较高的Δn值,约为0.40～0.54。差热分析结果显示,具有更多取代氟原子的液晶化合物具有相对更低的熔点。将这些高Δn液晶化合物溶于商品炔类液晶材料时,氟原子为1、2的液晶化合物显示出更低的黏度。当这些混合液晶材料用于具有固定调制量的光学器件时,2个取代氟原子的液晶化合物显示出了更好的响应性能。这些液晶化合物在液晶光学器件中将具有一定的应用潜力。

超高效液相色谱-串联质谱法定性和高效液相色谱法定量分析天南星中氨基酸成分

为建立中药材中氨基类极性非紫外活性成分的定性与定量分析方法,以中药材天南星为研究对象,采用柱前衍生化技术,以异硫氰酸苯酯（PITC）为衍生化试剂,经C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,3.5μm）分离和超高效液相色谱-串联质谱（UHPLC-MS/MS）分析,共解析了天南星中20个成分,包括18个氨基酸和2个胺类化合物。经优化衍生化条件,应用高效液相色谱法（HPLC）,以Diamonsil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）分离,以乙腈和0.05 mol/L醋酸铵-醋酸缓冲液（pH 6.5）为流动相,梯度洗脱,在254 nm下检测,建立了同时测定15种氨基酸含量的方法,经方法学考察符合含量测定要求。谷氨酸、色氨酸在2~100 mg/L范围内、精氨酸在6~300 mg/L范围内、其余各氨基酸在0.8~40 mg/L范围内均呈良好的线性关系,相关系数均不小于0.999 5;平均回收率在95%~105%之间,RSD均小于3%;并成功应用于12批中药材的测定。本方法简便、灵敏、准确,具有可操作性,可用于快速鉴定中药中的氨基类成分以及进行含量测定。

1-芳酰基-4-取代吡唑甲酰基氨基硫脲和环化产物的合成及生物活性

利用1-苯基-3-甲基-5-氯-4-吡唑甲酰基异硫氰酸酯（Ⅰ）与芳酰肼（Ⅱ）的加成反应合成了系列新的酰胺基硫脲衍生物（Ⅲ），并将Ⅲ在酸性条件下进行环化反应得到2-取代吡唑甲酰基氨基-5-芳基-1，3，4-噻二唑（Ⅳ）．生物活性测定结果表明部分化合物Ⅲ和Ⅳ具有较好的除草活性．

柱前衍生化RP-HPLC测定铁皮石斛鲜品中的氨基酸的含量

目的测定铁皮石斛鲜品中氨基酸的含量。方法样品以异硫氰酸苯酯（PITC）为衍生化试剂衍生后进行HPLC分析。采用CAPCELLPAKC18SG300（250ram×4．6mm，51a,m）色谱柱，柱温为250（：；流动相A为0．05mol／L醋酸钠缓冲液（以醋酸调pH值至6．5）-乙腈（1：1），流动相B为0．05mol／L醋酸钠缓冲液（以醋酸调pH值至6．5），梯度洗脱，流速为0．6ml／rain；检测波长为254nm。结果15种氨基酸浓度在0．077-2．042μg范围内呈良好的线性关系（r：0．9994-0．9999），平均回收率为94．3％-107．7％。结论本方法灵敏、准确，具有良好的重复性和稳定性，可用于铁皮石斛中氨基酸的检测。

含噻二唑基硫脲类化合物的合成

以噻二唑-2-氨甲基酚(1)为原料,与异硫氰酸苯酯反应,以中等到良好的产率得到噻二唑基N-苯基取代硫脲类化合物(3a^3i);而化合物1与活性较高的N,N-二甲胺基硫代甲酰氯反应,则可以得到—NH和—OH同时反应的含有N,N-二甲基硫脲和N,N-二甲基硫代氨基甲酸芳酯官能团的产物.利用核磁共振、红外光谱以及高分辨质谱等手段对产物结构进行了表征.

检测癫痫大鼠脑组织中Glu、Gly、GABA含量的异硫氰酸苯酯柱前衍生HPLC技术的建立

目的建立检测癫痫大鼠脑组织谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(Gly)含量的异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生高效液相色谱(HPLC)技术,并验证其检测效果。方法将海人藻酸(KA)或等量生理盐水注射入大鼠海马CA3区建立癫痫模型或对照,2周后分别取其海马和皮层组织,采用PITC柱前衍生法处理样品,采用醋酸钠缓冲液和乙腈梯度洗脱,Venusil-AA氨基酸分析柱结合紫外检测器检测,计算Glu、GABA、Gly含量。结果在30 min内3种氨基酸完全出峰。在0.20~12.50 mg/L范围内Glu线性关系良好,相关系数为0.999 3,日内精密度为1.46%,日间精密度为1.84%,加样回收率为97.12%±2.98%;在0.01~6.25 mg/L范围内Gly线性关系良好,相关系数为0.998 4,日内精密度为1.17%,日间精密度为1.62%,加样回收率为96.63%±1.28%;在0.10~6.25mg/L范围内GABA线性关系良好,相关系数为0.999 4,日内精密度为1.00%,日间精密度为1.53%,加样回收率为99.25%±2.98%。模型组海马和皮层中Glu含量均高于对照组相应组织(P均<0.05)。结论成功建立了检测癫痫大鼠脑组织Glu、Gly、GABA含量的PITC柱前衍生HPLC技术检测效果较好。