苦木生物碱的化学研究

目的研究苦木生物碱的化学成分。方法用硅胶和Sephadex LH-20进行色谱柱分离,通过理化性质、光谱数据鉴定结构。结果鉴定了16个生物碱,分别是:5-甲氧基-铁屎米酮(Ⅰ)、11-羟基-铁屎米酮(Ⅱ)、铁屎米酮(Ⅲ)、4,5-二甲氧基-铁屎米酮(Ⅳ)、4-甲氧基-5-羟基-铁屎米酮(Ⅴ)、3-甲基-铁屎米-2,6-二酮(Ⅵ)、1-甲酰-4-甲氧基-β-咔巴啉(Ⅶ)、1-甲氧基-β-咔巴啉(Ⅷ)、1-乙基-4,8-二甲氧基-β-咔巴啉(Ⅸ)、1-甲氧甲酰-4-羟基-β-咔巴啉(Ⅹ)、1-甲基-4-甲氧基-β-咔巴啉(Ⅺ)、1-乙氧甲酰-β-咔巴啉(ⅩⅡ)、1-甲酰-β-咔巴啉(ⅩⅢ)、1-甲氧甲酰-β-咔巴啉(ⅩⅣ)、1-乙基-4-甲氧基-β-咔巴啉(ⅩⅤ)和1,2,3,4-tetrahydro-1,3,4-trioxo-β-carboline(ⅩⅥ)。结论化合物Ⅺ是首次从自然界植物中分离得到,化合物Ⅱ、Ⅷ、ⅩⅤ是首次从该属植物中分离得到。

RP-HPLC测定苦木生物碱体外对磷酸二酯酶4的抑制活性

目的:建立使用高效液相色谱法体外测定磷酸二酯酶活性的方法,测定分离自中药苦木的单体生物碱体外对磷酸二酯4(PDE4)的抑制活性。方法:从猪血中性粒细胞中制备PDE4,以环腺苷酸(cAMP)为反应底物,使用高效液相色谱法,测定反应底物减少的量,从而测定受试药物对PDE4的抑制活性。阳性药物为Rolipram。色谱条件:Discovery C_(18)反相色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为甲醇-pH 6.6磷酸缓冲液(10:90);流速为1.0mL·min^(-1);柱温30℃;检测波长254nm。结果:底物cAMP分离良好,无干扰,cAMP浓度在0.5～8.0μmol·L^(-1)时,与相应峰面积呈良好线性关系。PDE4酶样在10～60μL与活性呈良好的线性关系。方法的平均回收率95.7%。4-甲氧基-5-羟基铁屎米酮、4,5-二甲氧基铁屎米酮、3-甲基铁屎米-2,6-二酮的IC_(50)分别为35.4,30.2,27.2μmol·L^(-1)。结论:苦木中分得的单体生物碱对自猪血中性粒细胞中分离的PDE4有明显的抑制作用。

HPLC法测定不同产地苦木药材中3种生物碱

目的建立苦木药材中4,5-二甲氧基-铁屎米酮、4-甲氧基-5-羟基铁屎米酮和3-甲基-铁屎米-2,6-二酮的HPLC测定方法,为苦木的质量分析和评价建立了分析方法。方法采用高效液相法,色谱柱为Welchrom C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);以乙腈(A)-1mL.L-1乙酸水(B)为流动相;梯度洗脱,流速1.0mL.min-1;检测波长254nm;柱温30℃。结果 3-甲基-铁屎米-2,6-二酮,4-甲氧基-5-羟基铁屎米酮和4,5-二甲氧基-铁屎米酮线性范围分别为5.5～38.5(r=0.999 8),19.8～138.6(r=0.999 7)和8.3～58.1μg.mL-1(r=0.999 9);平均加样回收率分别为99.4%,100.7%和100.5%。结论该方法简便、易行,稳定、可靠,为苦木药材的质量分析、评价和进一步研究开发提供参考。

苦木药材中总生物碱的含量测定及聚类分析和判别分析

目的:测定不同产地苦木药材中总生物碱的含量,优化现有苦木药材标准中总生物碱含量测定方法,评价苦木药材的质量。方法:采用紫外分光光度法,于318 nm处测定吸光度,以苦木酮为对照品,测定苦木药材中总生物碱的含量。结果:苦木酮的线性范围为0.004~0.02 mg/mL(r=0.9999),线性关系良好;加样回收率在94.51%~103.94%之间,平均回收率(n=9)为100.22%(RSD=2.8%),准确度良好;精密度RSD小于3.0%,精密度良好。通过聚类分析和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA),结果表明用药部位对总生物碱含量影响最大,产地次之。结论:不同产地不同部位苦木药材中总生物碱含量差异较大,总生物碱含量与产地和部位呈一定的相关性。

RP-HPLC法测定苦木药材中4-甲氧基-5-羟基铁屎米酮的含量

目的:建立RP-HPLC法测定苦木药材中4-甲氧基-5-羟基铁屎米酮含量。方法:采用Welchrom C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%醋酸水溶液(30∶70)为流动相,流速1.0 mL.min-1,紫外检测器检测,检测波长254 nm,柱温30℃。结果:4-甲氧基-5-羟基铁屎米酮浓度在12.0～240.0μg.mL-1(r=0.9999)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率(n=6)为101.2%,RSD为2.3%。结论:该方法简便、准确、灵敏,为2015年版中国药典一部增订苦木含量测定项提供参考。

苦木化学成分研究

目的对苦木Picrasmaquassioides的化学成分进行研究。方法采用柱色谱等多种方法进行分离纯化,并通过理化常数和各种波谱技术对化合物的结构进行鉴定。结果从苦木的80%乙醇提取物中共分离得到了16个化合物,其中包括12个生物碱和4个苦味素成分,分别鉴定为1-羟甲基-4-甲氧基-β-咔巴啉(1)、苦木碱B(2)、1-甲氧甲酰基-4-甲氧基-β-咔巴啉(3)、1-甲氧甲酰基-4,8-二甲氧基-β-咔巴啉(4)、1-乙基-4-甲氧基-β-咔巴啉(5)、1-乙基-4,8-二甲氧基-β-咔巴啉(6)、苦木西碱I(7)、铁屎米-6-酮(8)、5-甲氧基-铁屎米-6-酮(9)、苦木碱F(10)、苦木碱D(11)、quassidine B(12)、quassin(13)、苦木内酯B(14)、苦木内酯E(15)、norquassin(16)。结论化合物1为新的β-咔巴啉型生物碱,命名为苦木西碱丁(kumujantine D),化合物4为首次从苦木中分离得到。