黑壳病马氏珠母贝贝肉微量元素及挥发性成分分析

采用湿法消解和索氏提取法+水蒸气蒸馏法分别处理黑壳病马氏珠母贝(Pinctada martensii)贝肉样品。利用电感耦合等离子体质谱法(ICP-AES)检测样品中12种主要微量元素的质量分数,气质联用色谱法(GC-MS)检测其挥发性成分。结果表明,与健康贝贝肉相比,黑壳病贝贝肉中微量元素除锌(Zn)和硒(Se)的质量分数有明显变化(下降率分别为8.54%和10.98%)外,其他元素没有明显差异;病贝中含有的挥发性物质(16种)较健康贝的少(20种),并含有金属元素、大量的苯环等。

正常马氏贝与黑壳病马氏贝的氨基酸及其美拉德反应产物的对比分析

通过对正常马氏珠母贝和黑壳病马氏珠母贝的氨基酸及其美拉德反应产物的分析比较,黑壳病对马氏贝肉氨基酸的影响不大,方差分析的单尾概率值P=0.93>0.50。黑壳病对美拉德反应产物的影响很大,正常贝检测到19种物质,大部分为酯类、醇类和烷烃类,黑壳病贝检测到31种物质,大部分为烷烃类和醇类,酯类物质较少,且只有2种相同物质;正常贝中呈味物质相对含量占总物质的58.81%,黑壳病贝呈味物质占18.26%。

马氏珠母贝正常贝肉与黑壳病贝肉成分对比

为了研究黑壳病造成马氏珠母贝肉成份的变化,首先采用水蒸气蒸馏法分别提取正常马氏珠母贝和黑壳病马氏珠母贝肉的挥发性成份进行分析,正常马氏珠母贝肉检测出58种,黑壳病贝肉检测出59种。但黑壳病贝肉中仅有7种化合物与正常贝肉的挥发性成分相同。在黑壳病贝中,含量较高的成分有二十一烷和十八醛,分别为18.52%和17.95%,但在正常贝肉未检出。其次,采用茚三酮作柱后衍生试剂测定氨基酸的方法检测正常马氏珠母贝和患黑壳病的马氏珠母贝肉中牛磺酸的含量,结果分别为72.47mg/g、72.75mg/g,牛磺酸含量基本一致。通过分析黑壳病引起马氏珠母贝体内挥发性成分和牛黄酸成分变化,为研究马氏珠母贝患黑壳病的病变机理提供一定的科学依据。

马氏珠母贝F8代黑壳色选育系群体与普通养殖群体遗传多样性分析

利用9个SSR分子标记研究马氏珠母贝F8代黑壳色选育群体与普通养殖群体的遗传多样性。结果显示:9个位点共检测出30个等位基因,各位点的等位基因数(Na)为2~5,平均等位基因数为3.3333个。F8代黑壳色选育系群体和普通养殖群体的平均等位基因数(Na)分别为2.7778、3.2222;平均有效等位基因数(Ne)分别为2.1625、2.0319;平均多态信息含量PIC值范围为0.1291~0.7300,平均期望杂合度(He)范围为0.2231~0.8577,平均观测杂合度(Ho)范围为0~0.9500。F8代黑壳色选育系群体有3个位点观测杂合度为0,说明这3个位点已被纯化。哈迪-温伯格平衡(HWE)检验发现,F8代黑壳色选育系群体中有7个位点、普通养殖群体中有5个位点极显著偏离平衡(p<0.01)。两群体遗传分化系数(Fst)为0.1463。各项遗传参数表明,经8代群体继代选育,马氏珠母贝黑壳色选育系群体部分位点已被纯化,遗传多样性较普通养殖群体有所降低,但仍保持在较高水平。

马氏珠母贝黑壳色选育系F5和对照群体生产性状的比较

以贝壳棱柱层放射肋条纹颜色与生长性状为育种目标,结合家系选择与群体选择培育了马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)黑色放射肋选育品系(简称黑壳色系,black shell color line,BF)。为了探究黑壳色系的生产性能,本研究比较了选育系F5(BF5)和对照群体(control group,CG)在不同生长阶段的多项生产性能指标,包括受精率、孵化率、变态率、生长性状、对低温和高盐的耐受性以及育珠性能。结果显示BF5群体的受精率、孵化率、幼虫第10天和第20天的存活率以及变态率均大于CG群体,差异不显著(P>0.05);在20日龄以后,BF5群体的平均壳长均显著大于CG群体(P<0.05),其中BF5群体240日龄、330日龄和600日龄的平均壳长分别比CG群体提高了17.47%、21.34%和20.28%。33℃高温胁迫30 d后,BF5和CG群体的存活率分别为84.4%和63.9%,差异显著(P<0.05);16‰低盐胁迫30 d后,BF5和CG群体的存活率分别为69.2%和56.7%,群体间差异显著(P<0.05)。植核后150 d至育珠期结束(270 d),BF5的存活率显著高于CG群体(P<0.05),BF5最终存活率比CG提高了18.92%;BF5和CG的商品珠率和优质珠率差异不显著(P>0.05);BF5的留核率、珍珠层厚度显著高于CG(P<0.05),提高率分别达到18.97%和22.61%,表明BF5具有更好的育珠性能。本研究表明,BF5具有更好的生长、抗逆和育珠性能,为马氏珠母贝育种和产业应用提供了基础数据。